Что такое инфекционная активность вируса

Исследовали на модели культур клеток зависимость специфической инфекционной активности вируса бешенства промышленных (фиксированных) штаммов L. Pasteur и CVS от длительности и температуры хранения. Вирусную суспензию накапливали в клеточной культуре / С13 и замораживали при -20 и -80°С. Анализ специфической активности проводили через 1 неделю, 1, 2, 3, 6 и 12 месяцев хранения. Экспериментально установили, что для исследованных штаммов более эффективной для длительного хранения является температура -80°С.

Ключевые слова: вирус бешенства, вируссодержащая суспензия, антирабический иммуноглобулин, антирабическая вакцина, долгосрочное хранение, низкие температуры

The dependence of specific infectious activity on the cell culture model of rabies virus industrial (fixed) strains L. Pasteur and CVS from the duration and storage temperature was investigated. Viral suspension was produced by cell culture / C13 and frozen at -20 and -80°C. Analysis of the specific activity was performed after 1 week, 1, 2, 3, 6 and 12 months of storage. It was experimentally discovered that the temperature -80°C is more effective for storage for the studied strains.

Keywords: rabies virus, virus-containing suspension, rabies immunoglobulin, rabies vaccine, long-term storage, low temperature

Введение

Бешенство является опасным нейроинфекционным заболеванием теплокровных животных (в том числе и человека), которое встречается более чем в 150 странах мира [7, 10]. Возбудителем данного заболевания является РНК-содержащий вирус рода Lyssavirus, семейства Rhabdoviridae, порядка Mononegavirales. Заражение бешенством главным образом происходит через укус, в ходе которого инфекция передаётся со слюной. Основной мишенью вируса бешенства является центральная нервная система (ЦНС). Вирус бешенства является единственным из царства Virae, который поражает всех теплокровных животных с летальностью 100 %. От укусов животных, больных бешенством, ежегодно в мире погибает более 55 000 человек. В связи с этим согласно оценке Всемирной Организации Здравоохранения (ВОЗ) бешенство входит в пятёрку болезней, которые наносят наибольший ущерб человечеству и мировой экономике. Единственным методом борьбы с данным заболеванием являются пред- и постэкспозиционная профилактика, в рамках которой используются антирабические иммуноглобулин (АИГ) и вакцина (в дальнейшем — антирабические препараты) [1, 7, 10, 11].

Для получения антирабических препаратов и контроля их качества используются аттенуированные (или фиксированные) штаммы вируса бешенства, которые получают в ходе воздействия на полевые изоляты мутагенов или других факторов, позволяющих менять свойства вирионов. В отличие от полевых изолятов штаммы фиксированного вируса бешенства могут быть полностью или частично лишены способности к заражению целого организма животного или человека, но сохраняют возможность заражать ткани и клетки при непосредственном контакте. Наиболее распространёнными в производстве антирабических препаратов являются фиксированные штаммы вируса бешенства L. Pasteur и CVS, выделенные более 100 лет назад из полевых изолятов, ослабленные путём пассирования через мозг кроликов и адаптированные к мозгу мышей и клеточным линиям. С 1996 года ВОЗ рекомендует при производстве антирабических препаратов полностью отказаться от использования вируса бешенства, полученного пассированием через мозговую ткань животных, и использовать для накопления вирусной суспензии клеточные культуры [8, 11].

Цель исследования

Цель исследования — экспериментально определить эффективный температурный режим для долгосрочного хранения суспензии вируса бешенства штаммов L. Pasteur и CVS в условиях производства.

Материалы и методы

В качестве субстрата для накопления суспензии вируса бешенства использовали перевиваемую клеточную линию ВНК-21 / C13 (ATCC CCL-10), которая широко применяется для производства культуральной вакцины против бешенства [5, 6, 8, 12]. Клеточную линию накапливали в пристеночном монослое 1 сутки в стерильных пластиковых флаконах (SPL, Германия). В ходе исследования использовали фиксированные штаммы вируса бешенства L. Pasteur (адаптированный к клеточной линии Vero, № 2061 / Vero, 15 пассаж) и CVS (challenge virus standard), рекомендованные ВОЗ для производства АИГ и антирабических вакцин для животных и человека [8, 12]. Штамм L. Pasteur был адаптирован к клеточной линии ВНК-21 / C13 [6] и предоставлен Институтом Пастера (Нови-Сад, Сербия) вместе с технологическим регламентом производства антирабического антигена.

Вирусную суспензию культивировали в течении 4-х суток с момента заражения в поддерживающей среде DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) c 0, 2 % бычьего альбумина (PAA, Австрия) в СО₂-инкубаторе (Binder, Германия) при 33ºС и 5 % СО₂. Сбор вирусной суспензии проводили на 4 сутки после заражения. Полученную вирусную суспензию центрифугировали при 3000 об/мин 15 минут в рефрижераторной центрифуге (MPW, Польша) при 4ºС для удаления клеточного детрита. Супернатант собирали, добавляли к нему сахарозу с конечной концентрацией 5 %, расфасовывали в пластиковые криопробирки (PAA, Австрия) и замораживали при -20 и -80ºС в морозильных камерах (National Lab, Германия). Контроль температуры, при которой хранили криопробирки, производили с помощью спиртовых термометров [5, 6, 8, 12].

Для определения специфической инфекционной активности вирусной суспензии использовали метод титрации вируса в культуре клеток линии ВНК-21 / C13. Суспензию вируса бешенства размораживали через 1 неделю, 1 , 2, 3, 6 и 12 месяцев хрнения при низких температурах (срок наблюдения) и титровали с коэффициентом разведения 5 на культуре клеток ВНК-21 / C13 в 96-луночных планшетах (SPL, Германия) в 5-ти повторах (n = 5). Культивировали клетки 48 часов в СО₂-инкубаторе при 37ºС и 5 % СО₂, затем фиксировали монослой клеточной лини охлаждённым при -20ºС ацетоном. Так как промышленные штаммы вируса бешенства не оказывают на клеточные линии цитопатогенного действия, то для определения инфекционной активности вирусной суспензии использовали метод непрямой флуоресценции. Для этого применяли специфические моноклональные антитела к вирусу бешенства, меченные изотиоцинатом флуоресцина (FITC) (Fujirebio, U.S.A.), которыми производили окрашивание клеточного монослоя. Учёт результатов производили с помощью медицинского микроскопа (МИКМЕД-6, ЛОМО, Россия) (увеличение 100×) с люминисцентной насадкой. При микроскопировании учитывали яркое специфическое свечение зелёного цвета, которое свидетельствует о наличии вируса бешенства в клетках, и лунки с таким свечением отмечали как положительные (рисунок 1) [4, 5, 9, 12].

Рисунок 1 — Клетки лини ВНК-21 / С13, инфицированные вирусом бешенства штамма L. Pasteur. Окраска FITC-меченными моноклональными антителами, увеличение 100×

Расчёт титра вируса проводили с помощью формулы Спирмена-Карбера и выражали в десятичном логарифме 50 %-ой фокусформирующей инфицирующей дозы (lg FFD₅₀):

, где

x₀ — lg наибольшего разведения, в котором во всех лунках отмечается положительное свечение;

d — lg фактора разведения;

n_i — общее количество лунок, приходящихся на каждое разведение титрации вирусной суспензии;

r_i — количество положительных лунок в каждом разведении титрации вирусной суспензии [3, 9, 12].

Статистический анализ данных осуществляли с помощью стандартных пакетов компьютерных программ Microsoft Excel-2010 и Past. Вид распределения определяли с помощью W-критерия Шапиро-Уилка, достоверность различий между группами данных рассчитывали с использованием параметрического t-критерия Стьюдента (для групп с нормальным распределением данных). Расхождение считали статистически значимым при p ≤ 0, 05.

Результаты и обсуждение

В ходе проведенных исследований была проанализирована сохранность специфической инфекционной активности суспензии вируса бешенства штаммов L. Pasteur и CVS после хранения при температурах -20 и -80°С через 1 неделю, 1, 2, 3, 6 и 12 месяцев (срок наблюдения). В качестве контроля использовали данные по хранению вируса на протяжении 1-ой недели.

При анализе данных по хранению вирусной суспензии промышленного штамма L. Pasteur при -20ºС были получены следующие результаты. Активность вирусной суспензии через 1 неделю после замораживания при температуре -20°С составила 8,11±0,29 lg FFD₅₀ (n = 5) (рисунок 2). При сравнении данных по специфической активности вируса после 1-ого месяца хранения различия не были статистически значимыми (р ≥ 0, 05). После 2-х месяцев хранения при этой температуре активность вируса данного штамма начала снижаться (р ≤ 0, 05 ). Аналогичные данные были получены при сравнении активности вирусной суспензии после хранения на протяжении 3-х, 6-ти и 12-ти месяцев при температуре -20°С. Различия между данными по специфической активности после указанных сроков хранения были статистически значимы (р ≤ 0, 05). Через 12 месяцев хранения при температуре -20°С активность вируса штамма L. Pasteur составила 4, 75 ± 0, 19 lg FFD₅₀, что на 3, 36 lg FFD₅₀ меньше, чем данные контроля.

Рисунок 2 — Динамика изменения инфекционной активности вируса бешенства штамма L. Pasteur в ходе хранения при температурах -20°С и -80°С, * — статистически значимые различия между контролем и последующими сроками хранения; # — статистически значимые различия между каждым из сроков; $ — статистически значимые различия между показателями активности одного срока хранения, но при разных температурах

Специфическая инфекционная активность вирусной суспензии штамма L. Pasteur через 1 неделю после замораживания при температуре -80°С составила 8, 18 ± 0, 19 lg FFD₅₀ (n = 5) и не изменялась в течение 2-х месяцев (р ≥ 0, 05). Между 2-м и 3-м месяцами хранения при температуре -80°С инфекционная активность вируса начала достоверно снижаться (р ≤ 0, 05 ), как и на протяжении последующего хранения. Через 12 месяцев хранения при температуре -80°С активность вируса штамма L. Pasteur составила 5, 66 ± 0, 29 lg FFD₅₀, что на 2, 52 lg FFD₅₀ меньше, чем данные контроля. Со 2-ого по 12-й месяцы хранения при -80°С показатели инфекционной активности были достоверно выше (р ≤ 0, 05 ), по сравнению с образцами, хранившимися при -20°С.

Активность вирусной суспензии промышленного штамма CVS через 1 неделю после хранения при температуре -20°С составила 6, 78 ± 0, 19 lg FFD₅₀ (n = 5) (рисунок 3) и не изменялась до 2-х месяцев хранения (р ≥ 0, 05). Между 2-м и 3-м месяцами хранения при данной температуре произошло достоверное снижение (р ≤ 0, 05 ), активности, как и на протяжении последующего хранения. Через 12 месяцев хранения при температуре -20°С активность штамма CVS составила 4, 96 ± 0, 29 lg FFD₅₀, что на 1, 82 lg FFD₅₀ меньше, чем специфическая активность вируса при хранении в данном температурном режиме в течение недели.

Рисунок 3 — Динамика изменения инфекционной активности вируса бешенства штамма CVS в ходе хранения при температурах -20°С и -80°С, * — статистически значимые различия между контролем и последующими сроками хранения; # — статистически значимые различия между каждым из сроков; $ — статистически значимые различия между показателями активности одного срока хранения, но при разных температурах

Активность вирусной суспензии штамма CVS через 1 неделю после замораживания при температуре -80°С составила 6, 78 ± 0, 47 lg FFD₅₀ (n = 5) и не изменялась в течение 6-ти месяцев (р ≥ 0, 05). Достоверное снижение (р ≤ 0, 05) показателя активности вируса произошло между 6-м и 12-м месяцами хранения при данной температуре. После 12 месяцев хранения при температуре -80°С активность вирусной суспензии снизилась на 0,28 lg FFD₅₀ и составила 6, 5 ± 0, 19 lg FFD₅₀ по сравнению с данными контроля. С 3-ого по 12-й месяцы хранения при -80°С показатели инфекционной активности данного штамма были достоверно выше (р ≤ 0, 05 ), по сравнению с образцами, хранившимися при -20°С.

В результате проведенных исследований более низкие результаты сохранности обоих штаммов вируса были получены при хранении вирусной суспензии при температуре -20°С. Это может быть связано с тем, что эвтектическая температура солевых растворов, входящих в состав среды консервирования и ультраструктурных компонентов вирионов находится ниже -20°С, и вирионы подвергаются действию повреждающих факторов, связанных с кристаллизацией жидкой фазы, изменением рН и гиперконцентрацией электролитов [2].

Результаты исследования показали, что фиксированный штамм CVS более устойчив к хранению при низких температурах, чем штамм L. Pasteur. Предположительно, различия криоустойчивости изучавшихся промышленных штаммов вируса бешенства обусловлены особенностями строения их капсидов. Этот вопрос требует отдельного изучения.

Полученные результаты по сохранности вируса бешенства промышленных штаммов в суспензии не соответствуют требованиям производства, так как необходимо сохранение спицефической ативности вируса на протяжении более длительных сроков. Поэтому следует провести исследования по применению различных режимов замораживания вирусной суспензии и использованию различных криозащитных сред. Полученные данные, вероятно, смогут позволить хранить промышленные штаммы вируса бешенства при низких температурах более длительное время без потери их специфической активности.

ВИРУЛИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ ЭКОЦИДА С В ОТНОШЕНИИ ВОЗБУДИТЕЛЯ АФРИКАНСКОЙ ЧУМЫ СВИНЕЙ

Селянинов Ю.О. Татарчук О.П. Бирюкова А.В. ГНУВНИИВВиМ Россельхозакадемии Представительство KRKA (Словения) в РФ

Высокая контагиозность африканской чумы свиней (АЧС), в немалой степени, обусловлена биологическими особенностями возбудителя, а именно вирулентностью ДНК-содержащего вируса из семейства Asfarviridae и устойчивостью его во внешней среде.

Несмотря на безопасность вируса АЧС для человека, его социальная значимость несомненна. В очаге инфекции и вокруг него, в соответствии с текущим законодательством, проводится уничтожение всего поголовья свиней. На данный момент не существует этиотропных мер борьбы с АЧС, поэтому особое внимание должно уделяться превентивным мероприятиям — карантину и дезинфекции. Однако, контаминированные вирусом АЧС поверхности объектов, зачастую не подвергаются полному обеззараживанию из-за наличия органических загрязнений, защищающих вирус от действия внешних факторов. При АЧС данное обстоятельство может являться критичным вследствие высокой природной устойчивости возбудителя. Так, срок выживаемости возбудителя АЧС в присутствии протеин-содер-жащих загрязнений при рН 13,4 составляет 7 дней, а при их отсутствии — 21 час [1]; вируссодержащая кровь на бетонных, деревянных или других впитывающих поверхностях сохраняет инфекционную активность на протяжении 70 дней [2], а в условиях сочетанного загрязнения кровью и фекалиями вирус АЧС сохраняет жизнеспособность до 120 дней. Под защитой такого сочетанного органического загрязнения активность многих традиционных дезсредств резко снижается, поэтому рациональный выбор режимов обеззараживания должен быть основан на специфической активности дезинфектанта в отношении вируса АЧС.

Водорастворимый порошок Экоцид С (KRKA, Словения) зарегистрирован для дезинфекции объектов ветеринарно-санитарного надзора в комплексе мероприятий при инфекциях бактериальной, вирусной и грибковой этиологии в соответствии с Инструкцией по применению от 02.03.2007 г. Вирулицидная активность Экоцида С была изучена в отношении как ДНК, так и РНК-содержащих вирусов семейств Herpesviridae, Adenoviridae, Parvoviridae, Reoviridae, Rhabdoviridae и др.; имелись предварительные данные определения вирулицидной активности препарата в отношении вируса АЧС in vitro. Поэтому в задачу исследования входило изучение вирулицид-ной активности различных режимов дезинфекции Экоцидом С в отношении возбудителя АЧС в соответствии с "Методами испытаний дезинфекционных средств для оценки их безопасности и эффективности", утвержденными Главным государственным санитарным врачом РФ, М., 1998 г, "Методическими указаниями о порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики", утвержденными ГУВ Госагропрома СССР в 1987 г, с использованием биопробы и "Методическими указаниями по отбору, оценке и испытаниям антивирусного и антибактериального действия химических соединений" М., 2004 г.

В опыте использовали вирулентный вирус АЧС в виде вируссодержащей крови с инфекционной активностью 6,5. 7,0lg гемадсорбирующих единиц в 1 мл в смеси со стерильным высушенным свиным навозом (5:1 об:масс). На стерильные тест-объекты из бетона и полипропилена наносили смесь вирус-крови и высушенного свиного навоза, равномерно распределяли по площади 100 см2 и подсушивали в течение 2 часов. Испытуемые растворы средства Экоцид С орошением наносили на поверхность тест-объектов из расчета 300 мл/м2; на контрольные тест-объекты вместо растворов Экоцида С наносили такое же количество воды.

После экспозиции растворов Экоцида С с тест-объектов соскабливали вирусный материал, который затем ресуспендировали в среде Хенкса для внесения в культуру клеток костного мозга свиньи (ККМС), а также в физиологическом растворе для постановки биопробы (на 8 животных: 6 опытных и 2 контрольных). Наблюдение за культурами клеток вели в течение 14 дней с двумя последовательными пассажами, а за заражёнными подсвинками — в течение 21 суток.

Результаты испытаний дезинфицирующего действия средства Экоцид С в ККМС представлены в табл. 1 (опыт проводился в трех повторностях).

Из таблицы видно, что средство Экоцид С в виде раствора 2 %-ной концентрации с экспозицией 30 мин частично инактивирует вирус АЧС на тест-объектах из полипропилена и бетона. В связи с полученными in vitro результатами было принято решение исследовать растворы Экоцида С с концентрациями 1%, 2% и 3% при экспозиции 30-60 мин с постановкой биопробы на интактных восприимчивых животных.

Результаты испытаний дезинфицирующего действия средства Экоцид С в отношении вируса АЧС с использованием биопробы на карантинированных свиньях представлены в табл. 2.

При испытании с использованием биопробы средство Экоцид С в 1%-ной и 2%-ной концентрациях с экспозицией 30 мин не обладает дезинфицирующим действием в отношении вируса АЧС на впитывающих (пористых) поверхностях. Водный раствор дезредства Экоцид С в концентрации 3% с экспозицией 60 мин обладает дезинфицирующей активностью в отношении вируса АЧС как на впитывающих, так и на невпитывающих поверхностях.

В соответствии с результатами исследования, дезинфекция водными растворами Экоцида С может быть рекомендована для предупреждения заноса возбудителя в свиноводческие хозяйства промышленного типа, в том числе для заправки дезбарьеров и обработки транспортных средств, а раствор Экоцида С 3%-ной концентрации с экспозицией 60 мин проявил обеззараживающее действие в отношении вируса АЧС при высоком уровне фонового органического загрязнения.

Таблица 1
Вирулицидное действие Экоцида С в отношении АЧС при экспозиции 30 мин (в культуре клеток)

Таблица 2
Вирулицидное действие Экоцида С в отношении АЧС (в биопробе на свиньях)

Ключевые слова: вирус, африканская чума свиней, дезинфекция, предотвращение, Экоцид.

BIOCIDAL PROPERTIES OF ECOCID S AGAINST AFRICAN SWINE FEVER VIRUS

1SELYANINOV Y., 2TATARCHUK O., 2BIRJUKOVA A.

1GNU VNIIVViM Rosselkhozakademii, Representative office of Krka,

d.d. (Slovenia) in Russia

Prevention measures for Asfarviridae member' African Swine Fever Virus (ASFV) control is discussed. Since disinfection regimen is of a primary importance among other measures, biocidal properties of applied disinfectant should be considered due to ASFV natural resistance. Protocol of sanitation was evaluated on test patches is of concrete and polypropylene artificially contaminated with ASFV as circ. 10lg HAD50 units in blood-manure (5:1 v/w) protective mixture. Surprisingly, ASFV was successfully eliminated with 3% Ecocid S solution, followed by 60 minutes exposure, as confirmed in primary bone marrow cell culture and by inoculation test on quarantined naive pigs.

Keywords: virus, African swine fever, Asfarviridae, disinfection, prevention,

Заболевания, причинами которых являются микроорганизмы: бактерии, вирусы, грибы, паразиты или их токсины, называются инфекционными.

За последние десятилетия в лечении инфекционных заболеваний был сделан огромный шаг вперед. В основном это произошло благодаря открытию антибактериальных свойств пенициллина в 1940 году. С появлением антибиотиков многим казалось, что инфекции скоро будут представлять лишь исторический интерес. А ведь со времен Второй мировой войны были созданы сотни препаратов, не только антибактериальных, но и противовирусных, противогрибковых, антипаразитарных, большинство из которых эффективны и безопасны. Но, несмотря на это, инфекционные заболевания все еще остаются основной причиной ухудшения здоровья миллионов людей во всем мире и одной из главных причин смерти. Как это объяснить? Необходимо помнить, что инфекционные заболевания – особый вид болезней, причина которых – живой организм, который в свою очередь способен видоизменяться. Причем, процесс этот у микроорганизмов происходит значительно быстрее, чем у людей. У микробов выработались механизмы, позволяющие им противостоять столь мощному оружию, как препараты, создаваемые человеком. Количество устойчивых к существующим антибиотикам форм патогенных микробов становится угрожающим. Инфекционные болезни, которые во многих странах считались почти искорененными (туберкулез, холера) возобновились с новой силой. Во многом эта ситуация обусловлена бесконтрольным приемом антибактериальных препаратов. Сейчас на фармацевтическом рынке существует огромное количество различных антибиотиков, список которых пополняется с каждым днем. Выбор того или иного препарата, а также необходимость его приема в каждом конкретном случае должен определять только специалист.

Классификацию инфекционных заболеваний лучше начать с возбудителя болезни. По этиологии различают:

вирусные инфекции;
бактериальные инфекции;
хламидийные инфекции;
микоплазменные инфекции;
риккетсиозные инфекции;
спирохетозные инфекции;
микозные инфекции;
протозойные инфекции;
гельминтозные инфекции.

Самой распространенной группой инфекций являются вирусы. Далее представлена классификация вирусных инфекций согласно преимущественному пути инфицирования.

Путь передачи	Семейство вирусов
Воздушно-капельный	вирусы гриппа, вирусы ОРВИ, вирус Эпштейн-Барра, некоторые энтеровирусы
Фекально-оральный	вирус гепатита А, E, энтеровирусы
Контактный	вирус простого герпеса, контагиозный моллюск, папилломавирус
Трансплацентарный (от матери к плоду)	ВИЧ, цитомегаловирус, гепатит В, С, вирус герпеса
Трансмиссивный (через укусы насекомых)	желтая лихорадка, лихорадка Денге и другие геморрагические лихорадки
Инъекционный (через кровь)	ВИЧ, гепатит В, С и другие

Вирусы – это разнообразная группа инфекционных возбудителей. Они могут инициировать тяжелые эпидемии (грипп, лихорадка Эбола), вызывать простудные болезни (риновирусы, аденовирусы) и даже давать начало опухолевому процессу. Онкогенными свойствами обладает вирус гепатитов – он вызывает рак печени. Также онкологию могут вызывать некоторые разновидности папилломавирусов. Проникая в женские половые органы, они инициируют появление карциномы шейки матки.

В последние годы были открыты возбудители ранее неизвестных инфекционных заболеваний, с которыми человек соприкоснулся в результате изменения окружающей среды и миграции населения. Кроме того, стало известно, что микробы являются причиной некоторых болезней, которые раньше считались неинфекционными. Например, определенный вид бактерий (Helicobacter pylori) играет роль в развитии язвенной болезни желудка.
XXI век принес с собой новые проблемы. Вирусы, побив все рекорды изменчивости, уносят каждый день свыше 50 тысяч человеческих жизней. Примерно, каждый 4-5 человек нашей планеты, ежегодно подвергается нападению этого объединенного воинства, именуемого инфекционные заболевания.

Особенность современного развития общества – это глобализация во всех сферах деятельности и новые вызовы человечеству. Глобализация меняет параметры распространения инфекционных заболеваний в человеческом обществе. Быстро идет изменение свойств и самих возбудителей инфекционных болезней. Это проявляется на примере стремительного развития лекарственной устойчивости у многих микроорганизмов, повсеместно и негативно сказывается на заболеваемости и смертности от туберкулеза, малярии, от пневмококковой и стафилококковой инфекции. Ухудшение экологической обстановки и большие психоэмоциональные нагрузки приводят к значительному увеличению распространенности иммунодефицитных состояний. К особенностям глобализации следует отнести и продолжающийся процесс урбанизации, который приводит к значительным изменениям в социальной и демографической структуре общества.

Если говорить о вирусных гепатитах, то в настоящее время принято выделять пять вирусов, способных вызвать вирусный гепатит. Два из них – вирусы гепатита А и Е относятся к группе энтеральных гепатитов, т.е. передающихся через грязные руки или инфицированные продукты питания. Эти гепатиты не становятся хроническими и при своевременной диагностике и адекватном лечении заканчиваются выздоровлением. Вирусы В, С и Д (дельта) вызывают парентеральные гепатиты, передающиеся через биологические материалы (кровь, сперма, слюна и т.д.) и могут стать причиной хронического заболевания печени. При инфицировании вирусом гепатита С у 80% людей развивается хронический гепатит. Вирус гепатита Д (ВГД) не является самостоятельным, его существование возможно только при наличии сопутствующего хронического течения гепатита В, однако присоединение дельта-инфекции утяжеляет течение болезни и ухудшает прогноз заболевания.

Хронические вирусные гепатиты опасны возможностью их прогрессирования с развитием цирроза печени и первичного рака печени, т.н. гепатоцеллюлярной карциномы. Кроме того, постоянное присутствие вируса в организме может вызывать внепеченочные осложнения такие как системные заболевания. Отмечена также связь хронического гепатита С с развитием метаболического синдрома и сахарного диабета. Клиника хронического вирусного гепатита определяется степенью активности, этиологией заболевания, а выраженность симптоматики – сопутствующим фоном и длительностью поражения. Наиболее характерными проявлениями служат астеновегетативный, диспепсический и геморрагический синдромы, гепато- и спленомегалия.

Астеновегетативные проявления при хроническом вирусном гепатите характеризуются повышенной утомляемостью, слабостью, эмоциональной лабильностью, раздражительностью, агрессивностью. Иногда отмечаются жалобы на нарушение сна, головную боль, потливость, субфебрилитет.

Явления диспепсии связаны как с нарушением нормального функционирования печени, так и с частыми сопутствующими поражениями билиарного тракта, 12-перстной кишки и поджелудочной железы, поэтому сопровождают большинство случаев хронического вирусного гепатита. Диспепсический синдром включает ощущения тяжести в эпигастрии и подреберье, метеоризм, тошноту, отрыжку, непереносимость жирной пищи, ухудшение аппетита, неустойчивость стула (склонность к поносам). Желтуха не является патогномоничным симптомом хронического вирусного гепатита; в отдельных случаях может отмечаться субиктеричность склер. Явная желтуха чаще появляется и нарастает по мере развития цирроза и печеночной недостаточности.

В половине наблюдений у больных с хроническим вирусным гепатитом отмечается геморрагический синдром, характеризующийся склонностью к кожным кровоизлияниям, носовым кровотечениям, петехиальным высыпаниям. У 70 % пациентов отмечается появление внепеченочных знаков: телеангиэктазий (сосудистых звездочек), пальмарной эритемы, капиллярита (расширения капилляров), усиленного сосудистого рисунка на груди.

К внепеченочным проявлениям хронического вирусного гепатита относятся миалгии и артралгии, периферическая полинейропатия, аменорея, гинекомастия, снижение либидо, поражение глаз и слюнных желез. При преобладающем аутоиммунном синдроме могут присоединяться узелковый периартериит, кардиомиопатия, антифосфолипидный синдром, дерматомиозит, гранулематоз, болезнь Такаясу, аутоиммунный гепатит, хронический гломерулонефрит, сахарный диабет и др.

Расширение вен пищевода, геморроидальных вен, развитие асцита свидетельствуют о запущенности хронического вирусного гепатита и формировании цирроза печени.

Диагноз хронического вирусного гепатита устанавливается при длительно текущем (свыше 6 месяцев) инфекционном процессе, вызванном вирусами гепатита В, С, D, F, G; наличии гепатоспленомегалии, астенического, диспепсического и геморрагического синдромов.

С целью верификации формы заболевания проводится определение маркеров вирусных гепатитов методом ИФА, обнаружение РНК или ДНК вирусов с помощью ПЦР-диагностики. Из биохимических показателей функции печени интерес представляет исследование АлАт и АсАТ, щелочной фосфатазы (ЩФ), гамма-глутамилтранспептидазы (ГГТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ), билирубина, холестерина и др., позволяющих судить о степени повреждения паренхимы печени при хроническом вирусном гепатите. С целью оценки состояния гемостаза производится исследование коагулограммы, определение количества тромбоцитов.

УЗИ печени позволяет увидеть изменения печеночной паренхимы (воспаление, уплотнение, склерозирование и пр). На сегодняшний день в Минске доступно проведение эластометрии печени. Это современный не инвазивный (не травматический) способ выявления стадии фиброзного процесса в гепатоцитах. Такое исследование органа без операционного проникновения внутрь абсолютно безопасно для больного, и позволяет объективно оценить: на какой стадии находится фиброзный процесс; динамику патологических изменений; эффективность проводимой терапии, в том числе и антивирусной.

В некоторых случаях может потребоваться проведение пункционной биопсии печени. Биопсия печени и морфологическое исследование биоптата выполняется на заключительном этапе обследования для оценки активности хронического вирусного гепатита.

В последнее десятилетие достигнуты гигантские успехи в лечении хронических вирусных гепатитов, которые до недавнего времени считались неизлечимыми. В настоящее время имеется возможность добиться полного излечения хронического гепатита С и стойкого подавления активности хронического гепатита В. Для этого Европейской ассоциацией по изучению печени (EASL) и Американской ассоциацией по изучению болезней печени (AASLD) разработаны четкие правила и алгоритмы обследования и лечения больных с хроническими гепатитами В и С.

Перечень необходимых лабораторно-инструментальных методов исследования определяется после осмотра врача-инфекциониста.

220068, Республика Беларусь,
г. Минск, ул. Червякова 64
E-mail: mail@biomedica.by

Лицензия №02040/6344 от 26 марта 2010г

Время работы центра:

Понедельник - пятница:
08:00 - 20:00
Суббота: 08:00 - 16:00
Воскресенье: выходной

Читайте также: