Как расшифровать количественный показатель гепатита в

Научно-диагностический центр лабораторных технологий


Телефоны для справок:


Личный кабинет клиента


В корзине пусто!

Вирусный гепатит В (HBV), количественный

Вирусный гепатит В (HBV), количественный- исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови. Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.
Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке (

Подготовка к исследованию

Специальной подготовки не требуется.

Показания к исследованию

При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
При остром и хроническом вирусном гепатите В.
При микст-гепатитах.
До и во время противовирусной терапии.
Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.

Интерпретация

"Не обнаружено" – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (200 копий/мл = 90 МЕ/мл).
10^5 копий/мл (2*10^4 МЕ/мл) – высокая вирусная нагрузка, активный инфекционный процесс (необходимо проведение противовирусной терапии).
> 1,0*10^8 копий/мл (>4,8*10^7 МЕ/мл) – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.
Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых детектирующим амплификатором, составляет 7,5*10^2 – 1,0*10^8 копий/мл (3.6*10^2 – 4,8*10^7 МЕ/мл).

На результаты могут влиять

загрязнение биоматериала;
наличие в образце ингибиторов – химических и белковых субстанций, влияющих на различные компоненты ПЦР;
присутствие в крови гепарина.
Уровень вирусной нагрузки крови не указывает на степень повреждения печени и тяжесть заболевания. Для их оценки необходимо исследовать биохимические показатели и материалы биопсии.
Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.

Назначается в комплексе с

HBsAg
anti-HBc, антитела
anti-HBe, антитела
anti-HBs, антитела
HBеAg
HBV, ДНК [ПЦР качественный]
anti-HDV, антитела
Anti-HCV, антитела, ИФА
Биохимический анализ крови при заболеваниях ЖКТ


+(998 71) 256-09-19


c 08:00 до 18:00, Пн-Пт


c 08:00 до 16:00, Сб

Почти каждый третий человек на планете является либо носителем вируса гепатита В, либо заражен им. Государственные программы во многих странах предполагают выявление маркёров гепатита В среди населения. Антиген HbsAg является наиболее ранним сигналом инфицирования. Как выявить его наличие в организме и как расшифровать результаты анализа? Будем разбираться в этой статье.













Тест на HBsAg: почему назначается анализ?

Вирус гепатита В (HBV) представляет собой цепочку ДНК, окруженную белковой оболочки. Именно эта оболочка носит название HBsAg – hepatits B surface antigen. Первая иммунная реакция организма, призванная уничтожить HBV, направлена именно на этот антиген. Попав в кровь, вирус начинает активно размножаться. Через некоторое время иммунная система распознает возбудителя и вырабатывает специфические антитела – аnti-HBs, которые в большинстве случаев способствуют излечению от острой формы заболевания.

  • Люди, не имеющие признаков инфицирования, могут стать носителями возбудителя и сами того не желая – заразить окружающих.
  • По неизвестным причинам среди мужчин чаще встречаются носители антигена, чем среди женщин.
  • Носитель вируса или переболевший гепатитом В не может быть донором крови, он обязан встать на учет и регулярно сдавать анализы.

Из-за широкого распространения гепатита В во многих районах и областях России проводят скрининг. При желании пройти исследование может любой человек, однако существуют определенные группы людей, которые обязаны обследоваться:

  • беременные женщины два раза в течение всей беременности: при становлении на учет в женскую консультацию и в предродовой период;
  • медицинские работники, которые контактируют напрямую с кровью пациентов – медсестры, хирурги, гинекологи, акушеры, стоматологи и другие;
  • лица, которые нуждаются в хирургическом вмешательстве;
  • лица, являющиеся носителями или болеющие острой или хронической формой гепатита В.

Как отмечалось выше, у гепатита В есть две формы: хроническая и острая.

Если хроническая форма не является последствием острого гепатита, то практически невозможно установить, когда началась болезнь. Это происходит из-за слабо выраженного течения заболевания. Чаще всего хроническая форма встречается у новорожденных, чьи матери являются носителями вируса, и у людей, в крови которых антиген находился больше полугода.

Острая форма гепатита ярко выражена только у четверти зараженных. Она длится от 1 до 6 месяцев и имеет ряд симптомов, схожих с обычной простудой: потеря аппетита, непроходящая усталость, быстрая утомляемость, боль в суставах, тошнота, повышение температуры, кашель, насморк и дискомфорт в правом подреберье. Если у вас присутствуют эти симптомы – необходимо срочно обратиться к врачу! Без правильного лечения, начатого в срок, человек может впасть в кому или даже умереть.

Если помимо вышеперечисленных симптомов у вас был незащищенный половой контакт с малознакомым человеком, если вы пользовались чужими средствами личной гигиены (зубная щетка, расческа, бритвенный станок), вам следует немедленного сдать анализ крови на HBsAg.

Выявить наличие гепатита В помогают два метода: экспресс-диагностика и серологическая лабораторная диагностика. Первый тип исследования относят к качественным методам обнаружения, так как он позволяет узнать, есть ли в крови антиген или нет, возможен – в домашних условиях. Если антиген обнаруживается, стоит обратиться в больницу и пройти серологическую диагностику, которая относится к количественным методам. Дополнительные лабораторные исследования (методы ИФА и ПЦР) дают более точное определение болезни. Для проведения количественного анализа требуются специальные реактивы и оборудование.

Поскольку этот способ достоверно и быстро диагностирует HBsAg, то выполнить его можно не только в медицинском учреждении, но и в домашних условиях, беспрепятственно купив в любой аптеке набор для экспресс-диагностики. Порядок ее проведения таков:

  • обработать палец спиртовым раствором;
  • проколоть кожу скарификатором или ланцетом;
  • капнуть 3 капли крови на полоску-тестер. Чтобы не исказить результат анализа, не стоит касаться пальцем поверхности полоски;
  • через 1 минуту добавить на полоску 3-4 капли буферного раствора из набора;
  • через 10–15 минут можно увидеть результат анализа HBsAg.

Данный вид диагностики отличается от предыдущего. Его главная особенность – точность: он определяет наличие антигена через 3 недели после заражения, вместе с этим способен обнаружить антитела anti-HBs, которые появляются при выздоровлении больного и формируют иммунитет к гепатиту В. Также, при положительном результате, анализ HBsAg выявляет тип вируса гепатита В (носительство, острая форма, хроническая форма, инкубационный период).

Количественный анализ интерпретируется следующим образом:

Гепатит B – чрезвычайно серьезное и опасное заболевание. Передаваясь через кровь и другие жидкости организма, болезнь способна в короткие сроки перейти в хроническую стадию, которая практически не поддается лечению. Согласно официальной статистике, около 240 миллионов человек по всему миру являются носителями вируса гепатита В, и многие из них даже не подозревают об этом. Для того чтобы выявить это заболевание и существует специальный анализ на поверхностный антиген HBsAg.

Почему назначается анализ на HBsAg?

Существуют группы граждан, которые обязаны регулярно проходить тест на HBsAg: работники медицинских учреждений, беременные женщины (перед постановкой на учет в роддоме), люди, которым предстоит хирургическая операция, пациенты с циррозом печени и любым другим видом гепатита.

Определение уровня поверхностного антигена HBsAg связано с осуществлением специальной процедуры забора крови.

Для того чтобы подготовиться к качественному или количественному анализу на определение антигена, не нужно выполнять никаких сложных действий. Достаточно проследить за тем, чтобы последний прием пищи произошел как минимум за 4 часа до забора материала (венозной крови). Сама процедура происходит следующим образом. Врач перетягивает предплечье пациента специальным жгутом, а затем вводит в вену на локтевом сгибе иглу, выпуская кровь в специальную пробирку. Ответ будет готов через несколько дней, скорость его предоставления зависит от медицинского заведения, где вы сдаете анализ. Бланк с результатами, как мы уже упоминали, может содержать различные показатели, в зависимости от типа исследования.

Данный ответ свидетельствует о том, что пациент не инфицирован гепатитом В либо находится в стадии выздоровления после обострения болезни. Тем не менее существует вероятность, что вирус присутствует в организме человека, но дефектный состав молекул не позволяет стандартным методам исследования его вычислить. Также есть риск, что организм поразила так называемая микст-инфекция, то есть сочетание двух разных видов гепатита, например, B и D. Помимо этого отрицательный результат может означать наличие молниеносного злокачественного гепатита В. Для того чтобы уточнить ответ, могут понадобиться дополнительные серологические анализы.

Согласно законодательству Российской Федерации лаборатория, которая проводит анализ, обязана сообщить о выявлении заболевания в Отдел учета и регистрации инфекционных заболеваний Госсанэпиднадзора, а это учреждение в свою очередь ставит в известность амбулаторно-поликлиническое учреждение по месту прописки пациента. Возможно проведение анонимного анализа, но в случае положительного результата, он не сможет стать основанием для лечения.

Больным гепатитом В в острой форме показано стационарное лечение для предотвращения возникновения хронической неизлечимой стадии. Терапия основана на поддержании защитных сил организма, так как специального лекарств против гепатита В не существует – в 90% случаев заболевание исчезает естественным образом. Лишь в 10% случаев гепатит В приобретает хроническую форму, а пациент вынужден всю жизнь принимать гепатопротекторы и противовирусные препараты, чтобы сдерживать развитие болезни.

Оптимальным вариантом станет раннее выявление заболевания – для этого следует регулярно сдавать анализы на содержание антигена HBsAg в крови, особенно если есть подозрения на заражение гепатитом В. Но доступны ли подобные исследования?

Качественный анализ стоит значительно дешевле, чем количественный, ведь в первом случае проверяют лишь наличие антигена, а во втором – определяют его концентрацию. В Москве качественный тест на HBsAg в крови обойдется вам в 350–600 рублей, примерно такая же цена исследования и в Санкт-Петербурге. В региональных центрах, таких как Волгоград и Нижний Новгород, стоимость анализа составляет примерно 200–400 рублей.

Количественное исследование антигена HBsAg в Москве и Санкт-Петербурге стоит примерно 1000–2000 рублей. В Казани, Екатеринбурге и Иркутске анализ оценивается в 1000–1500 рублей.

Результат анализа на антиген HBsAg станет свидетельством наличия или отсутствия в вашей крови опасного вируса гепатита В. Очень важно правильно выбрать лабораторию для проведения анализа – некачественный тест может стать началом ненужного лечения, нанеся серьезный ущерб вашему здоровью.



Пом­ни­те, что за­ра­же­ние ге­па­ти­том B мо­жет про­изой­ти не толь­ко при по­па­да­нии ви­ру­са в кровь, но и на раз­дра­жен­ные участ­ки ко­жи или сли­зис­тую обо­лоч­ку. По­это­му не ис­клю­че­на пе­ре­да­ча за­бо­ле­ва­ния бы­то­вым пу­тем. В свя­зи с та­кой воз­мож­ностью (и по дру­гим при­чи­нам, ко­неч­но, то­же) сто­ит тща­тель­но со­блю­дать лич­ную ги­ги­е­ну – не раз­ре­шать поль­зо­вать­ся ва­ши­ми лич­ны­ми ве­ща­ми (зуб­ной щет­кой, губ­ной по­ма­дой, ма­ни­кюр­ны­ми нож­ни­ца­ми и т.д.) да­же близ­ким лю­дям, ведь они по­прос­ту мо­гут не знать о том, что яв­ля­ют­ся но­си­те­ля­ми ви­ру­са.

Исследование для выявления возбудителя гепатита B (HBV), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется наличие генетического материала (ДНК) вируса и его количество (вирусная нагрузка) в образце крови.

ДНК HBV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций – это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Для данного анализа линейный диапазон концентраций ДНК HBV, определяемых тест-системой, составляет 75,0 - 1,0*10^8 МЕ/мл.

Вирус гепатита В (ВГВ), количественное определение ДНК.

Hepatitis B Virus DNA, Quantitative, Real-Time PCR, Blood; HBV Viral Load; Hepatitis B Virus DNA Quant.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

МЕ/мл (международная единица на миллилитр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Вирусный гепатит В (ВГВ) – инфекционное заболевание печени, вызванное ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV). Среди всех причин развития острого гепатита и хронической вирусной инфекции вирус гепатита В считается одной из самых распространенных в мире. Действительное количество инфицированных неизвестно, так как у многих людей инфекция протекает без специфических симптомов и за медицинской помощью они не обращаются. Нередко вирус обнаруживают при проведении профилактических лабораторных исследований. По приблизительным подсчетам, в мире около 350 миллионов человек поражено вирусом гепатита В и ежегодно от его последствий умирает 620 тысяч. В России количество носителей HBV превышает 5 миллионов человек.

Источник инфекции – больной ВГВ или бессимптомный вирусоноситель. HBV передается с кровью и другими биологическими жидкостями. Заразиться можно при незащищенном половом контакте, использовании нестерильных шприцев, переливании крови и пересадке донорских органов, ребенка может заразить мать во время или после родов (через трещины в сосках). В группу риска входят: медицинские работники, у которых возможен контакт с кровью пациента, пациенты, получающие гемодиализ, инъекционные наркоманы, люди, ведущие беспорядочную половую жизнь, дети, рождённые от матерей с ВГВ.

Инкубационный период заболевания – от 4 недель до 6 месяцев. Вирусный гепатит В может протекать как в виде легких форм, длящихся несколько недель, так и в виде многолетней хронической инфекции. Основные признаки гепатита: желтушность кожных покровов, лихорадка, тошнота, утомляемость, в лабораторных анализах – нарушения функции печени и специфические антигены вируса гепатита В. Острое заболевание может быстро приводить к летальному исходу, переходить в хроническую инфекцию или заканчиваться полным выздоровлением. Считается, что после перенесенного ВГВ формируется стойкий иммунитет. Хронический вирусный гепатит В связан с развитием цирроза и рака печени.

Есть несколько специфических тестов для выявления существующего или перенесенного вирусного гепатита В. Для подтверждения наличия инфекции и уточнения периода заболевания используют определение антигенов вируса, антител к ним и ДНК вируса.

Полимеразная цепная реакция отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Методом ПЦР можно определить ДНК вируса качественно или количественно. Благодаря качественному методу подтверждается присутствие вируса гепатита В в организме и его активное размножение. Количественное определение вирусной нагрузки позволяет оценить интенсивность развития болезни, эффективность проводимой терапии или развитие устойчивости к противовирусным препаратам.

Существует зависимость между концентрацией вируса в крови и исходом острого вирусного гепатита В. При низком уровне виремии вероятность перехода инфекции в хроническую форму близка к нулю, а инфицированный человек неопасен для окружающих. При высокой вирусной нагрузке ( 5 копий/мл) хронизация возникает часто и больной является потенциальным источником инфекции. Доказана связь между количеством ДНК вируса в сыворотке крови, присутствием HBeAg, повышенной АЛТ и развитием цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы (рака печени).

Эффективность противовирусной терапии оценивается по уменьшению количества ДНК вируса в крови. Через 3-6 месяцев после начала лечения вирусная нагрузка при адекватном терапевтическом ответе должна уменьшиться на 1-2 порядка. Отсутствие уменьшения количества вируса или его увеличение на фоне проводимого лечения требует пересмотра и изменения терапии.

Количественное определение ДНК вируса гепатита В совместно с клинической картиной заболевания и биохимическими показателями, маркерами инфекции, а также результатом пункционной биопсии печени позволяет дать прогноз заболевания и оценить необходимость противовирусной терапии.

Для чего используется исследование?

  • Для прогнозирования течения вирусного гепатита В.
  • Для подтверждения хронической формы вирусного гепатита В.
  • Для выявления носителей вирусного гепатита В и мониторинга активности размножения вируса.
  • Для выявления скрытых и мутантных штаммов вируса гепатита В.
  • Для оценки эффективности противовирусной терапии гепатита В и принятия решения о дальнейшей тактике лечения.

Когда назначается исследование?

  • При качественном обнаружении ДНК вируса гепатита В.
  • При остром и хроническом вирусном гепатите В.
  • При микст-гепатитах.
  • До и во время противовирусной терапии.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено

  • "Не обнаружено" – ДНК вируса гепатита В не обнаружена или значение ниже предела чувствительности метода (50 МЕ/мл);
  • 1*10^8 МЕ/мл – ДНК вируса гепатита В обнаружена в концентрации выше линейного диапазона концентраций.

Линейный диапазон концентраций ДНК вируса гепатита В, определяемых тест-системой, составляет 75,0 - 1,0*10^8 МЕ/мл.

  • Количественное определение ДНК вируса гепатита В является обязательным исследованием до назначения противовирусной терапии. Во время курса лечения анализ необходимо повторить через 3-6 месяцев.
  • Вирусный гепатит В нередко сочетается с вирусным гепатитом D.

Кто назначает исследование?

Литература

  1. Возианова Ж.И. Инфекционные и паразитарные болезни: В 3х т. - К.: Здоровье, 2000 – Т.1.: 601-654.
  2. Chan Henry Lik-Yuen, Wong May Ling, and others. Use of Hepatitis B Virus DNA Quantitation To Predict Hepatitis Be Antigen Reversion in Cases of Chronic Hepatitis B. J Clin Microbiol. 2003 October; 41(10): 4793–4795. PMCID: PMC294957
  3. Harrison's Principles of Internal Medicine. 16 th ed. NY: McGraw-Hill; 2005: 1822-1855.
  4. Management of Hepatitis B. An NIH Consensus Development Conference. Program and Abstracts. October 20–22, 2008.



Автореферат диссертации по медицине на тему Значение количественного определения hbsag для диагностики и мониторинга неактивного носительства хронической hbv-инфекции

ГАРАГУЛЯ ЕВГЕНИЯ ВАЛЕРЬЕВНА

ЗНАЧЕНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ HBsAg ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ И МОНИТОРИНГА НЕАКТИВНОГО НОСИТЕЛЬСТВА ХРОНИЧЕСКОЙ НВУ-ИНФЕКЦИИ

14.01.04 - ВНУТРЕННИЕ БОЛЕЗНИ

АВТОРЕФЕРАТ диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Доктор медицинских наук, профессор. Заведующий кафедрой госпитальной терапии с курсом клинической лабораторной диагностики

Заведующий научно-консультативным клинико-диагностическим центром ФБУН Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора, кандидат медицинских наук.

Руководитель Референс-центра по мониторингу за вирусными

гепатитами Роспотребнадзора. Владимир Петрович Чуланов

Доктор медицинских наук, профессор кафедры терапии, профболезней и пульмонологии

Первого МГМУ им. И.М. Сеченова. Джамал Тинович Абдурахманов

С диссертацией можно ознакомиться в Научной библиотеке Российского университета дружбы народов (117198, г. Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6).

Ученый секретарь диссертационного совета, доктор медицинских наук, профессор

Гайрат Калуевич Киякбаев

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Число людей имеющих серологические признаки HBV-инфекции (инфекция вируса гепатита В) в мире оценивается в 2 миллиарда человек, более 240 миллионов из которых имеют хроническое заболевание печени [World Health Organization., 2012]. Ежегодная заболеваемость гепатоцеллюлярной карциномой (ГЦК), связанной с HBV- инфекцией у пациентов с хроническим гепатитом В (ХГВ) составляет от 2 % до 5 %, при установленном диагнозе цирроза печени [Ganem D., 2004; Fattovich G., 2004]. В настоящее время около 1 миллиона человек умирает от ГЦК, которая зачастую является терминальной стадией течения HBV- инфекции [Ganem D., 2004; Hoofnagle JH., 2007; Liaw YF., 2005].

Прогноз заболевания и подход к терапии определяются формой хронической HBV-инфекции: неактивное носительство хронической HBV-инфекции (НН), хронический гепатит В, иммунотолерантность (ИТ) [EASL., 2012]. Неактивное носительство хронической HBV -инфекции имеет хороший прогноз и не нуждается в лечении, требуя только динамического наблюдения [EASL., 2012]. Актуальным вопросом ддя выбора стратегии наблюдения становится эффективная и доступная диагностика НН и система мониторинга этого состояния.

Альтернативой многократному мониторингу НН может быть сочетание неинвазивных методов диагностики фиброза и количественное определение HBsAg.

Инновацией в области определения маркеров гепатита В стало количественное определение HBsAg [Deguchi М, 2004]. Исследования, проведенные в различных странах, показали широкий диапазон значений HBsAg у пациентов с хронической HBV-инфекцией и , достаточно сильную прямую корреляцию между уровнями HBsAg, обнаружением HBeAg и j

уровнем DNA HBV в крови [Chan HL., 2010; Kim YJ., 2011]. К настоящему времени немного исследований о диагностическом значении количественного содержания HBsAg для уточнения клинического варианта хронической HBV-инфскции и се мониторинга. Установлено, что значительное снижение уровней HBsAg является одним из критериев успешности терапии [Brunetto MR 2009]. В работе (McMahon BJ., 2009) было выявлено достоверное различие по уровню HBsAg у пациентов, удовлетворяющих критериям НН на всем протяжении наблюдения, по сравнению с пациентами, имеющими колебания ТА и DNA HBV с превышением пороговых значений НН (медиана 62,12 ME/мл, диапазон 0,14068 vs 3029 ME/мл, диапазон 0,5-82 480 ME/мл соответственно (р 2. Иммунологические исследования включали определение антинуклеарных антител, альфа-фетопротеина, исследование маркеров HCV (anti - HCV) методом иммуноферментного анализа (ИФА).

Всем больным проводилось исследование на качественное определение DNA HBV, используя качественный тест, с порогом чувствительности 108 МЕ/мл. Проводился качественный тест на RNA HDV. Так же проводилось количественное определение HBsAg методом ИФА с помощью набора Architect HBsAg (Abbott Laboratories; динамический диапазон 0,05-250,0 МЕ/мл). Всем

пациентам проведено измерение степени фиброза печени на аппарате Fibroscan, при этом, эластичность печени оценивалась по шкале METAVIR, в модификации для хронической HBV - инфекции.

Для статистической обработки данных использовали стандартный пакет анализа Microsoft Excel и программу Statistica 10,0 для Windows. Данные выражали в виде медианы и диапазона (минимум-максимум), используя описательную статистику. Проверка на нормальное распределение осуществлялась при помощи подсчета ассиметрии и эксцесса с помощью описательной статистики. В связи с тем, что все исследуемые параметры не подчинялись закону Гаусса, использовали непараметрическую статистику. Для сравнения двух несвязанных выборок использовали критерий Манна-Уитни, нескольких несвязанных выборок - критерий Красксла-Уоллиса, двух связанных выборок - критерий Вилкоксона. Частотные показатели сравнивались при помощи точного критерия Фишера. Значимыми во всех случаях считались различия уровня статистической значимости р 0,7; средней при 0,3 40 Ед\мл), высоким уровнем виремии (DNA HBV более 106 МЕ\мл) и положительным HBeAg были отнесены к группе HBeAg позитивным ХГВ (НВс(+)ХГВ). Пациенты с выявленой RNA HDV составили группу с гепатитом D.

Группа пациентов с HBeAg негативным ХГВ (НВе(-)ХГВ) характеризовалась повышенными ТА (> 40 Ед\мл) и\или значениями DNA HBV более 2000 МЕ\мл и\или показателями эластометрии более 7кРа.

Распределение пациентов с разными клиническими проявлениями хронической HBV-инфскции показано на рисунке № 1 Рис.№ 1

Распределение пациентов с хронической HBV- инфекцией ¡0-187)

Основную часть пациентов составили НН - 104 человека, (55%); пациенты с НВе(-)ХГВ - 52 человека, что составило 28%; пациентов с гепатитом О 22 человека, что составило 12%; пациентов с НВе(+)ХГВ - 7 человек, что составило 4%; ИТ 2 человека, что составило 1%.

Стоит отметить, что группа с НВе(-)ХГВ оказалась крайне разнородной. Среди 52 человек около половины имели другой фактор поражения печени - алкоголь, гемохроматоз, дефицит а1 антитрипсина, и факторы риска развития неалкогольного стеатогепатита (ожирение и ИР, СД 2 типа). Подробный анализ этой группы пациентов представлен в главе 5.

Основные показатели, характеризующие пациентов разных групп при хронической НВУ- инфекции представлены в таблице № 1.

Таб. № 1 Основные характеристики пациентов с хронической HBV-инфекцией (n-187)

НН НВе(+)ХГВ НВе(-)ХГВ ИТ Гепатит D

(п-104) (п-7) (п-52) (п-2) (п-22)

АЛТ Медиана 19 218 36,55 31 53,5

Ед\л Min 8,9 100 10 25 11

Мах 37 453 163 37 467

DNA Медиана 166 1x10" 2583 1,95x10" 138,5

HBV Min 0 8x10" 0 1x10" 0

(МЕ\мл) Мах 2000 1,22x10" 1x10" 2,9x10" 54561

HBsAg Медиана 822,61 39630 1651,27 58375 15104,29

(Ед\мл) Min 0,01 10807,92 0,01 57800 80,74

Мах 26595,42 125000 49395,23 58950 112106,3

F Медиана 5,5 6,8 7,1 7,45 11

(kPa) Min 2,7 5,3 3,2 6,9 4,8

Мах 6,9 16,9 28 8 40

Таким образом, максимальные значения АЛТ были выявлены в группе пациентов с НВс(+)ХГВ, а минимальные - в группе НН. Максимальные значения DNA HBV были выявлены в группе НВс(+)ХГВ пациентов и в группе ИТ, а минимальные в группе НН. Несмотря на высокий разброс, группа пациентов с гепатитом D так же характеризовалась невысокими значениями DNA HBV, а группа НВс(-)ХГВ была наиболее разнообразна по значениям HBV.

Показатели эластометрии были минимальные в группе НН, а максимальные в группе пациентов с гепатитом D.

При анализе количественного уровня HBsAg минимальные показатели были выявлены в группе НН, а максимальные в группах пациентов с НВе(+) ХГВ и группе ИТ.

Таким образом, НН имеют значимо более низкий уровень HBsAg по сравнению с другими группами пациентов.

Анализ значимости различий количественного уровня HBsAg показан на рисунке № 2. Учитывая малое количество пациентов, соответствующих фазе иммунотолерантности, статистический анализ значимости различий с этой группой не проводился. Рис. № 2

Значение уровня HBsAg в различны! группах хронической HSV инфекции

HBV-HDY НЕ-еМХГВ I иьш*

Таким образом, статистически достоверная разница (р 0,05). По уровню фиброза статистически достоверной разницы так же получено не было.

Значение уровня HBsAg б rpvime динамически стабильных пациентов и в группе с обострением HBV-инфекдии

Пациенты СД2 типа

Пациенты с ожирением и ИР

1Е6 1.5Е6 2Е6 2.SE6 ЗЕВ 3.5Е6 4Е6 DNA HSV МЕ'ЛЛ

5000 1000015000 20000 2Б00030000 3SOOO 40000 DNA WV МЕ1мп

R = - 0,01 - слабая отрицательная корреляционная связь

R = - 0,03 - слабая отрицательная корреляционная связь

Таким образом, для группы HBsAg - положительных пациентов с медикаментозно компенсированным СД 2 типа характерна слабая отрицательная корреляционная связь (R = - 0,01) между DNA HBV и количественным уровнем HBsAg; для группы HBsAg-положительных пациентов с ожирением и ИР, так же характерна слабая отрицательная корреляционная связь (R - - 0,03) между DNA HBV и количественным уровнем HBsAg.

Таким образом, по вирусологическим характеристикам пациенты с СД 2 типа (медикаментозно компенсированные), соответствуют НН, пациенты с ИР и ожирением -пациентам с HBeAg-негативным гепатитом.

1. Медианы уровня HBsAg зависят от формы хронической HBV-инфекции и составляют для неактивных носителей 822,61Ед\мл (min 0,01Ед\мл; max 26595,42Ед\мл), для пациентов с НВе(-)ХГВ 1651,27Ед\мл (min 0,01Ед\мл; max 49395,22Ед\мл), для пациентов НВе(+)ХГВ 39630Ед\мл (min 10807,92Ед\мл; max 125000Ед\мл), для пациентов с D - инфекцией 15104,29Ед\мл (min 80,74Ед\мл; max 112106, ЗЕд\мл), с иммунотолерантностью 58375 ЕдУмл (min 57800Ед\мл; max 58950Ед\мл).

2. Для HBsAg-позитивных пациентов связь уровня HBsAg с вирусной нагрузкой средняя положительная (R=0,55); связь уровня HBsAg с биохимической активностью сильная положительная (R=0,78); связь уровня HBsAg с уровнем фиброза по данным эластометрии слабая положительная (R=0,07).

3. После исключения гепатита D, и сопутствующих факторов поражения печени для HBsAg-положительных пациентов совместное определение АЛТ и уровня HBsAg позволяет диагностировать состояние НН с высокой вероятностью - 90%. Особо следует отметить крайне высокую специфичность и ПЦПР при АЛТ менее 30 Ед\л и уровне HBsAg менее 300 Ед\мл - 95%.

4. Уровень HBsAg выше у пациентов с последующим обострением HBV-инфекции, чем у пациентов, которые при динамическом наблюдении соответствуют параметрам неактивного носительства (медиана 3393,215 Ед\мл vs 647,29 Ед\мл, р по медицине, диссертация 2014 года, Гарагуля, Евгения Валерьевна

РОССИИСКИИ УНИВЕРСИТЕТ ДРУЖБЫ НАРОДОВ

На правах рукописи

ГАРАГУЛЯ ЕВГЕНИЯ ВАЛЕРЬЕВНА

Специальности: 14.01.04 - внутренние болезни Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

д.м.н., профессор Огурцов П.П. Москва 2013

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ. 4

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. 12

1.1. Эпидемиология HBV-инфекции. 12

1.2 Естественное течение HBV- инфекции. 15

1.3. Критерии неактивного носительства хронической HBV-инфекции. 21

1.4. Методы диагностики фиброза печени. 24

1.4.1. Биопсия печени. 24

1.4.2. Неинвазивные методы диагностики фиброза печени. 28

1.4.2.1. Фибротест. 28

1.4.2.2.Эластометрия печени. 29

1.5.Количественное определение HBsAg - нового маркера для постановки

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. 37

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ. 40

3.1. Общая характеристика HBsAg позитивных пациентов. 40

3.1.1. Сравнительная характеристика HBsAg позитивных пациентов. 41

3.2. Анализ группы неактивных носителей хронической HBV-инфекции . 48

3.3. Динамическое наблюдение за группой неактивных

3.4.Оценка диагностических характеристик различных уровней HBsAg для постановки диагноза неактивного носительства хронической HBV-

3.5. Анализ группы HBeAg-негативных пациентов . 63

ГЛАВА IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ. 71

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ. 85

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ. 86

Anti -Hbs - антитела к поверхностному антигену гепатита В

ANA - антинуклеарные антитела

АМА-антитела к митохондриям

Anti- LKM1- антитела к микросомам печени и почек

DNA HBV- ДНК вируса гепатита В

cccDNA - ковалентно замкнутая кольцевая ДНК

F1-F4- уровень фиброза по данным эластометрии

HBsAg - поверхностный антиген гепатита В

HBV- вирус гепатита В (hepatitis В virus)

HBV- инфекция - инфекция вызванная вирусом гепатита В

НВе(+)ХГВ - НВе- позитивныйный хронический гепатит В

НВе(-)ХГВ - НВе- негативный хронический гепатит В

HBeAg(+) - HBeAg позитивные пациенты

HBeAg(-) - HBeAg негативные пациенты

HDV - вирусный гепатит Дельта (hepatitis delta virus)

HCV - вирус гепатита С (hepatitis С virus)

HCV RNA - РНК вируса гепатита С

модели для оценки инсулинорезистентности

LKM- антитела к микросомам печени и почек

RNA HDV - РНК вируса гепатита Дельта

R- коэффециент корреляции

SMA- антитела к гладкой мускулатуре

БП - биопсия печени

ВИЧ - вирус иммунодефицита человека

Гепатит D - гепатит Дельта

ГЦК - гепатоцеллюлярная карцинома

Д al- дефицит al антитрипсина

ИМТ - индекс массы тела

ИФА - иммунноферментный анализ

ЛПВП - липопротеины высокой плотности

ЛИНИ - липопротеины низкой плотности

МРТ - магнитно-резонансная томография

НИ - неактивные носители хронической HBV-инфекции

ПЦР - полимеразная цепная реакция

СД 2 типа - сахарный диабет 2 типа

УЗИ - ультразвуковое исследование

ХГС - хронический гепатит С

ХГВ - хронический гепатит В

ЦП - цирроз печени

ФП - фиброз печени

Фиброэластометрия - ультрозвукова эластометрия печени

Число людей имеющие серологические признаки HBV-инфекции (инфекция вируса гепатита В) в мире оценивается в 2 миллиарда человек, более 240 миллионов из которых имеют хроническое заболевание печени [179]. Ежегодный уровень развития гепатоцеллюлярной карциномы (ГЦК) связанной с инфекцией вызванной вирусом гепатита В (HBV- инфекция) у пациентов с хроническим гепатитом В (ХГВ) составляет от 2 % до 5 %, при установленном диагнозе цирроза печени [86, 87]. В настоящее время около 1 миллиона человек умирает от ГЦК, которая зачастую может являться терминальной стадией в течении HBV- инфекции [87,103,116]. Прогноз заболевания и подход к терапии определяются формой хронической HBV- инфекции: неактивное носительство хронической HBV-инфекции (НН), хронический гепатит В, иммунотолерантность (ИТ) [79]. Неактивное носительство хронической HBV - инфекции имеет хороший прогноз и не нуждается в лечении, требуя только динамического наблюдения [79].

негативные пациенты (HBeAg(-)) с нормальным уровнем аланинаминотрансферазы (AJIT) и аспартатаминотрансферазы (ACT) (не более 40 ME/мл), уровнем DNA HBV менее 2000 МЕ/мл [79]. Однако, учитывая нестабильность этих показателей, необходим их динамический мониторинг, который должен проводиться в течение первого года каждые 3-4 месяца. У некоторых НН уровень вирусной нагрузки может быть более 2000 МЕ\мл, но менее 20000 ME/мл, сопровождаясь нормальными значениями трансаминаз [135,152,79]. Этим пациентам целесообразно проведение биопсии печени для уточнения степени уровня фиброза и воспаления. В 2008 г. (Zacharakis et al.) показали, что при HBeAg(-) ХГВ вирусная нагрузка выше 2000 ME/мл является независимым предиктором более тяжелой стадии фиброза. В исследовании, проведенном в ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, выявлена достоверная зависимость между концентрацией DNA HBV в сыворотке крови и степенью цитолиза[21].

Пациенты с вирусной нагрузкой менее 2 000 МЕ\мл и высокими ТА должны подвергнуться биопсии печени для уточнения иной причины поражения печени [52].

Инновацией в области определения маркеров гепатита В стало количественное определение поверхностного антигена гепатита В (HBsAg) [78]. Исследования, проведенные в различных странах, показали широкий диапазон значений HBsAg у пациентов с хронической HBV-инфекцией и достаточно сильную корреляцию между уровнями HBsAg, обнаружением HBeAg и уровнем DNA HBV в крови [70,113].

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции