Папиломо вирусная инфекция на груди

Вирус папилломы человека (ВПЧ) принадлежит к роду вирусов папиллом семейства Papoviridae. На сегодняшний день известно уже более 500 типов ВПЧ. Вирус инфицирует только пролиферирующие эпителиальные клетки базального слоя, а создание и формирование вирусных частиц происходит в верхних слоях эпителия. ВПЧ имеют видоспецифические, некоторые типоспецифические антигены, и они не культивируются в клеточных системах. Практически все люди в какой-то мере за свою жизнь сталкиваются с ВПЧ: бородавки на лице, теле, руках и ступнях.

Основным путем заражения является половой. Возможно заражение ВПЧ новорожденных – при родах, что является причиной возникновения ларингеального папилломатоза у детей и аногенитальных бородавок у младенцев. Так же заражение может быть бытовым путем. Возможно самозаражение при бритье, эпиляции. Вирус папилломы человека способен существовать некоторое время в общественных местах (бани, бассейны, спортзалы) и проникать в организм человека через ссадины и царапины на коже.

Вирусы папиллом, попав в организм, инфицируют эпителии базального слоя, в основном поражая переход многослойного плоского эпителия в цилиндрический эпителий. Репликация и развитие вируса продолжаются по иере созревания эпитеальных клеток и продвижения их к поверхности эпителиального пласта [9].

В зараженной клетке вирус существует в двух формах – эписомальной (вне хромосом клетки), которая считается доброкачественной формой и интросомальной – интегрированной (вирус встраивается в геном клетки), которую определяют как злокачественную форму. При интергрированной форме происходит индукция мутаций, приводящая к селекции клона клеток с мутантной ДНК, содержащей ДНК вируса. Под воздействием пока невыясненных факторов происходит размножение клона мутантных клеток, что клинически проявляется ростом опухоли. Например, при попадании вируса в организм с ослабленным иммунитетом под его действием происходит процесс деления и роста инфицированных клеток, который может привести к развитию онкологического заболевания.

Для ВПЧ инфекции характерно скрытое (латентное) течение. Инкубационный период колеблется от 1 месяца до нескольких лет. В зависимости от иммунного состояния в большинстве случаев происходит самоизлечение и человек может одновременно заражаться несколькими типами папилломавирусов. Различают три основные группы ВПЧ: неонкогенные (типы 1,2,3,4,7,10 и др.), онкогенные низкого риска (5,6,7,8,11,12,14,15 и др.) и онкогенные высокого риска (16,18,31,33 и др).

Учитывая, что онкологические заболевания молочной железы и рака шейки матки у женщин по статистике стоит на втором месте, часто наблюдаются у молодых женщин, была поставлена цель: исследовать сыворотку крови на вирус папилломы человека типов 16 и 18 при раке молочной железы и шейки матки и у женщин, составляющую группу онкологического риска по этим заболеваниям.

Материал и методы

Наиболее распространенными и чувствительными из молекулярных методов являются полимеразная цепная реакция (ПЦР) (polimeraze chaih reaction- PCR) и метод захвата гибридов( Hybrid Capture –НС). Эти методы позволяют выявить латентные, субклинические и клинические формы папилломавирусной инфекции. В ряде случаев при развитии дисплазии и рака вирус элиминирует из клеток или встраивается в геном и становится недоступным для молекулярных методов диагностики [9]. Применяются так же цитологические и гистологические методы исследования. Наблюдаются цитологические признаки папилломавирусной инфекции-койлоцитарная атипия.

На протяжении нескольких лет наблюдались женщины, составляющие группу риска по раку молочной железы и шейки матки: с диагнозом лейкоплакия (n=10), дисплазия и неоплазия (n=12), а также больные раком молочной железы (n=14) и шейки матки (n=12). Исследование сывороток крови больных на выявление вируса папилломы человека типов 16 и 18 проводилось с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). В качестве сравнения исследовалась сыворотка здоровых доноров (n=12).

При исследовании сыворотки крови пациенток, составляющих группу риска по раку молочной железы и шейки матки с диагнозом лейкоплакия, дисплазия, неоплазия, а также больных с раком шейки матки и молочной железы с помощью ПЦР, у них был выявлен папилломавирус типа 16 и 18. Полученные результаты представлены в таблице (таб. 1). Показано, что количество выявленных случаев папилломавирусной инфекции (ВПЧ) типа 16 и 18 в группе онкологического риска составили 57%, 42% (больные с диагнозом лейкоплакия) и 71%, 42% (больные с диагнозом дисплазия и неоплазия), соответственно.

При раке шейки матки по сравнению с группами онкологического риска, количество выявленного ВПЧ 18 увеличивалось на 33%, раке молочной железы – на 20%.

Выявленные случаи папилломавирусной инфекции (ВПЧ) у больных групп онкологического риска, раком шейки матки и молочной железы

Здоровые доноры (n =12) %

Больные с диагнозом лейкоплакия (n =10) %

Больные с диагнозом дисплазия, неоплазия (n =12) %

Вирус папилломы человека

Вирус папилломы человека (аббревиатура ВПЧ) – это самая распространенная, на сегодняшний день, инфекция онкогенного характера, поражающая кожный покров, внутренние органы, мочеполовые и дыхательные пути человека. По данным исследований более 60% всего населения земного шара являются потенциальными носителями данного вируса. В понятие ВПЧ входят больше 150 видов микроорганизмов вирусной природы, которые могут вызывать широкий спектр заболеваний в организме человека. Некоторые из них провоцируют развитие бородавок на теле, а другие вызывают рост кондилом на слизистых участках половых органов мужчин и женщин. Вирус обладает высокой контагиозной степенью (заразностью), поражает значительно чаще женский организм, чем мужской, и способен причинить вред органам вплоть до развития онкологических заболеваний, в частности вызывая рак шейки матки.

Симптомы

• образование наростов на теле (в области половых органов, на веках, под грудью, в подмышечных впадинах, на шее);
• различные высыпания или раздражение на коже;
• зуд и покраснение кожи;
• обильные выделения из влагалища с неприятным запахом;
• кровянистые выделения из влагалища;
• вагинальные кровотечения после полового акта;
• болезненные ощущения во время полового акта;
• неприятные ощущения во влагалище;
• общая усталость, апатия, потеря аппетита, потеря веса;
• тянущие боли внизу живота или пояснице.

Примерно в 90% случаев инфекции ВПЧ не проявляют выраженных симптомов и через некоторое время заболевания сходят на нет. Однако, под действием различных факторов, некоторые виды вируса папилломы человека (в особенности типы 16 и 18) имеют высокий риск развития предраковых состояний, которые без должного лечения могут перерасти в рак шейки матки. Поэтому крайне необходимо быть внимательными к своему здоровью и регулярно проходить осмотр у гинеколога.

Классификация ВПЧ

Данные типы вируса папилломы человека характеризуются появлением на коже различных видов бородавок (подошвенные, обычные, плоские, бородавчатая эпидермодисплазия и другие).

Типы ВПЧ, поражающие слизистые ротовой полости и половых органов (сюда относятся типы вируса №: 6, 11, 16, 18, 31, 33, 35,39,45,51,52,56,58,59).

Стадии ВПЧ

Инфекция присутствует в организме, но никак не проявляет себя и не провоцирует изменений в клетках. Обнаружить вирус на данной стадии можно при помощи анализа ПЦР.

Папилломавирус запускает активный процесс деления клеток эпидермиса, в следствие чего на участках кожи появляются характерные наросты. Диагностируется вирус с помощью ПЦР, гистологического и цитологического анализа.

ДНК вируса начинает взаимодействовать с ДНК клеток, что ведет к их объединению и нарушению эпителия. Для выявления данной стадии используются диагностические методы: ПЦР, гистологическое и цитологическое исследование, а также видеокольпоскопия (осмотр шейки матки под многократным увеличением).

Внедрение вируса в клетки приводит к их мутации и образованию злокачественных клеток, что в свою очередь ведет к развитию рака. На данном этапе применяются все вышеперечисленные методы диагностики.

Пути передачи вируса папилломы человека

Самый распространенный и основной путь передачи папилломавируса – половой акт. Вагинальный, оральный или анальный секс. Средства защиты не дают гарантии безопасности при половом сношении.

Вирус папилломы человека передается через поцелуй или рукопожатие.

Заражение во время бритья или эпиляции, а также при обкусывании заусенцев или ногтей в местах локализации вируса.

Инфицирование детей может произойти во время родов, при прохождении родовых путей инфицированной матери.

Причины развития ВПЧ

• начало половой жизни в раннем возрасте;
• беспорядочная половая жизнь;
• незащищенные половые акты;
• прием оральных контрацептивов длительное время;
• сниженный иммунитет на фоне частых простудных заболеваний;
• переутомление, недосыпание, частые стрессы;
• эндокринные патологии, в частности сахарный диабет;
• злоупотребление алкоголем;
• курение;
• несоблюдение правил личной гигиены;
• недоедание или питание в ресторанах быстрого питания;
• болезни ЖКТ;
• инфекционные заболевания мочеполовой системы;
• хронические воспалительные процессы в области половых органов;
• проживание в экологически неблагоприятных условиях;
• регулярные контакты с токсичными веществами;
• частые аборты;
• беременность.

Методы лечения

Контактный или бесконтактный радиохирургический метод удаления новообразований кожи. Не повреждает здоровые участки тканей и обеспечивает быстрое заживление в отличие от хируругического иссечения.

Профилактика

• соблюдать личную гигиену;
• исключить беспорядочные интимные связи;
• всегда использовать презерватив при половом контакте;
• придерживаться здорового образа жизни (правильное питание + умеренные физические нагрузки);
• отказаться от вредных привычек;
• правильно распределять время на работу и отдых;
• регулярно наблюдаться у гинеколога.

Записаться к врачу Белоглазова Анна Петровна Стаж 25 лет

Заведующая отделением гинекологии, врач высшей категории, гинеколог-эндокринолог.

Запишитесь на прием

Факт №19 – Реабилитация после операций

Если у Вас есть пожелания или претензии по работе нашей клиники, вы можете написать их управляющей клиники — Васкановой Светлане Анатольевне по электронной почте: dalimanager@mail.ru

Маяковская, Достоевская, Владимирская, Площадь Восстания, Гостиный двор, Чернышевская

Клиника находится в 10 минутах пешком от станций метро Маяковская, Достоевская и Владимирская. И в 15 минутах пешком от станций метро Площадь Восстания, Гостиный двор и Чернышевская.

• Троллейбусы: 3, 8, 15
• Маршрутки: К90, К177, К258

Пн-Пт 9:00 — 18:00
Сб-Вс — выходной

Лицензии Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения:
№ Л0-78-01-009468 от 18.12.2018 г.

В последнее время все больший интерес вызывает инфекция, вызванная вирусом папилломы человека. Обусловлено это прежде всего тем, что уже доказана непосредственная связь развития рака шейки матки с персистенцией (длительным существованием) этого возбудителя в женском организме.

И если еще около десятилетия назад диагностическая и лечебная тактика при подозрении на серьезную патологию шейки матки, предположительно ассоциированную с папилломавирусной инфекцией, была неопределенной, то на сегодняшний день практическая медицина сделала в этом направлении решительный шаг.

Разработаны международные протоколы скрининга на рак шейки матки, несколько отличающие в разных странах в отношении сроков обследования, но единые в отношении необходимости выявления значимых в развитии рака штаммов вируса папилломы.

ВПЧ - вирус папилломы человека что это?

Вирус папилломы человека (ВПЧ) далеко не всегда однозначно патогенен для человека. На сегодня определено более 100 разновидностей (штаммов) возбудителя, и лишь некоторые из них при попадании в организм человека способны не только к длительному транзиторному пребыванию там (что само по себе не опасно), но и к встраиванию в хромосомный аппарат клеток, а именно это и является началом серьезных патологических изменений. Наиболее агрессивными для человека (так называемыми высокоонкогенными) являются 16, 18, 31. 33, 48, 52, 58 штаммы вируса, но наибольшее значение в развитии рака шейки матки имеют типы 16 и 18, они были выявлены у 70-80% пациенток с этой патологией в разных странах мира. Значимость в канцерогенезе (развитии рака) остальных штаммов настолько невелика, что на данном этапе развития медицинской науки усилия ученых направлены на создание профилактических и лечебных средств именно против 16, 18 типов.

Кроме того, доказана значимость некоторых низкоонкогенных типов в развитии кондилом (бородавок) половых органов. Процесс этот абсолютно доброкачественный, но приводящий к значительному дискомфорту, а потому требующий лечения.

Инфицирование вирусом происходит при половом контакте, зачастую уже при первом. Вероятность заражения бытовым путем на сегодняшний день не доказана. Возможно попадание вируса в дыхательные пути ребенка при прохождении по инфицированным родовым путям, что может приводить к очень редкой патологии – разрастанию папиллом в гортани новорожденного. Очень важным является то, что можно было бы назвать гендерной специфичностью высокоонкогенных типов ВПЧ. То есть достаточно высокому риску развития рака шейки матки при инфицировании ВПЧ у женщин противостоят очень редкие случаи рака полового органа, ассоциированные с папилломавирусом, у мужчин. Вероятность возникновения кондилом у них также значительно ниже.

Однако инфицирование вирусом и болезнь – отнюдь не синонимы, причем касается это не только ВПЧ. В любом здоровом организме, особенно молодом, в ответ на попадание инородного объекта, в нашем случае – вируса, реагирует иммунная система, и при отсутствии особо благоприятных для него условий происходит самоэлиминация, то есть удаление патогена из организма. Такой механизм срабатывает в 80% случаев попадания ВПЧ в организм женщины моложе 30 лет в течение 8 месяцев – 2 лет. Возраст, как вы понимаете, условен, поскольку просто взят точкой отсчета в многочисленных исследованиях. К сожалению доказано, что по мере увеличения возраста вероятность самоэлиминации вируса снижается, соответственно, повышается риск развития предрака и рака шейки матки, достигая своего пика в возрасте 45 лет. Именно этим объясняется то, что во многих странах мира скрининговые программы включаются с 30-летнего возраста, а тактика ведения пациенток с ВПЧ-инфекцией молодого возраста значительно более щадящая, чем у старших женщин.

Интересным является тот факт, что частота ВПЧ-носительства и рака шейки матки ниже в мусульманских странах, что связано с особенностями традиционной гигиены. Заболеваемость Раком Шейки Матки безусловно ниже в индустриально развитых странах, что свидетельствует в пользу эффективности достаточно дорогостоящих бюджетных скрининговых программ, направленных на выявление ВПЧ и предраковой патологии шейки матки.

Собственно патологический процесс запускается в тот момент, когда ВПЧ начинает встраиваться в хромосомный аппарат клетки, что является необходимым условием для его размножения. Клинически это проявляется дисплазией эпителия шейки матки, степень тяжести которой медленно, но верно прогрессирует при отсутствии лечения. Процесс внутриклеточных изменений от легкой дисплазии до инвазивного рака шейки матки достаточно длительный и может, по данным различных исследований, продолжаться от 3 до 15 лет в зависимости от наличия факторов риска и особенностей иммунной системы. Важным является также то, что легкая дисплазия нередко может подвергаться обратному развитию в случае элиминации ВПЧ, следовательно, значимость различных внутриклеточных поражений в развитии рака неоднозначна и прямо пропорциональна степени их тяжести.

В связи с такими особенностями существования и развития ВПЧ становится понятной роль скрининговых профилактических осмотров. В странах с наиболее совершенной скрининговой системой (Швейцария, Финляндия) удалось добиться снижения заболеваемости раком шейки матки на 40-60% за 10 лет. Подходы к скринингу в разных странах отличаются, в основном, интервалом между осмотрами (от одного года до пяти лет). Суть осмотра заключается во взятии материала для цитологического (клеточного) исследования с шейки матки и цервикального канала а также выявлении носительства ВПЧ.

Что такое ВПЧ?

Генитальная папилломавирусная инфекция – это инфекция, передаваемая половым путем (ИППП). Возбудитель папилломавирусной инфекции - вирусы папилломы человека (ВПЧ). Вирусы папилломы человека – это группа вирусов, которая включает около 100 различных типов. Более 30 типов ВПЧ передаются половым путем, инфицируют половые органы и область ануса женщин и мужчин.

Большинство инфицированных не знают о своем заболевании, не имеют клинических проявлений и, более того, могут самопроизвольно выздороветь.

Инфекция наиболее распространена в возрасте от 15 до 40 и затрагивает одинаково и женщин и мужчин. К 50 годам жизни, около 80 процентов женщин приобретут ВПЧ - инфекцию.

Около 50-75% сексуально активных людей инфицируются ВПЧ в течение их жизни, и в большинстве случаев инфекция не вызывает заболевания и самопроизвольно излечивается.

Приблизительно 90% ВИЧ-инфицированных также имеют ВПЧ-инфекцию.

Как передается ВПЧ

Вирусы папилломы человека, инфицирующие половую область, передаются, через половые контакты. Большинство заразившихся не имеют видимых проявлений заболевания и поэтому носители ВПЧ не знают о своем инфицировании и могут заразить своих половых партнеров. Иногда инфицированная мать может заразить новорожденного во время родов. Это может привести к так называемому папилломатозу гортани новорожденных.

Проявления инфекции

Большинство заразившихся людей не знают об этом. ВПЧ часто не вызывает никаких проявлений на коже и слизистых оболочках. У части людей развиваются половые бородавки или происходят предраковые изменения на шейке матки, вульве, анальной области или половом члене. Очень редко эти изменения переходят непосредственно в рак. От инфицирования до развития тяжелой дисплазии в среднем проходит 20 лет. Большинство женщин спонтанно излечиваются в течение 9 – 15 месяцев от момента заражения. Основное проявление папилломавирусной инфекции – половые бородавки или остроконечные кондиломы (вызываются ВПЧ 6 и 11 типа) - мягкие бородавчатые образования на короткой тонкой ножке, напоминающие цветную капусту или петушиный гребень с различным расположением (головка полового члена, половой член, малые и большие половые губы, влагалище, шейка матки, область ануса). Остроконечные кондиломы появляются через 2 – 6 месяцев после заражения. Видимые кондиломы обнаруживаются при осмотре.

Диагностика инфекции

Диагностика кондилом проводится на основании осмотра. Диагностика ВПЧ высокого канцерогенного риска и связанных с ними изменений, более сложная задача. В основе диагностики предраковых заболеваний шейки матки в течении многих стоял цитологический анализ мазка (исследование мазка под микроскопом). Однако он имеет ряд существенных недостатков – сложность, низкая чувствительность и высокая частота неопределенных результатов. Американский комитет FDA (комитет по медикаментам и продовольствию) одобрил исследование ВПЧ методом полимеразной цепной реакции - ПЦР, который может определить 13 типов ВПЧ высокого риска. ПЦР на ВПЧобладает высокой чувствительностью, прост в исполнении. Совместное использование цитологических исследований и ПЦР тестов позволяет значительно повысить эффективность диагностики, чувствительность увеличивается до 99 – 100%. Применяемые в РКВД ПЦР тест-системы не уступают, а чаще, даже превосходят зарубежные аналоги. Важно, что выявление ВПЧ высокого риска происходит задолго до появления предраковых изменений слизистых.

ПЦР исследование на ВПЧ высокого риска рекомендовано:

- Как первичный метод в дополнение к цитологии для женщин старше 30 лет.

- Для разрешения сомнительных результатов цитологического исследования.

- Пациенткам, проходящим лечение по поводу дисплазии или рака.

- На первом этапе диагностики для стран, где плохо организованы программы обследования на папилломавирусную инфекцию.

- Для обследования мужчин.

Можно ли излечить это заболевание?

Диагностика и лечение ИППП, должна проводиться в условиях специализированной клиники – КВД, имеющей все необходимые средства для быстрой и точной диагностики.

Специфического лекарства против ВПЧ на сегодняшний день нет. Существует множество методов удаления кондилом, но болезнь может вернуться вновь, поскольку вирус остается в организме человека. Рецидивы возможны в 25% случаев в течение 3 месяцев после лечения. При лечении кондилом необходим осмотр половых партнеров. Однако подавляющее большинство половых партнеров заражены ВПЧ и просто не имеют видимых проявлений заболевания.

Лечение предраковых заболеваний заключается в использовании химических, физических и других методов, с целью изменить структуру пораженных участков слизистых оболочек, а также в применении препаратов стимулирующих иммунитет. В дальнейшем необходимо ежегодное цитологическое исследование и определение ВПЧ методом ПЦР.

Какая связь между ВПЧ и раком шейки матки?

• Вирусы папилломы человека высокого риска являются основной причиной рака шейки матки.
• В случаях тяжелой дисплазии (предрака) и рака шейки матки ВПЧ выявляется почти в 100% случаев.
• Выявление ВПЧ связано с 250-кратным увеличением риска развития тяжелой дисплазии.
• Рак шейки матки занимает 1-е место среди причин женской смертности в развивающихся странах.
• Рак шейки матки занимает 2-е место после рака молочной железы среди женщин в мире – 250 тысяч смертей ежегодно.
• В России ежегодно 12 300 женщин заболевает раком шейки матки и более 6 тысяч пациенток ежегодно умирает.
• За последние 10 лет средний возраст заболевших снизился с 58 до 55 лет.
• У женщин до 29 лет заболеваемость выросла в 2 раза.
• ВПЧ высокого риска вызывают рак шейки матки в 100% случаев, рак заднего прохода – 90%, рак влагалища и вульвы – 40%, рак полового члена – 40% и рак ротоглотки в 12% случаев.
• Американское Общество Раковых Заболеваний прогнозировали на 2004 год, что приблизительно у 10 520 женщин разовьется агрессивный рак шейки матки и приблизительно 3 900 женщины умрут от этой болезни. Большинство женщин с агрессивным раком шейки матки, не проходили правильного обследования на ВПЧ инфекцию.

Профилактика инфекции

Вернейший способ предотвращения половой ВПЧ-инфекции состоит в том, чтобы воздержаться от любого полового контакта с другим индивидуумом.

Долговременные сексуальные отношения с постоянным половым партнером не дает 100% гарантии от инфицирования ВПЧ. Трудно определить, без специальных тестов, инфицирован ли в настоящее время половой партнер.

Мужские презервативы из латекса, при правильном применении снижают риск передачи инфекции.

Любые проявления, такие как боль или неприятные ощущения при мочеиспускании, необычная сыпь, выделения являются сигналом для прекращения половых контактов и немедленного обследования в условиях специализированной клиники – РКВД. Если у больного обнаружены ИППП, он должен сообщить об этом своим половым партнерам, для того чтобы они также прошли полное обследование и соответствующее лечение. Это снизит риск развития серьезных осложнений и предотвратит возможность повторного заражения.

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Ашрафян Л. А., Боженко В. К., Слонов А. В., Овчинникова О. А., Хунова Л. З.

Вирусная природа многих онкологических заболеваний женской половой сферы в настоящее время не вызывает сомнения, однако роль вирусной инфекции в патогенезе рака молочной железы (РМЖ) остается недостаточно изученной. В статье рассматриваются аспекты значимости ряда вирусов в этиопатогенезе онкогинекологических заболеваний. Представлены результаты обследования 60 пациенток с РМЖ I-IV стадий и 30 больных с фиброзно-кистозной мастопатией, у которых сопоставляли наличие геномов ДНК-содержащих вирусов в опухолевой ткани и данные исследования мазков из генитального тракта, полученные методом полимеразной цепной реакции. Показано, что вирусы папилломы человека и цитомегаловирусы не играют существенной роли в развитии РМЖ, также не получено достоверных данных в отношении вируса Эпштейна-Барр .

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Ашрафян Л. А., Боженко В. К., Слонов А. В., Овчинникова О. А., Хунова Л. З.

The viral nature of many female genital cancers is now beyond question; however, the role of viral infection in the pathogenesis of breast cancer (BC) has not been adequately investigated. The paper defines the importance of a number of viruses in the etiopathogenesis of oncogynecological diseases. It presents the results of examining 60 patients with Stages I-IV BC and 30 patients with fibrocystic mastopathy, in whom the presence of DNA-containing virus genomes in tumor tissue was compared, and the data of polymerase chain reaction study of genital tract smears. It is shown that human papillomaviruses and cytomegaloviruses do not play a fundamental role in the development of BC; there is no valid evidence for Epstein-Barr virus .

Роль вирусной инфекции в этиопатогенезе рака молочной железы

Л.А. Ашрафян, В.К. Боженко, А.В. Слонов, О.А. Овчинникова, Л.З. Хунова

Отделение гинекологии ФГУРНЦРР Минздравсоцразвития России, Москва

Контакты: Лилия Заудиновна Хунова khunova@mail.ru

Вирусная природа многих онкологических заболеваний женской половой сферы в настоящее время не вызывает сомнения, однако роль вирусной инфекции в патогенезе рака молочной железы (РМЖ) остается недостаточно изученной. В статье рассматриваются аспекты значимости ряда вирусов в этиопатогенезе онкогинекологических заболеваний. Представлены результаты обследования 60 пациенток с РМЖ I—IV стадий и 30 больных с фиброзно-кистозной мастопатией, у которых сопоставляли наличие геномов ДНК-содержащих вирусов в опухолевой ткани и данные исследования мазков из генитального тракта, полученные методом полимеразной цепной реакции. Показано, что вирусы папилломы человека и цитомегаловирусы не играют существенной роли в развитии РМЖ, также не получено достоверных данных в отношении вируса Эпштейна-Барр.

Ключевые слова: рак молочной железы, вирус папилломы человека, вирус Эпштейна-Барр, вирус Mouse Mammary Tumor

Role of viral infection in the etiopathogenesis of breast cancer

L.A. Ashrafyan, V.K. Bozhenko, A.V. Slonov, O.A. Ovchinnikova, L.Z. Khunova

Department of Gynecology, Russian X-Ray Radiology Research Center, Ministry of Health and Social Development, Moscow

The viral nature of many female genital cancers is now beyond question; however, the role of viral infection in the pathogenesis of breast cancer (BC) has not been adequately investigated. The paper defines the importance of a number of viruses in the etiopathogenesis of on-cogynecologicaldiseases. It presents the results of examining 60 patients with Stages I-IV BC and 30 patients with fibrocystic mastopathy, in whom the presence of DNA-containing virus genomes in tumor tissue was compared, and the data of polymerase chain reaction study of genital tract smears. It is shown that human papillomaviruses and cytomegaloviruses do not play a fundamental role in the development of BC; there is no valid evidence for Epstein—Barr virus.

Key words: breast cancer, human papillomavirus, Epstein-Barr virus, mouse mammary tumor virus

Рак молочной железы (РМЖ) — наиболее распространенный вид опухолей, встречающихся среди женского населения Европы, Америки и некоторых стран Азии [1—4]. В течение последних 20 лет в мире, а также в России наметилась устойчивая тенденция к росту заболеваемости этим видом рака, особенно в городах и мегаполисах [1, 2, 4, 5]. Начиная с 1985 г. РМЖ занимает 1-е место среди онкологических заболеваний у женщин (частота встречаемости - 31,2%) [1, 3, 6].

Известно, что развитие опухоли связано с нарушением роста и дифференцировки клеток и злокачественным их перерождением. Во многих случаях такие нарушения обусловлены мутациями или резким повышением активности клеточных онкогенов - нормальных генов, которые участвуют в регуляции клеточного цикла, передаче сигналов и других процессах жизнедеятельности клеток. В 10% случаев заболевание передается из поколения в поколение и обусловлено наличием врожденных мутаций в ге-

нах предрасположенности BRCA1 или BRCA2 (BReast CAncer) [1, 4, 7-9].

Возникновение рака может быть связано не только с нарушением работы онкогенов и других генов, но и с развитием вирусных инфекций.

За последние 10 лет появились веские доказательства того, что в организме человека циркулируют ретровирусы, родственные вирусу опухолей молочных желез мышей, или MMTV (Mouse Mammary Tumor Virus). Их активация представляет сложную цепочку биохимических процессов, похожую на активацию некоторых ретровирусов, вызывающих лейкозы у человека и животных [10].

MMTV-родственный провирус человека, или hMTV (human Mammary Tumor Virus), был обнаружен в геноме лимфоцитов и опухолевых клеток (в нормальных тканях человека не выявлен). Циркуляция MMTV в организме мышей и человека осуществляется при участии лимфоцитов периферической крови. На этом этапе число копий провируса в геноме достаточно ограничено. Во время ак-

тивного деления эпителиальных клеток молочной железы, растущей под действием гормонов, встроенный в клеточный геном провирус получает возможность быстрого умножения копий в тысячи раз. По-видимому, провирус может встраиваться в клетки молочной железы, обладающие свойствами стволовых клеток, которые впоследствии дают начало множественным очагам опухолевого роста. Имеются данные о возможном прямом или опосредованном участии ИМТУ в развитии РМЖ.

В настоящее время в мире отмечается тенденция к росту числа сексуально-трансмиссивных заболеваний (не только в странах с высоким уровнем экономического развития, но и в развивающихся), что связано в основном с изменением образа жизни людей и, вследствие этого, с изменением особенностей сексуального поведения, ранним началом половой жизни, частой сменой половых партнеров, курением.

Эпидемиологическая ситуация с инфекциями, передаваемыми половым путем, сегодня принимает в Российской Федерации угрожающий характер. Заболеваемость населения инфекциями, передаваемыми половым путем, составляет около 0,8%. За последние годы зарегистрировано около 2 млн пациентов, из них женщин в 2 раза больше, чем мужчин. В последнее десятилетие наблюдается увеличение числа заболеваний, передаваемых половым путем, вирусной этиологии. Наряду с вирусом простого герпеса (ВПГ), цитомегаловирусом (ЦМВ), вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ), особое место занимает папилломавирусная инфекция (ПВИ).

В многочисленных эпидемиологических исследованиях установлено наличие причинной связи между ПВИ и раком шейки матки, а также цервикальными интраэпителиальными неоплазиями. Этиологическая роль вируса папилломы человека (ВПЧ) предполагает, что ПВИ является необходимой составляющей для развития опухолевого процесса.

Доля инфицированных лиц в популяциях достаточно высока и составляет в среднем 20-60%; в большинстве случаев возбудитель передается через микротравмы кожи, контактно, при половых сношениях и перинатально.

Папилломавирусы — единственная группа вирусов, в отношении которых доказанным является тот факт, что они индуцируют образование доброкачественных и злокачественных опухолей у человека в естественных условиях, а также играют роль в развитии рака гениталий. Инфицирование приводит к возникновению кожных и подошвенных бородавок, болезни Боуэна, веррукозного рака и кондилом (плоских и остроконечных), а также гигантских кондилом Бушке—Левенштейна. Каждый тип вируса ассоциирован с определенной патологией человека.

Таким образом, в настоящее время исследователи располагают достаточно убедительными данными о роли вируса ВПЧ в индукции предопухолевых и опухолевых процессов вульвы, шейки, а по некоторым сообщениям — и тела матки [11, 12]. Считается, что в 4—10% случаев ПВИ шейки матки приводят к развитию рака.

На сегодняшний день в инфекционной патологии все большее значение приобретают герпесвиру-сы (от греч. herpes — ползучий). Внимание, которое в течение последних 25 лет вирусологи и клиницисты проявляют к герпесвирусным заболеваниям человека, связано с их значительной эпидемиологической ролью и социальной значимостью в современном мире. Неуклонный рост числа герпетических заболеваний у взрослых и детей обусловливает необходимость всестороннего изучения герпетической инфекции и разработки эффективных методов профилактики и лечения разнообразных ее форм. Среди вирусных инфекций герпес занимает одно из ведущих мест в силу повсеместного распространения вирусов, многообразия клинических проявлений, как правило, хронического течения, а также различных путей передачи вирусов.

В настоящее время результаты немногочисленных эпидемиологических и экспериментальных научных работ свидетельствуют о том, что вирусы герпеса могут обладать определенным онкогенным потенциалом. Герпесвирусы ассоциированы с малиг-низацией и способны (по крайней мере ВЭБ, ВПГ и ЦМВ) трансформировать клетки in vitro. Все гер-песвирусы сходны по морфологическим признакам, размерам, типу нуклеиновой кислоты (2-це-почечная ДНК), икосадельтаэдрическому капсиду, сборка которого происходит в ядре инфицированной клетки, оболочке, типу репродукции, способности вызывать хроническую и латентную инфекции у человека [11, 13].

Результаты исследований последних лет подтверждают участие некоторых герпесвирусов в развитии таких злокачественных новообразований, как карциномы цервикального канала шейки матки, саркомы Капоши, нейробластомы и др. [11, 14].

В то же время роль вирусной инфекции в патогенезе РМЖ остается недостаточно изученной.

Нами проведена работа по обнаружению геномов ДНК-содержащих вирусов в ткани молочной железы у больных РМЖ и пациенток контрольной группы. В связи с тем, что в опухолевой ткани уровень противовирусной защиты значительно снижен, было решено сравнить наши данные с результатами, полученными при осуществлении ПЦР-диагностики (ПЦР — полимеразная цепная реакция) мазков, взятых из генитального тракта этих же пациенток.

Материалы и методы

В основу работы легли результаты наблюдений за 60 больными РМЖ 1—1У стадий и 30 пациентками с фиброзно-кистозной мастопатией, находящихся на лечении в ФГУ РНЦРР в период с 2006 по 2009 г.

Средний возраст больных РМЖ составил 56 ± 0,5 года, в контрольной группе этот показатель был равен 42,8 ± 0,7 года.

Распределение по стадиям пациенток со злокачественными новообразованиями молочной железы было следующим: I стадия РМЖ диагностирована у 15 (25%), II - у 34 (56,7%), III - у 2 (3,3%), IV - у 9 (15%) больных.

В план лечения входили различные варианты хирургических вмешательств: секторальная резекция молочной железы; радикальная резекция молочной железы с регионарной лимфаденэктомией (ЛАЭ); радикальная резекция молочной железы с регионарной ЛАЭ и одномоментной пластикой торакодор-зальным лоскутом и фрагментом большой грудной мышцы; мастэктомия по Маддену; подкожная ма-стэктомия (одно- или двусторонняя) с одномоментным аломаммопротезированием.

Гистологическое и иммуногистохимическое исследования биопсийного и операционного материалов проводили в отделении патоморфологии ФГУ РНЦРР. Молекулярно-генетическое исследование осуществляли с использованием метода ПЦР. Материалом для исследования являлась ткань опухоли молочной железы.

Основные этапы исследования включали подготовку материала и выделение из него ДНК, амплификацию и детекцию продуктов ПЦР.

Подготовка материала заключалась в следующем:

1) перед получением срезов поверхность микротома обрабатывали ксилолом, а затем этанолом, что позволило избежать контаминации анализируемых образцов ткани;

2) готовили срезы толщиной 10-20 мм, которые с соблюдением стерильности переносили в пробирку типа Эппендорф на 1,5 мл;

3) экстрагировали парафин из среза посредством добавления в пробирки 1 мл ксилола и перемешивания его на встряхивателе при комнатной температуре;

4) через 2 мин осаждали ткань центрифугированием при скорости 12 тыс. об/мин в течение 5 мин;

5) осторожно (не касаясь ткани) удаляли супернатант;

6) добавляли в пробирку 1 мл 100% этанола и встряхивали (ткань при этом приобретала беловатый цвет);

7) пробирки центрифугировали при скорости 12 тыс. об/мин в течение 5 мин и сливали супернатант;

8) этапы 6 и 7 повторяли еще раз;

9) ткань высушивали в открытых пробирках в термостате при температуре 55 °С;

10) высушенную ткань хранили при комнатной температуре в закрытых пробирках типа Эппендорф.

Следует отметить, что возможность осуществления успешной амплификации зависит от типа использованного фиксатора, продолжительности фиксации и сроков хранения образцов. Оптимальное время фиксации перед дальнейшей обработкой тканей составляет 1-24 ч. Под действием формальдегида в ДНК могут образовываться шиффовы основания, препятствующие проведению эффективной амплификации. При увеличении времени фиксации могут происходить также и другие необратимые процессы.

При заливке тканей в парафин наблюдается стабилизация ДНК, однако постепенно происходит медленная деградация молекул ДНК. В старых (использующихся на протяжении >10 лет) парафиновых блоках эффективность осуществления амплификации значительно снижается.

Для выделения ДНК из биопроб с помощью ускоренной пробоподготовки пробирку со стерильным физиологическим раствором (0,5-1 мл), содержащим клинический материал, центрифугировали на аппарате ЕррепёогГ 5415D (Германия) в течение 2 мин при скорости 10 000 об/мин, супернатант удаляли. К осадку добавляли от 50 до 200 мкл рабочего раствора ЭкстраГена (суспензия смеси ионообмен-ников с протеолитическими ферментами), в зависимости от размера полученного осадка, и суспендировали осадок на вортексе Ые1ёо1рИ (Германия). Пробирку инкубировали при температуре 56 °С в течение 30 мин, а затем на протяжении 10 мин при температуре 0 °С в микротермостате Термо 24-15 (Россия), после чего центрифугировали в течение 10-15 с при скорости 10 000 об/мин для сбора конденсата. Для постановки реакции амплификации брали 10 мкл прозрачного супернатанта, содержащего исследуемый образец ДНК.

Для выделения ДНК с помощью универсальной пробоподготовки к 100 мкл анализируемой пробы, содержащей клинический материал в пробирке объемом 1,5 мл (типа Эппендорф), добавляли 400 мкл лизирующего реагента (раствор гуанидинтиоциона-та, предназначенный для лизиса клеток, солюбилизации клеточного дебриса и денатурации клеточных нуклеаз).

Пробирку с пробой встряхивали и инкубировали в течение 5 мин при температуре 65 °С. Затем в пробирку добавляли 20 мкл суспензии сорбента Кие1еоБ и перемешивали ее содержимое в течение 5 мин на ротаторе (или вручную). После центрифугирования пробы (в течение 10 с со скоростью 5000 об/мин) супернатант отбрасывали, а осадок сорбента трижды промывали солевым буфером, содержащим 70% эта-

нол. Пробирку помещали в микротермостат и подсушивали пробы на протяжении 5 мин при температуре 65 °С, оставляя пробирку открытой. В пробирку с осадком добавляли 100 мкл ЭкстраГена, суспендировали содержимое на вортексе до получения гомогенного состояния, после чего инкубировали в течение 5 мин при температуре 65 °С. После этого еще раз суспендировали содержимое пробирки на вортексе и затем центрифугировали в течение 1 мин при скорости 10 000 об/мин. Супернатант использовали для установления реакции амплификации.

Амплификация. В пробирку типа Эппендорф объемом 0,5 мл, содержащую лиофилизованную сухую реакционную смесь, готовую для осуществления амплификации выделенной ДНК (МастерМикс), добавляли 10 мкл ПЦР-растворителя, 10 мкл анализируемого образца и 20 мкл минерального масла. Амплификацию проводили в программируемом термостате Атр1у-4 (Россия) в соответствии со следующим температурным режимом:

• 95 °С — денатурация;

• 60 °С — отжиг праймеров;

• 74 °С — комплиментарное достраивание

цепи ДНК. Всего было проведено 43 цикла.

Детекция результатов. С помощью источника тока с фиксированным напряжением 130 В полученные продукты амплификации разгоняли с помощью электрофореза в 1,5% агарозном геле, содержащем бромистый этидий, в течение 20 мин при напряжении Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

4. Nevanlinna H. CHEK2 gene. BCLC Familial Cancer 2003;2:186.

5. Моисеенко В.М. “Естественная история” роста рака молочной железы. Практ онкол 2002;3(1):6-14.

6. Любченко Л.Н. Генодиагностика наследственной предрасположенности к раку молочной железы и разработка системы ин-

дивидуального прогнозирования развития, течения и профилактики заболевания. Ав-тореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2002.

7. Карпухин А.В., Поспехова Н.И., Любченко Л.Н. и др. Частоты олигонуклео-тидных полиморфизмов и мутаций в гене BRCA1 при наследственно обусловленном раке молочной железы и/или яичников. ДАН 2002;383(5).

8. Seal S., Barfoot R., Jayatilake H. et al. Evaluation of Fanconi Anemia in familial breast cancer. BCLC Familial cancer 2003;2:212-3.

9. Szabo C., Neuhausen S., Devilee P.

et al. BRCA1 founder mutations: population genetics and genome evolution. BCLC Familial Cancer 2003;2:177-8.

10. Bar-Sinai A., Bassa N., Fiscette M. et al. Mouse mammary tumor virus env-derivated

peptide associates with nucleolar targets in lymphoma, mammary carcinoma, and human breast cancer. Cancer Res 2005;65(16):7223-30.

11. Ашрафян Л.А., Киселев В.И. Опухоли репродуктивных органов (этиология и патогенез). М., 2007; с. 103-27.

12. Ашрафян ЛА, Киселев В.И., Муйж-нек Е.Л. Патогенетическая профилактика рака репродуктивных органов. М., 2009; с. 123-30.

13. Боженко В.К. Молекулярные маркеры рака молочной железы. Клин маммол 2005;1:51-7.