Набор ифа для определения аскарид

Аскариды – крупные нематоды. Самцы могут достигать 25 см в длину, самки – до 40 см. По различным данным, аскаридозом заражено около 1,27 млрд человек, или примерно 1/4 населения, во всем мире. Ascaris lumbricoides – вид аскарид, очень важный для медицины человека, так как это единственный вид, для которого организм человека является основным хозяином. Половозрелые нематоды живут в тонком кишечнике. В день самки откладывают до 200 000 яиц, которые выделяются в окружающую среду с калом. Инфекционные личинки развиваются внутри яиц, и после проглатывания вылупливаются в верхнем отделе тонкого кишечника. Они проникают в стенку кишечника и попадают в венозную кровь, с которой они проникают в печень и легкие, где они покидают сосуды и проникают в альвеолы. Личинка мигрирует в трахею и через глотку при проглатывании возвращается в тонкий кишечник. Там происходит созревание до стадии взрослой особи нематоды. Приблизительно через 10-12 недель после инфестации нематоды выделяются с калом. Взрослая нематода живет около 18 месяцев. Человеческая аскарида (Ascaris lumbricoides) является одним из наиболее распространенных патогенных возбудителей инфекционных заболеваний в мире. Дети поражаются чаще, чем взрослые. Заражение приводит к аскаридозу, в основном с латентным развитием. Мигрирующие личинки могут приводить к воспалительной эозинофильной инфильтрации легких и вызывать кашель, одышку и легкую лихорадку. Скопления нематод могут вызывать закупорку кишечника. Если нематоды мигрируют в желчный пузырь, поджелудочную железу или желудок, это приводит к развитию соответствующих клинических симптомов.

Описание

Наборы Ascaris lumbricoides IgG ELISA каталожные номера 16548HRP - 48 определений и 16596HRP - 96 определений, предназначены для качественного определения антител класса IgG к человеческой аскариде (Ascaris lumbricoides) в сыворотке или плазме человека, методом твердофазного иммуноферментного анализа.

Принцип работы набора

Качественное иммуноферментное определение антител к человеческой аскариде (Ascaris lumbricoides) основано на методе твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA). На лунки стрипов титрационного микропланшета уже нанесены антигены аскариды (Ascaris lumbricoides) для связывания соответствующих антител образца. После промывания лунок для удаления несвязанного материала образца добавляют конъюгат антител к IgG человека, меченых пероксидазой хрена (HRP). Этот конъюгат связывается с удержанными специфическими антителами к аскариде. Иммунный комплекс, образованный связанным конъюгатом, визуализируется посредством добавления субстрата тетраметилбензидина (ТМБ), который в результате реакции даёт продукт синего цвета. Интенсивность данного продукта пропорциональна количеству специфических антител к аскариде в образце. Реакцию останавливают добавлением фосфорной кислоты, что приводит к окрашиванию в жёлтый цвет. Оптическую плотность определяют на длине волны 450 нм с помощью микропланшетного ридера.

Состав набора

Набор реагентов Ascaris lumbricoides IgG ELISA на 48 или 96 определений. В набор входят стрипы покрытые антигеном Ascaris lumbricoides, коньюгат антител к IgG к аскариде, промывочный буфер, ТМБ субстрат, стоп-раствор, буфер для разведения, положительный контроль, пороговый контроль, отрицательный контроль.

Аналитические характеристики набора

Специфичность диагностического метода составляет > 90%. Чувствительность диагностического метода составляет 95%. Продолжительность исследования 1час 45 минут, небольшой инкубационный период (60 мин/30 мин/15 мин). 10 мкл сыворотки или плазмы на каждый тест. Система обнаружения (OD 450nm/620nm). Готовые к использованию реагенты с цветной кодировкой. Ломкие стрипы для микротитрования. Объём набора 48 или 96 определений. Хранение при температуре 2-8°C. Сроки годности до двух лет. Логотип CE.

Клинические значения

В клиническом течении аскаридоза выделяют две фазы - раннюю (миграционную) и позднюю (кишечную). Основными клиническими признаками аскаридоза являются симптомы поражения лёгких (сухой кашель, одышка, боли в груди), субфебрильная температура, уртикарные высыпания, зуд, недомогание, слабость, головные боли, эозинофилия до 20 - 30%, гиперлейкоцитоз. В хронической фазе аскаридоза возникают тошнота, дисфункция кишечника, боли в животе, нарушение сна. Возможные осложнения аскаридоза: панкреатит, аппендицит, кишечная непроходимость. Лабораторная диагностика кишечной стадии аскаридоза основана на обнаружении яиц аскарид при анализе кала на яйца глист или взрослых аскарид в фекалиях после диагностической дегельминтизации. Но уже в ранней (миграционной или личиночной) стадии можно диагностировать аскаридоз с помощью иммунологического исследования – определения специфических антител к аскаридам. Хотя диагноз не может быть поставлен на основании только одного серологического тестирования, результаты следует рассматривать вместе с анамнезом и клинической симптоматикой, но ранняя серологическая диагностика позволяет начать терапию до появления осложнений заболевания. У пациентов с иммунодефицитами и новорожденных серологические данные имеют ограниченное значение. Кроме того, данный анализ помогает оценить эффективность лечения аскаридоза.


Новые наборы для экспресс-диагностики геморрагической лихорадки с почечным синдромом Ханта-IgМ-экспресс-БЕСТ и Ханта-IgG-экспресс-БЕСТ more

ID] => 2363 [TIMESTAMP_X] => 18.06.2019 09:49:14 [

TIMESTAMP_X] => 18.06.2019 09:49:14 [MODIFIED_BY] => 9321 [

MODIFIED_BY] => 9321 [DATE_CREATE] => 18.06.2019 09:49:14 [

DATE_CREATE] => 18.06.2019 09:49:14 [CREATED_BY] => 9321 [

CREATED_BY] => 9321 [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [

IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [SORT] => 4800 [

SORT] => 4800 [NAME] => Аскаридоз [

NAME] => Аскаридоз [PICTURE] => [

PICTURE] => [LEFT_MARGIN] => 95 [

LEFT_MARGIN] => 95 [RIGHT_MARGIN] => 96 [

RIGHT_MARGIN] => 96 [DEPTH_LEVEL] => 3 [

DEPTH_LEVEL] => 3 [DESCRIPTION] => [

DESCRIPTION] => [DESCRIPTION_TYPE] => text [

DESCRIPTION_TYPE] => text [SEARCHABLE_CONTENT] => АСКАРИДОЗ [

SEARCHABLE_CONTENT] => АСКАРИДОЗ [CODE] => [

SOCNET_GROUP_ID] => [LIST_PAGE_URL] => /prod/index.php [

LIST_PAGE_URL] => /prod/index.php [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2363 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2363 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

EXTERNAL_ID] => [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) [PATH] => Array ( [0] => Array ( [ID] => 2316 [

ID] => 2316 [CODE] => root_ifa [

CODE] => root_ifa [XML_ID] => [

EXTERNAL_ID] => [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => [

IBLOCK_SECTION_ID] => [SORT] => 100 [

SORT] => 100 [NAME] => Иммуноферментная диагностика [

NAME] => Иммуноферментная диагностика [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [DEPTH_LEVEL] => 1 [

DEPTH_LEVEL] => 1 [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2316 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2316 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) ) [1] => Array ( [ID] => 2357 [

EXTERNAL_ID] => [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => 2316 [

IBLOCK_SECTION_ID] => 2316 [SORT] => 4200 [

SORT] => 4200 [NAME] => Паразитарные инвазии [

NAME] => Паразитарные инвазии [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [DEPTH_LEVEL] => 2 [

DEPTH_LEVEL] => 2 [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2357 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2357 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) ) [2] => Array ( [ID] => 2363 [

EXTERNAL_ID] => [IBLOCK_ID] => 17 [

IBLOCK_ID] => 17 [IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [

IBLOCK_SECTION_ID] => 2357 [SORT] => 4800 [

SORT] => 4800 [NAME] => Аскаридоз [

NAME] => Аскаридоз [ACTIVE] => Y [

ACTIVE] => Y [DEPTH_LEVEL] => 3 [

DEPTH_LEVEL] => 3 [SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2363 [

SECTION_PAGE_URL] => /prod/index.php?SECTION_ID=2363 [IBLOCK_TYPE_ID] => products [

IBLOCK_TYPE_ID] => products [IBLOCK_CODE] => catalog [

IBLOCK_CODE] => catalog [IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [

IBLOCK_EXTERNAL_ID] => [GLOBAL_ACTIVE] => Y [

GLOBAL_ACTIVE] => Y [IPROPERTY_VALUES] => Array ( ) ) ) ) [SECTIONS_COUNT] => 0 )


№ по каталогу Наименование и краткое описание Количество определений
D-3452

Набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к антигенам Ascaris lumbricoides в сыворотке (плазме) крови.

1 набор реагентов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов класса G к антигену Ascaris lumbricoides в сыворотке крови человека Аскарида-IgG-ИФА-Бест D-3452 инструкция по применению набор реагентов D

5 конъюгат, концентрат (прозрачная жидкость синего цвета) 1 фл., 1,5 мл; раствор для предварительного разведения сывороток (РПРС; прозрачная жидкость малинового цвета) 1 фл., 10 мл; раствор для разведения сывороток (РРС; прозрачная жидкость зеленого цвета) 1 фл., 28 мл; концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Т 25; прозрачная бесцветная жидкость, допускается выпадение осадка солей) 1 фл., 28 мл; субстратный буферный раствор (СБР; прозрачная бесцветная жидкость) 1 фл., 13 мл; тетраметилбензидин, концентрат (ТМБ; прозрачная бесцветная или светло-желтого цвета жидкость) 1 фл., 1 мл; стоп-реагент (прозрачная бесцветная жидкость) 1 фл., 12 мл; липкая пленка 2 шт.; пластиковая ванночка для реагентов 2 шт.; наконечники для пипеток 16 шт.; инструкция по применению 1шт.; планшет для предварительного разведения исследуемых образцов 1 шт. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Возможен перекрест иммунологических реакций при заболеваниях описторхозом, токсокарозом, трихинеллезом и эхинококкозом, что D

8 запрещается использовать реагенты из наборов других фирм-производителей; не проводите ИФА в присутствии паров кислот, щелочей, альдегидов или пыли, которые могут менять ферментативную активность конъюгатов; используйте стеклянную посуду, тщательно вымытую и ополоснутую дистилли рован ной водой, или (предпочтительно) одноразовую посуду; не допускайте высыхания стрипов в перерыве между завершением промывки и внесением реагентов; ферментативная реакция чувствительна к присутствию ионов металлов, поэтому не допускайте контактов каких-либо металлических предметов с конъюгатом и раствором субстрата; избегайте загрязнения компонентов набора микроорганизмами и химическими примесями, для этого используйте в работе чистую посуду и чистые одноразовые наконечники для каждого реагента, контроля, образца; необходимо следить за состоянием промывочного устройства регулярно обрабатывайте шланги и емкости 70% этиловым спиртом; рабочие поверхности столов, оборудования следует обрабатывать 70% этиловым спиртом (не допускается использование перекиси водорода, хлорсодержащих растворов); никогда не используйте одну и ту же емкость для приготовления конъюгата и рабочего 8 D-3452

9 раствора ТМБ; обращаем Ваше особое внимание на то, что малейшее, даже не видимое глазом загрязнение пипеток раствором конъюгата может привести к контаминации всего содержимого флаконов с СБР и ТМБ, поэтому необходимо протирать рабочую поверхность стола и конус пипетки (внутреннюю и внешнюю поверхности) 70% этиловым спиртом перед внесением ТМБ в СБР; проверяйте пипетки и другое оборудование на точность и правильность работы; не изменяйте протокол исследования; если допущена ошибка при внесении анализируемых образцов, нельзя, опорожнив эту лунку, вносить в нее новый образец; такая лунка бракуется. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ: спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения оптической плотности растворов в лунках стрипов в двухволновом режиме при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне нм и/или при длине волны 450 нм; воздушный термостат, поддерживающий температуру (37±1) С; промывочное устройство для планшетов; холодильник бытовой; пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным или фиксированным объемом со сменными D

10 наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости от 5 до 5000 мкл (погрешность не более 5%); пипетки полуавтоматические многоканальные со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкостей до 300 мкл (погрешность не более 5%); перчатки резиновые хирургические; бумага фильтровальная лабораторная; флаконы стеклянные вместимостью 15 мл; цилиндр мерный 2-го класса точности вместимостью 100 мл и 1000 мл; колба вместимостью 1000 мл; вода дистиллированная. 6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 6.1. Образцы крови у обследуемых лиц в количестве не менее 0,5 мл отбирают из вены или из пальца натощак Образцы сыворотки (плазмы) крови можно хранить при температуре от 2 до 8 С не более 5 суток при условии отсутствия микробной контаминации или при температуре минус 20 С (и ниже) не более 3 мес. Следует избегать многократного замораживания / оттаивания, так как это может привести к получению неправильных результатов. После размораживания образцы следует тщательно перемешать Образцы сывороток (плазмы) крови, содержащие осадок, необходимо очистить центрифугированием при об/мин в течение 5 мин при температуре от 18 до 25 С. 10 D-3452

11 6.4. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированную, мутную сыворотку крови Следует обратить внимание на точное дозирование и тщательное перемешивание сывороток с раствором, используемым для их разведения. От соблюдения этих требований зависит точность и воспроизводимость результатов анализа. 7. ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ 7.1. Перед работой извлечь набор из холодильника, вскрыть упаковку и выдержать все компоненты набора, в том числе запечатанный пакет с планшетом, и образцы сывороток (плазмы) при температуре от 18 до 25 С не менее 60 мин ПРАВИЛА РАБОТЫ ПРИ ДРОБНОМ ИСПОЛЬЗОВАНИИ НАБОРА Растворы из флаконов отбирать только одноразовыми наконечниками для пипеток После отбора части содержимого флаконы сразу плотно закрыть завинчивающимися крышками, поместить в холодильник и хранить при 2 8ºС в течение всего срока годности ПОДГОТОВКА ПЛАНШЕТА Вскрыть пакет выше замка и установить на рамку необходимое для проведения анализа D

12 Таблица расхода компонентов набора реагентов Количество одновременно используемых стрипов Рабочий раствор ФСБ-Т ФСБ-Т, концентрат, мл Вода дистил., мл Рабочий раствор конъюгата Конъюгат, концентрат, мл Рабочий раствор ФСБ-Т, мл Рабочий раствор ТМБ ТМБ, концентрат, мл СБР, мл 1 2,0 до 50 0,1 1,0 0,05 1,0 2 4,0 до 100 0,2 2,0 0,10 2,0 3 6,0 до 150 0,3 3,0 0,15 3,0 4 8,0 до 200 0,4 4,0 0,20 4,0 5 10,0 до 250 0,5 5,0 0,25 5,0 6 12,0 до 300 0,6 6,0 0,30 6,0 7 14,0 до 350 0,7 7,0 0,35 7,0 8 16,0 до 400 0,8 8,0 0,40 8,0 9 18,0 до 450 0,9 9,0 0,45 9, ,0 до 500 1,0 10,0 0,50 10, ,0 до 550 1,1 11,0 0,55 11, ,0 до 600 1,2 12,0 0,60 12,0 12 D-3452

13 количество стрипов. Оставшиеся неиспользованные стрипы немедленно поместить вновь в пакет с влагопоглотителем, удалить из него воздух, плотно закрыть замок и поместить в холодильник. Хранение: при температуре от 2 до 8 С в течение срока годности набора ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО ФОСФАТНО- СОЛЕВОГО БУФЕРНОГО РАСТВОРА С ТВИНОМ Рабочий раствор ФСБ-Т приготовить разведением исходного концентрата фосфатносолевого буферного раствора с твином в 25 раз. Для этого в соответствии с числом используемых стрипов (см. таблицу расхода компонентов набора реагентов) внести в мерный цилиндр необходимое количество концентрата ФСБ-Т и довести до соответствующего объема дистиллированной водой. При выпадении осадка солей в концентрате необходимо прогреть его при температуре (30 40) С до полного растворения осадка. Хранение: не более 5 суток при 2 8 С ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РАСТВОРА КОНЪЮГАТА В соответствии с числом используемых стрипов (см таблицу расхода компонентов) отобрать в чистый флакон или в пластиковую ванночку для реагента необходимое количество рабочего D

14 раствора ФСБ-Т и добавить соответствующее количество концентрата конъюгата. Хранение: не более 3 часов при С ПРИГОТОВЛЕНИЕ РАБОЧЕГО РАСТВОРА ТЕТРАМЕТИЛБЕНЗИДИНА Внимание! Рекомендуется выделить наконечники для пипеток, которые использовать только для работы с тетраметилбензидином. Посуду и наконечники для пипетки, контактирующие с раствором ТМБ, нельзя отмывать с применением синтетических моющих средств, поскольку даже их следы ведут к неконтролируемому разложению ТМБ в ходе реакции. После работы посуду и наконечники ополоснуть водой, промыть 70% этиловым спиртом и тщательно отмыть дистиллированной водой. В соответствии с числом используемых стрипов (см. таблицу расхода компонентов) в отдельный чистый флакон или в пластиковую ванночку для реагента внести необходимое количество СБР, добавить соответствующее количество концентрата ТМБ, тщательно перемешать. Допустимо голубое окрашивание рабочего раствора ТМБ, которое не оказывает влияния на результаты анализа. Хранение: не более 3 часов при С в темноте. 14 D-3452

15 7.7. ПОДГОТОВКА КОНТРОЛЬНЫХ ОБРАЗЦОВ Контрольные образцы готовы к использованию и не требуют дополнительного разведения ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ СЫВОРОТКИ (ПЛАЗМЫ) КРОВИ Исследуемые образцы сывороток (плазмы) крови предварительно развести в 10 раз раствором для предварительного разведения сывороток, используя стрипы дополнительного планшета. Для этого внести в лунки планшета для предварительного разведения исследуемых образцов по 90 мкл РПРС и добавить по 10 мкл исходной исследуемой сыворотки (плазмы), тщательно перемешать. При этом цвет раствора в лунках должен измениться с малинового на желтый. Если изменения цвета не произошло, результат анализа данной сыворотки может быть неправильным. Хранение: не более 3 часов при С. 8. ПРОВЕДЕНИЕ ИММУНОФЕРМЕНТНОГО АНАЛИЗА Внимание! В комплект набора входит пленка для заклеивания планшета при инкубации в термостате растворов сывороток и конъюгата. При использовании одного или нескольких стрипов следует отрезать полоску пленки нужного размера и клейкой стороной закрыть все лунки. При извлечении стрипов из термостата пленку удалить и поместить в дезинфицирующий раствор. D

16 Пленка предназначена для одноразового использования Внести контрольные образцы: 1 лунка 100 мкл К+; 2 лунки по 100 мкл К. Например, в лунки В-1 и С-1 внести по 100 мкл К. В лунку А мкл К+. В остальные лунки внести по 90 мкл раствора для разведения сывороток и по 10 мкл предварительно разведенных исследуемых сывороток (п. 7.7.), тщательно перемешать; таким образом, исследуемая сыворотка в лунке разбавляется в 100 раз. Внесение исследуемых сывороток для определения титра произвести в семи последовательных двукратных разведениях в интервале от 1:100 до 1: В лунки горизонтального ряда А внести по 200 мкл разведения 1:100 исследуемых сывороток, приготовленных, как описано выше. В лунки рядов B H внести по 100 мкл раствора для разведения сывороток. Каждую сыворотку титровать, перенося по 100 мкл раствора из лунок предыдущего ряда в лунки последующего от A до H, тщательно перемешать пипетированием. После раститровки из каждой лунки последнего ряда H удалить в сосуд с дезинфицирующим раствором по 100 мкл раствора, оставляя в лунках по 100 мкл. Планшет заклеить пленкой и инкубировать в термостате в течение 30 мин при температуре 37 С. 16 D-3452

17 8.2. По окончании инкубации снять липкую пленку и поместить ее в сосуд с дезинфицирующим раствором. Содержимое лунок удалить в сосуд с дезинфицирующим раствором и промыть лунки планшета 5 раз рабочим раствором ФСБ-Т (п. 7.4.) с помощью промывочного устройства. При этом в каждую лунку вносить не менее 400 мкл жидкости в процессе одного промывания. Время между заполнением и опорожнением лунок должно быть не менее 30 сек. Необходимо следить за полным опорожнением лунок после каждого цикла отмывки. По окончании промывки остатки влаги из лунок тщательно удалить, постукивая перевернутым планшетом по фильтровальной бумаге Внести во все лунки по 100 мкл рабочего раствора конъюгата (п. 7.5.). Планшет заклеить пленкой и инкубировать в течение 30 мин при температуре 37 С. Для внесения рабочего раствора конъюгата использовать пластиковую ванночку и одноразовые наконечники, входящие в состав набора По окончании второй инкубации удалить содержимое лунок и промыть стрипы 5 раз так, как указано в п Внести во все лунки по 100 мкл рабочего раствора тетраметилбензидина (п. 7.6.) и инкубировать в темноте в течение 25 мин при температуре от 18 до 25 С. Для внесения рабочего раствора тетраметилбензидина использовать пластиковую D

18 ванночку и одноразовые наконечники, входящие в состав набора Внести во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и рабочий раствор тетраметилбензидина, по 100 мкл стопреагента (при этом цвет раствора в лунках меняется на желтый). Внимание! Избегайте контакта с раствором ТМБ и стоп-реагента. В случае попадания на кожу рабочего раствора ТМБ или стоп-реагента необходимо немедленно смыть их водой с мылом. 9. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ Результаты ИФА регистрировать с помощью спектрофотометра, измеряя оптическую плотность в двухволновом режиме: основной фильтр 450 нм, референс-фильтр в диапазоне нм. Допускается измерение оптической плотности на одной длине волны 450 нм. Измерение проводить через 2 3 мин после остановки реакции. Время между остановкой реакции и измерением оптической плотности не должно превышать 5 мин. 18 D-3452

19 10. КРАТКАЯ СХЕМА ИФА Использовать только после тщательного ознакомления с инструкцией! Внести: по 100 мкл К+, К ; по 90 мкл РРС и по 10 мкл анализируемых образцов, предварительно разведенных в РПРС. Инкубировать: 30 мин, 37 С. Промыть: рабочий раствор ФСБ-Т, 400 мкл, 5 раз. Внести: по 100 мкл рабочего раствора конъюгата. Инкубировать: 30 мин, 37 С. Промыть: рабочий раствор ФСБ-Т, 400 мкл, 5 раз. Внести: по 100 мкл рабочего раствора тетраметилбензидина. Инкубировать: 25 мин, С, в темноте. Внести: по 100 мкл стоп-реагента Измерить: ОП при 450 нм / референсная длина волны нм. D

20 11. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ Рассчитать средние арифметические значения оптической плотности в лунках с отрицательным контрольным образцом; для каждой пары лунок, содержащих образцы исследуемых сывороток (плазмы) и последовательные разведения исследуемых сывороток (плазмы) крови Значение оптической плотности в лунке с положительным контрольным образцом должно быть не менее 1,0 ед. опт. плотн. Среднее значение оптической плотности в лунках с отрицательным контрольным образцом (ОП ср К ) должно быть не более 0,25 ед. опт. плотн Оценку результатов проводить при условии полного выполнения положений п На основании полученных данных вычислить диагностическое значение оптической плотности (ОП Д ) по формуле: ОП Д = ОП ср К + 0, Результат анализа считают положительным, если ОП обр ОП Д, где ОП обр среднее значение оптической плотности анализируемого образца в лунке, ед. опт. плотн. Результат анализа считают отрицательным, если ОП обр 21 ным и через 2 4 недели необходим повторный анализ вновь взятого образца сыворотки крови данного человека. Если оптическая плотность (ОП) второго анализа будет снова в серой зоне результат следует считать отрицательным В выявленных при скрининге положительных сыворотках следует определить титр антител для контроля лечения. За титр антител к антигенам аскарид принимают то наибольшее разведение исследуемой сыворотки, при котором ее оптическая плотность равна или превышает расчетное значение ОП Д Интерпретацию результатов ИФА анализа проводит лечащий врач с учетом клинических признаков и результата копрологии обследуемых лиц. Следует учитывать возможность перекреста иммунологических реакций при заболеваниях описторхозом, токсокарозом, трихинеллезом и эхинококкозом. Это может быть связано как с совместной инвазией, так и со взаимодействием антител с гетерологичным антигеном за счет иммунологических перекрестов между антигенами При динамическом наблюдении пациента для получения результатов, адекватно отражающих изменение концентрации IgG к антигенам Ascaris lumbricoides в крови, необходимо использовать наборы реагентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя). D

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Степанова Е.А., Якубовский М.В., Трус И.А.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Степанова Е.А., Якубовский М.В., Трус И.А.

Diagnostic efficacy of “IFA-hypoderma” kit for early diagnosis of Hypoderma spp. infection of cattle

The examined “IFA-hypoderma” kit for early recovery of antibodies to Hypoderma bovis and H. lineatum antigens allows to diagnos the disease at subclinic stage. The specificity and sensitivity values appear to be 99,13-100 and 96,55-100% respectively.

контаминированной онкосферами цестод, а в сельской местности и с сельскохозяйственными животными, шерсть которых нередко содержит инвазионные онкосферы. Распространение заболевания среди животноводов объясняется этими же причинами.

На основании приведенных данных об эхинококкозе в Волгоградской области мы считаем, что эхинококкоз можно считать краевым гельминтозом для данного региона.

Литература: 1. Бессонов А.С. Цистный эхинококкоз и гидатидоз. М., 2007.- 672с. 2. Бронштейн А.М., Малышев Н.А. и др. //Российский медицинский журнал. 2007. - № 2. - С. 33-36. 4. Ярулин Г.Р., Андреева В.С. и др. //Паразитические животные Волгоградской области. - Волгоград, 1969. -С. 3-61.

To the question of Echinococcus infection prevalence among population of the Volgograd Region. Stepanchuk N.A. Volgograd State University.

Summary. Echinococcus infection is rather spread in population of the Volgograd Region. The most number of cases is observed in agricultural areas. The geography of infection covers all natural-climatic zones and constitutes 71,3% of the region’s territory. One note infection in children of preschool age (2,73%).

Степанова Е.А., Якубовский М.В., Трус И.А.

Введение. Гиподерматоз крупного рогатого скота остается проблемой для Республики Беларусь. Сотрудниками нашего отдела на протяжении последних лет (2003-2009 гг.) постоянно проводятся изучение эпизоотической ситуации по гиподерматозу крупного рогатого скота в хозяйствах и на мясокомбинатах республики.

При сравнении динамики инвазирования крупного рогатого скота личинками подкожного овода в различные годы наблюдений, установлено, что средняя инвазированность животных личинками Hypoderma bovis в различные годы наблюдений изменяется незначительно. В 2003г. инвазированность личинками подкожного овода составила 4,18%, а к 2004 г. снизилась до 3,08%. В 2005 г. был зарегистрирован подъем инвазированности крупного рогатого скота личинками подкожного овода до 4,81%, тогда как в 2006 г. этот показатель был на уровне 1,98%, в 2007 г - 0,90 %, 2008- 2,00%. В 2009 г. личинками подкожного овода было инвазированно 1,94%

обследованного крупного рогатого скота с максимальным уровнем заражения в мае - июне (3,33 - 4,35%).

В последние годы в отделе паразитологии ведутся работы направленные на разработку методов ранней диагностики паразитарных заболеваний.

Целью наших исследований ставилась задача изучить диагностическую эффективность ранней иммунодиагностики гиподерматоза (ИФА).

Объем исследований составил: 944 иммунологических, 3540

клинических исследований, в опыте использовали 236 голов крупного рогатого скота.

В первой серии опыта для изучения эффективности ранней диагностики гиподерматоза крупного рогатого скота методом ИФА с использованием экспериментального образца антигена в хозяйствах Минского района подобрали 2 группы животных в количестве 24 и 52 голов предварительно не обработанных с профилактической целью противооводовыми препаратами. Формирование животных в группы провели на основании результатов аллергической диагностики гиподерматоза с использованием аллергена из личинок подкожного овода (ТУ 600049853.086-2006).

Сыворотки крови от исследуемых животных проверили в ИФА. В опыте использовали 76 сывороток крови от опытных групп животных, в качестве контроля использовали 5 сывороток крови здоровых коров, 3 сыворотки молодняка крупного рогатого скота гипериммунизированного гиподерматозным антигеном и эмбриональную сыворотку крови крупного рогатого скота.

Установлено, что при исследовании крови животных спонтанно инвазированных личинками подкожного овода в ИФА было выявлено 18 сывороток крови с превышением оптической плотности в 1,49-2,53 раза по сравнению с нормальной сывороткой (больные животные). У 58 образцов превышение оптической плотности по сравнению с нормальной сывороткой составило в 1,09-1,41 раза (здоровые животные).

Для подтверждения результатов иммуноферментного анализа и установления его диагностической эффективности (чувствительность и специфичность) в апреле-августе провели обследование животных на наличие клинических признаков заболевания гиподерматозом и сравнили их с данными, полученными при постановке иммуноферментного анализа.

Установлено, что у всех животных, отрицательно реагировавших в ИФА клинические признаки гиподерматоза выявлены не были (58 голов), тогда как у всех животных (17 голов) положительно реагировавших в ИФА при визуальном осмотре были обнаружены гиподерматозные желваки, с интенсивностью инвазии 1-8 личинки на животном.

Таким образом, установлено, что специфичность и чувствительность экспериментального образца антигена для выявления спонтанно инвазированного личинками подкожного овода крупного рогатого скота в ИФА при гиподерматозе крупного рогатого скота составила 100%.

Во второй серии опыта для определения эффективности ифа для ранней диагностики гиподерматоза с использованием опытного образца антигена также подобрали 2 группы животных в хозяйстве (1 группа - 121 животное), а также принадлежащих населению в минском районе (2 группа - 23 головы). Исследования проводились на животных спонтанно инвазированных личинками подкожного овода.

Установлено, что из 121 проб отобранных у животных 1 - группы в ИФА было выявлено 19 сывороток крови с превышением оптической плотности в 1,5-2,92 раза по сравнению с нормальной сывороткой (больные животные). У 104 образцов превышение оптической плотности по сравнению с нормальной сывороткой составило в 1,02-1,48 раза (здоровые животные). Из 23 проб отобранных у животных 2- группы в ИФА было выявлено 10 сывороток крови с превышением оптической плотности в 1,5-2,67 раза по сравнению с нормальной сывороткой (больные животные), тогда как, у 13 образцов превышение оптической плотности по сравнению с нормальной сывороткой составило в 1,08-1,49 раза (здоровые животные)

Для подтверждения результатов иммуноферментного анализа и установления его диагностической эффективности также как и в первой серии опыта, весной провели обследование животных на наличие клинических признаков заболевания.

У всех животных отрицательно реагировавших в ИФА клинические признаки гиподерматоза выявлены не были (115 голов). При обследовании животных положительно реагировавших в ИФА (29 голов) у 28 животных были выявлены гиподерматозные желваки с интенсивностью инвазии 1-8

личинки на голову, тогда как у одного животного клинических признаков гиподерматоза на протяжении всего периода наблюдения выявлено не было.

Diagnostic efficacy of “IFA-hypoderma” kit for early diagnosis of Hypoderma spp. infection of cattle. Stepanova E.A., Yakubovsky M.V., Trus I.A. S.N. Vishelevsky Institute of Experimental Veterinary Medicine (Republic of Byeloruss).

Summary. The examined “IFA-hypoderma” kit for early recovery of antibodies to Hypoderma bovis and H. lineatum antigens allows to diagnos the disease at subclinic stage. The specificity and sensitivity values appear to be 99,13100 and 96,55-100% respectively.

ВЛИЯНИЕ ПРИЖИЗНЕННЫХ ВЫДЕЛЕНИИ НЕМАТОД НА ГЕНОМ БЕЛЫХ КРЫС

Стибель В.В., Данко Н.Н., Сварчевский О.А.

Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологии им. С.З. Гжицкого

Введение. Аскаридоз, трихоцефалез и эзофагостомоз являются наиболее распространенными гельминтозами свиней и наносят значительные экономические убытки свиноводческим хозяйствам. При широком распространении аскаридоза, трихоцефалеза и эзофагостомоза у свиней, возможные изменения в наследственном аппарате соматических и генеративных клеток при данных паразитарных инвазиях, остаются малоизученными и составляют актуальность проблемы [1].

Материалы и методы. Исследования проведены на 72 белых крысах-самцах живой массой 120-140 г. Яйца от половозрелых аскарид, трихоцефал выделяли и культивировали до инвазионной стадии по методике, описанной Г.А.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции