Антигенная структура изменение антигенных свойств и плюрализм вирусов

Соматический (О-антиген) (от нем. Ohne Hauch – не образующие налета на агаре), обозначается арабскими цифрами, он расположен на поверхности клетки и состоит из фосфолипидно-полисахаридных комплексов, включающих до 60 % полисахаридов, 20–30 % липидов и 3,5–4,5 % – гексозамина, термостабилен, выдерживает кипячение в течение 2,5 часов и незначительно разрушается автоклавированием при 120°С в течение 30 мин, не разрушается спиртом, денатурируется формалином. Липополисахарид сальмонелл изучен наиболее детально, и его обычно принимают за стандарт, с которым сравнивают ЛПС других бактерий. В липополисахаридном комплексе выделяют три компонента: полисахаридная часть (О-специфические цепи), ядро – образовано цепочками гексоз и липид А, при этом важнейшим антигенным компонентом является полисахаридная часть. Липополисахариды являются носителями О-эндотоксинных свойств, обнаруживая высокую токсичность [3, 14, 15]. Средняя летальная доза его при парентеральном введении мышам, крысам, морским свинкам составляет 0,5–10 мг/кг. Химический анализ показывает, что липополисахариды состоят из фосфорополисахаридного компонента, связанного с фосфоролипоидным компонентом. Полисахаридный компонент содержит определенные углеводы, среди которых превалируют гексозамины и гексозы, часто содержатся метилпентозы (рамноза), иногда дезоксиметилпентозы. Углеводный состав полисахаридов у различных видов сальмонелл различен, обусловливая высокую специфичность получаемых токсических фракций. Последние осаждаются специфической сывороткой в чрезвычайно высоких разведениях (1:1 000 000–1:10 000 000). При этом речь идет не о групповой специфичности, а о специфичности для каждого вида бактерий в соответствии со специфичностью полисахаридной части, так как полисахарид, освобожденный от других веществ, осаждается специфической сывороткой в высоких разведениях [8].

Состав основной полисахаридной последовательности (О-специфические цепи) у Salmonella весьма стабилен, но такие модификаторы, как ацетильные группы, остатки сахаров, образующие ветви, присутствуя не у всех молекул полисахарида, определяют микрогетерогенность ЛПС даже у одной бактериальной клетки. Число олигосахаридных последовательностей в разных молекулах ЛПС может значительно варьировать. Так, у S. typhimurium некоторые цепи состоят из 30–35 повторов, тогда как некоторые молекулы ЛПС совсем лишены О-цепей. О-антигенные цепи выступают над поверхностью внешней мембраны бактериальной клетки, образуя ворсинки до 150 нм длиной.

Основная специфичность О-антигена в серологических реакциях обусловлена присутствием на концах полисахаридных цепочек, формирующих отдельные антигенные факторы, определенных полиозидов (дидезоксигексоз).

Иммунный комплекс О12-антигена обусловлен присутствием двух латеральных цепей, на концах которых находится в одном случае рамноза, в другом – глюкоза.

Синтез ядра ЛПС происходит независимо от синтеза О-специфических цепей. При синтезе ядра мембранным носителем выступает липид А, который затем остается в составе ЛПС. Липид А, входящий в состав полноценных, не мутантных, молекул ЛПС, не обладает антигенностью. Однако, в реакциях с R-мутантами или при использовании очищенных препаратов липида А антитела к нему образуются.

Позднее описан еще один соматический антиген, названный Т-антигеном (от слова transient). Первый Т-антиген (T1) был обнаружен у S. paratyphi B и S. typhimutium, второй Т-антиген (Т2) – у S. bareilly [3].

Таким образом, антигенное разнообразие, обусловленное различиями структуры О-цепей, дает бактериям определенные селективные признаки.

Жгутиковый (Н-антиген) имеет две фазы, при этом первая фаза обозначается строчными буквами латинского алфавита, вторая фаза – арабскими цифрами или латинскими буквами. Например, II – O 1, 6, 14 H, e, n, x, z . Это значит, что штамм с такой антигенной характеристикой относится к виду enterica subsp. Salamae [1]. Н-антиген сальмонелл, белковый по химической структуре, термолабильный (75–100 °С), разрушается фенолом и спиртом, но устойчив по отношению к формалину. Н-антиген определяет, как известно, типовую специфичность многих энтеробактерий, и его используют для идентификации штаммов [3].

Помимо указанных антигенов у сальмонелл известны и другие антигены. К их числу относятся К-антигены (капсульные), объединяющие ряд различных антигенов:

2. Антигены 5 и 27 (у сальмонелл группы В) также отличают по физико-химическим свойствам от О- и Vi-антигеиов.

3. М-антиген (слизистый антиген), обнаруженный F. Kauffmann у слизистых штаммов S. paratyphi В, S. choleraesuis, S. anatum, S. dublin и др. [Цит. по Е.С. Станиславскому, 1971], по-видимому, идентичный для всех типов сальмонелл. М-антиген – кислый полисахарид, он не растворим в воде, разрушается под воздействием кислоты и этанола и обладает слабыми антигенными свойствами.

По химической природе К-антигены представляют собой фосфолирированные белково-липо-полисахаридные комплексы и отличаются от О-антигенов качественным составом сахаров и структурным построением полисахарида. К-антигены характеризуются анодной электрофоретической подвижностью, обладают выраженными антигенными свойствами [7]. Подобно жгутиковым антигенам, капсульные антигены сальмонелл не токсичны [2, 3, 5].

Из вышесказанного следует, что антигенная структура сальмонелл имеет мозаичное строение и определяется наличием вариаций антигенных детерминант, которые приводят к некоторым закономерным изменениям антигенного состава штаммов [3].

По Кауфману (1959) различаются следующие 4 вида антигенных вариаций:

1. Н–О-вариации, характеризующиеся переходом из жгутиковой НО-формы в безжгутиковую О-форму и сопровождающиеся потерей Н-антигена. Данный переход встречается редко, и он почти всегда необратим.

3. Вариации формы:

а) О-вариации, представляющие собой количественные изменения О-антигена;

б) V–W-вариации, касающиеся исключительно Vi-антигена;

в) М–N-вариации, представляющие собой превращение слизистой (М) формы в нормальную (N) форму.

4. Вариации фазы, являющиеся определенными качественными изменениями жгутиковых антигенов.

Рецензенты:

Каждый микроорганизм, как бы примитивно он ни был устроен, содержит несколько антигенов. Чем сложнее его структура, тем больше антигенов можно обнаружить в его составе.

У различных микроорганизмов, принадлежащих к одним и тем же систематическим категориям, различают группоспецифические антигены - встречаются у разных видов одного и того же рода или семейства, видоспецифические - у различных представителей одного вида и типоспецифические (вариантные) антигены - у разных вариантов в пределах одного и того же вида. Последние подразделяют на серологические варианты, или серовары. Среди бактериальных антигенов различают Н, О, К и др.

Жгутиковые Н-антигены. Как видно из названия, эти антигены входят в состав бактериальных жгутиков. Н-антнген представляет собой белок флагеллин. Он разрушается при нагревании, а после обработки фенолом сохраняет свои антигенные свойства.

Соматический О-антиген. Ранее полагали, что О-антиген заключен в содержимом клетки, ее соме, поэтому и назвали его соматическим антигеном. Впоследствии оказалось, что этот антиген связан с бактериальной клеточной стенкой.

О-антиген грамотрицательных бактерий связан с ЛПС клеточной стенки. Детерминантными группами этого слижного комплексного антигена являются концевые повторяющиеся звенья полисахаридных цепей, просоединенные к ее основной части. Состав Сахаров в детерминантных группах, так же как и их число, у разных бактерий неодинаков. Чаще всего в них содержатся гексозы (галактоза, глюкоза, рамноза и др.), аминосахар (М-ацетилглюкозамин). О-антиген термистабилен: сохраняется при кипячении в течение 1-2 ч, не разрушается после обработки формалином и этанолом. При иммунизации животных живыми культурами, имеющими жгутики, образуются антитела к О- и Н-антигенам, а при иммунизации кипяченой культурой образуются антитела только к О-антнгену.

К-антигены (капсульные). Эти антигены хорошо изучены у эшерихий и сальмонелл. Они, так же как О-антигены, тесно связаны с ЛПС клеточной стенки и капсулой, но в отличие от О-антигена содержат главным образом кислые нолисахариды: глюкуроновую, галактуроновую и другие уроновые кислоты. По чувствительнсти к температуре К-антигены подразделяют на А-, В- и L-антигены. Наиболее термостабильными являются А-антигены, выдерживающие кипячение более 2 ч. В-антигены выдерживают нагревание при температуре 60°С в течение часа, а L-антигены разрушаются при нагревании до 60°С.

К-антигены располагаются более поверхностно, чем О-антигены, и часто маскируют последние. Поэтому для выявления О-антигенов необходимо предварительно разрушить К-антигены, что достигается кипячением культур. К капсульным антигенам относится так называемый Vi-антиген. Он обнаружен у брюшнотифозных и некоторых других энтеробактерий, обладающих высокой вирулентностью, в связи с чем данный антиген получил название антигена вирулентности.

Капсульные антигены полисахаридной природы выявлены у пневмококков, клебсиелл и других бактерий, образующих выраженную капсулу. В отличие от группоспецифических О-антигенов они часто характеризуют антигенные особенности определенных штаммов (вариантов) данного вида, которые на этом основании подразделяются на серовары. У сибиреязвенных бацилл капсульный антиген состоит из полипептидов.

Антигены бактериальных токсинов. Токсины бактерий обладают полноценными антигенными свойствами в том случае, если они являются растворимыми соединениями белковой природы.

Ферменты, продуцируемые бактериями, в том числе факторы патогенности, обладают свойствами полноценных антигенов.

Протективные антигены. Впервые обнаружены в экссудате пораженной ткани при сибирской язве. Они обладают сильно выраженными антигенными свойствами, обеспечивающими иммунитет к соответствующему инфекционному агенту. Протективные антигены образуют и некоторые другие микроорганизмы при попадании в организм хозяина, хотя эти антигены не являются их постоянными компонентами.

Антигены вирусов. В каждом вирионе любого вируса содержатся различные антигены. Одни из них являются вирусспецифически-ми. В состав других антигенов входят компоненты клетки хозяина (липиды, углеводы), которые включаются в его внешнюю оболочку. Антигены простых вирионов связаны с их нуклеокапсидами. По своему химическому составу они принадлежат к рибонуклеопротеидам или дезоксирибонуклеопротеидам, которые являются растворимыми соединениями и поэтому обозначаются как S-антигены (solutio-раствор). У сложноорганизованных вирионов одни антигенные компоненты связаны с нуклеокапсидами, другие - с гликопротеидами внешней оболочки. Многие простые и сложные вирионы содержат особые поверхностные V-антигены - гемагглютинин и фермент нейраминидазу. Антигенная специфичность гемагглютинина у разных вирусов неодинакова. Данный антиген выявляется в реакции гемагглютинации или ее разновидности - реакции гемадсорбции. Другая особенность гемагглютинина проявляется в антигенной функции вызывать образование антител - антигемашпотининов и вступать с ними в реакцию торможения гемагглютинации (РТГА).

Вирусные антигены могут быть группоспецифическими, если они обнаруживаются у разных видов одного и того же рода или семейства, и типоспецифическими, присущими отдельным штаммам одного и того же вида. Эти различия учитываются при идентификации вирусов.

Наряду с перечисленными антигенами в составе вирусных частиц могут присутствовать антигены клетки хозяина. Так, например, вирус гриппа, выращенный на аллантоисной оболочке куриного эмбриона, реагирует с антисывороткой, полученной к аллантоисной жидкости. Этот же вирус, взятый из легких инфицированных мышей, реагирует с антисывороткой к легким данных животных и не реагирует с антисывороткой к аллантоисной жидкости.

Гетерогенные антигены (гетероантигены). Общие антигены, обнаруженные у представителей различных видов микроорганизмов, животных и растений, называют гетерогенными. Например, гетерогенный антиген Форсмана содержится в белковых структурах органов морской свинки, в эритроцитах барана и сальмонеллах.

Существование общих гетероантигенов у животных и паразитирующих в их организме микроорганизмов можно рассматривать как следствие антигенной мимикрии паразита, т.е. способности разных патогенных микроорганизмов маскироваться в организме за счет общих антигенов. В результате подобной маскировки клетки иммунной системы организма недостаточно активно отвечают синтезом антител на инфекцию данными патогенными агентами.

Перекрестно реагирующие антигены (ПРА) обнаружены у ряда микроорганизмов и в тканях человека. К нимотносится антиген слизистой оболочки кишечника человека, в частности у больных язвенным колитом, и общий антиген энтеробактерий. Гемолитические стрептококки группы А содержат ПРА, общие с аутоантигенами миокарда и клубочков почек, с чем связывают их способность провоцировать ревмокардит и гломерулонефрит. ДНК-содержащие вирусы и ядра клеток организма человека также несут в себе ПРА. Для паразита ПРА играют защитную роль, для организма хозяина они могут стать пусковым механизмом аутоиммунного заболевания.

Антигены организма человека

Все ткани и клетки организма человека обладают антигенными свойствами. Одни антигены специфичны для всех млекопитающих, другие видоспецифичны для человека, третьи - для отдельных групп, их назвают изоантигенами (например, антигены групп крови). Антигены, свойственные только данному организму, называют аллоантигенами (греч. аллос - другой). К ним относятся антигены тканевой совместимости - продукты генов главного комплекса тканевой совместимости МНС (Major Histocompatibiliti Complex), свойственные каждому индивидууму. Антигены разных лиц, не имеющие отличий, называют сингенными. Органы и ткани помимо других антигенов обладают специфичными для них органными и тканевыми антигенами. Антигенным сходством обладают одноименные ткани человека и животных. Существуют стадиоспецифические антигены, появляющиеся и исчезающие на отдельных стадиях развития тканей или клеток. Каждая клетка содержит антигены характерные для наружной мембраны, цитоплазмы, ядра и других компонентов.

Антигены каждого организма в норме не вызывают в нем иммунологических реакций, поскольку организм к ним толерантен. Однако при определенных условиях они приобретают признаки чужеродности и становятся аутоантигенами, а возникшую против них реакцию называют аутоиммунной.

Антигены опухолей и противоопухолевый иммунитет. Клетки злокачественных опухолей представляют собой варианты нормальных клеток организма. Поэтому им свойственны антигены тех тканей, из

которых они произошли, а также антигены, специфичные для опухоли и составляющие малую долю всех антигенов клетки. В ходе канцерогенеза происходит дедифференцировка клеток, поэтому может происходить утрата некоторых антигенов, появление антигенов, свойственных незрелым клеткам, вплоть до эмбриональных (фетопротеины). Антигены, свойственные только опухоли, специфичны только для данного вида опухоли, а нередко для опухоли у данного лица. Опухоли, индуцированные вирусами, могут иметь вирусные антигены, одинаковые у всех опухолей, индуцированных данным вирусом. Под влиянием антител у растущей опухоли может меняться ее антигенный состав.

Лабораторная диагностика опухолевой болезни включает выявление антигенов, свойственных опухоли в сыворотках крови. Для этого в настоящее время медицинская промышленность готовит диагностические наборы, содержащие все необходимые ингредиенты для выявления антигенов при иммуноферментном, радиоиммунном, иммунолюминесцентном анализе.

Резистентность организма к опухолевому росту обеспечивается действием естественных киллерных клеток, которые составляют 15% всех лимфоцитов, постоянно циркулирующих в крови и всех тканях организма. Естественные киллеры (ЕК) обладают способностью отличать любые клетки, имеющие признаки чужеродности, в том числе опухолевые, от нормальных клеток организма и уничтожать чужеродные клетки. При стрессовых ситуациях, болезнях, иммунодепрессивных воздействиях и некоторых других ситуациях число и активность ЕК снижаются и это служит одной из причин начала опухолевого роста. В ходе развития опухоли ее антигены вызывают иммунологическую реакцию, но она, как правило, недостаточна для остановки опухолевого роста. Причины этого явления многочисленны и недостаточно изучены. К ним относятся:

низкая иммуногенность опухолевых антигенов вследствии их близости к нормальным антигенам организма, к которым организм толерантен;

развитие толерантности вместо позитивного ответа;

развитие иммунного ответа по гуморальному типу, тогда как подавить опухоль могут только клеточные механизмы;

иммунодепрессивные факторы, вырабатываемые злокачественной опухолью.

Химио и радиотерапия опухолей, стрессовые ситуации при хирургических вмешательствах могут быть дополнительными факторами, снижающими иммунную защиту организма. Меры по повышению уровня противоопухолевой резистентности включают использование иммуностимулирующих средств, препаратов цитокинов, стимуляцию иммуноцитов пациента in vitro с возвратом в русло крови больного.

Изоантигены. Это антигены, по которым отдельные индивидуумы или группы особей одного вида различаются между собой.

В эритроцитах, лейкоцитах, тромбоцитах, а также в плазме крови людей открыто несколько десятков видов изоантигенов.

Изоантигены, генетически связанные, объединены в группы, получившие названия: система ЛВО, резус и др. В основе деления людей на группы по системе АВО лежит наличие или осутствие на эритроцитах антигенов, обозначенных А и В. В соответствии с этим все люди подразделены на 4 группы. Группа I (0) - антигены отсутствуют, группа II (А) - в эритроцитах содержится антиген А, группа

III (В) - эритроциты обладают антигеном В, группа IV (АВ) - эритроциты обладают обоими антигенами. Поскольку в окружающей среде имеются микроорганизмы, обладающие такими же антигенами (их называют перекрестнореагирующими), у человека имеются антитела к этим антигенам, но только к тем, которые у него отсутствуют. К собственным антигенам организм толерантен. Следовательно, в крови лиц I группы содержатся антитела к антигенам А и В, в крови лиц II группы - анти-В, в крови лиц III группы - анти-А, в крови лиц

IV группы антитела к А и Вантигенам не содержатся. При переливании крови или эритроцитов реципиенту, в крови которых содержатся антитела к соответствующему антигену, в сосудах происходит агглютинация перелитых несовместимых эритроцитов, что может вызвать шок и гибель реципиента. Соответственно люди I (0) группы именуются универсальными донорами, а люди IV (АВ) группы - универсальными реципиентами. Кроме антигенов А и В эритроциты человека могут обладать и другими изоантигенами (М, М2, N, N2) и др. К этим антигенам нет изоантител, и следовательно, их присутствие не учитывается при переливании крови.

Антигены главного комплекса тканевой совместимости. Помимо антигенов, свойственных всем людям и групповых антигенов, каждый организм обладает уникальным набором антигенов, свойственных только ему самому. Эти антигены кодируются группой генов, находящихся у человека на 6 хромосоме, и называются антигенами главного комплекса тканевой совместимости и обозначаются МНС-антигены (англ. Major histocompatibility complex). МНС-антигены человека впервые были обнаружены на лейкоцитах и поэтому имеют другое название HLA (Human leucocyte antigens). МНС-антигены относятся к гликопротеинам и содержатся на мембранах клеток организма, определяя его индивидуальные свойства и индуцируют трансплантационные реакции, за что они получили третье название - трансплантационные антигены. Кроме того, МНС-антигены играют обязательную роль в индукции иммунного ответа на любой антиген.

Гены МНС кодируют три класса белков, из которых два имеют прямое отношение к работе иммунной системы и рассматриваются ниже, а в число белков III класса входят компоненты комплемента, цитокины группы ФНО, белки теплового шока.

Белки I класса находятся на поверхности практически всех клеток организма. Они состоят из двух полипептидных цепей: тяжелая ацепь нековалентно связана со второй рцепью. ацепь существует в трех вариантах, что определяет разделение антигенов класса на три серологические группы А, В и С. Тяжелая цепь обуславливает контакт всей структуры с мембраной клеток и ее активность. Рцепь представляет собой микроглобулин одинаковый для всех групп. Каждый антиген I класса обозначается латинской буквой и порядковым номером данного антигена.

Антигены I класса обеспечивают представление антигенов цитотоксическим С08+лимфоцитам, а распознавание этого антигена антигенпредставляющими клетками другого организма при трансплантации приводит к развитию трансплантационного иммунитета.

МНС антигены II класса находятся преимущественно на антигенпредставляющих клетках - дендритных, макрофагах, Влимфоцитах. На макрофагах и Влимфоцитах их экспрессия резко увеличивается после активации клетки. Антигены II класса подразделяются на 5 групп, в каждой из которых имеется от 3 до 20 антигенов. В отличие от антигенов I класса, которые выявляются в серологических тестах с помощью сывороток, содержащих антитела к ним, антигены II класса лучше всего выявляются в клеточных тестах - активации клеток при совместном культивировании испытуемых клеток со стандартными лимфоцитами.

Дата публикования: 2015-02-03 ; Прочитано: 11029 | Нарушение авторского права страницы

studopedia.org - Студопедия.Орг - 2014-2020 год. Студопедия не является автором материалов, которые размещены. Но предоставляет возможность бесплатного использования (0.003 с) .

ЭКЗАМЕНАЦИОННЫЕ ВОПРОСЫ

1. Классификация ДНК-содержащих вирусов.

2. Взаимодействие вирусов при смешанных инфекциях.

3. Химический состав вирусов, значение и функции нуклеиновой кислоты и белка в онтогенезе вирусов.

4. Взаимодействие клеточных и гуморальных механизмов защиты при формировании противовирусного иммунитета.

5. Устойчивость вирусов к физико-химическим факторам.

6. Противовирусные препараты и химиотерапия вирусных инфекций.

7. Открытие вирусов. Периоды развития вирусологии.

8. Морфология и строение вирусов. Внутриклеточные включения - характеристика, классификация, диагностическое значение. Определить местонахождение вирусов на микрофотографиях.

9. Структура вирусов.

10. Этапы развития вирусных инфекций, связь их патогенеза с фазами внутриклеточной репродукции вирусов.

11. Методы лабораторной диагностики вирусных инфекций.

12. Условия и особенности возникновения вирусных инфекций.

13. Распространение вирусов и пути заражения животных.

14. Классификация РНК-содержащих вирусов.

15. Взаимодействие вирусов с клеткой организма по типу острой инфекции (фаза инфицирования).

16. Взаимодействие вирусов с клеткой организма по типу острой инфекции (фаза экспрессии вирусного генома).

17. Природа вирусов и происхождение вирусов.

18. Место вирусов в биосфере. Экология вирусов.

19. Основные свойства вирусов, позволяющие отличить их от бактерий и других микроорганизмов.

20. Генетическая организация вирусного генома. Генетические признаки вирусов.

21. Наследственность и изменчивость вирусов. Виды изменчивости вирусов

22. Антигенная структура вирусов, изменение антигенных свойств и плюрализм вирусов. Назовите виды вирусов, которым свойственен плюрализм.

23. Предмет, достижения и задачи вирусологии. Проблемы вирусологии, требующие решения в ближайшие годы.

24. Клеточные механизмы противовирусного иммунитета.

25. Основы современной классификации вирусов.

26. Противоопухолевой иммунитет.

27. Взаимодействие вирусов с клеткой организма по типу латентной, онкогенной и медленной инфекции. Механизм интеграции ДНК - и РНК-содержащих вирусов с геномом клетки (указать виды вирусов со слабо и интенсивно выраженной способностью к интеграции). Персистенция.

28. Клеточные механизмы противовирусной защиты.

29. Типы и особенности приготовления противовирусных вакцин. Преимущества и недостатки различных типов вакцин. Принципы получения вакцинных штаммов.

30. Гуморальные механизмы противовирусного иммунитета.

31. Гуморальные механизмы противовирусной защиты.

32. Онкогенные вирусы: основные виды, репродукция, биологические особенности.

33. Автономный тип взаимодействия вирусов с клеткой.

34. Интеграционный тип взаимодействия вирусов с клеткой.

35. Средства пассивной профилактики и экстренной терапии вирусных болезней. Диагностические препараты. Принципы получения, практическое значение.

36. Определение понятия “титр вируса”, методы титрования вирусов.

37. Титрование иммунных сывороток (определение понятия “титр сыворотки”, реакции для титрования сывороток).

38. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

39. Реакция гемадсорбции (РГАд). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

40. Использование световой микроскопии в вирусологической практике (цель, методы, значение для диагностики). Обнаружить вирионы осповакцины в демонстрационных препаратах под микроскопом.

41. Биологический метод исследования в вирусологии (назначение, виды лабораторных животных, их чувствительность к вирусам различных видов, методы экспериментального заражения).

42. Взятие крови от животных, получение сыворотки, плазмы, эритроцитов, лейкоцитов.

43. Реакция связывания комплемента (РСК). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

44. Реакция задержки гемагглютинации (РЗГА). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

45. Культивирование вирусов в развивающихся куриных эмбрионах. Требования, предъявляемые к РКЭ, методы заражения. Методика вскрытия РКЭ. (Продемонстрировать экзаменатору метод заражения РКЭ на ХАО).

46. Реакция задержки гемадсорбции (РЗГАд). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

47. Вирусоскопический метод исследования. Индикация телец-включений (определить тельца-включения Бабеша-Негри в стандартных препаратах).

48. Вода, солевые растворы и питательные среды, применяемые для культивирования клеток, требования, предъявляемые к посуде при вирусологических исследованиях.

49. Реакция иммунодиффузии (РИД). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки. (Приготовить агаровый гель, определить положительный и отрицательный результат РИД).

50. Реакция гемагглютинации (РГА). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки. (Определить положительный и отрицательный результат РГА, поставленной в планшетах).

51. Виды клеточных культур. Получение культуры клеток методом первичной трипсинизации из органов и тканей клеток животных и птиц.

52. Заражение культур клеток. ЦПД вирусов (формы, особенности проявления при острой, латентной и онкогенной инфекции).

53. Правила написания сопроводительной записки. Написать сопроводительную записку на отправку исследуемого материала (в соответствии с вирусной болезнью указанной в вопросе №3);

54. Взятие, пересылка и обработка вируссодержащего материала с применением антибиотиков перед заражением куриных эмбрионов, лабораторных животных и культур клеток (продемонстрировать экзаменатору метод обработки вируссодержащего материала).

55. Устройство люминесцентного микроскопа (показать и объяснить назначение составных частей).

56. Метод флуорохромирования (сущность, техника выполнения, практическое значение).

57. Иммуноферментный анализ (гистохимический вариант). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

58. Реакция нейтрализации (РН) (идентификация специфических антител). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

59. Реакция нейтрализации (РН) (идентификация вирусного антигена). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

60. Фильтры и методы фильтрования, применяемые с целью освобождения вируссодержащего материала от бактерий. (Осуществить фильтрование вируссодержащего материала через фильтр Зейтца).

61. Техника безопасности и правила работы в вирусологическом отделе лаборатории. Структура, устройство и оборудование лаборатории. Документация лаборатории.

62. Иммуноферментный анализ (твёрдофазный вариант). Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

63. Устройство электронного микроскопа. Техника электронной микроскопии. Приготовление препаратов для электронно-микроскопического исследования.

64. Перевиваемые линии и штаммы клеток. Получение перевиваемой культуры клеток. Их преимущество по сравнению с первичной культурой клеток.

65. Полимеразная цепная реакция. Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, преимущества и недостатки.

66. Иммунохроматографический метод. Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

67. Иммуноблотинг. Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

68. ДНК-зонды и их применение для диагностики вирусных болезней. Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

69. Реакция иммунофлуоресценции. Назначение, сущность, варианты постановки, компоненты и оборудование, техника постановки, учет реакции, интерпретация результатов, преимущества и недостатки.

70. Схема вирусологического исследования при вирусных болезнях.

71. Вирус парагриппа-3 крупного рогатого скота.

72. Вирус диареи крупного рогатого скота.

73. Вирус аденовирусной инфекции крупного рогатого скота.

74. Вирус злокачественной катаральной горячки крупного рогатого скота.

75. Вирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней.

76. Вирус болезни Марека.

77. Вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота.

79. Вирус чумы плотоядных.

80. Вирус болезни Ауески.

81. Вирус гриппа сельскохозяйственных животных и птиц.

82. Вирус классической чумы свиней.

83. Вирус респираторно-синцитиальной инфекции крупного рогатого скота.

84. Вирус энзоотического энцефаломиелита свиней.

85. Вирус энзоотического лейкоза крупного рогатого скота.

86. Вирус инфекционного бронхита кур.

87. Вирус инфекционной бурсальной болезни.

88. Вирус миксоматоза кроликов.

89. Вирус африканской чумы свиней.

90. Вирус алеутской болезни норок.

91. Вирус оспы млекопитающих и птиц.

92. Вирус Ньюкаслской болезни.

93. Вирус инфекционного ларинготрахеита кур.

94. Вирус бешенства.

95. Вирус геморрагической болезни кроликов.

96. Вирус парвовирусной инфекции свиней.

97. Вирус репродуктивно-респираторного синдрома свиней.

98. Возбудитель скрепи.

99. Возбудитель спонгиоформной энцефалопатии крупного рогатого скота.

100. Вирус инфекционной анемии лошадей (ИНАН)

101. Вирус чумы крупного рогатого скота и мелких жвачных животных

102. Вирус ротавирусной инфекции телят и поросят

103. Вирусы болезней свиней с везикулярным синдромом (возбудитель везикулярного стоматита, везикулярной болезни свиней и везикулярной экзантемы свиней).