Диагностика эшерихиоза у животных
Колибактериоз (colibacteriosis) (эшерихиоз, колидиарея, колисепсис) – остропротекающая болезнь молодняка сельскохозяйственных животных, проявляющаяся септицемией, токсемией и энтеритом.
Этиология. Возбудителем является Escherichia coli. Это – грамотрицательная палочка с закругленными концами, размером 2-3 х 0,4-0,6 мкм, спор не образует, капсулу не образует, за исключением отдельных штаммов серогрупп 08, 09, 0101. Эшерихии хорошо растут на обычных питательных средах при температуре 37°С и рН 7,2-7,4. В почве, навозе, воде и в животноводческих помещениях возбудитель сохраняется 1-2 месяца. Губительно действуют на эшерихий: 4 % горячий раствор гидроокиси натрия, осветленный раствор хлорной извести с содержанием 3 % активного хлора, 20 % взвесь свежегашеной извести.
Эпизоотологические данные. К колибактериозу восприимчив молодняк всех видов сельскохозяйственных животных, начиная с первых дней жизни. Источником возбудителя инфекции являются больные и бактерионосители. Передается возбудитель с молозивом, кормом, водой, через навоз, подстилку и предметы ухода загрязненные фекалиями и мочой. Заражение чаще происходит алиментарным путем, реже – аэрогенным и внутриутробным. Болезнь протекает в виде энзоотии.
Течение и симптомы. Колибактериоз телят, поросят, ягнят протекает в энтеритной, энтеротоксемической (отечной) и септической формах. Течение болезни сверхострое, острое, подострое и хроническое. Инкубационный период от нескольких часов до 2-х суток.
Сверхострое течение колибактериоза отвечает септической форме болезни и присуще новорожденным в первые 1-3 дня. Оно сопровождается отказом от корма, резким повышением температуры тела до 41-42 °С, учащением пульса, дыхания и высокой летальностью.
Острое и подострое течение отвечает энтеротоксемической и энтеритной формам болезни, чаще наблюдается в 3-5 дневном возрасте и сопровождается общей депрессией, профузным поносом. Фекалии жидкие, желтоватого или серо-белого цвета с пузырьками газа.
Диагноз. На колибактериоз ставят с учетом эпизоотологических данных, клинических признаков, патологоанатомических изменений и результатов бактериологического исследования. Диагноз считают установленным, если выделенная культура отнесена к роду эшерихиа, типируется или является патогенной для лабораторных животных; при выделении культуры эшерихий, с одним или более типами адгезивных антигенов.
Дифференциальный диагноз. Колибактериоз дифференцируют от диарей незаразного происхождения, сальмонеллеза, стрептококкоза, пастереллеза, адено-, рота- и коронавирусных инфекций. У поросят дополнительно от вирусного гастроэнтерита, дизентерии.
Лечение. Необходимо начинать лечение при появлении первых признаков заболевания. Применяют бактериофаг, гипериммунную сыворотку, гамма-глобулин. Антибиотики назначают в соответствии с результатами определения чувствительности выделенного возбудителя, наиболее эффективными являются (энроксил, флумеквин, канамицин, кобактан, гентамицин и др.), а также можно применять сульфаниламидные (сульфазол, сульфадиметоксин и др.) и нитрофурановые (фуразолидон, фуразидин и др.) препараты. Симптоматические средства применяют для восстановления водно-солевого обмена, кислотно-щелочного равновесия, нейтрализации токсинов и компенсации в организме дефицита белков, углеводов и витаминов.
Профилактика и меры борьбы. Профилактика основана на проведении комплекса организационно-хозяйственных, противоэпизоотических, зоотехнических, ветеринарно-санитарных и зоогигиенических мероприятий, направленных на повышение резистентности организма матерей и молодняка, обеспечение гигиены родов, а также предотвращение заражения животных через объекты окружающей среды. Своевременная вакцинация стельных коров и супоросных свиноматок, пассивная иммунизация новорожденного молодняка специфической иммунной сывороткой и гамма-глобулинами. В качестве профилактических средств в первые часы жизни используют неспецифические глобулины, АБК, ПАБК, ацидофилин.
Колибактериоз - кишечное заболевание, вызываемое бактерией Esherihia coli. Заболевание проявляется профузным поносом, сопровождается тяжёлой интоксикацией и обезвоживанием организма.
Вид Esherihia coli относится к естественным представителям кишечной микрофлоры животных и человека. При определенных условиях E. coli становится патогенной, приводя к заболеванию колибактериозом (эшерихиозом).
Эшерихии могут вызывать заболевание у щенков в возрасте 1 - 5 дня, реже - 6 - 10.
Источник инфекции - больные и переболевшие животные. Кроме того, источником служат матери-носители.
Выделение возбудителей во внешнюю среду происходит в основном с калом, иногда с мочой больных животных.
Заражение щенят происходит в период родов. Способствует этому употребление молозива, молока, содержащих возбудителей, несоблюдение правил гигиены.
Путь заражения чаще алиментарный, реже - аэрогенный.
Предрасполагает к развитию болезни скученное содержание, например, в питомнике, а также нарушения кормления.
У щенков изучен недостаточно. Скорее, это септический процесс.
У щенков заболевание также может протекать по типу токсикоинфекции. Бактерии и токсические продукты проникают в кровь.
Инкубационный период от нескольких часов до суток.
Формы протекания болезни:
Сопровождается потерей аппетита, повышением температуры тела до 40-41 градуса. У животных развивается диарея, часто со слизью и кровью.
Летальность щенков в первые 7 дней жизни колеблется от 2 до 98 %;
Сопровождается возбуждением, судорогами, парезами, параличами, то есть признаками менингоэнцефалита.
Слизистая оболочка желудочно-кишечного тракта набухшая, покрыта слизью, гиперемирована. Кишечник содержит жёлто-белые, серые массы с кровью и желчью.
Селезёнка обычно увеличена, тёмно-красная. Печень, почки также увеличены, полнокровны.
Сосуды головного мозга наполнены кровью, ткань мозга отёчна.
Проводится на основании эпизоотических, клинических и патологоанатомических данных, а также результатов бактериологических исследований.
При бактериологическом исследовании проводится выделение и определение эшерихий, определение патогенности культуры, а также определение серологической группы в реакции агглютинации .
Если культуры эшерихий выделяются из селезёнки, головного мозга, костного мозга, тогда диагноз считается установленным без определения серогруппы и патогенности.
В начальном периоде заболевания можно использовать сыворотку против колибактериоза сельскохозяйственных животных в дозе 2-5 мл. Применяются антибиотики тетрациклинового ряда и левомицетин.
Тяжело больному животному проводится интенсивная терапия.
Важно улучшение кормления животных. Следует тщательно убирать помещения.
Важно выполнение правил содержания, кормления животных, особенно беременных сук, соблюдение санитарно-гигиенических условий при щенении, лактации.
Необходимо проводить дезинфекцию. При появлении эшерихиоза обязательна изоляция больных животных.
ЦЕЛЬ ЗАНЯТИЯ. Изучить свойства возбудителей эшерихиозов и методы бактериологической диагностики.
МАТЕРИАЛЬНОЕ ОСНАЩЕНИЕ. Для демонстрации необходимы таблицы по морфологическим и культуральным свойствам кишечной палочки и биопрепараты. Для приготовления препаратов – мазков-отпечатков – суточные культуры кишечной палочки, реактивы для окрашивания их по Граму, среда Эндо, среда Левина, среда Гисса, кровяной МПА, пробирки со взвесью культур кишечной палочки, диагностические агглютинирующие сыворотки для серо-групповой типизации кишечной палочки.
При подготовке к занятию необходимо уяснить следующие вопросы:
1. Кишечная палочка, ее морфологические и культуральные свойства, ее роль в возникновении кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных.
2. Схема бактериологического исследования материала на эшерихиоз.
1. Классификация возбудителя
Вид: E. coli (энтеропатогенные штаммы)
2. Общая характеристика болезни:
Колибактериоз – острая инфекционная болезнь молодняка сельскохозяйственных животных, характеризующаяся главным образом диареей.
3. Восприимчивые животные:
- все виды сельскохозяйственных животных, включая птиц и пушных зверей, главным образом, молодняк;
4. Патогенез и факторы вирулентности:
- заражение происходит алиментарным путем, реже аэрогенным;
- возбудитель проникает в кровь, вызывает сепсис или размножается в кишечнике - энтеротоксическая или энтеритная формы;
- факторы вирулентности – возбудитель продуцирует термолабильный экзотоксин и термостабильные эндотоксины, гемолизины, обладает адгезией и др.
Методы диагностики (рис. 81)
А. Бактериологический метод:
1. Материал для исследования:
- посмертно – труп целиком, отрезок тонкого кишечника, брыжеечные лимфатические узлы, паренхиматозные органы, головной мозг.
а) методы окраски: простой метод, по Граму;
б) микрокартина: полиморфные палочки до 3 мкм, располагаются одиночно, реже попарно (рис. 82);
г) спор не образуют;
д) капсулу не образуют;
а) посев на питательные среды: МПА, МПБ, дифференциально-диагностические среды (среда Эндо, среда Левина и др.);
б) особенности выделения возбудителя:
Рис. 81. Схема лабораторной диагностики эшерихиоза (колибактериоза)
- оптимальная температура 37°С;
- срок культивирования 18-20 ч.
в) культуральные свойства:
- на МПБ – интенсивное помутнение, образование легко разбивающегося осадка;
- на МПА – сочные, круглые, с ровными краями, серо-белого цвета колонии;
- на среде Эндо – ярко-красные колонии, на среде Левина – темно-фиолетовые или черные колонии (рис. 83).
Рис. 82. Возбудитель эшерихиоза (энтеропатогенные кишечные палочки) чистая агаровая культура. Увеличение х900
Рис. 83. Рост кишечных палочек на среде Левина. Колонии темно-фиолетовые или черные. Увеличение х2
г) биохимические свойства:
- ферментируют с образованием кислоты и газа – глюкозу, лактозу, маннит, не расщепляют сахарозу;
- желатин не разжижают, сероводород не образуют, образуют индол, дают положительную реакцию с метиленовым красным (ярко-розового цвета), отрицательная реакция Фогес-Проскауэра;
- внутримышечно заражают выделенной микробной культурой белых мышей и цыплят.
Б. Серологический метод:
- используют РА (пробирочная и на стекле) для серотипизации полученного антигена (микробной культуры) с поли- и моновалентными коли-сыворотками;
- используют реакцию иммунофлюоресценции.
В. Аллергический метод:
4. Биопрепараты для специфической профилактики:
- инактивированная ГОА – формолтиомерсаловая вакцина (вводят стельным коровам, супоросным свиноматкам, суягным овцам);
- колипротектант ВИЭВ (взвесь убитой нагреванием культуры эшерихий, отмытой от токсинов и консервированной формалином).
5. Биопрепараты для специфической терапии:
- поливалентная гипериммунная сыворотка,
Задания для самостоятельной работы
1. Изучить морфологические, культуральные, биохимические свойства кишечной палочки.
2. Приготовить препараты-мазки из суточных культур кишечной палочки, окрасить по Граму и микроскопировать.
3. Изучить бактериологическую диагностику эшерихиоза сельскохозяйственных животных.
5. Провести серотипизацию культуры кишечной палочки в РА с использованием поли- и моновалентных коли-сывороток.
Скляров О.Д. ФГБУ "Всероссийский государственный Центр качества и
стандартизации лекарственных средств для животных и кормов"
Моторыгин А.В. ФГБОУ ВПО "Московский государственный университет
пищевых производств"
Эшерихиоз - остро и подостро протекающее заболевание, играющее важную роль в неонатальной патологии крупного рогатого скота, так как достаточно распространено и наносит значительный экономический ущерб животноводству за счет высокой смертности и задержке роста реконвалесцентов [1, 2, 4, 5, 6, 8, 10].
Циркулирующие среди животных эшерихии различаются по антигенной структуре [3, 5, 9, 11, 12, 13]. В связи с этим, разработка и применение средств специфической профилактики, впрочем, как и средств диагностики, невозможны без постоянного углубленного изучения этиологической структуры эшерихиоза и антигенной структуры эшерихий.
Целью работы явилось изучение этиологической структуры эшерихиоза телят и патогенных свойств изолятов Escherichia coli , выделенных из патологического материала молодняка крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Рязанской области.
Материалы и методы. Диагноз на эшерихиоз устанавливали с учетом анализа клинико-эпизоотологических данных, патоморфологических изменений результатов и результатов бактериологических исследований, выполненных в соответствии с "Методическими указаниями по колибактериозу (эше-рихиозу) животных" (2000). Серогрупповую принадлежность E.coli определяли набором стандартных "О - колисывороток", выпускаемых ФГУП "Армавирская биофабрика". Определение серогрупповой принадлежности изолятов, нетипирующихся сыворотками стандартного набора, проводили путем получения агглютинирующих кроличьих сывороток к изолятам с последующей их идентификацией эталонными штаммами эшери-хий. Реакции оценивали по скорости образования и характеру агглютината, а также степени просветления реакционной смеси. Статистическую обработку результатов исследований проводили общепринятыми методами [7].
Результаты исследований и обсуждение. В период с 2007 по 2010 годы был проведен ретроспективный анализ эпизоотический ситуации инфекционных болезней крупного рогатого скота в животноводческих хозяйствах Рязанской области в соответствии с первичными данными ветеринарной отчетности с 2007 по 2010 годы: форма N° 2 "Журнал для записи противоэпизоотических мероприятий"; форма N° 3 "Журнал для записи эпизоотического состояния района"; форма N° 16 "Журнал серологического исследования крови". Согласно результатам анализа смертность телят 2-3-х суточного возраста за период 2007-2010 годов составила 2,6%, летальность - 2,9% в 2007 году и 4,2% в 2008 году, 3,2% в 2009 году, 5,2% в 2010 году. При анализе данных по желудочно-кишечным болезням молодняка крупного рогатого скота установлено, что по Кораблинскому и Сторожиловскому районам Рязанской области в 2007 году было зарегистрировано 34 больных животных в возрасте до 5-ти суток, в 2008 году - 45 больных животных, в 2009 году - 32, в 2010 году - 48 больных животных в возрасте до 5-ти суток. Из общего числа желудочно-кишечных болезней у молодняка в возрасте до 5 суток 45,8-59,5% составляет эшерихиоз. В 2007 году была зарегистрирована 21 голова животных, павших с подтвержденным бактериологическим исследованиями диагнозом эшерихиоз, что составило 58,6% от общего числа болезней; в 2008 году - 26 голов (52,4%); в 2009 году - 23 головы (55,4%); в 2010 году - 21 голова (47,4 %).
У телят при желудочно-кишечной инфекции ведущим клиническим признаком была диарея, проявляющаяся выделением жидких фекалий серовато-белого или желто-серого цвета с пузырьками газа или примесью слизи, со зловонным запахом. У больных животных наблюдали потерю аппетита, нарастающую слабость, адинамию, нарушение сердечной деятельности, учащенное и поверхностное дыхание, интоксикацию. Поражение центральной нервной системы характеризовалось судорогами, парезами, параличами конечностей, депрессией, сменяющейся возбуждением. При затяжном течении инфекции развивалось обезвоживание и истощение. Кроме того, наблюдались серозно-катаральные или серозно-гнойные истечения из носовых полостей, кашель, хрипы в области бронхов и легких, конъюнктивит, артрит. При патологоанатомическом исследовании на эпи- и эндокарде в области клапанов часто отмечались точечные и пятнистые кровоизлияния. Легкие имели мраморный рисунок с наличием лобулярной пневмонии, в бронхах и трахее выявлялся пенистый экссудат. В почках под капсулой отмечали точечные кровоизлияния, четкой границы между корковым и мозговым слоем не наблюдалось. Поражения органов пищеварения характеризовались катаральным или катарально-геморрагическим гастроэнтеритом с наличием точечных, пятнистых и полосчатых кровоизлияний на слизистой оболочке тонкого и толстого отделов кишечника; мезентериальные лимфатические узлы были увеличены, на разрезе сочные, красного или вишневого цвета. Брыжейка толстого отдела кишечника отечная, кровеносные сосуды инъецированы. В брюшной полости содержался серозный экссудат светло-желтого цвета, иногда с примесью крови. Печень имела глинистый цвет, пульпа органа на разрезе была дряблой консистенции. Селезенка с утолщенными краями или увеличена, с точечными кровоизлияниями под капсулой.
Анализ клинико-эпизоотологических данных и патоморфологических морфологических изменений дает основание предположить, что основную долю болезней молодняка крупного рогатого скота в возрасте до 5-ти суток составляет эшерихиоз. Для бактериологического исследования использовали патологический материал от телят в возрасте от 2-х до 6-ти суток, в том числе:
- павших или убитых с диагностической целью (n=6);
- с признаками желудочно-кишечной инфекции (n=3);
- образцы фекалий от животных с признаками диареи, дегидратации и токсемии (n=35);
- смывы со слизистых оболочек полости рта и носовой полости больных от 26 телят;
- смывы с 20 объектов репродукторных помещений животноводческих хозяйств Рязанской области (ООО колхоз "имени Пряхина В.Г.", ООО "Семион-агро", ОАО АПК "Золотая Нива", Колхоз "Шелковской").
Всего при исследовании было выделено 86 культур семейства Enterobacteriaceae , из которых 64 культуры были идентифицированы как E.coli , 10 - P. mirabilis , 9 - K.pneumoniae , 3 - S.typhimurium (табл. 1).
Таблица 1. Видовой состав энтеробактерий, выделенных в животноводческих хозяйствах
1.1. Смешанная кишечная инфекция - остропротекающая инфекционная болезнь молодняка разных видов сельскохозяйственных животных, которая имеет полиэтиологическую природу и вызывается двумя-тремя и более видами патогенных энтеробактерий, относящимся к родам Escherichia, Citrobacter, Proteus, Morganella, Klebsiella, Salmonella. Помимо указанных микроорганизмов возбудителями болезни могут быть также бактерии других родов и семейств - Yersinia, Pseudomonas, Staphylococcus, Streptococcus, Clostridium и пр. Наряду с бактериальными агентами нередко (особенно на крупных фермах) болезнь обусловливают корона- и ротавирусы.
1.2. Болезнь возникает в первые дни и недели жизни животных и проявляется чаще в виде энзоотической вспышки, развитию которой способствуют различные факторы, связанные с несоблюдением технологических и ветеринарно-санитарных требований воспроизводства стада, а также нарушением режимов содержания и кормления молодняка.
1.3. Смешанная кишечная инфекция может протекать в кишечной (энтеритной) и септической формах. При кишечной форме возбудители болезни локализуются только в желудочно-кишечном тракте и брыжеечных лимфоузлах, регионарных поражённым участкам кишечника; при септической форме - в паренхиматозных органах, различных тканях, а также в кишечнике и брыжеечных лимфоузлах. Основными клиническими признаками болезни являются: потеря аппетита, понос, переходящий в профузный, нарастающая слабость, депрессия, учащенное дыхание и сердцебиение, обезвоживание организма (при затяжном течении); нередко наблюдается поражение центральной нервной системы (возбуждение, судороги), иногда пневмония, артриты; температура тела в пределах нормы, в отдельных случаях повышена на 0,5 - 1 °С, в предагональном состоянии она снижается ниже нормы.
1.4. Патологоанатомические изменения у погибших животных имеют картину катарального или катарально-геморрагического гастроэнтерита, на слизистой желудка, тонкого отдела кишечника и слепой кишки могут встречаться язвы, нередко отмечаются множественные точечные, полосчатые и пятнистые кровоизлияния на слизистой желудка, толстого и тонкого отделов кишечника, под капсулой селезенки, эпи- и эндокарде (клапанах); иногда отмечается очаговая катаральная пневмония и отек легких, дистрофия печени; регионарные брыжеечные лимфатические узлы как правило увеличены, отечны, на разрезе розового или красно-вишневого цвета; при вскрытии черепной коробки - гиперемия кровеносных сосудов и отек ткани головного мозга. Указанные изменения могут быть в отдельных или одновременно в нескольких органах.
1.5. Диагноз на смешанную кишечную инфекцию в хозяйствах устанавливают на основании совокупности эпизоотологических данных (возраст заболевших животных, массовость поражения, стационарность и др.), клинических признаков болезни, патологоанатомической картины и результатов бактериологического (при необходимости еще и вирусологического) исследования патологического материала от больных или погибших животных.
2.1. Для посмертной бактериологической диагностики в лабораторию направляют 2 - 4 свежих трупа погибших или убитых с диагностической целью больных животных (желательно не подвергавшихся лечению антибактериальными препаратами). В случае невозможности доставки целого трупа посылают следующий патологический материал: голову, трубчатую кость, сердце, перевязанное лигатурой вблизи разреза сосудов и аорты, селезенку, долю печени с желчным пузырем, брыжеечные лимфатические узлы, регионарные воспаленному участку кишечника, а также пораженный отрезок тонкого отдела кишечника, перевязанный с двух концов лигатурой (в отдельной таре или полиэтиленовом пакете). Указанный патологический материал исследуют в день поступления его в лабораторию.
2.2. Для прижизненной бактериологической диагностики в лабораторию направляют фекалии больных диареей животных, не подвергавшихся лечению антибактериальными препаратами. Пробы фекалий берут от 5 - 6 больных животных одной фермы в стерильные пробирки по 2 - 3 г непосредственно из прямой кишки с помощью прокипяченного резинового катетера. Пробирки вместе с сопроводительной запиской упаковывают в полиэтиленовый пакет или картонную коробку.
При невозможности быстрой доставки проб фекалий в лабораторию (через 3 - 4 часа после взятия) их консервируют стерильным 30 %-ным глицериновым раствором в соотношении 1:2 (см. приложение).
2.3. Пробы фекалий и содержимого тонкого отдела кишечника (в количестве не более 0,5 г) разводят в 10 см 3 стерильного 0,85 %-ного раствора хлорида натрия, тщательно размешивают и затем выдерживают 10 - 15 минут при комнатной температуре для осаждения крупных частиц. Надосадочную жидкость используют для посева на питательные среды не позднее 1 - 2 часов после приготовления взвесей. При исследовании консервированных фекалий, их тщательно размешивают, после чего разводят физиологическим раствором в 5 - 10 раз.
3.1. Патологический материал (за исключением содержимого тонкого отдела кишечника и фекалий) засевают в пробирки с МПБ и на плотные дифференциально-диагностические среды в чашках: Эндо (или Левина) и среду Плоскирева (или висмут-сульфит агар). Содержимое тонкого отдела кишечника и фекалий засевают только на указанные выше плотные среды в чашках. Кроме того для выделения из фекалий сальмонелл неразведенные пробы фекалий засевают еще в одну из сред обогащения (селенитовый бульон, магниевую, Мюллера или др.) в соотношении 1:5.
3.1.1. Посев материала в МПБ проводят пастеровской пипеткой. Посевы на плотные среды в чашках из внутренних органов и тканей, указанных в п. 2.3, делают путем отпечатков разрезанной поверхностью кусочка органа из предварительно профламбированного участка на подсушенную питательную среду или вносят материал пастеровской пипеткой на поверхность среды, а затем равномерно растирают его стеклянным шпателем.
3.1.2. Содержимое тонкого отдела кишечника, взятое путем соскоба с пораженного участка слизистой оболочки, суспендируют в 10 см 3 стерильного 0,85 %-ного раствора хлорида натрия, затем засевают суспензию бактериологической петлей на подсушенные в термостате плотные дифференциально-диагностические среды в чашках широким частым штрихом по всей поверхности среды. Аналогичным образом проводят посев разведенных фекалий.
3.2. Пробирки с посевами в МПБ из внутренних органов и тканей инкубируют при температуре 37 - 38 °С в течение 18 - 24 часов. При наличии в МПБ помутнения среды культуру микроскопируют и в случае обнаружения мелких грамотрицательных палочек пересевают ее на агар Эндо (или Левина) и среду Плоскирева (или висмут-сульфит агар) в чашках, которые помещают в термостат (37 - 38 °С ) на 18 - 24 часа.
Пересев культур, полученных в МПБ, на плотные селективные среды проводят в том случае, если отсутствует рост колоний на этих средах в первичных посевах из соответствующих органов и тканей.
При наличии на агаре Эндо (или Левина) роящегося налета, характерного для протея, пересевают его на скошенный МПА (культуры из двух-трех внутренних органов, тканей или фекалий). Чашки и пробирки с посевами инкубируют 18 - 20 часов при той же температуре.
3.4. Чашки с первичными посевами на агаре Плоскирева инкубируют при температуре 37 - 38 °С в течение 24 - 36 часов. После просмотра культур пересевают мелкие круглые колонии S-формы полупрозрачные, сероватого цвета с голубым оттенком в пробирки со скошенным МПА (по 1 - 2 колонии с культур из двух-трех внутренних органов, тканей или фекалий, каждую колонию в отдельную пробирку), которые помещают в термостат на 18 - 24 часа.
В том случае, если пересев проводят на комбинированную среду (Олькеницкого, Клиглера), то каждую колонию пересевают в одну пробирку с этой средой и в одну пробирку со скошенным МПА.
3.5. Суточные культуры бактерий на скошенном МПА или комбинированной среде, выделенные из внутренних органов, тканей или фекалий, микроскопируют (окраска по Граму) и при наличии в мазках однородных мелких грамотрицательных палочек, не образующих спор и капсул (бактерии вида Klebsiella pneumoniae образуют капсулу), используют для изучения ферментативных, патогенных, антигенных свойств, а также (при необходимости) определения подвижности в полужидком МПА. Для выявления у культур клебсиелл капсулы окраску мазков проводят по методу Гинса (тушью).
3.6. Ферментативные свойства изучают у 2 - 6 агаровых (в порядке исключения у бульонных) культур бактерий, выделенных из одного патологического материала, на наборе сред с углеводами и индикатором Андреде или полужидких средах с индикатором ВР, куда входят среды с глюкозой, лактозой, сахарозой, маннитом, мальтозой, а также на средах с мочевиной, сернокислым железом (определение сероводорода), агаре Симонса, в бульоне Хоттингера или МПБ (определение индола), мясопептонной желатине, среде с фенилаланином.
При использовании комбинированной среды Олькеницкого или Клиглера учитывают изменения, вызываемые представителями разных родов энтеробактерий в этой среде, после чего данную культуру изучают по другим необходимым биохимическим тестам.
Засеянные пробирки инкубируют при температуре 37 - 38 °С.
Предварительные результаты изучения ферментативных свойств культур учитывают через 24 часа, окончательные результаты - через 48 часов. Изучение ферментативных свойств культур энтеробактерий можно проводить также с помощью тест-системы для биохимической идентификации энтеробактерий. Родовую и видовую принадлежность культур устанавливают по показателям таблицы.
Следует учитывать, что у бактерий рода Proteus встречаются нероящиеся штаммы, образующие при росте на плотных питательных средах мелкие круглые колонии S-формы сероватого цвета. Важными признаками родовой идентификации таких штаммов является их способность дезаминировать фенилаланин и разжижать желатин.
При наличии у культур отклонений от основных показателей таблицы используют дополнительные тесты: реакции с метилротом и Фогес-Проскауэра, наличия образования оксидазы, определение подвижности и др.
СХЕМА
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО
МАТЕРИАЛА НА СМЕШАННУЮ КИШЕЧНУЮ ИНФЕКЦИЮ
Дифференциальные признаки энтеробактерий по ферментативным свойствам
- Описание болезни и причины её возникновения
- Патогенез
- Симптомы колибактериоза
- Диагностика заболевания
- Особенности лечения
- Профилактические меры
Описание болезни и причины её возникновения
Возбудителем колибактериоза являются патогенные штаммы кишечной палочки. Поражение молодняка происходит с 1 по 7 день жизни, при этом возбудитель может попасть в организм не только от мёртвых или заражённых, но и через ЖКТ здоровых животных. Главными источниками заражение колибактериозом являются больные или переболевшие телята, а также взрослые животные, являющиеся носителями инфекции.
Кишечная палочка (эшерихии) может проникать внутрь животного через грязное вымя и сосание молока, в котором находится возбудитель. Заболевший телёнок через свою мочу и жидкие экскременты выделяет во внешнюю среду много патогенных организмов. В результате чего появляется большой риск заболевания всего молодняка.
Существует ряд факторов, влияющих на развитие болезни:
- содержание большого количества молодняка на одном пространстве
- неполноценное питание стельных животных;
- позднее выпаивание телят молозивом;
- неправильные условия содержания животных.
Патогенез
Возникновение колибактериоза, помимо эшерихий, зависит и от предрасположенности организма животного, высокой проницаемостью стенки кишечника в первые два дня жизни, плохо развитой барьерной функции печени и низкой кислотностью.
Проникновение возбудителя происходит также по причине физиологических особенностей пищеварительного тракта телёнка. Очень часто молозиво не поступает в первый час жизни, а это значит, что не происходит блокировка иммунными глобулинами. Поэтому в организм телёнка легко попадают вредоносные бактерии и вирусы.
Существует три формы заболевания:
- Септическая форма. В данном случае кишечные палочки могут проникать в лимфатическую систему, а далее в кровь и органы. При недостаточном содержании иммуноглобулинов происходит быстрое заражение всего организма. В этом процессе часть бактерий разрушается, что приводит к шоку, наступает общая слабость и сосудистый коллапс. Для этой формы характерен понос и высокая вероятность летального исхода.
- Для энтеритной формы характерно внедрение инвазивных форм вируса. Из-за накопления в организме экзотоксина происходит гиперсекреция жидкости и электролитов в кишечнике.
- При энтеротоксемической форме у животного наблюдается токсикоз и профузная диарея. Болезнь может протекать в острой и подострой форме.
Симптомы колибактериоза
Инкубационный период заболевания может составлять от 1-2 часов до 3 дней. В зависимости от возраста телёнка и особенностей его организма колибактериоз протекает в подострой, острой и сверхострой форме. При несвоевременном лечении летальный исход наступает в 60-70% всех случаев.
Энтеритная форма имеет следующую симптоматику:
- непрекращающийся понос;
- фекалии с примесью крови или слизи;
- обезвоживание и истощение всего организма;
- пенистые белые фекальные массы;
- запавшие бока и веки.
При септической форме характерно:
- сильное угнетение телёнка;
- учащение пульса и дыхания;
- повышение температуры;
- диарея лишь в крайне редких случаях;
- волнообразные движения животного.
При смешенной форме колибактериоза все симптомы могут себя проявлять. Чаще всего лечение не даёт положительного результата, животное погибает на 2-3 день.
Диагностика заболевания
Важно! Не следует самостоятельно ставить диагноз. Он может оказаться ошибочным, что приведёт лишь к ухудшению состояния животного!
Особенности лечения
Положительного результата можно добиться при своевременном лечении. При этом заболевшего телёнка необходимо сразу же изолировать от остальных особей и посадить на строгую диету, исключив полностью молоко. В первые дни проявления колибактериоза следует давать телёнку антигистаминные препараты и антибиотики (хлортетрациклин, неомицин и прочие).
Выбор лекарственных средств должен предлагать ветеринарный врач после проведения всех необходимых исследований. После курса антибиотиков животному назначают приём пробиотиков для восстановления микрофлоры в кишечнике. Встречается также практика назначения бактериофага телятам.
Также для лечения животным ветеринаром могут назначаться такие лекарственные средства, как Тримеразин, Цефтибутен, Энрофлон и прочие.
Следует помнить! Лекарственные препараты назначаются лишь опытным ветеринаром! Самостоятельное лечение в данном случае категорически не рекомендуется. Мясо умершего телёнка запрещается употреблять в пищу не только человеку, но и животным!
Профилактические меры
Чтобы свести к минимуму необходимость лечения колибактериоза, следует провести ряд профилактических мер:
- Вакцинация коров перед отёлом (за месяц до спаривания, 2 раза через две недели). Для этого подойдёт инактивированная вакцина.
- Вакцинирование телят минимизирует риск возникновения данного заболевания.
- Соблюдение правил гигиены персонала, который занимается животными, а также содержание всего инвентаря в чистоте.
- Дезинфекция всех помещений и оборудования.
Залогом успеха в разведении здоровых животных является тщательный уход и наблюдение за ними, а при любых изменениях в поведении или состоянии здоровья необходима консультация ветеринара.
Читайте также: