Наставление по применению туберкулинов для диагностики туберкулеза

Наставление
по применению туберкулинов для аллергической диагностики туберкулеза у млекопитающих и птиц
(утв. Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 9 февраля 1978 г. взамен наставлений от 10 декабря 1970 г. и от 30 июля 1973 г.)

1. Для аллергической диагностики туберкулеза у сельскохозяйственных и других животных (включая птиц) применяют стандартные альттуберкулин для млекопитающих, сухой очищенный (ППД - протеин пурифиед дериват) туберкулин для млекопитающих и сухой очищенный (ППД) туберкулин для птиц.

Альттуберкулин для млекопитающих имеет вид прозрачной, просвечивающейся в проходящем свете, слегка маслянистой, коричневого или темно-коричневого цвета жидкости с характерным запахом без осадка, хлопьев и других примесей.

Сухие очищенные (ППД) туберкулины имеют вид пористой аморфной массы светло-коричневого цвета с сероватым оттенком.

Растворитель сухих очищенных (ППД) туберкулинов представляет собой стерильную бесцветную прозрачную жидкость с легкой опалесценцией.

2. Туберкулины и растворитель для сухих очищенных туберкулинов выпускают в ампулах или флаконах. Ампулы должны быть запаяны, а флаконы плотно закрыты пробками, закатаны алюминиевыми колпачками и упакованы в коробки.

Ампулы (флаконы) с растворителем вкладывают в каждую коробку с сухим очищенным туберкулином.

На каждой коробке должна быть этикетка с указанием наименования и товарного знака биопредприятия, изготовившего препарат, наименования препарата, даты его изготовления, номеров серии и госконтроля, срока годности, количества ампул (флаконов) в коробке, количества препарата в ампуле (флаконе), условий хранения, обозначения стандарта (ГОСТа) и номера ТУ.

На каждой ампуле (флаконе) должно быть указано наименование препарата и номер серии.

В каждую коробку должно быть вложено наставление по применению туберкулинов.

Срок годности альттуберкулина для млекопитающих - 5 лет, сухих очищенных (ППД) туберкулинов - 3 года со дня изготовления при хранении в условиях, указанных в этикетках на коробках с препаратами.

3. Каждую ампулу (флакон) с туберкулином и растворителем перед применением просматривают. При обнаружении в препаратах каких-либо примесей, плесени, хлопьев, при нарушении целостности стекла или укупорки, отсутствии надписи на ампуле (флаконе) их выбраковывают.

Препараты используют только в день вскрытия ампул (флаконов).

4. Для внутрикожного введения туберкулина используют специальные иглы для внутрикожных инъекций с двойной трубкой из нержавеющей стали (МРТУ 46-84-62) или иглы N 0612 и шприцы с бегунком емкостью 1-2 мл или безыгольные инъекторы. Для нанесения туберкулина на конъюнктиву глаза применяют глазные пипетки.

Инструменты, используемые для туберкулинизации, не разрешается применять для введения животным других веществ.

Шприцы, иглы и глазные пипетки перед и после их использования стерилизуют кипячением в течение 10 минут в дистиллированной или кипяченой воде без добавления дезинфицирующих веществ. Безыгольные инъекторы стерилизуют в соответствии с наставлением по их применению.

Во время туберкулинизации животных инъекционные иглы сменяют перед каждым наполнением шприца туберкулином, а в паузах между инъекциями препарата конец шприца с иглой держат в ватном тампоне, смоченном 70%-ным этиловым спиртом.

5. Для диагностики туберкулеза применяют:

у млекопитающих животных (кроме свиней и обезьян) - сухой очищенный (ППД) туберкулин или альттуберкулин для млекопитающих;

у свиней - одновременно сухие очищенные (ППД) туберкулины для млекопитающих и для птиц;

у обезьян - сухой очищенный (ППД) туберкулин для млекопитающих;

у птиц - сухой очищенный (ППД) туберкулин для птиц.

6. Туберкулинизации подвергают животных начиная с 2-месячного возраста.

Не разрешается исследовать туберкулинами животных в течение 3 недель после вакцинации их против инфекционных болезней.

7. Сухие очищенные (ППД) туберкулины непосредственно перед применением растворяют специальным растворителем, высылаемым биопредприятием вместе с препаратом.

При проведении туберкулинизации животных (кроме свиней и обезьян) с использованием шприца с иглой или безыгольного инъектора марки "Овод" содержимое одной ампулы (флакона) с ППД-туберкулином для млекопитающих растворяют в одной ампуле (флаконе) растворителя. При пользовании безыгольным инъектором марки ИБВ-01 в одной ампуле (флаконе) растворителя растворяют содержимое двух ампул (флаконов) с туберкулином.

Для проведения туберкулинизации свиней в одной ампуле (флаконе) растворителя растворяют содержимое двух ампул (флаконов) с ППД-туберкулином для птиц, в другой ампуле (флаконе) растворителя - содержимое одной ампулы (флакона) с туберкулином для млекопитающих.

Для туберкулинизации птиц содержимое ампулы (флакона) с ППД-туберкулином для птиц растворяют в одной ампуле (флаконе) растворителя.

Для туберкулинизации обезьян содержимое одной ампулы (флакона) с ППД-туберкулином для млекопитающих растворяют в одной ампуле (флаконе) растворителя, затем 1 мл этого раствора смешивают с 49 мл растворителя (0,1 мл - в 4,9 мл).

8. Туберкулинизацию животных разрешается проводить только ветеринарным врачам и ветеринарным фельдшерам со специальным средним образованием под контролем ветврача.

Внутрикожный метод туберкулинизации

9. Туберкулин вводят внутрикожно:

крупному рогатому скоту, буйволам, зебу, зебувидному скоту, оленям (маралам) в области средней трети шеи;

свиньям - в области наружной поверхности уха в двух сантиметрах от его основания (с одной стороны головы вводят ППД-туберкулин для млекопитающих, с другой - ППД-туберкулин для птиц);

козам, овцам, собакам, обезьянам и пушным зверям (кроме норок) - в области внутренней поверхности бедра или локтевой складки;

норкам - интрапальпебрально в верхнее веко;

верблюдам - в кожу брюшной стенки в области паха на уровне горизонтальной линии седалищного бугра;

курам - в бородку;

индейкам - в подчелюстную сережку;

гусям, уткам - в подчелюстную складку;

фазанам, павлинам, попугаям, голубям, журавлям, цаплям, аистам, фламинго - в области наружной стороны голеностопного сустава, выше его на 1-2 см.

10. Перед введением туберкулина шерсть в месте инъекции выстригают (перья выщипывают), кожу обрабатывают 70%-ным этиловым спиртом.

Вводить туберкулин в кожу, имеющую травматические повреждения, а также уплотнения или абсцессы, поражения грибками, клещами, гельминтами, запрещается.

11. Туберкулины применяют в объеме 0,2 мл млекопитающим животным (кроме обезьян и норок) и 0,1 мл - обезьянам, норкам и птицам. При исследовании крупного рогатого скота и буйволов с помощью безыгольного инъектора марки ИБВ-01 туберкулин животным вводят в объеме 0,1 мл.

12. Учет и оценку реакции на внутрикожное введение туберкулина проводят у крупного рогатого скота, буйволов, зебу, зебувидного скота, верблюдов и оленей через 72 часа после введения препарата; у коз, овец, свиней, собак, обезьян, пушных зверей - через 48 часов; у птиц - через 30-36 часов.

13. У животных реакция в месте инъекции туберкулина проявляется в виде разлитого отека тестоватой или мягкой консистенции, не имеющей, как правило, четких границ с окружающей тканью. Образование отека сопровождается повышением местной температуры, гиперемией и болезненностью воспаленного участка кожи. У некоторых животных реакция проявляется в виде появления плотной, безболезненной, отчетливо контурированной припухлости.

14. При учете внутрикожной реакции у каждого исследуемого животного пальпируют место введения туберкулина, при интрапальпебральном введении препарата (норкам) сравнивают веки левого и правого глаза.

При обнаружении изменений в коже в месте введения туберкулина у крупного рогатого скота, буйволов, зебу, зебувидных, верблюдов, оленей измеряют кутиметром толщину кожной складки в миллиметрах и определяют величину ее утолщения сравнением с толщиной складки неизмененной кожи вблизи места введения туберкулина.

15. Животных считают реагирующими на туберкулин:

крупный рогатый скот, буйволов, зебу, зебувидных, верблюдов и оленей - при утолщении кожной складки на 3 мм и более (независимо от характера реакции);

коз, овец, свиней, собак, обезьян, пушных зверей, кур и других птиц - при образовании припухлости в месте введения туберкулина, норок - при опухании века.

Глазной метод туберкулинизации

16. Глазную туберкулиновую пробу (офтальмопробу) применяют для диагностики туберкулеза у лошадей. В отдельных случаях эту пробу допускается применять у крупного рогатого скота одновременно с внутрикожной пробой.

Глазную туберкулинизацию проводят двукратно с интервалом в 5-6 дней между первым и повторным введением туберкулина. Препарат в количестве 3-5 капель наносят пипеткой на конъюнктиву нижнего века или на поверхность роговицы при оттянутом нижнем веке. При различных поражениях глаза и его конъюнктивы исследование животных офтальмопробой не разрешается.

17. Учет результатов реакции на туберкулин проводят через 6, 9, 12 и 24 часа после первого и через 3, 6, 9 и 12 часов после повторного введения туберкулина.

Реакция на туберкулин характеризуется выделением из внутреннего угла глаза слизисто-гнойного или гнойного секрета, накапливающегося вначале в конъюнктивальном мешке, а затем вытекающего в виде шнура. Одновременно наблюдается гиперемия конъюнктивы, а при сильной реакции и отек ее. При учете реакции необходимо внимательно осматривать конъюнктивальный мешок.

Порядок проведения исследования

18. Исследование животных на туберкулез методом туберкулинизации проводят в порядке и сроки, предусмотренные инструкцией о мероприятиях по профилактике и ликвидации туберкулеза животных, утвержденной Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР.

19. На проведение туберкулинизации составляют акт, а при исследовании крупного рогатого скота, буйволов, зебу, зебувидных, верблюдов и оленей, кроме того, составляют опись исследованных животных.

В описи указывают наименование населенного пункта, вид животных и их владельцев (колхоз, совхоз, граждане и т.д.), а также инвентарный номер или кличку животного, гол, возраст, у реагирующих животных - величину утолщения кожной складки и характер реакции на туберкулин.

Откройте актуальную версию документа прямо сейчас или получите полный доступ к системе ГАРАНТ на 3 дня бесплатно!

Если вы являетесь пользователем интернет-версии системы ГАРАНТ, вы можете открыть этот документ прямо сейчас или запросить по Горячей линии в системе.

Наставление по применению туберкулинов для аллергической диагностики туберкулеза у млекопитающих и птиц (утв. Главным управлением ветеринарии Минсельхоза СССР 9 февраля 1978 г. взамен наставлений от 10 декабря 1970 г. и от 30 июля 1973 г.)

Текст наставления опубликован в сборнике "Ветеринарное законодательство". Том III. - М.: Колос, 1981 г.

СБОРНИК основных инструкций и наставлений по борьбе с болезнями сельскохозяйственных животных - НАСТАВЛЕНИЕ по применению туберкулинов для диагностики туберкулеза у животных

***

НАСТАВЛЕНИЕ
по применению туберкулинов для диагностики туберкулеза у животных

(Утверждено Управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 22 ноября 1962 г. взамен наставления по применению туберкулина для диагноcтики туберкулеза у сельскохозяйственных животных и наставления по применению туберкулина для диагностики туберкулеза у птицы от 4 февраля 1958 г., временного наставления по применению сухого туберкулопротеина от 26 февраля 1958 г. и временного наставления по применению сухого очищенного туберкулина для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота от 25 апреля 1958 года)

1. Для диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота, буйволов, свиней, коз, овец, лошадей, собак, обезьян и пушных зверей применяют обычный или сухой очищенный туберкулин (туберкулопротеин).

Для диагностики туберкулеза у птиц (кур, индеек, гусей, уток) применяют птичий туберкулин.

2. Обычный туберкулин представляет собой стерильный, выпаренный до 1/10 первоначального объема, фильтрат убитой туберкулезной культуры бычьего типа, имеющий вид прозрачной, темно-бурой жидкости вязкой консистенции, обладающий специфическим запахом.

Сухой очищенный туберкулин (туберкулопротеин) — аморфная масса желтоватого оттенка, состоящая из осажденных белков фильтрата туберкулезной культуры, выращенной на безбелковой синтетической среде.

Птичий туберкулин является аналогом туберкулина, но готовится из штаммов возбудителя птичьего туберкулеза. По внешнему виду это жидкость темно-коричневого цвета.

Срок годности бычьего и птичьего туберкулинов — 5 лет, туберкулопротеина — 2 года со дня выпуска биофабрикой при условии хранения в темном, прохладном, сухом помещении.

3. Туберкулопротеин непосредственно перед применением разводят специальным разбавителем, высылаемом биофабрикой. Ампулы с разбавителем и наставлением по применению туберкулопротеина вкладывают в каждую коробку.

Каждую ампулу с туберкулином и туберкулопротеином перед применением просматривают. При обнаружении в них каких-либо примесей, плесени, хлопьев, трещин стекла, отсутствии этикетки ампулы выбраковывают. Использование остатка туберкулина или туберкулопротеина из открытых ампул на следующий день не разрешается. Жидкие туберкулины, подвергавшиеся замораживанию, применять не разрешается.

4. Туберкулин вводят животным внутрикожно или на конъюнктиву глаза. Внутрикожным и глазным методом туберкулинизации исследуют крупный рогатый скот и буйволов. При одновременном исследовании этими методами достигается более полное выявление больных животных.

Лошадей исследуют методом глазной туберкулинизации; свиней — внутрикожным, но одновременно двумя туберкулинами — бычьим и птичьим; молодняк крупного рогатого скота, овец, коз, собак, обезьян, птицу и пушных зверей исследуют методом внутрикожной туберкулинизации.

5. Для внутрикожного введения туберкулина используют тонкие иглы № 32 и шприцы с бегунком, емкостью 1 или 2 мл. Для нанесения туберкулина на конъюнктиву глаза применяют обычные глазные пипетки.

Шприцы, иглы и пипетки стерилизуют кипячением в воде без добавления дезинфицирующих средств.

6. Исследование животных на туберкулез путем туберкулинизации проводят в порядке и сроки, предусмотренные инструкцией о мероприятиях по борьбе с туберкулезом животных.

ВНУТРИКОЖНЫЙ МЕТОД ТУБЕРКУЛИНИЗАЦИИ

7. Туберкулин или туберкулопротеин вводят: взрослому крупному рогатому скоту — в кожу средней трети шеи, телятам — в область лопатки, козам — в под-хвостовую складку, свиньям — в кожу тыльной поверхности каждого уха. ближе к его основанию, овцам, собакам и обезьянам — в кожу внутренней бесшерстной поверхности бедра или плеча и пушным зверям — в кожу верхнего века одного из глаз.

Курам туберкулин вводят в одну из бородок, индейкам — в подкрыльцевую складку или подчелюстную сережку, гусям и уткам — в одну из подчелюстных складок.

Вводить туберкулин в кожу, имеющую травматические повреждения (уплотнения или абсцессы, поражения грибками, клещами, гельминтами), запрещается.

Исследовать методом внутрикожной туберкулинизации истощенных коров, овец, коз, обезьян и собак, а также всех животных за один месяц до родов и 3 недель после родов и всех вакцинированных животных против какого-либо инфекционного заболевания до истечения 2 недель с момента прививки не разрешается.

8. Туберкулин и разведенный туберкулопротеин при меняется в дозе по 0,2 мл независимо от вида и возраста животных, а птице — в дозе по 0,.1 мл.

Повторно туберкулин (туберкулопротеин) вводят только тем животным, которые не реагировали на его первое введение.

9. У крупного рогатого скота и буйволов, больных туберкулезом, специфическая реакция на туберкулин обычно начинает проявляться через 18—20 часов после его введения и достигает максимума через 48—72 часа. Она проявляется на месте инъекции туберкулина в виде разлитого отека тестоватой консистенции, не имеющей, как правило, четких границ с окружающей тканью. Образование отека сопровождается повышением местной температуры, гиперемией и болезненностью воспаленного участка кожи. Интенсивность проявления указанных признаков зависит от давности и характера инфекционного процесса, а также от общего состояния животного. При плохой упитанности или генерализованном туберкулезном процессе реакция может быть слабо выражена или совсем отсутствовать.

Реакцию учитывают по наличию указанных признаков, а также по результатам измерения толщины кожной складки на месте введения туберкулина.

При наличии указанных признаков воспаления и утолщении кожной складки не менее чем на 7 мм при применении обычного туберкулина и не менее чем на 3 мм при применении туберкулопротеина реакция считается положительной.

При наличии тех же признаков воспаления, но выраженных менее отчетливо, и утолщении кожной складки менее 7 мм при применении обычного туберкулина и менее 3 мм при применении туберкулопротеина реакция считается сомнительной. При отсутствии отека или других воспалительных явлений на месте введения туберкулина или при образовании плотной, холодной ограниченной припухлости кожи реакцию признают отрицательной.

Учет и оценку реакции после первого введения туберкулина проводят через 48 часов. Положительно реагировавших животных признают больными и изолируют, а остальных повторно проверяют через 72 часа и реагировавших положительно также признают больными и изолируют.

Животным, у которых реакция была отрицательной или сомнительной, вводят туберкулин вторично через 72 часа после первого введения в тот же участок кожи и повторно учитывают реакцию. При отсутствии положительно и сомнительно реагирующих животных, при учете реакции через 48 часов после первого введения туберкулина, повторное введение туберкулина разрешается проводить через 48 часов, т. е. сразу же после первого учета реакции.

Учет и оценку реакции на повторное введение туберкулина проводят через 24 часа.

10. Животных, давших сомнительную реакцию и на вторичное введение туберкулина, изолируют и через 30—45 дней исследуют повторно методами двойной внутрикожной и двойной глазной туберкулинизации.
"Животных, давших положительную реакцию на один из указанных методов исследования, признают больными туберкулезом.

11. У коз и овец учет и оценку реакции после первого введения туберкулина проводят через 48—72 часа, а после повторного — через 24 часа. Образование на месте введения туберкулина разлитой, тестоватой отечности величиной не менее 3—5-копеечной монеты считается положительной реакцией. При наличии плотной, ограниченной, незначительной припухлости реакция считается сомнительной, а при отсутствии изменений на месте инъекции туберкулина — отрицательной.

12. У свиней реакцию учитывают через 48 и 72 часа. Положительная реакция характеризуется образованием на месте введения туберкулина отечной припухлости, величиной от двухкопеечной монеты и более, повышением местной температуры, появлением болезненности и гиперемии. У здоровых животных кожа на месте введения туберкулина не изменяется. Вторично туберкулин свиньям вводят через 72 часа.

У собак реакцию учитывают через 24 и 48 часов. Положительной реакцией считают образование болезненной, разлитой отечности. При отсутствии изменений на месте введения туберкулина собак признают по туберкулезу здоровыми.

14. Обезьянам туберкулин перед введением дополнительно разводят физиологическим раствором или дистиллированной водой в соотношении 1:1—1:2. Реакцию учитывают через 24—48 часов. При образовании на месте введения туберкулина разлитой болезненной отечности реакцию считают положительной.

15. У пушных зверей реакция проявляется через 24—48 часов после введения туберкулина и удерживается до 72—96 часов. Положительная реакция характеризуется отеком века и прикрытием глаза до 3/4, слезотечением, выделением гноя.

Реакцию учитывают через 24 и 48 часов. При слабо выраженном отеке, прикрытии глазного яблока на 1/4 реакцию считают сомнительной, а при отсутствии изменений — отрицательной. Звери, реагировавшие сомнительно, подлежат повторному исследованию через 1 месяц.

16. Все виды птицы исследуют птичьим туберкулином. Учет реакции проводят через 24 и 48 часов после первого введения туберкулина и через 24 часа после второго. Повторно туберкулин вводят через 96 часов.

Положительная реакция характеризуется заметным диффузноотечным опуханием бородки (подчелюстной складки, сережки), которая становится тестообразной, отвисающей и горячей на ощупь. При незначительном опухании бородки реакция считается сомнительной. У здоровой птицы никаких изменений на месте введения туберкулина не наблюдается.

ГЛАЗНОЙ МЕТОД ТУБЕРКУЛИНИЗАЦИИ

17. Методом глазной туберкулинизации исследуют на туберкулез крупный рогатый скот, буйволов и лошадей.

При наличии механического загрязнения или воспалительных процессов в конъюнктиве и оболочках глаза проводить исследование животных не разрешается.

Туберкулин или туберкулопротеин наносят пипеткой на слизистую оболочку нижнего века или на поверхность глаза при оттянутом нижнем веке в дозе по 3—5 капель.

18. У животных, больных туберкулезом, реакция на первое введение туберкулина проявляется через 3—6 и длится до 15—24 часов.

Учет реакции должен проводиться через 3, б, 9, 12 и 24 часа после введения туберкулина.

Положительная реакция характеризуется выделением из внутреннего угла глаза слизисто-гнойного или гнойного секрета, накапливающегося вначале в конъюнктивальном мешке отдельными круглыми образованиями и нитями, а затем вытекающего в виде шнурка. Одновременно наблюдается обильное слезотечение, гиперемия и набухание конъюнктивы. При сильной реакции отекшая конъюнктива выступает над краем века и на склере глаза виден студенистый инфильтрат.

При первичном введении туберкулопротеина признаки реакции могут быть выражены слабее. Поэтому для правильного учета результатов туберкулинизации веки животного необходимо раскрыть и определить характер и интенсивность воспалительных реакций на конъюнктиве.

При образовании только слизистого секрета, слабо выраженной гиперемии и незначительного отека конъюнктивы реакция считается сомнительной.

Кратковременная гиперемия и слезотечение с образованием небольшого количества слизистого секрета, а равно отсутствие каких-либо изменений считается отрицательной реакцией.

19. Животных, положительно реагировавших на туберкулин, признают больными туберкулезом и изолируют, а всех реагировавших сомнительно и отрицательно исследуют тем же методом повторно через 5—6 дней. При этом туберкулин вводят в тот же глаз и в той же дозе. В результате сенсибилизации реакция у больных наступает раньше, сохраняется менее продолжительно и выражена обычно более резко. Учет результатов повторной туберкулинизации необходимо проводить через 3, б, 9 и 12 часов после введения туберкулина.

1. Пункт 8 наставления изложить, в следующей редакции:

«Туберкулин и разведенный туберкулопротеин применяется в дозе 0,2 мл независимо от вида и возраста животных, а птице и норкам — в дозе 0.1 мл.

2. Пункт 16 наставления изложить в следующей редакции:

«Все виды птиц исследуют птичьим туберкулином. Учет реакции проводят однократно через 30—36 часов после введения туберкулина.

Дубовой Б.Л., Полякова О.Н. ГНУ СКЗНИВИ, г. Новочеркасск

Туберкулез причиняет огромный экономический ущерб и представляет большую опасность для здоровья людей. Пер­востепенной задачей в противотуберкулезных мероприяти­ях является своевременная диагностика, ранее выявление источника возбудителя инфекции.

Прижизненная диагностика аллергическими исследованиями запоздалая и не выявляет животных в первые дни, и даже месяцы после их заражения. Поэтому, требуются более чувствительные мето­ды, которые позволяют выявить этиологию аллергического процесса при туберкулезе.[2]

Для дифференциации неспецифических туберкулиновых реак­ций используют симультанную пробу с аллергенами - ППД для млеко­питающих и КАМ, изготовленных из нескольких штаммов атипичных микобактерий.[1, 5, 6] Симультанную аллергическую пробу применя­ют при первичной постановке диагноза на туберкулин в благополуч­ных хозяйствах и в случае, если реакции на туберкулин обусловлены атипичными микобактериями и кислотоустойчивыми сапрофитами.[4] Также прибегают к комиссионному контрольно-диагностическому убою животных с реакцией на внутрикожное введение туберкулина, для уточнения диагноза патологоанатомическими, бактериологичес­кими исследованиями и биопробой.

Однако владельцы высокоудойных коров оспаривают право­мерность контрольно-диагностического убоя животных, давших по­ложительную реакцию на туберкулиновую пробу, и требуют прижиз­ненных способов диагностики для дополнительного исследования высокопродуктивных животных на туберкулез. Поэтому кроме симультанной аллергической пробы, патологоанатомических осмотров и лабораторных исследований, эпизоотологического обследования хозяйств, анализа динамики проявления аллергических реакций у различных групп животных, для изучения неспецифических туберку­линовых реакций у крупного рогатого скота и дифференциации их от специфических используют клеточные реакции ин витро - реакцию бласттрансформации лимфоцитов и специфического лизиса лейкоци­тов и другие реакции.

В нашем исследовании для выявления причин неспецифичес­ких туберкулиновых реакций использовали реакцию специфического лизиса лейкоцитов в сопоставлении с патологоанатомическими изме­нениями.

Постановку РСЛЛ выполняли в модификации Б.Л. Дубового.

Целью исследований явилось выявление причин неспецифичес­ких реакций, связанных с дифференциальной диагностикой туберку­леза, вызванного разными видами микобактерий, что имеет большое ветеринарно-санитарное, эпизоотическое и хозяйственное значение.

Выявление инфицированных микобактериями и больных ту­беркулезом животных реакцией специфического лизиса лейкоцитов (РСЛЛ) in vitro основана на явлении немедленно появляющейся повы­шенной чувствительности лейкоцитов к повторному контакту с антиге­ном (аллергеном) вне организма [3].

В производственных условиях испытания РСЛЛ для возможной диагностики туберкулеза выполняли в базовых хозяйствах Ростовской области. Так на ранее благополучной ферме восемь коров реагирова­ли на туберкулин. Их подвергли контрольно-диагностическому убою. При ветеринарно-санитарной экспертизе патологоанатомических из­менений во внутренних органах и лимфатических узлах визуально не обнаружили. Бактериологические исследования патматериала в Рос­товской областной лаборатории были отрицательными.

Перед убоем у коров взяли кровь для проведения реакции спе­цифического лизиса лейкоцитов (РСЛЛ). Результаты исследований по количеству лейкоцитов и показателям РСЛЛ в пробах крови представ­лены в таблице.

Таблица. Количество лейкоцитов, показатели РОЛЛ и патологоанатомические изменения у прореагировавших на туберкулин коров.

Как видно из таблицы, во всех пробах крови с ППД-туберкулином для млекопитающих реакция специфического лизиса лейкоцитов была отрицательной, что свидетельствует об отсутствии инфицирова­ния их M. bovis.

В пробах крови четырех убитых коров реакция специфического лизиса лейкоцитов была положительна с ППД-туберкулином для птиц. Лизис лейкоцитов в пробах был 11%, 20%, 22%, 26%, что указывает на инфицирование животных M. avium.

В пробах крови четырех животных получен положительный ре­зультат РСЛЛ с КАМ. Процент лизиса лейкоцитов составил 11%, 13%, 15%, 20%, что связано с инфицированием животных при жизни ати­пичными микобактериями.

Таким образом, выполненные исследования крови с туберкулинами вне организма от животных с положительными туберкулиновы­ми пробами позволяют в короткие сроки выявить истинные причины, вызвавшие сенсибилизацию организма к туберкулину, и, главное, делают возможным исключить необоснованный убой высокопродук­тивных животных. Возможность применения способа диагностики in vitro неспецифически туберкулиновых реакций непосредственно в условиях хозяйств будет способствовать широкому применению ал­лергенов различной природы в качестве средств дифференциальной диагностики специфических и неспецифических туберкулиновых ре­акций.

Предлагаемый способ диагностики неспецифических туберкули­новых реакций рекомендуем использовать в бла­гополучных по туберкулезу хозяйствах. Для этого от всех животных, давших положительную реакцию на внутрикожное введение туберкулина, берут кровь и исследуют ее вне организма с имеющимися туберкулинами, что позволяет выявить этиологию туберкулиновых реакций, вызванных микобактериями различных видов.

1. Верховский, О.А. Диагностическое значе­ние реакций клеточного иммунитета при туберкуле­зе крупного рогатого скота / О.А. Верховский, А.Х. Найманов, О.А. Савицкая // Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии живот­ных. Материалы международной научно-практи­ческой конференции Москва, 16-17 мая, 2006. - М.; ИзографЪ, 2006. - С.180-186.
2. Дубовой, Б.Л. Новое в дифференциальной диагностике туберкулеза сельскохозяйственных животных / Б.Л. Дубовой, О.Н. Соловьева, Н.В. Улько // Сборник научных трудов "Диагностика, про­филактика и лечение при инфекционных болезнях сельскохозяйственных животных".- Персиановский, 2000. - С.8-12.
3. Дубовой, Б.Л. Исследования специфичности и активности РСЛЛ при диагностике туберкулеза крупного рогатого скота / Б.Л. Ду­бовой, О.Н. Полякова // Инновационный путь развития АПК-магист­ральное направление научных исследований для сельского хозяйства. - Персиановский, 2007. - С.67-69.
4. Найманов, А.Х. Дифференциация аллергических реакций на туберкулин / А.Х. Найманов // Ветеринария. - 2002. - N°3.- С.10-12.
5. Наставление по проведению симультанной пробы с примене­нием туберкулина комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ) при диагностике туберкулеза животных. Ветеринарное законодательство. Т. 3, М.: "Колос", 1981.- С.220-224
6. Эпизоотологический контроль и постановка диагноза на тубер­кулез у животных разных видов. Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных. Сборник санитарных и ветеринарных правил. Изд. Официальное. Госкомсанэпиднадзор Рос­сии. Минсельхозпром России. Москва, 1996.- С. 164 - 167.

Требуются более чувствительные методы, которые позволяют выявить этиологию аллергического процесса при туберкулезе. Для определения этиологии неспецифических туберкулиновых реакций в благополучных хозяйствах использовали ППД-туберкулин для птиц и КАМ вне организма с кровью животных, реагирующих на тубер­кулин для млекопитающих. Показано, что РСЛЛ можно использовать для дифференциации специфических и неспецифических реакций на туберкулин.

Ключевые слова: диагностика, туберкулез, реакция специфи­ческого лизиса лейкоцитов (РСЛЛ).

DIAGNOSTICS OF UNSPECIFIC REACTIONS TO TUBERCULINE CAUSED BY ATYPICAL AND AVIAN MYCOBACTERIES Dubovoi B.L., Polyakova O.N. Summary

More sensitive methods that can detect the etiology of allergic process at tuberculosis are required. PPD-tuberculin for birds and CAM outside the body with the blood of animals, reacting to tuberculin for mammals, were used to determine the etiology of nonspecific tuberculin reactions in wealthy economies. It is founded the RSLL can be used for the differentiation both of specific and unspecific reactions to tuberculine.

Key words: diagnostics, tuberculosis, reaction of specific lysis of leucocytes (RSLL).

About the authors

Dubovoy Boris L. - D. Sc. in Veterinary Medicine, professsor, chief of infectious diseases of farming animals and poultry research laboratory of the State scientific establishment "North Caucasian zonal veterinary research institute" of Russian Academy of agricultural sciences; 6/4. Veterinarnaya st., Novocherkassk, Rostov region, 394400; Tel.89281360864.

Responsible for correspondence with the editorial board: Polyakova Olga N.- post-graduate student of the State scientific establishment "North Caucasian zonal veterinary research institute" of Russian Academy of agricultural sciences; 28, Sadovaya st., Novocherkassk, Rostov region, 394406; Tel.89287549422

Сведения об авторах

Дубовой Борис Лаврентьевич, доктор ветеринарных наук, про­фессор, заведующий лабораторией по изучению инфекционных болезней сельскохозяйственных животных и птицы ГНУ "Северо­Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт" Российской академии сельскохозяйственных наук; 394400, Ростовская область, г. Новочеркасск, ул. Ветеринарная, д.4, кв.6; тел.: 89281360864.

Ответственный за переписку с редакцией : Полякова Ольга Николаевна, аспирант ГНУ "Северо-Кавказский зональный науч­но-исследовательский ветеринарный институт" Российской ака­демии сельскохозяйственных наук; 394406, Ростовская область, г. Новочеркасск, ул. Садовая, д.28; тел.: 89287549422.