| D-8482 |
РеалБест ДНК ВПЧ ВКР генотип (комплект 2)
Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК вирусов папилломы человека 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 и 59 типов высокого канцерогенного риска методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени. Не содержит реагентов для выделения ДНК.
HPV-КВАНТ-набор реагентов для выявления, типирования и количественного определения вируса папилломы человека методом ПЦР.
Одно из основных мест среди злокачественных опухолей репродуктивной системы занимает рак шейки матки (РШМ). Это заболевание находится на втором месте по распространенности (после рака молочной железы) и составляет около 14 % от всех злокачественных опухолей у женщин.
На сегодняшний день установлено, что этиологическим агентом РШМ является папиллома- вирусная инфекция. Показано, что ДНК вируса папилломы человека (ВПЧ) выявляется более чем в
99,5% всех биоптатов у пациенток с раком шейки матки.
На сегодняшний день известно более 120 типов ВПЧ, из них около 30 могут инфицировать эпи- телий урогенитального тракта. По способности вызывать злокачественные перерождения эпителия их делят на две группы: высокого и низкого онкогенного риска.
К группе высокого онкогенного риска относят следующие типы ВПЧ: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45,51, 52, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82. При этом тип 16 является наиболее распространенным в Европе и выявляется более чем в 50 % всех случаев РШМ.
К группе папиллом низкого онкогенного риска относят типы 6, 11, 36, 42, 43, 44, 46, 47, 50. Инфекция, вызванная этими типами, обычно протекает в виде доброкачественных поражений шейки матки и кондилом гортани.
ВПЧ обычно поражает эпителий зоны трансформации шейки матки, в котором и вызывает предраковые изменения. Принято считать, что прогресс от инфицирования эпителия до развития РШМ занимает не менее 5 лет (в среднем 10–20 лет) и только в очень редких случаях этот процесс может происходить за 1-2 года. Поэтому значительное место в профилактике РШМ должны занимать исследования, позволяющие определить наличие ВПЧ-инфекции и предраковые изменения на ранних стадиях развития заболевания.
Развитие молекулярной биологии и установление роли вирусов папилломы человека в развитии РШМ привели к тому, что ДНК-диагностика ВПЧ-инфекции рассматривается в настоящее время как основа скрининга и профилактики этого тяжелого заболевания, и во многих странах накоплен положительный опыт применения различных методов определения ДНК ВПЧ в скрининговых исследованиях.
Согласно рекомендациям по комплексной борьбе с раком шейки матки, опубликованным Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в 2010 г., анализ на наличие ВПЧ при обследовании в рамках скрининга рекомендован по крайней мере один раз женщинам в возрасте 35–45 лет или, если это возможно, каждые 3 года в возрасте 25–65 лет.
В соответствии с национальными рекомендациями, представленными в руководстве для врачей по профилактике РШМ, начало скрининга – 25 лет, с интервалом каждые 3 года (для женщин моложе 50 лет) и 5 лет (для женщин 50-65 лет). Обследование на наличие ДНК ВПЧ показано для пациенток с ASCUS (от англ. atypical squamous cell undetermined significance – атипичные клетки плоского эпителия неясного значения) и для мониторинга терапии цервикальных поражений высокой степени (CIN III (от англ. сervical intraepithelial neoplasia – цервикальная интраэпителиальная неоплазия), рак in situ, инвазивный рак). В случае обнаружения ДНК ВПЧ у пациенток с ASCUS повторный анализ рекомендован через 12 месяцев.
На основании накопленных данных были сформулированы требования к молекулярно-биологическим методам обнаружения ДНК ВПЧ:
- не менее 10 высокоонкогенных типов (16,18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58);
- высокая чувствительность – более 95 %;
- высокая специфичность.
ВПЧ-тест должен быть простым и быстрым в исполнении, недорогим, учет результатов должен быть автоматизирован.
Выявление ВПЧ в рамках скрининга РШМ с использованием метода ПЦР также могут включать определение вирусной нагрузки. Данное исследование может быть использовано для
- определения тактики ведения пациента;
- динамического наблюдения;
- оценки эффективности лечения;
- прогноза течения заболевания.
HPV-квант-21
Комплект реагентов для выявления, типирования и количественного определения вируса папилломы человека методом ПЦР. Предназначен для выявления HPV 6,11, 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 44, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82 – 24 определения.
Материал для исследования: соскобы эпителиальных клеток из цервикального канала, с шейки матки, из уретры, соскоб с поверхности кожи и слизистых, соскоб с поверхности экзофитной кондиломы, предметное стекло с имеющимся материалом для цитологического исследования, ткани, полученные при биопсии.
Внимание! Клинически значимая концентрация вируса составляет не менее 103 копий ДНК HPV на образец (при корректном взятии материала), что характеризует высокий уровень инфекции и может привести к развитию неоплазии шейки матки. Поэтому при относительном типе анализа результатов ПЦР по умолчанию используется программное ограничение полученных значений концентрации вируса, если они не попадают в клинически значимый диапазон (для образцов с меньшей концентрацией программа фиксирует отрицательный результат).
Материал для исследований
Для получения объективного результата необходимо, чтобы исследуемый клинический материал содержал возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи и примеси крови. Критерием правильности процедуры взятия является наличие в образце достаточного количества эпителиальных клеток -показатель КВМ (контроль взятия материала) должен больше 10 4 ГЭ/образец.
- Поскольку ПЦР является прямым методом лабораторной диагностики, в целях уменьшения рисков получения ложноотрицательных результатов рекомендуется брать материал из места предполагаемой локализации инфекционного процесса.
- Решение о необходимости исследовать ту или иную локализацию (влагалище, уретра,цервикальный канал) для анализа принимает лечащий врач на основании совокупности жалоб пациентки и клинической картины заболевания.
- В день обследования женщины не должны проводить туалет половых органов и спринцевание влагалища.
- Для получения объективного результата необходимо, чтобы исследуемый клинический материал содержал возможно большее количество эпителиальных клеток и минимальное количество слизи и примеси крови. Неправильное взятие биоматериала может привести к невозможности получения достоверного результата и, вследствие этого , необходимости повторного взятия биоматериала.
- Клинический материал берут в пробирку объемом 1,5 мл, содержащую транспортную среду.
Порядок взятия клинического материала в пробирку с транспортной средой:
- Открыть крышку пробирки.
- С помощью одноразового стерильного зонда получить отделяемое соответствующего биотопа (влагалище, уретра, цервикальный канал).
- Перенести зонд с клиническим материалом в пробирку с транспортной средой, когда зонд упрется в дно пробирки, дополнительным усилием согнуть тонкую часть зонда до насечки, затем отломить и оставить зонд в пробирке .При необходимости получения клинического материала из нескольких биотопов повторить процедуру, каждый раз забирая клинический материал новым зондом в новую пробирку.
- Пробирку плотно закрыть крышкой, промаркировать.
Особенности взятия клинического материала из цервикального канала:
- Клинический материал цервикального канала получают после введения во влагалище гинекологического зеркала с помощью уретрального зонда.
- Перед взятием клинического материала необходимо тщательно обработать отверстие цервикального канала с помощью стерильного марлевого тампона и затем обработать шейку матки стерильным физиологическим раствором.
- После введения тампона (зонда) в шеечный канал на 1,5 см его вращают несколько раз и извлекают. При извлечении тампона (зонда) необходимо полностью исключить его касание стенок влагалища.
- Полученный клинический материал помещается в пробирку с транспортной средой (см. выше).
Особенности взятия клинического материала из уретры:
- Клинический материал из уретры получают с помощью уретрального зонда.
- Перед взятием клинического материала пациентке рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-2 часов.
- При наличии свободных уретральных выделений наружное отверстие уретры следует очистить с помощью ватного тампона.
- При отсутствии свободных выделений может быть проведен легкий массаж уретры.
- После введения инструмента в уретру на глубину 1 см необходимо продвигать его к наружному отверстию, слегка нажимая на заднюю и боковые стенки уретры (вращательные движения болезненны).
- Полученный клинический материал помещается в пробирку с транспортной средой (см. выше).
Для исследования материала ,полученного из нескольких биотопов, процедуру повторяют, каждый раз используя новый стерильный зонд и новую пробирку.
Недопустимо смешивать материал из цервикального канала, влагалищного содержимого и уретры в одной пробирке!
Условия хранения и транспортировки биоматериала:
- Пробирки с полученным клиническим материалом должны быть промаркированы.
- В сопроводительном документе-направлении необходимо указать: ФИО, возраст пациентки, клинический материал, предполагаемый диагноз, показания к обследованию, дату и время взятия пробы, наименование учреждения (подразделения), направляющего клинический материал, фазу (день) менструального цикла или причину отсутствия менструации (менопауза, аменорея и т.п.).
- Если время транспортировки клинического материала от момента взятия до момента его доставки в лабораторию не более суток, то пробирку с клиническим материалом необходимо хранить и доставлять в лабораторию при температуре бытового холодильника (+ 4–10°С), не замораживая.
- В случае невозможности доставки клинического образца в лабораторию в течение суток, допускается однократное замораживание и хранение образца клинического материала при температуре -20°С до одного месяца.
В работе проанализирована частота выявления типов вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска среди жителей . Частота проб среди женщин составила 40%, среди мужчин — 21, 5%. Частота обнаружения папилломавируса наибольшая среди молодых лиц до 35 лет. Более 40% лиц имеют среднюю концентрацию вируса, при которой возможна дисплазия клеток.
Ключевые слова: вирус папилломы человека, скрининг, вирусная нагрузка
In this study the detection frequency of human papilloma virus types with high carcinogenic risk among residents of was analyzed. The frequency of samples among women was 40%, among men — 21, 5%. Detection frequency of human papillomavirus was highest among young persons up to 35 years. More than 40% of persons had an average concentration of virus which may cause the cell dysplasia.
Keywords: human papillomavirus, screening
Введение
Вирус папилломы человека (ВПЧ) относится к семейству паповавирусов (Papovaviridae), группе Papillomavirus (HPV). ВПЧ является чисто эпителиотропным вирусом. Актуальность изучения папилломавирусной инфекции (ПВИ) определяется чрезвычайно высоким канцерогенным потенциалом ряда генотипов ВПЧ и является не только медицинской, но социальной демографической проблемой. В настоящее время выделено более 130 различных генотипов вируса, среди которых почти 30 были обнаружены в кондиломатозных, предраковых и раковых поражениях вульвы, влагалища и шейки матки [1]. Если многочисленные эпидемиологические исследования доказали безусловную роль ВПЧ в способности индуцировать неопластические процессы в шейке матки, то у мужчин роль ВПЧ как кофактора в формировании рака полового члена, предстательной железы и яичек дискутируется.
Цель исследования
Целью данной работы было изучение частоты регистрации вируса папилломы человека среди жителей в зависимости от пола.
Материал и методы
Материалом для исследования послужили образцы ДНК, полученные из эпителиальных клеток урогенитального тракта женщин и мужчин. Всего было исследовано 5655 образцов ДНК лиц женского пола и 3291 образец ДНК мужчин.
Результаты и обсуждение
В настоящее время известно, что папилломавирусная инфекция передается преимущественно половым (с инфицированием сексуальных партнеров в 60%) [3] и путем, а также при проведении медицинских исследований, при прохождении плода через инфицированные родовые пути (с этим путем передачи связывают ювенильный папилломатоз гортани и рецидивирующий респираторный папилломатоз с кистозом легких у детей) [4].
По данным литературы инфицированность населения России и мира вирусом папилломы человека в целом составляет от 40 до 80% [3]. Однако инфицированность аногенитальными типами ВПЧ составляет 10–20%, в Москве — 16%, в Нижнем Новгороде — 33, 4% [5; 6].
Папилломавирусная инфекция поражает как женщин, так и мужчин, однако гормональных различий вероятность развития опухолей у мужчин гораздо ниже, чем у женщин. Тем не менее, мужчины в течение длительного времени могут быть носителями ВПЧ и передать вирус женщинам.
Генодиагностика папилломавирусной инфекции позволяет быстро с высокой чувствительностью и специфичностью выявлять этиологический фактор возможной патологии, определять группы риска по онкозаболеваниям урогенитального тракта и вовремя предотвратить не контролируемый рост инфекций в популяции.
Анализ данных скрининга на вирус папилломы человека показал, что частота проб среди женщин составила 40, 0%, среди мужчин — 21, 5%. При этом наибольшая частота инфицированных лиц как женского, так и мужского пола приходится на молодых людей до 35 лет. В этой возрастной группе более половины лиц являются носителями вируса папилломы человека. Наши данные соответствуют данным литературы, согласно которым пик выявления ВПЧ приходится на возрастные группы до 29 лет [5; 7], у которых отмечается наибольшая сексуальная активность и смена половых партнеров. Среди населения США 44, 8% инфицированных папилломавирусом — это лица в возрасте от 20 до 24 лет [8].
Самыми опасными типами ВПЧ являются 16 и 18 типы. Одновременное инфицирование данными типами ВПЧ обусловливает 70% случаев цервикального рака [3]. Частота выявления 16 и 18 типов вируса среди жителей представлена в таблице 1. Как видно из данных таблицы частота выявления вируса папилломы человека 16 и 18 типов среди лиц младше 20 лет составляет около 15%, и с возрастом снижается. Среди лиц старше 30 лет частота выявления самых опасных типов ВПЧ достоверно ниже по сравнению с более молодыми возрастными группами.
Однако в старших группах в силу возрастных изменений иммунитета и гормональных функций организма возможны проявления папилломавирусной инфекции и клеточная трансформация ракового характера. От заражения ВПЧ до развития предрака и рака шейки матки в среднем проходит 20 лет [9]. Более высокий риск () отмечается у женщин старше 30 лет, инфицированных типами ВПЧ высокого онкогенного риска, включая в первую очередь типы 16 и 18 [3].
Таблица 1 — Частота обнаружения вируса папилломы человека 16 и/или 18 типов в зависимости от возраста
![]()
Об актуальных изменениях в КС узнаете, став участником программы, разработанной совместно с ЗАО "Сбербанк-АСТ". Слушателям, успешно освоившим программу выдаются удостоверения установленного образца.
![]()
Программа разработана совместно с ЗАО "Сбербанк-АСТ". Слушателям, успешно освоившим программу, выдаются удостоверения установленного образца.
![]()
Обзор документа
Письмо Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения от 8 мая 2014 г. N 01И-674/14 "О новых данных по безопасности медицинского изделия"
Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения в рамках исполнения государственной функции по мониторингу безопасности медицинских изделий, находящихся в обращении на территории Российской Федерации, сообщает следующее.
Росздравнадзор доводит до сведения специалистов здравоохранения письмо ООО "Эбботт Лэбораториз" о новых данных по безопасности, связанных с медицинским изделием "Наборы реагентов in vitro для определения генотипа вируса гепатита С и выявления хламидий, хламидий/гонореи и вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска методом ПЦР в режиме реального времени", производства "Эбботт Молекьюлар Инк.", США (регистрационное удостоверение ФСЗ 2009/04560 от 18.06.2009).
Приложение: на 2 л. в 1 экз.
| Врио руководителя | М.А. Мурашко |
Продукт: RealTime High Risk HPV и компакт-диск RealTime High Risk (HR) HPV m2000 System ROW Combined Application CD-ROM
Кат. номера: 02N09 и 4N05-01
Номер ревизии: Версия 1.0 компакт-диска RealTime HR HPV m2000
System ROW Combined Application CD-ROM
Данная проблема не относится к определённым серии/серийному номеру
April 28, 2014 u/
Уважаемый пользователь Abbott Molecular,
Данное письмо содержит важную информацию о тесте RealTime High Risk (HR) HPV и компакт-диске m2000 System ROW Combined Application CD-ROM, версия 1.0. Просим вас внимательно изучить данную информацию.
Шумовые помехи инструмента m2000rt определены как повышенная вариабельность флуорецентных сигналов от цикла к циклу во время амплификации и процесса детекции. Отделение Abbott Molecular определило, что параметр отклонения по нижнему пределу шумового сигнала инструмента для теста RealTime HR HPV установлен вне оптимальных настроек для выявления излишней вариабельности флуоресцентного сигнала. Поэтому при излишнем шумовом сигнале могут быть получены неправильные результаты.
Флуоресцентные сигналы (шумы) инструментов могут немного варьировать. Однако одним фактором, повышающим шумы инструментов, являются проблемы ламп m2000rt. Если у вас имеются проблемы шума инструмента, связанные с лампами m2000rt,такие как код ошибки 4448 или сообщения о статусе лампы (Expired (истёк срок годности), Failed, (отказ), или Replace Soon (заменить в ближайшее время)), выполняйте процедуры по устранению неисправности, описанные в Руководстве по эксплуатации m2000rt. Если проблемы на устраняются, обратитесь за помощью к своему местному представителю Abbott Molecular.
Решение проблемы было определено и оно требует изменения параметра допустимого уровня шума инструмента для теста RealTime HR HPV.
При излишнем шуме инструмента существует возвожность получения неправильных результатов теста RealTime HR HPV без сообщения об ошибке. В частности, у вас может быть неожиданное увеличение количества положительных результатов. Некоторые отрицательные образцы могут быть неправильно определены как положительные. В исследовании, проведённом Abbott Molecular, было определено, что в результате этой проблемы менее 0,2% отрицательных образцов могли быть неправильно определены как положительные.
Если в вашей лаборатории проводится исследование RealTime HR HPV, и вы наблюдаете излишний шумовой сигнал инструмента, имейте в виду, что эта проблема может быть причиной получения неправильных результатов. Оцените последствия этой проблемы для вашей лаборатории.
Было проведено обновление версии компакт-диска RealTime HR HPV CD-ROM, исправляющее данную проблему. Этот обновлённый диск будет предоставлен вам в ближайшее время Abbott Molecular. Диск будет доступен к декабрю 2013 г. в зависимости от одобрения в вашей стране. Инсталляция компакт-диска RealTime HR HPV CD-ROM, версия 2.0, устранит данную проблему.
До обновления программного обеспечения вашей системы m2000 версией 2.0 диска RealTime HR HPV CD-ROM продолжайте делать следующее:
| 1. | Если вы получили код ошибки 4448 (Excessive noise was detected in the reference signal (излишний шум был обнаружен в референсном сигнале), следуйте инструкциям по устранению неисправности, описанным в вашем Руководстве по эксплуатации m2000rt; если ошибка не устранена, обратитесь к представителю службы технического обслуживания пользователей компании Abbott. |
| 2. | Проверьте статус лампы на вашем m2000rt в соответствии с Руководством по эксплуатации m2000rt. Если статус лампы Expired (истёк срок годности) или Failed (отказ), замените вашу лампу до проведения каких-либо тестов на инструменте m2000rt. Следуйте инструкциям по замене лампы вашего Руководства по эксплуатации m2000rt. Если проблема не устранена, или вам нужна помощь, обратитесь к своему представителю технического обслуживания пользователей компании Abbott. |
| 3. | Как в любом другом диагностическом тесте, результаты теста Abbott RealTime HR HPV должны быть интерпретированы с учетом результатов других клинических и лабораторных исследований. |
Если у вас имеются вопросы относительно данной информации, обращайтесь к своему местному представителю Abbott Molecular
Проанализируйте данную информацию вместе с персоналом лаборатории и сохраните копию в документации для дальнейшего использования. Мы приносим свои извинения за все неудобства, которые создаёт вашей лаборатории данная проблема.
Abbott Molecular Inc.
Обзор документа
Приводится письмо ООО "Эбботт Лэбораториз" о новых данных по безопасности применения медицинского изделия "Наборы реагентов in vitro для определения генотипа вируса гепатита С и выявления хламидий, хламидий/гонореи и вируса папилломы человека высокого канцерогенного риска методом ПЦР в режиме реального времени", производства "Эбботт Молекьюлар Инк." (США).
Сообщается, что шумовые помехи инструмента m2000rt определены как повышенная вариабельность флуорецентных сигналов от цикла к циклу во время амплификации и процесса детекции. При излишнем шуме инструмента существует возможность получения неправильных результатов теста RealTime HR HPV без сообщения об ошибке. В частности, возможно неожиданное увеличение количества положительных результатов. Некоторые отрицательные образцы могут быть неправильно определены как положительные.
Решение проблемы определено и требует изменения параметра допустимого уровня шума инструмента для теста RealTime HR HPV.
При возникновении вопросов относительно данной информации, обращаться следует к своему местному представителю Abbott Molecular.
Читайте также:
Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.
Copyright © Иммунитет и инфекции
(1).jpg)
