Цитомегаловирус полуколичественный что это

Исследование, направленное на обнаружение генетического материала (ДНК) возбудителя цитомегаловирусной инфекции, Cytomegalovirus, методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Цитомегаловирус; ЦМВ; ДНК [полимеразная цепная реакция в режиме реального времени]; количественный анализ.

Синонимы английские

Cytomegalovirus; CMV; DNA [polymerase chain reaction, real-time PCR]; quantitative.

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Амниотическая жидкость, бронхоальвеолярный лаваж, венозная кровь, ликвор, мазок из зева (ротоглотки), первая порция утренней мочи, слюна, биоптат (биоптат лёгких, печени, ЖКТ).

Общая информация об исследовании

Цитомегаловирус (Cytomegalovirus) относится к семейству герпес-вирусов человека, рода Cytomegalovirus, и является возбудителем цитомегаловирусной инфекции. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) – это широко распространенная инфекция человека, характеризующаяся легким, бессимптомным течением у людей в обычных условиях и с нормально функционирующей иммунной системой. Особое клиническое значение она приобретает у лиц с патологией иммунной системы, иммунодефицитными состояниями и у беременных женщин из-за риска внутриутробного инфицирования плода.

По данным различных исследований, носительство цитомегаловирусной инфекции выявляется у 60-90 % взрослого населения. ЦМВИ также входит в группу TORCH-инфекций (перевод первых букв латинских токсоплазмы - Toxoplasma, краснухи - Rubella, цитомегаловируса - Cytomegalovirus, герпеса - Herpes), - являющихся потенциально опасными для развития плода и вызывающими тяжелые поражения органов у новорождённых детей. Цитомегаловирус является ведущей причиной врождённых инфекций во всем мире и обнаруживается у 0,2-2,2 % новорождённых. У 10 % таких детей развиваются клинические признаки заболевания с рождения, у части в течение первых десяти лет жизни.

Цитомегаловирус является ДНК-содержащим вирусом, обладающим способностью к медленному распространению в культуре инфицированных клеток и приводящим к их изменению и увеличению размера (цитомегалии). Источником инфекции является человек, выделяющий вирус через различные биологические жидкости. К ним относятся кровь, слюна, моча, грудное молоко, цервикальный и вагинальный секрет, семенная жидкость, ликвор, содержимое желудочно-кишечного тракта и прочие секреты. Инфекция передается воздушно-капельным, контактным, половым путем, в результате переливания крови от инфицированного донора. Возможно также заражение при трансплантации органов и вертикальный путь передачи, от инфицированной женщины к ребенку во время беременности или родов. Длительность инкубационного периода заболевания часто установить невозможно, так как большинство клинических случаев не распознается и протекает в латентной, бессимптомной, форме. Также следует отметить, что для ЦМВИ характерна длительная персистенция возбудителя в организме человека. Это приводит к тому, что множество людей является носителями этого вида инфекции на протяжении долгих лет и, возможно, всей жизни. При ослаблении иммунной системы может отмечаться тяжелое течение заболевания.

Различают приобретенную и врождённую формы ЦМВИ. Приобретенная форма инфекции протекает в виде острого локализованного процесса, схожего по клинической симптоматике с острой респираторной вирусной инфекцией или инфекционным мононуклеозом. Отмечается повышение температуры тела, слабость, общее недомогание, боль в горле, миалгии, увеличение шейных лимфатических узлов. В редких случаях отмечаются осложнения в виде артралгий, артритов, пневмонии, цитомегаловирусного гепатита.

У детей до трех месяцев жизни, а также у лиц с патологией иммунной системы (иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях) ЦМВИ может протекать в тяжелой форме с развитием серьезных осложнений. При этом развиваются тяжелые поражения легких, почек, печени, желудочно-кишечного тракта, нервной системы с развитием вирусного энцефалита.

Врождённая форма ЦМВИ возникает в результате трансплацентарной передачи инфекции от матери плоду при инфицировании женщины на ранних сроках беременности, особенно при первичном инфицировании. Последнее очень опасно в связи с тем, что предполагает отсутствие у женщины предварительного иммунитета к цитомегаловирусу и, следовательно, незащищенность здоровья ребенка. При этом развивается острая врождённая ЦМВИ, приводящая к самопроизвольному аборту или гибели эмбриона. При поражении плода на более поздних сроках беременности развивается геморрагический синдром с кровоизлияниями в кожу, внутренние органы, головной мозг. Отмечается энцефаломаляция, церебральная кальцификация, увеличение селезёнки, печени, гепатит. Возможно также заражение ребенка во время родов при прохождении родовых путей. При хронической врождённой ЦМВИ возникает фиброз внутренних органов и пороки развития: гидроцефалия, микроцефалия, увеит, слепота, пороки сердца, нейросенсорная потеря слуха и другие неврологические нарушения. Отмечается отставание и в неврологическом и психическом развитии.

В связи с тем что клиническая диагностика ЦМВИ в большинстве случаев затруднена, лабораторная диагностика очень важна. Современным методом диагностики ЦМВИ является полимеразная цепная реакция в режиме реального времени. Это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал возбудителя на ранних этапах заболевания. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата и доступностью. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) цитомегаловируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. Он позволяет определять ДНК цитомегаловируса в случае подозрения на острую, текущую ЦМВИ у детей и взрослых, у людей с патологией иммунной системы, у беременных женщин. Преимуществом метода является возможность его использования для диагностики заболевания на ранних стадиях, при латентной и персистирующих формах инфекции. Возможно проведение исследования в биоматериале, взятом у новорождённых детей в случае подозрения на врождённую форму ЦМВИ или при инфицировании матери. Используется для дифференциальной диагностики инфекции, вызванной цитомегаловирусом, и других вирусных инфекций. Рекомендуется также для оценки эффективности проводимой терапии.

Для чего используется исследование?

Для подтверждения ЦМВИ.
Для диагностики острой или текущей ЦМВИ.
Для диагностики первичной инфекции и/или активной формы ЦМВИ в период реактивации (обострения) персистентной инфекции.
Для диагностики латентной формы ЦМВИ.
Для диагностики персистентной формы ЦМВИ.

Когда назначается исследование?

При подозрении на ЦМВИ и ее клинических проявлениях.
При подозрении на латентную и персистентную формы ЦМВИ.
При клинических проявлениях ЦМВИ у лиц с иммунодефицитными состояниями, ВИЧ-инфекцией, после трансплантации органов, лечения иммуносупрессивными препаратами, при злокачественных заболеваниях.
При поражении легких, желудочно-кишечного тракта, нервной системы, почек, печени предположительно цитомегаловирусной этиологии.
При атипичном течении заболеваний бронхо-легочной системы у детей, при пневмонии.
Во время беременности (при симптомах заболевания, при подозрении на нарушения развития плода, для скрининга ЦМВИ).
Женщинам при патологии беременности: невынашивание беременности, замершая беременность, самопроизвольные аборты, гибель эмбриона.
Обследование плода при инфицировании беременной женщины во время беременности, признаках внутриутробной инфекции.
Новорождённым детям: если его мать перенесла первичную цитомегаловирусную инфекцию во время беременности; если у ребенка есть симптомы врождённой инфекции: анемия, геморрагия, гепатит, микроцефалия, увеличение селезенки и/или печени, нарушение слуха, зрения, пороки сердца, неврологические нарушения (задержка умственного развития, конвульсии).
При оценке контроля проведенного лечения против ЦМВИ.

Что означают результаты?

Референсные значения: не обнаружено.

инфицирование цитомегаловирусом;
острая, текущая, персистентная, латентная формы ЦМВИ.

отсутствие инфицирования цитомегаловирусом.

Диагностика ЦМВИ является комплексной и основана на сочетании анамнестических, клинических данных и результатах лабораторных исследований.
Метод ПЦР в режиме реального времени позволяет выявлять части и молекулу ДНК цитомегаловируса при любых формах ЦМВИ. Преимуществом метода является возможность его использования для диагностики заболевания на ранних стадиях, при латентной и персистирующих формах инфекции. Важно отметить, что с помощью данного метода невозможно проводить дифференциальную диагностику форм ЦМВИ, так как генетический материал вируса может быть обнаружен и при латентной форме инфекции.

13 Cytomegalovirus предранний белок IEA, IgM, IgG

9 Cytomegalovirus, IgG

12 Cytomegalovirus, IgM

9 Cytomegalovirus, ДНК [реал-тайм ПЦР]

54 Антитела к Cytomegalovirus (IgG) с определением авидности

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, инфекционист, акушер-гинеколог, неонатолог, педиатр, уролог, хирург.

Литература

Wang L, Xu X, Zhang H, Qian J, Zhu J. Dried blood spots PCR assays to screen congenital cytomegalovirus infection: a meta-analysis / Virol J. 2015 Apr 14;12:60.
Liu Z, Zhang P, Tang S, He X, Zhang R, Wang X, Yuan Z, Tan J, Peng B, Liu E, Fu Z, Zou L. Urine real-time polymerase chain reaction detection for children virus pneumonia with acute human cytomegalovirus infection / BMC Infect Dis. 2014 May 8;14:245.
Ross SA, Ahmed A, Palmer AL, Michaels MG, Sánchez PJ, Bernstein DI, Tolan RW Jr, Novak Z, Chowdhury N, Fowler KB, Boppana SB; National Institute on Deafness and Other Communication Disorders CHIMES Study. Detection of congenital cytomegalovirus infection by real-time polymerase chain reaction analysis of saliva or urine specimens / J Infect Dis. 2014 Nov 1;210(9):1415-8.
Gaytant M A, Steegers E A P, Semmekrot B A, Merkus H M M W, Galama J M D. Congenital cytomegalovirus infection: Review of the epidemiology and outcome. Obstet Gynecol Surv 2002; 57: 245-256.

Описание

Метод ПЦР позволяет идентифицировать в биологическом материале искомый участок генетического материала и обнаружить единичные молекулы ДНК вируса, не выявляемые другими методами. Принцип метода основан на многократном увеличении числа копий, специфичных для данного возбудителя участка ДНК.

С помощью ПЦР-анализа можно диагностировать инфекцию в остром периоде и выявлять случаи носительства.

Цитомегаловирус (ЦМВ) — это разновидность из группы герпесвирусов (Herpesvirus), относящаяся к роду Cytomegalovirus подсемейства 3-herpesviridae. Встречается везде. Статистика частоты встречаемости очень вариативна — вероятно, из-за того, что у значительной массы носителей вируса заболевание протекает бессимптомно. Способов полного излечения от герпеса пока нет, т.е. заражённый человек остаётся носителем возбудителя на всю жизнь.

ЦМВ — это инфекция, сходная с герпесом или ветрянкой, только с гораздо более серьёзными и неожиданными последствиями — от повреждения внутренних органов до необратимых изменений ЦНС. Передача вируса возможна только от человека человеку — через предметы или животных заражение произойти не может. Определить данное заболевание на ранних стадиях проблематично, его точный инкубационный период пока неизвестен. Проявления инфекции могут быть приняты за воспаление органов мочеполовой системы, обычные недомогания типа ОРВИ (острая респираторная вирусная инфекция) и прочие обычные болезни. Весьма часто ЦМВ приводит к возникновению многочисленных воспалений сразу в нескольких внутренних органах.

CMV у лиц с ослабленным иммунитетом
При беременности вирус не всегда передаётся от больной матери ребёнку. Но если инфицирование ЦМВ произошло в период беременности или болезнь усилилась, то вероятность передачи заболевания плоду значительно возрастает.

Возникший иммунодефицит может спровоцировать активизацию болезни. Возбудитель может содержать моча, слюнная или семенная жидкость, молоко или секрет шейки матки. Мать может заразить ребёнка как внутриутробно, так и при родах или при кормлении. Подростки часто заражаются при поцелуях, половых контактах и т.д.

Передача возбудителя возможна посредством цельной крови или её препаратов, содержащих красные кровяные тельца, либо во время пересадки органов. При нормальном иммунитете заболевание может никак себя не проявлять даже в течение всей жизни.

Основное средство профилактики ЦМВ — это поддержание сильного иммунитета, систематический прием иммуностимуляторов и витаминов. В противном случае даже при небольших проблемах с иммунитетом вирус способен стать причиной многих инфекционных болезней. Он довольно устойчив к противовирусным средствам, особенно при острой форме. Инкубационный период цитомегаловирусной инфекции обычно длится от 20 до 60 дней. Во время острой фазы болезни, которая продолжается от 2 до 6 недель, появляются признаки общей интоксикации организма: озноб, головная боль, боли в мышцах, наблюдается общая слабость и повышение температуры тела. На фоне первичного внедрения инфекции перестраивается иммунная система организма. В течение нескольких недель после острой фазы сохраняется слабость, могут возникать вегетативно-сосудистые расстройства.

Клинические признаки инфекции, вызванной CMV
Наиболее часто цитомегаловирусная инфекция проявляется как острая респираторно-вирусная инфекция. От больных поступают жалобы на общее недомогание, насморк, быструю утомляемость. Происходит увеличение и воспаление слюнных желёз, сопровождающееся беловатым налётом на языке и дёснах, а также обильным выделением слюны.

У женщин и мужчин поражение мочеполовой системы даёт симптомы хронического неспецифического воспаления. В этом случае, если не обнаружена вирусная природа патологии, лечение заболевания при помощи антибиотиков будет малоэффективно.

Осложнения CMV
Самые серьёзные и опасные осложнения цитомегаловируса — это патология беременности, плода и новорождённого. Если произошло инфицирование плода во время беременности, то риск развития этой патологии будет максимальным. Однако, не стоит забывать, что проблемы могут возникнуть также у беременных при активации латентной ЦМВ-инфекции, когда вирус попадает в кровь, впоследствии заражая плод. Согласно статистике, ЦМВ является наиболее частой причиной невынашивания беременности. Внутриутробная цитомегаловирусная инфекция является причиной поражений центральной нервной системы (тугоухость и отставание в умственном развитии). 20–30% случаев заканчиваются смертью ребёнка.

Лечение CMV-инфекции
Лечение ЦМВ-инфекции является комплексным. Оно включает в себя противовирусную и иммунную терапию. Стоит помнить, что ЦМВ довольно быстро покидает периферию и не выделяется из биологических жидкостей (грудное молоко, слюна и кровь). Таким образом, наступает латентная фаза инфекции. Очень важно вовремя и качественно провести иммунотерапию, чтобы активировать защитные механизмы организма для контроля активации латентной ЦМВ-инфекции.

Показания:

подготовка к беременности;
признаки внутриутробной инфекции, фетоплацентарная недостаточность;
состояние иммуносупрессии при ВИЧ-инфекции, неопластических заболеваниях, приёме цитостатических препаратов и т.д;
клиническая картина инфекционного мононуклеоза в отсутствии инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барра;
гепато-спленомегалия неясной природы;
лихорадка неясной этиологии;
повышение уровня печёночных трансаминаз, гамма-ГТ, ЩФ в отсутствии маркёров вирусных гепатитов;
атипичное течение пневмонии у детей;
невынашивание беременности (замершая беременность, привычные выкидыши).

Подготовка
Специальная подготовка не требуется. Рекомендуется взятие крови не ранее чем через 4 часа после последнего приёма пищи.

Накануне сдачи исследования нужно исключить физические и психоэмоциональные нагрузки.

Забор крови производится в соответствующую пробирку строго до метки.

Интерпретация результатов
Ответ выдается в количественном формате.

Единица измерения — lg копий ДНК CMV на 10 5 клеток.

Информация об исследовании

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) позволяет увеличить число копий ДНК бактерий или вирусов в миллионы раз с использованием фермента ДНК-полимеразы. Для диагностики достаточно одной молекулы ДНК. Синтезированное количество ДНК идентифицируют методами иммуноферментного анализа или электрофореза. ПЦР-диагностика позволяет обнаружить возбудителя на самых ранних этапах инфекционного процесса, в любой биологической среде организма, с возможностью количественного определения вирусов или бактерий.

Выявление цитомегаловирусной инфекции имеет большое значение в диагностике перинатальной патологии. Внутриутробная и перинатальная передача ЦМВ может иметь тяжелые последствия. Цитомегаловирусная инфекция во время беременности часто протекает в скрытой форме и не имеет клинических проявлений. ПЦР-диагностика в таких случаях позволяет выявить этиологический фактор заболевания. Материалом для исследования могут служить клетки осадка мочи (новорожденных детей), эпителий цервикального канала больных женщин, околоплодные воды, соскобы с конъюнктивы глаз и урогенитального тракта, слюна. Обнаружение частиц вируса в крови больного с помощью ПЦР используют для диагностики цитомегаловирусной инфекции и контроля эффективности противовирусного лечения.

Выявление возбудителя цитомегаловирусной инфекции (Cytomegalovirus), в ходе которого определяется генетический материал (ДНК) цитомегаловируса. ЦМВ входит в семейство вирусов герпеса. Попав в организм человека, сохраняется в нем пожизненно. С нормальным иммунитетом цитомегаловирус никак не дает о себе знать. Заболевание представляет опасность при беременности для будущего ребенка, для больных с иммунодефицитами. Сдать анализ на ЦМВ (CMV) рекомендуют пи планировании беременности. Анализ крови входит в комплекс обследования на TORCH-инфекции. Если инфицирование установлено, то это не страшно. Во время беременности вирус может обостриться, но обычно данная форма неопасна. Если анализ на CMV отрицательный, значит пациентка входит в группу риска. Для плода наиболее опасна первичная инфекция. Но заражение не указывает на обязательную передачу ребенку. В худшем случае возможны врожденные патологии: микроцефалия, церебральная кальцификация, увеличение селезенки и печени.

Показания к назначению исследования

Подготовка к исследованию

Женщинам рекомендуется сдавать анализ до менструации или через 2 дня после ее окончания.
Мужчинам не следует мочиться в течение 3 часов до анализа.
За 24-48 час исключить -половой контакт, местные(влагалищные) процедуры- введение свечей, спринцевания, УЗИ вагинальное и кольпоскопия.
Мазок из зева берется строго натощак (исключить прием напитков, пищи).
Проводить исследование не ранее чем через 14 дней после применения противовирусных препаратов.
Исключить прием антисептических препаратов за 5-7 дней до исследования.

С этим исследованием сдают

20.58. Цитомегаловирус IgG (п/кол)
20.59. Цитомегаловирус IgG авидность (п/кол)
20.60. Цитомегаловирус IgM (п/кол)

Результаты исследования

Противовирусная терапия способна снижать количество вируса в клетках эпителия, однако в силу высокой чувствительности метода ПЦР это редко приводит к ложноотрицательным результатам.
Ошибки на этапе взятия биологического материала, когда в образец для исследования не попадает достаточное количество инфицированных вирусом клеток, могут вести к ложноотрицательным показателям.

Анализ качественный
При отсутствии ДНК цитомегаловируса в образце исследуемого материала выдается результат - "не обнаружено".
При инфицировании образца исследуемого материала ДНК цитомегаловируса будет указан результат - "обнаружено".
Отрицательный результат:
У пациента нет текущей ЦМВ-инфекции. Если есть симптомы какого-то заболевания, то они вызваны другим возбудителем. При этом ЦМВ может присутствовать в латентной форме.
Положительный результат:
Выявление ДНК вируса указывает на недавнее заражение (первичную инфекцию) или обострение латентной инфекции.
Повторные анализы (с интервалом во времени) помогают следить за лечением: если терапия эффективна, то количество вирусной ДНК должно снижаться.

Цитомегаловирус (ЦМВ) или вирус герпеса 5 типа, – ДНК-содержащий вирус Cytomegalovirus hominis семейства Herpesviridae подсемейства Betaherpesvirinae. Цитомегаловирусная инфекция (ЦМВИ) человека – хроническая антропонозная болезнь вирусной этиологии, характеризующаяся многообразием форм патологического процесса и клинических проявлений – от латентной инфекции до клинически выраженного генерализованного заболевания. Заболевание ЦМВИ классифицируют в зависимости от сроков и механизмов заражения (врожденная и приобретенная инфекция, пренатальная, интранатальная и постнатальная), степени активности вируса (латентная, персистирующая и реактивированная инфекция), первичного или повторного заражения (острая инфекция, реактивация вируса и реинфекция).

Отличительными особенностями инфекции являются возможность ЦМВ персистировать во многих органах и способность его к инфицированию практически всех клеток организма человека, что предопределяет многообразие клинических проявлений, как при врожденной, так и приобретенной формах инфекции. ЦМВ рассматривается в качестве основного возбудителя внутриутробной инфекции, имеющей самые различные исходы: от инфицирования без реализации инфекции, формирования пороков развития и заболевания новорожденных до гибели плода и мертворождения.

ЦМВИ – типичный антропоноз. Источником инфекции является больной человек либо вирусоноситель. Пути передачи: вертикальный, половой, воздушнокапельный, фекально-оральный, артифициальный (парентеральный). Факторами передачи являются кровь, цервикальный и вагинальный секреты, сперма, женское молоко. Вирус выделяется с мочой, фекалиями, слюной, мокротой, в меньшей степени – со слезной жидкостью. Заражение может происходить также при переливании крови, трансплантации органов и тканей. Цитомегалия — широко распространенная инфекция, среди взрослого населения РФ у 73–98% обнаружены АТ-ЦМВ.

ЦМВИ относится к оппортунистическим инфекциям, особую опасность представляет для больных с иммунодефицитами различной природы. Иммуносупрессия приводит к реактивации латентной инфекции и развитию манифестных вариантов болезни с поражением различных органов и систем, способных привести к летальному исходу. Манифестная ЦМВИ занимает одно из первых мест в структуре оппортунистических заболеваний у ВИЧ-инфицированных пациентов. Данная патология встречается у 20–40% больных СПИДом, не получающих антиретровирусной терапии. Клинически выраженная ЦМВИ — одно из серьезных инфекционных осложнений при трансплантации органов, инфекция обостряет процессы, приводящие к реакции отторжения трансплантата.

При персистенции ЦМВ в организме человека выделяют две стадии, которые сменяют друг друга – продуктивную (с репликацией вируса) и латентную. Выход вируса из латентной стадии означает реактивацию, что может быть предопределено снижением иммунорезистентности либо появлением иных факторов, способствующих его репродукции. Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции.

При первичном заражении на 5–7 день вырабатываются АТ IgM, через 10–14 дней – низкоавидные АТ IgG, затем постепенно авидность этих АТ увеличивается, они становятся высокоавидными. АТ IgM исчезают через один месяц, низкоавидные АТ IgG – через 1–3 месяца, высокоавидные АТ IgG циркулируют в крови носителя пожизненно. При первичном инфицировании в стадии “серологического окна”, до начала синтеза АТ, происходит активная репликация вируса, в этот период единственным маркером инфекции является ДНК вируса в крови. При реактивации возможно появление АТ IgM и/или IgA, а также низкоавидных АТ IgG; в пик реактивации выявляются ДНК либо АГ ЦМВ в плазме крови.

Решающим условием антенатальной ЦМВИ является виремия у матери вследствие первичного или повторного заражением вирусом или его реактивации. ЦМВ способен преодолевать плацентарный барьер и поражать плод в различные сроки беременности, вызывая врожденную инфекцию. По данным различных авторов, активная форма ЦМВИ выявляется у женщин с отягощенным акушерским анамнезом в 35–60% случаев. Входными воротами для вируса в антенатальном и интранатальном периодах течения беременности могут быть плацента и плодные оболочки, в неонатальном периоде и позже – дыхательные пути и пищеварительный тракт, возможно заражение и через кровь.

ЦМВ обладает преимущественно нейротропным, эпителиотропным, гепатотропным и кардиотропным действием на плод. Его воздействие может быть и опосредованным, приводящим к различным нарушениям в плаценте: расстройству маточно- плацентарного кровообращения, отклонению в эволюционном формировании плаценты. Клиническим эквивалентом этих расстройств могут быть сокращение продолжительности беременности и преждевременное родоразрешение, рождение детей с симптомами перенесенной гипоксии или признаками внутриутробной гипотрофии, общая задержка внутриутробного развития.

Наибольшее значение для развития ранних перинатальных поражений плода имеет гематогенный путь инфицирования. Кроме того, для интранатальных и более поздних поражений характерными являются вертикальный и контактный пути передачи ЦМВ, нередки также случаи смешанного инфицирования. Острая ЦМВИ может протекать в виде генерализованной формы с присоединением вторичных инфекций и иметь летальный исход уже в первые недели жизни ребенка. При инфицировании плода во время реактивации латентной ЦМВИ чаще имеют место поздние проявления инфекции в виде нарушений зрения, слуха, задержки психического развития, двигательных нарушений. При отсутствии выраженных иммунологических нарушений острая ЦМВИ переходит в латентную с пожизненным присутствием вируса в организме человека. Развитие иммуносупрессии, в частности связанной с ВИЧ-инфекцией, ведет к возобновлению репликации ЦМВ, появлению вируса в крови и манифестации заболевания. Летальность больных ВИЧ-инфекцией, страдающих ЦМВИ, составляет 25–27%.

Клинический диагноз ЦМВ-инфекции требует обязательного лабораторного подтверждения. Выявление в крови пациента АТ-ЦМВ IgМ и/или IgG недостаточно ни для установления факта активной репликации ЦМВ, ни для подтверждения манифестной формы заболевания.

Показания к обследованию

Женщины, планирующие беременность;
женщины с отягощенным акушерским анамнезом (перинатальные потери, рождение ребенка с врожденными пороками развития);
беременные женщины (в первую очередь имеющие УЗИ-признаки внутриутробной инфекции, лимфоаденопатии, лихорадку, гепатит и гепатоспленомегалию неясного генеза);
беременные женщины с иммунодефицитом, в т. ч. с ВИЧ-инфекцией;
матери, родившие ребенка с признаками внутриутробной инфекцией или врожденными пороками развития;
дети, имеющие симптоматику врожденной инфекции, пороки развития или рожденные женщинами из группы риска по внутриутробной передаче ЦМВ;
пациенты (в первую очередь новорожденные) с сепсисом, гепатитами, менингоэнцефалитом, пневмонией, поражением ЖКТ;
пациенты с наличием иммунодефицита с клинической картиной органных или генерализованных поражений.

Врожденная ЦМВИ – краснуха, токсоплазмоз, неонатальный герпес, сифилис, бактериальная инфекция, гемолитическая болезнь новорожденных, родовая травма, наследственные синдромы;
мононуклеозоподобное заболевание – инфекции, вызываемые вирусом Эпштейна-Барр, герпес-вирусами 6 и 7 типов, острая ВИЧ-инфекция, стрептококковый тонзиллит, дебют острого лейкоза;
заболевание органов дыхания у детей раннего возраста – коклюш, бактериальный трахеит или трахеобронхит, РС-вирусной инфекция, герпетический трахеобронхит;
у больных с иммунодефицитом – пневмоцистная пневмония, туберкулез, токсоплазмоз, микоплазменная пневмония, грибковые и герпетические инфекции, бактериальный сепсис, лимфопролиферативные заболевания, ВИЧ-энцефалит, нейросифилис, прогрессирующая многоочаговая лейкоэнцефалопатия;
полинейропатия и полирадикулопатия – полирадикулопатия, вызванная герпесвирусами 2 и 6 типов, синдром Гийена-Барре, токсическая полинейропатия, связанная с приемом лекарственных средств, алкоголя, наркотических психотропных веществ.

Этиологическая лабораторная диагностика включает микроскопические исследования, выявление возбудителя в культуре клеток, обнаружение АГ или ДНК, определение АТ IgM, IgА, IgG, авидности АТ IgG.

Материал для исследования

Кровь (сыворотка, плазма), лейкоциты крови, моча, слюна, СМЖ – культуральные исследования, выявление ДНК;
пуповинная кровь, амниотическая жидкость – выявление ДНК;
слюна, моча – выявление АГ;
сыворотка/плазма крови – определение АТ.

Для обнаружения АГ вируса в слюне и моче используют метод РИФ, по количеству светящихся клеток можно приблизительно оценить интенсивность выделения вируса. В связи с персистенцией ЦМВ обнаружение АГ не указывает на активность инфекционного процесса, для ее оценки требуются дополнительные исследования – выявление отдельных АГ вируса (р55, рр65 и др.).

При проведении микроскопического исследования (световая микроскопия) основными морфологическими признаками ЦМВИ являются гигантские клетки с внутриядерными включениями (цитомегалы). Их можно обнаружить в эпителии почечных канальцев, желчных протоках, выводных протоках слюнных желез, поджелудочной железы, ткани легких, клетках глии, нейронах, эндотелиоцитах. Наличие таких клеток указывает на репродукцию вируса, однако они обнаруживаются не во всех случаях активной инфекции. Диагностическая чувствительность метода не превышает 50%.

Определение специфических АТ к вирусу помогает в распознавании заражения человека ЦМВ, но ввиду длительного периода нарастания титра АТ от момента инфицирования, последующего долгого сохранения их в крови, трансплацентарного перехода АТ IgG от матери к плоду (выявляются у ребенка до 1,5 лет) диагностическая ценность исследования ограничена. При наблюдении в динамике (2–4 недели) повышение титра АТ IgG в 4 раза указывает на активную ЦМВИ. Однако необходимость длительного периода наблюдения (до 4 недель) и возможность сохранения повышенного титра АТ на протяжении ряда лет лимитирует использование такого подхода к диагностике.

Дополнительным исследованием при поражении мозга, вызванного ЦМВ, может быть параллельное обнаружение АТ IgG в периферической крови и СМЖ методом ИФА с последующим расчетом их соотношения. Значение соотношения позволяет выявить интратекальную продукцию АТ и соответственно вовлечение в инфекционный процесс ЦНС.

Иммуноблот позволяет детектировать АТ IgM и IgG к отдельным белкам ЦМВ, подтвердить специфичность исследования, следить в динамике за появлением и исчезновением отдельных белков, что имеет высокое диагностическое и прогностическое значение. Наличие АТ к отдельным АГ вируса подтверждает формирование иммунного ответа к ЦМВ.

Показания к применению различных лабораторных исследований и интерпретация их результатов у разных категорий обследуемых

Диагностика первичного заражения, в т. ч. в период беременности, возможна только у пациентов, в крови которых отсутствуют АТ-ЦМВ. Независимо от клинических вариантов заболевания, при первичной ЦМВИ выявляются прямые (присутствие вируса, его ДНК или АГ) и косвенные (АТ-ЦМВ) лабораторные маркеры активной репликации ЦМВ. При обследовании больных при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) необходимо количественное определение содержания ДНК ЦМВ в крови. Определение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛЖ, биоптатах бронхов, биоптатов органов выполняют при наличии соответствующей органной патологии.

Выявление прямых маркеров репликации вируса (виремия, ДНК или АГ) свидетельствует о наличии инфекции. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови беременной женщины – основной маркер высокого риска заражения плода и развития врожденной ЦМВИ.

Отсутствие АТ-ЦМВ IgM, IgА и IgG означает отсутствие ЦМВ в организме. Однако у лиц с выраженным иммунодефицитом при активной репликации ЦМВ продукция специфических АТ может быть снижена до неопределяемого уровня.

Выявление АТ-ЦМВ разных классов позволяет определить фазы инфекционного процесса (репликативная или латентная). АТ IgM чаще оценивают как маркер первичной герпес-вирусной инфекции. При выявлении АТ IgM для подтверждения инфицирования ЦМВ рекомендуются дополнительные исследования: определение АТ IgА или авидности АТ IgG, выявление АТ к отдельным белкам с использованием иммуноблота; повторное обследование женщины или ребенка через 2 недели. Выявление АТ IgА и(или) низкоавидных АТ IgG подтверждает наличие инфекции. При повторном выявлении АТ IgM и отсутствии IgА и(или) низкоавидных IgG результат выявления АТ IgM считают ложноположительным.

Выявление АТ IgM и IgG к предранним белкам-антигенам и низкоавидных АТ IgG свидетельствует о первичном инфекционном процессе.

Обнаружение только АТ IgG не позволяет охарактеризовать период заболевания. При наличии иммуносупрессии классического (4-х кратного) увеличения АТ IgG во время рецидива не наблюдают.

Установление факта инфицирования плода осуществляется на основании обнаружения ДНК ЦМВ. Выбор биологического материала определяется с учетом срока гестации, обусловливающего возможность проведения того или иного метода инвазивной пренатальной диагностики: амниотическая жидкость – 16–23 недели, пуповинная кровь – 20–24 недели. Косвенным подтверждением факта инфицирования плода является обнаружение АТ IgM и/или АТ IgА в пуповинной крови (проведение исследования возможно с 22 недели беременности).

Лабораторная диагностика врожденной ЦМВИ основана на обнаружении ЦМВ, его ДНК или АГ в различном биологическом материале (периферическая кровь, моча, слюна, смывы и мазки от ротоглотки, СМЖ) и выявлении в сыворотке или плазме крови АТ IgМ и IgА в течение первых 7 дней после рождения. Проведение исследования в более поздние сроки не позволяет дифференцировать врожденную и приобретенную инфекцию. Выявление ДНК ЦМВ или АГ вируса в крови, моче, соскобах со слизистой ротовой полости через 4–6 недель жизни ребенка при отсутствии вируса в первые 2 недели говорит об интранатальном или раннем постанатальном заражении. Подтверждением манифестной ЦМВИ у детей первых месяцев жизни является наличие ДНК ЦМВ в крови.

При сомнительных результатах дополнительную диагностическую информацию может дать выявление АТ IgМ к отдельным белкам-антигенам вируса методом иммуноблота. Отсутствие АТ-ЦМВ у детей с врожденной ЦМВИ может быть связано с развитием иммунологической толерантности к АГ вируса цитомегалии (инфицирование ЦМВ не сопровождается эффективным синтезом АТ-ЦМВ).

Выявление АТ IgG в сыворотке крови новорожденного без сопоставления с уровнем АТ в крови матери не является диагностически значимым вследствие возможности их трансплацентарного переноса из материнского организма. Только при динамическом (с интервалом в 14–21 день) сравнении уровня АТ IgG новорожденного ребенка с уровнем АТ IgG в крови матери можно судить об их природе. Если титры АТ IgG у ребенка при рождении равны материнским, а при повторном исследовании через 3–4 недели снижаются приблизительно в 1,5–2 раза, то АТ, выявленные у ребенка, являются материнскими.

Скрининг беременных женщин – выявление АТ IgМ и низкоавидных АТ IgG. Для исключения реактивации целесообразно определение АТ IgА и низкоавидных АТ IgG.

Обследование больных с наличием иммунодефицита при подозрении на активную ЦМВИ и манифестную форму заболевания (ЦМВ-болезнь) включает гистологическое исследование биопсийных материалов для выявление цитомегалов (окраска гематоксилином и эозином), обнаружение ДНК ЦМВ в ликворе, плевральной жидкости, БАЛ, биоптатах бронхов, биоптатов внутренних органов при наличии соответствующей органной патологии; выявление АГ ЦМВ в крови, определение концентрации ДНК ЦМВ в крови методом ПЦР. В диагностике ЦМВИ у ВИЧинфицированных наиболее информативно наличие в крови ДНК ЦМВ в высокой концентрации (в плазме крови >10000 копий/мл, в лейкоцитах > 1000 копий/ 105 лейкоцитов).

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Читайте также: