Напряженность иммунитета к гриппу птиц

Донник Ирина Михайловна
Директор ГНУ Уральского научно-исследовательского вете­ринарного института (УрНИВИ).
Член-корреспондент РАСХН, профессор

Шилова Евгения Николаевна
Зав. отделом инфекционной патологии ГНУ УрНИВИ Кандидат ветеринарных наук, доцент

В последние годы большое внимание уделяется про­филактике высокопатогенного гриппа птиц, как инфек­ции, представляющей возможную угрозу человечеству. Одним из наиболее эффективных средств профилактики гриппа А птиц является иммунопрофилактика. Вакцинация, не препятствуя инфицированию птицы, защищает ее от клинического проявле­ния заболевания, увеличивая порог вирусной инфекции, необ­ходимый для инфицирования привитой птицы, а также воздейс­твует на эпизоотический процесс, ограничивая пути передачи и распространение инфекции (Ямникова С.С, Смоленский В.И., Хохлачев О.Ф. и др., 2007).

Как известно, эффективность применения вакцины оце­нивают по трём показателям: уровню поствакцинального им­мунитета, выраженного в установлении протективных титров антител, заболеваемости и смертности птиц при эксперимен­тальном или полевом инфицировании. Согласно "Инструкции по применению вакцины против гриппа птиц инактивированной эмульгированной" (2006), данная вакцина должна вызывать не менее чем у 80 % вакцинированных птиц накопление в крови антител к вирусу гриппа птиц в титре 1/16 со штаммом вируса, имеющего иную антигенную форму, иммунитет формируется в течение 28 дней после вакцинации.

Установлено, что интенсивность иммунного ответа у живот­ных и птиц может отличаться на разных территориях, в случае, если на организмы влияют разные факторы внешней среды, в т.ч. и неблагоприятная экологическая обстановка (Бектимиров Т.А., Горбунов М.А., Никитюк Н.М. и др., 2001).

В связи с этим, нами проведены исследования напряжен­ности и длительности иммунитета при вакцинации взрослых гу­сей против гриппа птиц А.

Материалы и методы:

Нами проведена экспериментальная вакцинация разных видов домашней птицы против гриппа птиц А. Птицу содержа­ли в опытных вольерах вивария. Рацион был стандартным на основе комбикорма. Ведение препарата организовывали в отдельном помещении, вынесенном за пределы птицепредпри-ятий.

Вакцинацию гусей проводили разработанной в ФГУ ВНИ-ИЗЖ инактивированной эмульгированной вакциной против гриппа птиц из шт. H5N1 (производство ОАО "Покровский ком­бинат биопрепаратов"). Вакцину вводили согласно наставле­нию: подкожно, в дозе 0,5 мл. на голову. Вакцинацию проводи­ли трехкратно, с интервалом в 1 мес.

Для получения сыворотки кровь у гусей брали из яремной вены каждые 10 дней после вакцинации.

Уровень поствакцинальных антител в сыворотке экспере-ментальной птицы определяли в реакции торможения гемаг-глютинации (РТГА) с использованием стандартного диагности­ческого набора

Дополнительно у опытной и контрольной птицы определяли гематологические и иммунологические показатели. В цельной крови выявляли содержание гемоглобина (гемометром Сали), количество эритроцитов и лейкоцитов [И.А. Болотников, Ю.В. Соловьев, 1980]. Подсчет эритроцитов и лейкоцитов осущест­вляли одновременно в камере Горяева по методике Фриед и Лукачевой в модификации Болотникова И.А Для характерис­тики клеточного и гуморального иммунитета (проводили коли­чественное определение Т- и В- лимфоцитов [Л.С. Колабская, 1980].

Исследования проводились в течение 2005-2007 гг.

После проведенной вакцинации установлено, что уже че­рез 10 дней во всех пробах сыворотки крови птиц выявляются антитела в протективных титрах. При этом разброс разведений, в которых обнаружены антитела, составляет от минимального

- 1/16 до максимального - 1/256 (у 25 % птиц титры составили
1/16, у 8,3% - 1/32, у 16,6% - 1/64, у 16,6% - 1/128, у 33,3%

Однако уже через 30 дней после введения вакцины у гу­сей отмечено снижение титров антител, при этом у 33% гусей выявлены антитела ниже протективного титра (разведение 1/8). Таким образом, однократное введение вакцины не вы­зывало полноценную иммунную защиту у 67% птицы через 30 дней после первичной вакцинации.

Первую ревакцинацию птицепоголовья провели через 30 дней (третья декада). Анализ показал, что через 10 дней после ревакцинации было отмечено значительное снижение напря­женности иммунитета у гусей (рис. 1). При этом у 33% птиц ан­титела совсем не выявляли, у 17%титр был ниже протективного (1/8), у 50 % в титре 1/16 - 1/32. То есть, повторное введение вакцины через 30 дней после предыдущей вакцинации (чет­вертая - пятая декада) искусственно снижает напряженность иммунитета вплоть до исчезновения антител, и птица в этот пе­риод становилась не иммунной к возбудителю гриппа птиц.

Через 14-21 день после ревакцинации (шестая декада) отмечали рост титра антител, при этом все 100% вакциниро­ванных птиц имели специфические гемагглютинины в протек-тивных концентрациях (1/16-1/128). Таким образом, после рекомендуемой наставлением однократной ревакцинации у птиц есть

После второй ревакцинации (седьмая декада) снижение концентрации антител не происходило, напротив, были отмече­ны максимальные титры (1/64-1/128), которые удерживались в течение месяца (70-100-й день опыта).

Начиная со 110-го дня опыта (одиннадцатая - двенадцатая декада), отмечено снижение концентрации антител к вакцин­ному антигену (рис.2). Также установлено, что в эксперимен­тальной группе вакцинированных против ГП птиц ежемесячно отмечалось наличие, в среднем, 30-40% птиц, не имеющих иммунной защиты к вакцинному антигену, а, следовательно, к возбудителю гриппа птиц А. У остальных птиц концентрация специфических гемагглютининов оставалась низкая, но доста­точная для защиты от заболевания (1/16-1/64).

К концу периода наблюдения (через 12 мес. после начала вакцинации) протективные титры сохранялись у 50% поголовья, средняя концентрация антител составила 1/42.

Обобщая полученные данные, можно отметить, что, в це­лом, всех птиц данной популяции можно было условно разде­лить на три группы: с высоким уровнем антителообразования, со средним и с низким. При этом, если у птиц после первой вакцинации отмечались высокие титры антител, то и на протя­жении всего периода наблюдения они продолжали оставаться высокими (1/128-1/512). Количество таких птиц в эксперимен­тальной популяции было, в среднем, 15% (рис.3).

У гусей, которые после первой вакцинации показывали низкие значения напряженности иммунитета, после 1 и 2 ре­вакцинации уровень антител продолжал оставаться низким и, спустя 4-5 мес. после начала опыта, исчезал совсем. Данная группа птиц более половины срока наблюдения оставалась неиммунной после трехкратной вакцинации, их количество со­ставляло, в среднем, 37%. Поголовье птицы, которое показыва­ло средние уровни антителообразования (1/16-1/64), состав­ляло, в среднем, 48%.

При проведении биохимических и гематоиммунологичес-ких исследований установлено, что у гусей перед вакцинацией отмечено низкое содержание у-глобулинов, средние значения данного показателя составили 17,6% от среднего содержания (при норме 35-37%). Также у гусей отмечено достаточно низкое содержание тимоцитов и В-клеток (34% и 21 % соответственно), изменение их соотношения (Т/В составило 2,1 у.е.), что свиде­тельствует об иммунологической недостаточности.

Проведенные исследования показали, что полноценный иммунный ответ на введение вакцины отмечен только после трехкратного введения вакцины с интервалом 30 дней, концен­трация защитных антител у птиц удерживалась при этом до 12 мес. в протективных титрах. также необходимо отметить, что в популяции, в среднем, до 40% птиц не формируют иммунитет против ГП.

Заключение: Таким образом, исследованиями установле­но, что при вакцинации гусей трехкратно с интервалом 1 мес, в среднем, 37-50% поголовья показывают низкий иммунный ответ на введение вакцины, что выражается отсутствием ан­тител либо уровнем антител ниже протективного уровня (1/8). Данные исследования являются предварительными, поскольку проведены на ограниченном поголовье экспериментальной птицы и требуют дальнейших производственных опытов.

1. Вакцинация - профилактика гриппа птиц/ Ямникова С.С, Смоленский В.И., Хохлачев О.Ф., Власов Н. 2007

2. Вирусные болезни животных/ В.Н. Сюрин, А.Я. Са-муйленко, Б.В.Соловьев, Н.В.Фомина. - М.: ВНИИТиБП, 1998. - С.324-336.

3. Грипп птиц. Стратегия противодействия/ Э. Д. Джава-дов, Ф.И. Полежаев и др.// Ж. Ветеринария. - N°6. - 2006. -С. 3-6.

4. Испытание вакцины против высокопатогенного грип­па птиц в эксперименте/ Э.ДДжавадов, Э.М. Амдий, А. С. Дубо­вой и др.//Ж. Птица и птицепродукты. - N°3. - 2006.

5. Смирнов A.M. История и реальность вируса гриппа птиц штамма H5N1/А.М.Смирнов, М.А. Шесточенко, В.А. Иса­ченко - М.: Издательство РАСХН, 2006. - 100 с.

Динамика напряженности поствакцинального иммунитета у экспериментальной птицы при гриппе А

И.М.Донник, Е.Н. Шилова

Уральский научно-исследовательский ветеринарный инс­титут

При вакцинации против гриппа птиц гусей три раза с ин­тервалом 1 мес, в среднем, 37-50% поголовья показывают низкий иммунный ответ на введение вакцины, что выражается отсутствием антител либо уровнем антител ниже протективного уровня (1/8).

Ключевые слова: грипп А, специфическая профилактика, иммунитет, антитела, мониторинг

УДК 619:615.371:6169215:57083.3:636 028:6365

Dynamics of intensity immunity at a fu А at an experimental poultry

The Urals State Scientifc-Research Institute of the Veterinary Medicine

At vaccination against a flu of birds of geese three times with an interval of 1 month, on the average, 37-50 % of a poultry show the low immune answer to introduction of a vaccine that is expressed by absence of antibodies or a level of antibodies of below protective level (1/8).

Key words: immunity, flu A, poultry, vaccination

Сведения об авторах:

Донник Ирина Михайловна
Директор ГНУ Уральского научно-исследовательского вете­ринарного института (УрНИВИ). Член-корреспондент РАСХН, д.б.н., профессор

Шилова Евгения Николаевна
Зав. отделом инфекционной патологии ГНУ УрНИВИ Кандидат ветеринарных наук, доцент

- ответственная за пере­писку с редакцией Адрес: 620142, г.Екатеринбург, ул.Белинского, 112а, Тел. (343)257-20-44, факс (343)257-82-63 Адрес: 620142, г.Екатеринбург, ул.Белинского, 112а, Тел. (343)257-20-44, факс (343)257-82-63

Эффективность применения вакцины оценивают по трем показателям: уровню поствакционального иммунитета выраженного в протективных титрах антител, заболеваемости и смертности птиц при экспериментальном или полевом инфицировании. В качестве косвенного теста активной иммунной системы можно использовать количественные показатели иммунокомпетентных клеток.

Согласно инструкции по применению вакцины против гриппа птиц инактивированной эмульгированной, она должна вызывать не менее чем у 80% вакцинированных птиц накопление антител в крови к вирусу гриппа птиц в титре 1:16 со штаммом, имеющим иную антигенную форму. Иммунитет формируется в течение 28 дней после вакцинации. Однако существует мнение, если после иммунизации против вирусных болезней у 15% и более особей титры антител ниже, чем 1:64 в РТГА, то проведенные профилактические мероприятия можно считать не эффективными.(2)

Цель работы -определить эффективность вакцинопрофилактики птиц в Пышминском районе по результатам лабораторного мониторинга напряженности поствакцинального иммунитета.

Материалы и методы.

Реакция торможения гемагглютинации — (РТГА) метод идентификации вируса или выявления противовирусных антител в сыворотке крови больного, основанный на феномене отсутствия агглютинации эритроцитов препаратом, содержащим вирус, в присутствии иммунной к нему сыворотки крови.

Реакция торможения гемагглютинации проводится микрометодом в лунках 96-луночного круглодонного планшета для иммунологических исследований. Титр более 1:8 считается положительным.

Ее принцип состоит в том, что при контакте вируса с гомологичными антителами происходит связывание антител с гемагглютининами вируса, в результате чего вирус теряет свойство агглютинировать (склеивать) эритроциты. Для этого исследуемую сыворотку в разных разведениях смешивают с одинаковыми дозами известного вируса и после контакта ко всем смесям добавляют суспензию эритроцитов, которые служат индикатором вирусных гемагглютининов. При высшем разведении исследуемой сыворотки, когда еще подавляется гемагглютинация, и определится титр антител в этой сыворотке.

Результаты и обсуждение исследований

В Пышминском районе проводится уже 4 года подряд мониторинговая программа по гриппу птиц - исследуют сыворотку крови через месяц после ревакцинации кур и сыворотку диких птиц убитых во время сезона охоты. Сыворотки крови отправляют в Свердловскую областную лабораторию на исследование напряженности иммунитета.

При исследовании 15 проб полученных от дикой водоплавающей птицы, отстреленной в охотничьих угодьях Пышминского городского округа, методом РТГА, антител к вирусу гриппа птиц не обнаружили.

Проведя сравнительный анализ по полученным титрам антител, определяемых в реакции торможения гемагглютинации со штаммом вируса гриппа А подтипа Н5 исследовали в 2008 году 108 проб сыворотки крови кур. По результатам исследования сыворотки крови из 108 голов у 94 (87%) выявлен высокий уровень антител к гриппу и только у 14 (13%) антител не обнаружили. При этом 94 головы можно разделить на 3 группы: с высоким, и низким уровнем антителообразования. В процентном соотношении эти группы делятся так: с высоким уровнем 64,9%, с средним уровнем 33,0% с и низким 2,1%.

По результатам 2009 года из 80 голов у 73 (91,2%) выявлен высокий уровень антител к гриппу и только у 7 (8,8%) антител не обнаружили. При этом 73 головы так же можно разделить на три группы: с высоким, средним и низким уровнем антителообразования. В процентном соотношении эти группы делятся так: с высоким уровнем 19,2%, с средним уровнем 48,0% и низким 32,8%.

Список использованной литературы

Мезенцев С.В. Грипп птиц: эпизоотология и безопасность продукции // Ветеринарный консультант.№20. 2006

(с) 2009 ООО "Уралбиовет-Консалтинг"
620142 Екатеринбург, ул. Белинского, 112а. Тел./факс: (343) 214-76-30, 214-76-32
По всем вопросам звоните или пишите через форму обратной связи.

480 руб. | 150 грн. | 7,5 долл. ', MOUSEOFF, FGCOLOR, '#FFFFCC',BGCOLOR, '#393939');" onMouseOut="return nd();"> Диссертация - 480 руб., доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Автореферат - бесплатно , доставка 10 минут , круглосуточно, без выходных и праздников

Виткова Ольга Николаевна. Усовершенствование системы лабораторной диагностики и профилактики гриппа птиц : диссертация . кандидата ветеринарных наук : 16.00.03 / Виткова Ольга Николаевна; [Место защиты: Всерос. науч.-исслед. и технол. ин-т биол. пром-сти РАСХН].- Щелково, 2009.- 168 с.: ил. РГБ ОД, 61 09-16/125

Содержание к диссертации

1. Обзор литературы 13

2. Материалы и методы 44

2.1. Материалы 44

2.2. Приборное обеспечение и расходные материалы 46

2.3. Методы исследований 47

3. Результаты собственных исследований 65

3.1. Анализ распространения вируса гриппа птиц типа А подтипа H5N1B мире и на территории Российской Федерации 65

3.2. Изучение клинических признаков и патологоанатомических изменений при гриппе у различных видов птиц

3.3. Сравнительное изучение вирусологических, молекулярно-биологических (ПЦР), иммунохроматографических методов при детекции высокопатогенного гриппа птиц в патматериале

3.4. Изучение биологических и генетических свойств выделенных изолятов

3.5. Сравнительное изучение серологических методов диагностики гриппа птиц ИФА и РТГА

3.6. Изучение напряженности поствакцинального иммунитета к вирусу гриппа H5N1 у различных видов птиц 99

3.7. Влияние иммуностимулирующих препаратов на эффективность вакцинации против гриппа 109

Обсуждение результатов 112

Практические предложения 114

Список литературы 115

Введение к работе

Актуальность темы. Промышленное птицеводство - наиболее индустриально развитое направление сельского хозяйства, как в России, так и зарубежом.

В нашей стране птица в большом количестве разводится в индивидуальных подворьях граждан, особенно в южных регионах Российской Федерации. Для интенсивного ведения птицеводства с высокой концентрацией птицепоголовья всегда были актуальными проблемы связанные с инфекционными заболеваниями.

В настоящее время во всем мире наибольшее беспокойство вызывает высоко патогенный грипп птиц (ВПГП) - болезнь, известная также под названием классическая чума птиц, вызываемая вирусами, относящимися к семейству Огtomyxovirdae, типу А. Наиболее восприимчивыми к вирусу гриппа являются куры и индейки. На протяжении последних десяти лет ситуация по гриппу птиц в мире значительно осложнилась. Значительные экономические потери имели место в промышленном птицеводстве различных стран. Только в 2005 г. потери в сельскохозяйственном секторе стран Азии оценивались приблизительно в 10 млрд. долларов. Ситуация по гриппу птиц значительно осложняется в связи с возросшей опасностью для человека, так общее количество, подтвержденных ВОЗ случаев заболеваний, вызванных вирусом гриппа A/H5N1 у людей, к 2009 г.,достигло 408 , из которых 255 случаев с летальным исходом.

Впервые вспышки гриппа птиц H5N1 были зарегистрированы в России в июле 2005 г., в Новосибирской области. По данным Россельхознадзора с 2005 г. по 2008 г., было зарегистрировано 179 очагов заболевания гриппом птиц H5N1 в 20 субъектах Российской Федерации и суммарные потери в птицеводстве составили более 2,8 млн. птиц.

Резервуаром фиппа птиц в природе является дикая водоплавающая птица.

Сезонная миграция диких перелетных птиц способствует широкому распространению возбудителя инфекции. Несмотря на предпринятые в мире меры контролю над данным инфекционным заболеванием, вирус гриппа продолжает распространяться и вызывать вспышки среди домашних и диких видов птиц.

Существует потенциальный риск возникновения не только панзоотии, но и пандемий, в случае появления высоко патогенных для человека рекомбинантных штаммов, полученных в результате взаимодействия вирусов гриппа птиц, свиньи и человека.

В настоящее время в лабораторной диагностике гриппа птиц используются как классические методы, такие как: выделение вируса на куриных эмбрионах и реакция торможения гемагглютинации (РТГА), а также новые методы экспресс диагностики, включающие иммуноферментный анализ (ИФА), полимеразную цепную реакцию (ПЦР) или полимеразную цепную реакцию в реальном времени, иммунохроматографические методы.

В нашей стране такие методы как ИФА и ПЦР стали активно использоваться с 2005 г., иммунохроматографический метод применяется крайне редко, так как используются импортные тесты-системы, не используются практически в лабораторной практике метод РДП (реакция диффузионной преципитации).

Методы экспресс диагностики (полимеразная цепная реакция (ПЦР) или полимеразная цепная реакция в реальном времени, иммунохроматографические
методы) направлены на обнаружение вируса гриппа птиц типа А, а также подтипов Н5 и Н7 в исходном патологическом, биологическом материалах.

Метод иммуноферментного анализа используется для обнаружения антител к вирусам гриппа птиц типа А только у кур, в основном, в промышленных стадах. С 2006 г. в Российской Федерации проводится иммунизация птицы в индивидуальных подворьях граждан.

Цель и задачи исследований. Целью исследований являлось усовершенствование системы лабораторной диагностики и профилактики гриппа птиц.

Научная новизна. Впервые изучено распространение вируса гриппа птиц на территории Российской Федерации с 2000-2007 г.г.

Изучены биологические и генетические свойства выделенных изолятов высокопатогенного вируса гриппа птиц (10) при вспышках болезни на территории нашей страны.

Изучена напряженность поствакцинального иммунитета у птиц, иммунизированных в зонах риска инактивированными вакцинами против гриппа птиц на территории Российской Федерации.

Разработаны научно обоснованные схемы лабораторных исследований, позволяющие в 100% случаев диагностировать грипп в максимально короткие сроки, в течение суток.

Доказано иммуностимулирующее действие препаратов фоспренила и сальмозана у цыплят бройлеров при совместном их применении с инактивированной вакциной, что позволяет повысить напряженность поствакцинального иммунитета.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, в том числе 2 - в журналах рекомендованных ВАК Российской Федерации.

Основные положения и результаты, выносимые на защиту:
1. Результаты анализа распространения гриппа птиц на территории Российской Федерации по данным Россельхознадзора и результатам лабораторного мониторинга за период с 2000 по 2007 г.г., проведенного ветлабораториями Российской Федерации.

2. Результаты клинических и патологоанатомических исследований при гриппе птиц.

3. Результаты сравнительных ПЦР, иммунохроматографического и вирусологического методов исследований.

Объём и структура диссертации. Материалы диссертация изложены на 127 страницах машинописного текста и включают введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследований, собственные исследования, обсуждения полученных результатов, выводы практические предложения, список использованной литературы (103 источника из которых 50 отечественных и 53
иностранных). Работа содержит 22 таблицы, 34 рисунка, 41 страницу приложений.

Автор благодарит специалистов Ставропольской, Новосибирской, Краснодарской межобластных и Ростовской областной ветеринарных лабораторий, государственную ветеринарной службу Московской области за оказанное содействие в проведении лабораторно-диагностических работ в период вспышек высокпатогенного гриппа на территории данных субъектов.

Обзор литературы

Высоко патогенный грипп птиц (ВПГП) — заболевание птиц, характеризующееся поражением респираторных органов, желудочно-кишечного тракта и центральной нервной системы, известное также под названием классическая чума птиц.

Возможно острое и сверхострое течение заболевания, при котором наблюдается очень короткий период клинического проявления и экстремально высокая смертность. Возбудителями данного заболевания являются вирусы, относящиеся к семейству Ortomyxovirdae. В настоящее время к данному семейству относятся три типа вирусов гриппа: А, В, С (1, 2, 31,54,80).

Вирусы гриппа типов В и С вызывают заболевания у людей (1,2, 54) и являются причиной локальных вспышек и эпидемий (тип В) или спорадических заболеваний, чаще у детей (тип С). Именно вирусы гриппа А ответственны за появление пандемий и тяжелых эпидемий у людей, а также эпизоотии и панзоотии у животных(54, 80).

Вирус гриппа птиц типа А широко распространен в природе в популяциях диких птиц. Дикие виды птиц, в особенности водоплавающие, являются наиболее устойчивыми к данному заболеванию. Болезнь у них может протекать в легкой форме или бессимптомно. Дикую водоплавающую птицу считают резервуаром вирусов гриппа типа А в природе. Сезонная миграция диких перелетных птиц способствует широкому их распространению (1, 2, 21, 22, 23, 31,54, 80). Домашняя птица более чувствительна к гриппу, особенно куры и индейки.

До последнего времени считалось, что вирусы типа А имеют видовую специфичность, то есть, как правило, вирусы, выделенные от птиц, не могут вызывать заболевание у свиньи или человека, и наоборот.

В настоящее время доказано, что вирусы гриппа типа А, вызывающие заболевание у птиц, могут также поражать как человека, так и некоторых млеко питающих животных (лошади, свиньи, хорьки, норки, тюлени), описано два случая выделения их от китов (16, 36, 54, 59, 62, 63, 66,88). Имеются сообщения о возможности заболевания гриппом H5N1 свиней.(54, 71, 84)

Вспышки заболеваний, вызванные высоко патогенными штаммами вируса гриппа птиц (H7N1) и (H7N7), регистрировались достаточно часто в середине прошлого столетия в странах Северной и Южной Америки, на Ближнем и Дальнем Востоке, в Европе, Великобритании, на территории Советского Союза (1, 31,54).

Высоко патогенные штаммы, относящиеся к подтипам Н5, были обнаружены у цыплят в Шотландии (H5N1) и (H5N3). В этот период складывается мнение, что все высоко патогенные штаммы относятся только к подтипам Н5 или Н7. Однако, в это же время в различных частях мира исследователи выделяют от различных видов птиц, как домашних, так и диких, изоляты вирусов гриппа Н5 и Н7, которые не вызывают заболевание т.е. являются апатогенными, но все же исторически было показано, что наибольшее количество проблем, обусловленных вспышками высоко патогенного гриппа птиц, было связано именно с вирусами, имеющими гемагглютинин Н5 и Н7 (54).

Материалы

Патматериал (кусочки внутренних паренхиматозных органов, головного мозга, кишечника, суспензии патматериалов и экстро-эмбриональные жидкости), полученный от трупов птиц, вынужденно убитых с диагностической целью больных и подозреваемых в заражении гриппом птиц.

Штаммы вирусов гриппа птиц H5Nb полученные в результате вирусологических исследований на эмбрионах СПФ кур.

Пробы сывороток крови от различных видов невакцинированной домашней и от дикой птицы, поступившей на исследования в целях мониторинга гриппа птиц, а также сыворотка крови от вакцинированной птицы, поступившей с целью определения поствакцинального иммунитета. Эмбрионы СПФ кур, производство Щелковского биокомбината, Московская область. Эритроциты кур на физиологическом растворе - 1% взвесь.

Культуры клеток фибробластов куриных эмбрионов и MDBK (культура клеток MDBK любезно предоставлена профессором Р.В Белоусовой (ФГОУ ВПО МГАВМиБ) им.К.И.Скрябина.

Инактивированная гидроокись алюминиевая формолвакцина против гриппа птиц из эпизоотического штамм H5Ni.

Анализ распространения вируса гриппа птиц типа А подтипа H5N1B мире и на территории Российской Федерации

Для выяснения проблемы распространения гриппа птиц нами были проанализированы данные МЭБ по распространению гриппа птиц в мире, а также данные официальной отчетности ветеринарных служб и межобластных ветеринарных лабораторий субъектов Российской Федерации за 2000 - 2007г.г.

На протяжении последних десяти лет ситуация по гриппу птиц в мире значительно осложнилась. Вспышки гриппа птиц типа А, подтипа H5N1 регистрировались, по данным МЭБ, более чем в 50 странах.

Значительные экономические потери имели место в промышленном птицеводстве различных стран. В реестре стран неблагополучных по высокопатогенному гриппу H5N1 Россия занимает 7 место

По данным ВОЗ, как видно из таблицы 10, с 2003 по 2008 г.г. включительно заболело 359 человек, из которых 226 умерло.

Лабораторная диагностическая служба РФ представлена Центральной ветеринарной лабораторией, межобластными, областными, краевыми и республиканскими, зональными, межрайонными, районными ветеринарными лабораториями. Ветлаборатории Российской Федерации, включая Центральную научно-методическую ветеринарную лабораторию, проводят ежегодный эпизоотологи-ческий мониторинг вирусных болезней на территории РФ и все данные для статистической обработки поступают в центральную научно-методическую ветеринарную лабораторию.

В нашу задачу входил анализ распространения гриппа птиц на территории Российской Федерации с 2000 по 2007 годы на основе литературных данных и отчетных данных Россельхознадзора и ветеринарных лабораторий Российской Федерации.

В работе использованы данные, полученные из официальной отчетности ветеринарных служб административных единиц РФ по форме 4-ВЕТ.

По литературным данным (12, 33, 34, 35, 45 ) вспышки гриппа птиц Н6 (по новой классификации Н9) на территории Советского Союза отмечались в 70-е годы, в т.ч. на территории Российской Федерации регистрировался в 1970-1971г.г. штамм А/курица/СССР/315/70(84). В 1978-1979 г.г. в птицеводческих хозяйствах наблюдалось заболевание цыплят 45-47 дневного возраста, затем начали болеть куры других возрастных групп: от 60 до 450 дней.

Более 25 лет в Российской Федерации (с 1979 г. плоть до 2005г.) не было зарегистрировано вспышек гриппа птиц ни в промышленном птицеводстве, ни в индивидуальных подворьях граждан.

Вспышки гриппа птиц H5N1 были впервые зарегистрированы в России в Новосибирской области в 2005 г. Всего в 2005 г. было выявлено 62 очага гриппа птиц в 10 субъектах Российской Федерации. Пало - 26844, уничтожено 609250 птиц, одна птицефабрика в Курганской области.

С 2000 г. по 2007г. в ветлаборатории России с целью диагностики гриппа птиц поступило 81994 патологичнских и биоматериалов, по которым было проведено 4348 вирусологических и 103621 исследований методом ПЦР и/или РВ-ПЦР.

Ниже в таблице 11 представлены данные исследований патологических и биоматериалов на грипп птиц за период 2000г. по 2007г. Из данных таблицы следует, что до 2005 г. объемы исследований на грипп птиц были незначительные, а в последние три года количество исследований, в связи со сложной эпизоотической ситуацией по гриппу птиц, резко возрастает, внедряется в лабораторную практику новый метод исследований - ПЦР и РВ-ПЦР. Динамика выявления положительных результатов представлена на гистограмме (рис.3). В 2006 г. отмечается незначительное снижение количества положительных результатов к уровню 2005 г., в 2007 г. их количество возрастает, но не достигает уровня 2005 г.