Иммунологические методы диагностики гельминтозов у животных
Каких паразитов можно обнаружить в фекалиях?
Фауну пищеварительного тракта делят на две большие группы-простейшие кишечника и гельминты. На сегодняшний день известно более 250 возбудителей гельминтозов у человека; из них наиболее распространены около 50 видов. Паразитирующие в организме человека гельминты, в основном, представлены круглыми (класс Nematoda); плоскими червями (класс сосальщиков Trematoda и ленточных червей Cestoidea).
К представителям круглых червей относятся острицы, аскариды, трихинеллы; власоглав; ленточных– бычий, свиной и карликовый цепни, эхинококки, широкий лентец; сосальщиков - кошачья и печеночная двуустки.
В фекалиях могут быть обнаружены вегетативные стадии и цисты более 20 видов простейших, яйца и личинки многих видов гельминтов
Прямые методы позволяют непосредственно выявить гельминты, их фрагменты, личинки или яйца. При исследовании прямыми методами чаще всего используются фекалии.
Иммунологические (косвенные) методы диагностики основаны на обнаружении в сыворотке крови спецефических антител к антигенам тех или иных гельминтов и простейших. Для некоторых паразитов (лямблии, аскариды, анизакиды, описторхи) иммунологические методы применяются для оценки адекватности иммунного ответа на антигены, также, они могут быть и самостоятельными диагностическими тестами.
Для ряда гельминтов (токсокара, эхиннокок), яйца которых не обнаруживаются прямыми методами копрологической диагностики, иммунологические методы являются основными диагностическими тестами.
На результаты исследования влияет срок поступления и хранения материала. При подозрении на инфицирование некоторыми паразитами кал должен быть исследован немедленно, или в течении 30-40 минут после дефекации. Более оптимальным является исследование кала с применением специальных консервантов.
Современные методы паразитологической диагностики включают методы флотации, седиментации, комбинированные, с использованием концентраторов и консервантов для оптимального сохранения материала.
-Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов комплексным методом
-Исследование кала на простейшие без использования консерванта
-Исследование кала на простейшие (с использования консерванта)
-Исследование кала на яйца гельминтов методом Като
-Микроскопическое исследование отпечатков с поверхности кожи перианальных складок на яйца остриц
-Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов комбинированным гельминтоовоскопическим методом
-Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов комплексным методом с использованием концентратора Parasep
Правила подготовки к исследованию кала
- Кал собирают на протяжении 3 дней ежедневно (при дефекации каждый день) или через день (при запоре и опорожнении кишечника не ежедневно)
-Кал забирают ложечкой из контейнера (на кончике ложечки) из нескольких мест, общий ежедневный объем кала должен быть приблизительно с горошину, помещают в контейнер, перемешивают круговыми движениями, до исследования кал сохраняют в темном прохладном месте (не в холодильнике!) –оптимально на полу в туалетной комнате
-перед исследованием (за 1-2 дня) не рекомендуется употреблять в пищу грибы, печень, большое количество грубой клетчатки
-после приема масляных клизм должны пройти несколько суток
-в случае лечения антибиотиками широкого спектра действия кал для исследования рекомендуется собирается через 7-10 дней после окончания приема препаратов
-жидкий стул следует собрать однократно, в количестве не менее 2-4 мл (приблизительно объем с чайную ложку)
-Исследование кала на простейшие необходимо проводить 3-х кратно с интервалом в 5-8 дней (если врач не назначил Вам обследование по другой схеме)
Выявление антител к паразитам и оценка адекватности специфического иммунного ответа
Через неделю с момента заражения в сыворотке крови больного выявляются специфические антитела класса IgM, позже выявляются антитела класса Ig G. После выздоровления пациента антитела к антигенам паразитов класса IgG довольно длительное время могут сохраняться. Содержание этих антител постепенно снижается в течение 2 -12 месяцев после гибели паразитов.
Преимущества диагностики паразитозов с помощью метода ИФА:
Возможность ранней диагностики инвазии
Короткий срок получения результатов
Относительно невысокая стоимость
Выявление антител к паразитам и оценка адекватности специфического иммунного ответа
Антител к антигенам лямблий- Ig M, суммарные
Антител к антигенам паразитов:
Как подготовиться к исследованию крови на выявление антител к паразитам
Кровь для анализа сдается из вены натощак.
За 10 часов до исследования необходимо исключить употребление алкоголя
Лекарства искажают результаты исследований. Пациент должен сообщить специалисту о постоянном приеме каких-либо медикаментов.
Результаты исследования выдают в регистратуре поликлиники
Гельминтоларвоскопия - совокупность приемов обработки и исследования проб материала с целью выявления личинок гельминтов и установления по ним возбудителя.
Гельминтоларвоскопию применяют для диагностики стронгилято- зов пищеварительного тракта, диктиокаулеза и стронгилоидоза крупного рогатого скота.
Культивирование личинок гельминтов. Его проводят с целью диагностики гельминтозов вообще и дифференциальной диагностики в частности. Культивирование заключается в создании для яиц гельминтов, находящихся в фекалиях, благоприятных условий, чтобы личинки выросли до инвазионной стадии. По их морфологии определяют вид возбудителей.
У крупного рогатого скота в пищеварительном тракте часто паразитируют нематоды из подотряда стронгилят. Выделяющиеся с фекалиями яйца этих нематод трудно различимы. Поэтому методами ово- скопии практически ставят только общий диагноз. Дифференциальный диагноз возможен по развившимся личинкам
Метод культивирования личинок. Порцию свежих фекалий животного в количестве 10-30 г помещают в стакан, закрывают куском стекла и оставляют в термостате при 25-27°С на 7 дней или при комнатной температуре на 10-12 дней. По мере подсыхания пробу фекалий слегка увлажняют водой. По истечении указанных сроков пробу фекалий исследуют по методу Бермана-Орлова или Шильникова.
Освобожденный от фекалий стакан заполняют водой, выдерживают 15-20 минут, затем верхний слой жидкости осторожно сливают, а осадок исследуют в часовом стекле под микроскопом.
Гельминтоларвоскопия при диктиокаулезе (Метод Бермана- Орлова). Эта методика наиболее широко распространена и несложна по технике исполнения. Для исследования по этому методу нужно иметь металлические или пластмассовые воронки (с верхним диаметром 10 см), маленькие гельминтологические пробирки (5-8 см высотой и 0,8-1 см диаметром), резиновые трубки (диаметром 0,7-0,8 см), штатив для воронок и зажимы.
Метод основан на следующем: личинки в теплой влажной среде активно выбираются из фекалий и, попав в воду, падают на дно.
Фекалии (5—10 г) кладут на металлическое сито или заворачивают в марлю и помещают в воронку. На нижний конец воронки надевают резиновую трубку длиной 10 см с зажимом, в свободный конец трубки вставляют пробирку. Собранный в таком виде аппарат Бермана ставят в штатив и заполняют теплой водой (40°С).
Аппарат с пробами кала крупного рогатого скота оставляют при комнатной температуре на 12 часов. За это время личинки нематод выползают из пробы в жидкость и опускаются до места перекрытия трубки зажимом. После истечения срока зажимы открывают и наполняют пробирки водой, в которой могут находиться личинки нематод. Пробирки ставят в штатив на 20 минут для осаждения личинок. Затем воду из пробирок сливают до осадка. Осадок встряхивают на предметные стекла и микроскопируют. Личинки нематод подвижны и легко обнаруживаются.
Метод Шильникова. Автор еще более упростил методику Бермана-Орлова. В этой методике используются обыкновенные медицинские градуированные стаканчики (емкостью 30 мл), имеющие форму усеченного конуса и сферическое дно. Выпуклость дна направлена кверху. Пробы фекалий завертывают в марлевые салфетки, раскладывают по стаканчикам и заливают теплой водой. Через 8-10 часов пробы осторожно вынимают, а жидкость отстаивают 10-15 минут. Затем стаканчики медленно наклоняют, сливают воду до появления мути. Дают отстояться осадку жидкости 5-10 минут. После этого стаканчик медленно наклоняют и из него глазной пипеткой отсасывают верхний прозрачный слой воды до тех пор, пока в пипетку не начнет всасываться осадок на дне. При аккуратном отсасывании на дне стаканчика остается 0,5-1 мл жидкости. Этот осадок каплями наносят на предметное стекло и микроскопируют.
Эта методика заслуживает внимание практиков. Она проста и удобна для выполнения в любых условиях.
Дифференциация личинок диктиокаулюсов. Для дифференциации диктиокаулюсов предложена методика окраски. К осадку в пробирке или на стекло добавляют 1-2 капли 0,1% водного раствора метиленового синего. Осадок встряхивают и через 20-30 секунд микроскопируют. Личинки диктиокаулюсов телят окрашиваются в светло- сиреневый цвет. Личинки других нематод остаются неокрашенными, частицы корма окрашиваются в зеленый цвет, а жидкость - в голубой.
Прижизненная диагностика телязиоза, вызванного 77г. rhodesi, осуществляется путем обнаружения червей в смывах из конъюнктивальной полости. Для этого используют 2-3% раствор борной кислоты в количестве 50 мл, который вводят в конъюнктивальный мешок под третье веко. Вытекающую после процедуры жидкость собирают в емкость и на темном фоне просматривают. Телязии и их личинки хорошо видны невооруженным глазом.
Для диагностики телязиоза, вызванного 77г. qulosa и 77г. skrjabini исследуют слезные истечения или смывы из слезно-носового канала. Для этого слезно-носовой канал промывают физиологическим раствором. Собранную жидкость в медиальном углу глаза исследуют вышеописанным способом.
В.В. Грязнов и статоры (2013) усовершенствовали диагностику телязиоза. Они предложили перед промыванием глаз проводить блокаду 0,5% новокаином. После введения раствора появляется незначительное выпячивание глазного яблока, опускание верхнего века, набухание конъюнктивального мешка, век и склеры, наблюдается выпадение третьего века и химоз самой конъюнктивы. Во время вышеописанного клинического состояния глаза у крупного рогатого скота через 5-8 минут после блокады легко проводится орошение конъюнктивального мешка физиологическим раствором.
Следует отметить, что в конъюнктивальной полости и слезном канале располагаются очень мелкие личинки телязий, которые в развитии патологического процесса играют очень важную роль. При орошении они обнаруживаются с трудом и только после проведения ретробульбарной новокаиновой блокады вымываются полностью.
Для подтверждения диагноза на парафиляриоз берут кровь из кровоточащих ран. Ее помещают на предметное стекло, разводят 1:10 дистиллированной водой и микроскопируют. Также можно разведенную кровь центрифугировать и микроскопировать осадок со дна пробирки [24].
Материалом для прижизненной диагностики служат кусочки кожи, взятые с нижней стороны брюшной стенки и с внутренней части ушных раковин [95], а также - в области холки, плеч и передних конечностей. Кусочки кожи берутся площадью 15-30 мм 2 при толщине ткани 2-3 мм. Пробу разрыхляют и помещают в пробирку с 2-3 мл физиологического раствора. Пробирку ставят в термостат на 1-2 часа при температуре 37°С. Далее из пробирки удаляют кожу и микроско- пируют осадок [3, 286].
Личинок сетарий обнаруживают при исследовании мазков, приготовленных из периферической крови. Мазки красят по Романовскому- Гимзе. Мазки желательно готовить в вечернее время, когда количество микросетарий в периферической крови увеличивается [286].
Ю.В. Козлов, А.Г. Деревянкина (2011) предложили брать кровь из яремной вены в стеклянную пробирку. Далее к 1 мл взятой крови добавлять 2-3,5 мл 0,1% уксусной кислоты, отстаивать 10-15 минут и микроскопировать осадочную жидкость.
При использовании данного метода происходит гемолиз эритроцитов, в результате поле зрения микроскопа в исследуемой пробе не перегружено клетками крови, к тому же личинки сетарий некоторое время остаются подвижными, все это облегчает их обнаружение. Кроме того, 0,1% раствор уксусной кислоты не является токсичным реактивом, а оптимальной дозой уксусной кислоты является 3 мл, так как при меньшем ее количестве происходит не полный гемолиз эритроцитов, а при большем - личинки сетарий погибают.
В последнее время все шире применяются иммунологические методы прижизненной диагностики гельминтозов посредством серологических и аллергических реакций.
Р.З. Тимербаева (2003) проводила опыты по серологической и аллергической диагностике фасциолеза крупного рогатого скота.
Автор считает, что антиген из фасциол, полученный комбинированным метом (промывание фасциол, их высушивание, воздействие диметилсульфоксидом, центрифугирование, замораживание, оттаивание надосадочной жидкости и ее диализ), оказался наиболее активным и специфичным в РСК.
В результате постановки РСК с испытуемым антигеном было установлено, что положительно реагировали 81,8%, сомнительно - 9,1% и отрицательно - 9,1% зараженных фасциолами животных.
При постановке ИФА из всех антигенов наиболее активным и специфичным оказался диагностикум, полученный с применением диметилсульфоксида. Результаты изучения специфичности этого антигена показали, что при исследовании 40 негативных проб сывороток крови реакция ИФА была отрицательной, 12 позитивных фасцио- ловых сывороток показали положительный результат. Из 10 дикроце- лиозных сывороток одна проба и из 10 эхинококкозных - две пробы, также реагировали позитивно, то есть и при ИФА не исключается возможность перекрестных реакций с фасциоловым антигеном.
Из 22 сывороток крупного рогатого скота, больного фасциолезом положительно в ИФА реагировали 20 (90,9%), отрицательно - 2 (9,1%).
Количество животных, выявленных аллергической пробой, было меньше, чем установленных серологическим методом.
В заключении автор отметила, что серологическая диагностика (РСК, ИФА) фасциолеза позволяет определять степень и ранние сроки инвазированности животных. Реакция ИФА в сравнении с РСК оказалась более чувствительным методом обнаружения фасциоловых антител у крупного рогатого скота. Аллергический метод диагностики фасциолеза целесообразно использовать при остром течении болезни. Диагностическая эффективность этого метода ниже, чем серологического.
По мнению I.A. Trus, S.N. Vyshelesskij (2008), иммунологические методы диагностики фасциолеза крупного рогатого скота высокочувствительны: иммуноферментный анализ - 100%; косвенные реакции гемагглютинации - 98%, аллергические кожные пробы - 88%. При этом чувствительность копрологических методов составляет 68%.
Г.Г. Горшкова (2004) сравнила эффективность гельминтологического вскрытия печени, модифицированного гельминтоовоскопиче- ского метода Котельникова-Вареничева и серологического метода иммуноферментного анализа при дикроцелиозе крупного рогатого скота.
В первой серии опытов с дикроцелиозным антигеном в ИФА исследовали сыворотки крови от 18 голов крупного рогатого скота, убитого на мясокомбинате. У этих животных одновременно исследовали печень и брали пробы фекалий для копрологического исследования.
В результате исследований было установлено, что из 18 исследованных животных патологоанатомическим и копрологическими методами были выявлены 7 (38,8%). Интенсивность инвазии по данным копрологического исследования составила от 5 до 37 яиц. В реакции ИФА положительно реагировали 10 голов (55,5%) крупного рогатого скота.
Во второй серии опытов диагностическая эффективность и специфичность метода ИФА в условиях мясокомбината изучалась на 342 головах крупного рогатого скота.
По данным вскрытия печени выявили 19,9% животных, инвази- рованных дикроцелиями; 10,8% - фасциолами и у 3,5% установили эхинококкоз. Копрологическими исследованиями обнаружили инва- зированных дикроцелиозом и фасциолезом соответственно 16,7 и 10,8%. При исследовании сывороток крови в реакции ИФА с дикро- целиозным антигеном, положительные результаты показали 19,9% животных, зараженных гельминтами, 0,5% - зараженных фасциолами и 0,5% - зараженных эхинококками. В 16 пробах (4,7%) сывороток крови от животных, показавших отрицательные результаты, как по патологоанатомическому вскрытию, так и по копрологическим исследованиям, были выявлены антитела в реакции ИФА.
Иммунодиагностика широко применяется при цистицеркозе крупного рогатого скота. Разработаны внутрикожная аллергическая проба, реакция латекс агглютинации (РЛА) и реакция непрямой гемагглюти- нации (РНГА).
По данным Е.С. Лейкиной с соавт. (1976а), чувствительность РЛА с антигеном из лиофилизированных цистицерков реакции составляет 94—97%.
Ю.Б. Комаров (1977) разработал высокочувствительную реакцию флюоресцирующих антител для диагностики цистицеркоза крупного рогатого скота.
Чувствительность РНГ А при цистицеркозе крупного рогатого скота составляет 92,8% (Акбаев М.Ш. и соавт., 2008).
М.Н. Кульневская (2007) изучала фагоцитарную активность нейтрофилов (ФАН) при цистицеркозе крупного рогатого скота. В этой реакции автор сравнивала отношение специфического фагоцитоза к неспецифическому фагоцитозу объекта в разных группах животных. Одни были больны только цистицеркозом, другие - инвази- рованы цистицерками и другими видами гельминтов, третьи - служили контролем. Эффективность метода составила 60%.
Для прижизненной диагностики эхинококкоза крупного рогатого скота используют внутрикожную аллергическую пробу (реакция Ка- цони), РИГА, РЛА, реакция сколексокольцепреципитации (РСКП).
В ветеринарной практике чаще всего применяют пробу Кацони, так как она наиболее эффективна (96-100%).
А.М. Идрисов (2004) предложил усовершенствовать аллергическую пробу путем добавления к эхинококкозной жидкости физиологического раствора и глицерина (1 часть эхинококкозной жидкости, 1,5 части физиологического раствора и 1,5 части глицерина).
По данным И.Н. Резяпкина (2001), у крупного рогатого скота при спонтанном эхинококкозе чувствительность РИГА составила 80,9% при специфичности 50%, а в РЛА чувствительность составила 39,3%, специфичность - 42,8%.
Ю.Н. Павлов (2005) описал новый метод прижизненной диагностики эхинококкоза крупного рогатого скота, основанный на спектрофотометрии гемолизата. По мнению автора, у крупного рогатого скота после заражения эхинококками происходят конформационные изменения в гемоглобине, которые можно регистрировать с помощью спектрофотометрии в диапазоне длин волн от 350 до 500 нм и получать характерные спектры (коэффициенты поглощения), позволяющие отличать здоровых от зараженных животных.
По мнению М.Д. Новака и соавторов (2012), для диагностики стронгилоидоза крупного рогатого скота перспективным является применение РИГА. В опытах на телятах эффективность этого метода составляла 76-88%.
Серологические реакции с положительным результатом испытаны при многих гельминтозах. К таким реакциям относятся внутрикожная аллергическая проба, ИФА, РЛА, РСК, РДСК, РИГА, РИФ, РИД, им- мунопероксидазная проба, реакции кольцепреципитации и микропреципитации на живых личинках, реакция двойной диффузии, реакция энзиммеченых антител и др.
Однако данные методы недостаточно совершенны: низка эффективность иммунологических реакций, зачастую антигены дают неспецифические перекрестные реакции как между биологически близкими видами, так и видами из разных классов гельминтов. Использование аллергической диагностики ограничено из-за сенсибилизации организма.
Обработка гомогенатов гельминтов несовершенна, что влечет за собой изменение белков и их активности, приводит к перераспределению специфических молекулярных структур таким образом, что количественное содержание белков и антигена не может с достоверностью определять его иммунологическую ценность.
В последние годы предприняты многочисленные поиски методов прижизненной диагностики гельминтозов с помощью иммунологических методов — серологических и аллергических реакций.
Практически применяют их при эхинококкозе, трихинеллезе. Так, А. С. Бессонов (1967) предложил метод иммунологической диагностики трихинеллеза, а Р. С. Шульц — эхинококкоза. Однако все методы недостаточно совершенны: низка эффективность иммунологических реакций, нередко антигены дают неспецифические перекрестные реакции, притом не только между биологически близкими видами, но и видами из другого класса гельминтов и даже бактериями и простейшими.
При обработке гомогенатов гельминтов изменяются структура белков и их активность, специфические реактивные молекулярные структуры перераспределяются таким образом, что количественное содержание белков в антигене не позволяет с достоверностью определить его иммунологическую ценность.
Почти при всех основных гельминтозах испытаны с положительным результатом кожная аллергическая реакция (внутрикожная проба) и реакция связывания комплемента, преципитиновые реакции: кольцепреципитации, микропреципитации на живых личинках, реакция двойной диффузии в гель по Ухтерлони, реакция агглютинации прямая и пассивная, латексагглютинации и др.
Внутрикожная проба. В последние два десятилетия широко применяют внутрикожную аллергическую пробу при эхинококкозе овец. Наибольшее число правильных показаний дает очищенный антиген. По данным В. Т. Рамазанова (1968), аллергическая проба в серии опытов давала правильные показания на 75—80%. Отрицательные реакции часто были при эхинококкозе легких, особенно при ацефалоцистах, нагноении эхинококковых цист.
Специфическая сенсибилизация в результате предшествовавшего введения одной диагностической дозы аллергена не позволяет повторно проводить пробы и ставить диагноз на эхинококкоз сельскохозяйственных животных.
Для прижизненной диагностики ценуроза овец (аллергическая проба) лучший результат дает полисахаридный антиген (Ронжина, 1961; Шульц, 1964; Исмагилова, 1968). Аллергические реакции применяли при цистицеркозе свиней, кроликов, крупного рогатого скота, аскаридозе свиней, метастронгилезе, сетариозе, диктиокаулезе и других гельминтозах, однако из-за сенсибилизации организма использование их ограничено.
Реакция сколексопреципитации (РСкП). Впервые ее разработали применительно к диагностике эхинококкоза Р. С. Шульц и Р. Г. Исмагилова (1963). РСкП очень проста по своим показаниям, однако для диагностики эхинококкоза с помощью этой реакции необходимы постоянно свежие сколексы. М. В. Алферова (1968) испытала эту реакцию при цистицеркозе крупного рогатого скота и пришла к выводу, что она достаточно чувствительна, но требуется более тщательная доработка.
Для прижизненной диагностики цистицеркоза крупного рогатого скота E. С. Лейкина с соавт. (1968) рекомендовали реакцию латекс-агглютинации с антигеном из лиофилизированных цистицерков. Чувствительность этой реакции оказалась равной 94—97%. Ь. К. Омаровым (1973) разработана реакция флюоресцирующих антител для диагностики цистицеркоза с высоким показателем чувствительности.
Получены хорошие показатели специфичности и чувствительности реакции связанного комплемента применительно к диагностике фасциолеза крупного рогатого скота (Полуэктова, 1978). Для целей иммунодиагностики успешно применяют реакции флуоресцирующих антител. В качестве антигенов служат цельные или фрагментированные организмы, яйца или личинки гельминтов. При аскаридозе свиней Л. Е. Верета (1969) отметил высокую чувствительность метода флуоресцирующих антител (антитела обнаружены на 7-й день после заражения). При трихинеллезе реакция иммунофлуоресценции прямого типа введена Jackson (1959). Антигеном служили инкапсулированные личинки трихинелл. Последних инкубировали в иммунной меченой сыворотке, в смеси иммунной меченой и нормальной сыворотками. Все меченые иммунные сыворотки вызывали флуоресценцию пищеварительного тракта личинок. Реакцию непрямой флуоресценции испытали несколько авторов (Sadun, 1961; Sadun et al., 1962; Barata et al., 1963) и установили большую ее чувствительность при диагностике трихинеллеза. Kagan (1964) подтвердил, что флуоресцирующие антитела могут быть выявлены раньше, чем комплементсвязывающие.
Реакция иммунофлуоресценции прямого типа позволила успешно выявлять участки локализации антигена и пути миграции личинок трихинелл. Начиная с 4-го дня после заражения, флуоресцирующие участки обнаруживали в капиллярах печени, синусах и просвете кровеносных сосудов селезенки белых мышей. Это свидетельствовало о миграции личинок трихинелл через внутренние органы (Берчев, 1966). Результатами более объективной оценки иммунофлуоресценции нужно считать установление большого числа неспецифических реакций при исследовании сывороток от индивидов, зараженных различного рода паразитами и незараженных трихинеллами.
Практическое применение реакции флуоресцирующих антител затрудняется сложностью теста, требующего определенной аппаратуры для приготовления антигена и учета реакции, необходимых антивидовых глобулинов и использования дорогих и дефицитных реактивов.
Реакция энзим-меченых антител. Основана она на переводе антигенов в нерастворимое состояние путем пассивной адсорбции на твердой поверхности. С помощью реакции можно количественно определять специфические антитела. Для ее постановки используют растворимый антиген, которым покрывают стенки пробирок из полистирола, и меченный пероксидазой или фосфатазой антииммуноглобулин (Voller, 1976). Реакция энзим-меченных антител значительно специфичнее и чувствительнее других методов иммунодиагностики (Huldt et al., 1975; Bout et al., 1976; Me Laren et al., 1979; Белозеров, 1982; Полетаева, 1983).
Большинство гельминтологов (иммунологов) при постановке этой реакции стремятся получить специфичный и высокочувствительный антиген, определить его химический состав, который бы позволил точнее воспроизводить результаты и достигнуть надлежащей стандартизации. Однако добиться этого трудно, так как невыяснено, какие стадии развития гельминта являются наиболее удобными для получения антигенов. В различных лабораториях антигены готовят произвольно. Поэтому любой антиген, даже если он получен от одного и того же паразита, отличен от другого и не соответствует требованиям стандартизации. Гельминтные антигены не химическое вещество, а биологический материал сложного строения, поэтому необходима полная стандартизация антигенов из гельминтов, рекомендуемых для серологической диагностики.
Посмертная (послеубойная) диагностика гельминтозов. Гельминты паразитируют во всех органах и тканях, поэтому истинную картину поражения можно установить только после убоя или падежа животных с помощью методики гельминтологических вскрытий, разработанной К. И. Скрябиным. Количественный подсчет всех видов гельминтов, которыми поражено животное, можно произвести методом полных гельминтологических вскрытий. Если требуется определить место нахождения того или иного гельминта, то проводят полное гельминтологическое исследование отдельных органов. Неполным гельминтологическим вскрытием предусматривается извлечение из органов и тканей лишь отдельных гельминтов.
Гельминты различных видов в процессе физиологического развития приспособились к паразитированию в организме определенного вида животных в отдельных органах и тканях, вызывая соответствующие гельминтозы. Знание мест локализации гельминтов в организме окончательного хозяина позволяет более быстро диагностировать тот или иной гельминтоз.
Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.
Нефедова Светлана Александровна
директор академии пчеловодства и современных биотехнологий
доктор биологических наук, профессор
Адрес электронной почты: Этот e-mail адрес защищен от спам-ботов, для его просмотра у Вас должен быть включен Javascript
Сотрудники академии
 |  |
