Пцр на хламидии микоплазму уреаплазму трихомонады герпес и цитомегаловирус

Официальный сайт

Главная страница
>
Услуги
>
Рекомендации
>
Рекомендации_kozhven-stoskol

У многих пар, планирующих ребенка, возникают сомнения, нужно ли сдавать анализы на инфекции, передающиеся половым путем (ИППП), если вроде бы все в порядке? Но, к сожалению, эти заболевания довольно распространены и часто протекают без всяких проявлений. А большинство из них могут отрицательно повлиять на зачатие, ход беременности, роды и здоровье малыша.

На сегодняшний день заболевания, передающиеся половым путем, чрезвычайно распространены во всем мире. Ежегодно регистрируются миллионы новых случаев ИППП. Следствием заражения ими становятся воспалительные заболевания половой системы, которые являются одной из самых частых причин обращения женщин к гинекологам. ИППП оказывают множество неблагоприятных воздействий на здоровье человека, но самым значительным является урон, наносимый репродуктивной функции как у женщин, так и у мужчин. Прежде всего возникают сложности с зачатием, а также с течением беременности и развитием плода. Таким образом, сложно переоценить значение обследования обоих партнеров на ИППП и, при необходимости, лечения этих заболеваний еще на этапе планирования беременности.

Существует множество ИППП, виновниками которых могут быть бактерии, вирусы и простейшие. К основным видам, влияющим на зачатие, течение беременности и развитие плода, относятся: гонококки, бледная трепонема, трихомонада, а также хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, цитомегаловирус, генитальный герпес, вирус папилломы человека и др.

Все эти микроорганизмы негативно воздействуют на репродуктивную систему, часто вызывая воспалительные заболевания половых органов. У женщин могут развиться, например, вульвовагинит (воспаление наружных половых органов и влагалища), эндометрит (воспаление слизистой оболочки матки), сальпингоофорит (воспаление маточных труб и яичников).

А следствием может стать бесплодие, внематочная беременность, хронические тазовые боли, замирание и прерывание беременности на различных сроках, нарушения развития плода. У мужчин часто возникают воспаления полового члена и простаты, приводящие к проблемам с эрекцией, простатиту, опухолям простаты и бесплодию.

Одним из самых распространенных заболеваний, передающихся половым путем, является трихомониаз. Вызывает его простейший одноклеточный паразит вагинальная трихомонада. Самыми частыми клиническими проявлениями являются обильные пенистые выделения из половых путей с неприятным запахом, зуд в промежности, дискомфорт при мочеиспускании. Однако до 50% женщин переносят трихомониаз бессимптомно.

У мужчин в большинстве случаев симптомов либо нет вовсе, либо их очень мало (например, выделения из мочеиспускательного канала, боль и жжение при мочеиспускании). Кроме этого, трихомонады, размножаясь в семенной жидкости и выделяя вредные продукты жизнедеятельности, тормозят рост сперматозоидов и обездвиживают их.

Иногда инфекция живет в организме десятки лет. Паразит при трихомониазе у женщин может проникать в верхние отделы мочеполовой системы, вызывая воспалительный, а потом и спаечный процесс, следствием которого может стать внематочная беременность. Проводились исследования, указывающие на связь трихомоноза у женщин с преждевременными родами, преждевременным излитием околоплодных вод и низкой массой тела новорожденных.

Другая инфекция, передающаяся половым путем, также негативно сказывающееся на возможности зачатия и течении беременности, – это гонорея. Ее вызывает бактерия Neisseria gonorrhoeae. У мужчин гонорея обычно проявляется ярко, поэтому редко остается незамеченной, а вот при гонорее у женщин в 50–70% не наблюдается никаких симптомов, и болезнь часто переходит в хроническую форму. При отсутствии лечения гонореи у женщин длительно существующее воспаление может привести к бесплодию и внематочной беременности. Несмотря на то, что гонорея у женщин не вызывает пороков развития плода, на беременность она может оказать значительное влияние. Нередко поражаются околоплодные оболочки, что может привести к выкидышу, преждевременному излитию околоплодных вод, преждевременным родам. Ребенок может инфицироваться как до родов, так и во время них. У новорожденных заражение гонореей проявляется конъюнктивитом (воспаление слизистой глаз) и сепсисом (заражение крови).

Генитальный герпес – крайне опасное воспалительное заболевание половых органов, вызванное вирусом простого герпеса. Иногда герпес протекает бессимптомно. Но чаще герпес проявляется высыпаниями на коже вокруг рта и носа (простуда) или в области половых органов. Сначала появляются пузырьки с прозрачным содержимым, сопровождающиеся зудом и болью, затем они лопаются, образуя открытую ранку, которая через несколько дней покрывается корочкой и заживает. Чем же грозит герпес во время беременности? Прежде всего это выкидыши на различных сроках, инфицирование плода и новорожденного. Длительно существующий в организме женщины герпес может привести к хроническому эндометриту, воспалению придатков матки, замиранию беременности и самопроизвольным выкидышам на разных сроках. У мужчин герпес может привести к уретриту и простатиту, и в сочетании с другими ИППП стать причиной бесплодия.

Какие диагностические мероприятия рекомендуется пройти паре для исключения ИППП при планировании беременности?

Женщина должна обратиться к гинекологу, где у нее возьмут мазки, при микроскопии которых выявляются такие заболевания, как трихомониаз и гонорея. Обязательно нужно сдать анализ на ПЦР (полимеразная цепная реакция) – исследование отделяемого половых органов и уретры на наличие хламидий, уреаплазм, микоплазм, ЦМВ, герпеса, гонококков и, по назначению специалиста, других возбудителей ИППП. При необходимости количественного определения возбудителя или чувствительности к антибиотикам могут использоваться бактериологические анализы на ИППП – посевы взятого материала на питательные среды. Такой метод применяется, например, для диагностики трихомониаза, хламидиоза, микоуреаплазмоза, ЦМВ и герпеса. Обнаружить ИППП можно и при помощи анализов крови из вены. Так, по наличию специфических антител класса IgM, IgG определяют заражение ЦМВ, герпесом, хламидиями и другим инфекциям. Кроме этого, желательно, сдав кровь из вены, исключить и такие заболевания, как гепатит В и С, сифилис и ВИЧ. Не следует забывать, что партнер также должен пройти обследование, даже при отсутствии каких-либо симптомов. Для обследования мужчина должен обратиться к урологу, андрологу или дерматовенерологу. В этом случае специалист возьмет мазок из мочеиспускательного канала для микроскопии, ПЦР и бактериологических анализов на ИППП. Также доктор даст направление на необходимые анализы крови.

Лечение заболеваний, передающихся половым путем, должно назначаться только врачом. Самолечение абсолютно недопустимо, оно может только усугубить заболевание, способствуя развитию форм возбудителей, устойчивых к действию лекарственных препаратов.

Длительность лечения ИППП составляет в среднем от 10 дней до 1 месяца в зависимости от вида инфекции, передающейся половым путем, тяжести течения и длительности ее нахождения в организме. В ряде случаев требуется повторение курса. Контрольное обследование необходимо обоим партнерам через 1–1,5 месяца после окончания лечения. Если повторный анализ на ИППП подтвердит у них отсутствие инфекции (т.е. излечение), то можно планировать беременность в следующем менструальном цикле.

ИППП бактериальной природы, такие как гонорея, хламидии, микоплазмы, уреаплазмы, лечатся антибактериальными препаратами. Помимо этого женщине, как правило, назначается местное лечение (свечами) с последующим восстановлением микрофлоры влагалища. Мужчинам дополнительно может быть назначено промывание мочеиспускательного канала дезинфицирующими растворами.

Вирусные инфекции, передающиеся половым путем, лечатся противовирусными препаратами строго по назначению врача. Также применяются различные лекарственные средства, повышающие иммунитет.

При трихомониазе используются противопротозойные препараты в свечах или таблетках.

За звучной аббревиатурой ПЦР скрывается сложная и не слишком понятная для рядового пациента расшифровка — полимеразная цепная реакция. Что же такое ПЦР-диагностика, на чем она основана и почему в последнее время ее стали считать самой перспективной технологией в постановке диагнозов, касающихся инфекционных и вирусных заболеваний? Мы расскажем о преимуществах ПЦР-метода, его особенностях и этапах проведения.

ПЦР-диагностика: что это такое?

Диагностика методом ПЦР существует чуть более 30 лет. Значительно эволюционировав за это время, она зарекомендовала себя как один из наиболее точных способов выявления инфекций. В основе метода лежит принцип многократного увеличения микроскопических концентраций фрагментов ДНК возбудителя в биологической пробе пациента в искусственных условиях. В результате сложного процесса, называемого амплификацией, под воздействием ферментов и изменения температуры (от 50 до 95°С) из одной молекулы ДНК образуется две. При этом происходит копирование участка ДНК, который присутствует только у того вида патогенного микроорганизма, который интересует врача.

Цикл образования новой молекулы ДНК занимает всего около 3 минут, а тридцати-сорока циклов вполне достаточно, чтобы получить количество молекул, необходимое для достоверного визуального определения методом электрофореза.

Кроме амплификации, то есть простого увеличения числа копий молекулы ДНК, с помощью ПЦР можно производить и другие манипуляции с генетическим материалом, например, сращивать фрагменты ДНК, вводить мутации и т.д. Это позволяет использовать ПЦР не только для диагностики инфекционных и генетических заболеваний, но и для установления отцовства, клонирования и выделения новых генов.

ПЦР-диагностика проводится в специальных лабораториях с помощью амплификационного оборудования. На сегодня существует множество различных модификаций ПЦР, включая технологии с использованием не только ДНК, но и фрагментов рибонуклеиновой кислоты (РНК). В некоторых из них амплификация осуществляется при постоянной температуре, и для их проведения специальное оборудование не требуется.

Еще одна популярная модификация ПЦР — мультиплексная амплификация (МПА), которая позволяет проводить исследование сразу нескольких изучаемых фрагментов в одной пробирке. Это не только ускоряет и удешевляет проведение анализа, но и позволяет рассматривать одни фрагменты, получившиеся в результате реакции, в качестве положительных маркеров для других, что еще больше увеличивает точность исследования методом ПЦР.

В клинической медицине ПЦР-диагностика является одним из наиболее востребованных методов анализа в самых разных сферах:

Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ (ИФА), выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции.
Высокая специфичность метода . Она обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется фрагмент ДНК, характерный только для конкретного возбудителя инфекции. Специфичность исключает возможность ложных результатов анализа, тогда как в иммунологических методах исследований ошибки вполне вероятны из-за перекрестной реакции антигенов.
Высокая чувствительность . При помощи ПЦР-диагностики можно выявить присутствие в организме даже единичных клеток вирусов или бактерий в тех случаях, когда обычными методами сделать это практически невозможно. ПРЦ определяет наличие всего 10–100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103–105.
Универсальность . Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы.
Скорость получения результатов . Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4–5 часов.
Диагностика латентных инфекций . ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.

Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания.

Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода:

Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма . При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени (1–2 месяца), за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме.
Возможность возникновения перекрестной реакции . Подбор фрагментов ДНК (праймеров) осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма. Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа.
Изменчивость микроорганизмов . Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа.

Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя.

ПЦР-диагностика проводится в специальной лаборатории в несколько этапов.

Забор биоматериала . Процедура, предшествующая непосредственному анализу, которая осуществляется в процедурном кабинете соответствующего профиля. Забор делается с помощью стерильного оборудования только в стерильные пробирки. Материалом для исследования могут быть:
- Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек: из уретры, из цервикального канала, со слизистой дыхательных путей и зева, из конъюнктивы. Забор проводится с помощью специального ершика, при этом недопустимо попадание в материал следов крови.
- Моча . Собираются первые 50 г утренней мочи в стерильную емкость. Материал используется для диагностики мочеполовых инфекций.
- Мокрота . Используется для ПЦР-диагностики туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза. Мокроту собирают в стерильный флакон в количестве 15–20 мг.
- Кровь, сыворотка, плазма . С их помощью диагностируются гепатиты, герпес, ВИЧ-инфекция. Для анализа используется венозная кровь (1–1,5 мл), собранная у пациента натощак в стерильную пробирку. Хранить биоматериал можно не более суток при температуре 4°С. Замораживать кровь категорически запрещается.
- Биологические жидкости . К ним относятся слюна, сок простаты, околоплодная, плевральная, спинномозговая, суставная жидкости. Собираются при помощи пункции с использованием стерильного инструментария в количестве 0,1–1,5 мл в стерильные пробирки.
- Биоптаты , т.е. материалы, полученные путем биопсии. Обычно на анализ отправляют биоптаты двенадцатиперстной кишки или желудка, чтобы выявить хеликобактерную инфекцию. Объем материала 2–3 мм 3 .
Хранение и транспортировка биоматериала . Хранить образцы можно при комнатной температуре не более 2 часов. Если необходимо длительное хранение, то пробы помещают в холодильник с температурой 2–8°С на срок не более одних суток. Допустимо хранение некоторых биоматериалов в течение двух недель в замороженном виде при температуре -20°С. Оттаивание и повторное замораживание проб запрещено. Транспортировка, если она необходима, должна проводиться в специальных термоконтейнерах или термосах с соблюдением всех правил хранения и перевозки биоматериалов.
Выделение ДНК из образца . Способ выделения зависит от вида определяемого микроорганизма и от вида биологического образца. Если, например, анализируется соскоб эпителиальных клеток, используется так называемый метод твердофазной сорбции, заключающийся в добавлении в образец специального вещества, концентрации ДНК на сорбенте и его многократной отмывке буферным раствором.
Проведение ПЦР . Некоторое количество образца из биологической пробы переносится в специальную микроцентрифужную пробирку. Туда же добавляется амплификационная смесь, имеющая сложный состав, в объеме 25 мл. Пробирки устанавливают в программируемый термостат, и автоматическом режиме проводится амплификация. Время ее проведения зависит от заданной программы и составляет 2–3 часа. Одновременно с опытными пробами проводятся контрольные — положительные , включающие в себя контрольный препарат ДНК исследуемого возбудителя, и отрицательные , не содержащие исследуемую ДНК. Количество циклов амплификации варьирует от 30 до 40, более 40 циклов проводить не рекомендуется, так как это способствует увеличению количества неспецифических продуктов в пробе.
Регистрация результатов . Фрагмент ДНК, характерный для возбудителя инфекции, выделяют методом электрофореза в присутствии специального вещества — бромистого этидия. Его соединение с фрагментами ДНК дает светящиеся полосы при облучении ультрафиолетовым излучением. Образец помещают в камеру для электрофореза и в течение 35–40 минут проводят разделение продуктов амплификации. После этого образец просматривают в ультрафиолетовом свете — наличие оранжевой светящейся полосы свидетельствует о положительном результате.
Интерпретация результатов исследования . Результат ПЦР-диагностики может быть либо положительным, либо отрицательным. Положительный результат говорит о том, что в организме человека обнаружены следы инфекции, причем именно в данный момент времени. Количественный результат ПЦР-анализа оценить может только врач, они индивидуальны для разных типов инфекций. На основании количественного результата можно сделать вывод о степени активности заболевания и определить характер лечения.

Цена ПЦР-диагностики зависит от того, на какую конкретно инфекцию пациент планирует проверяться, от вида анализируемого материала, методики тестирования — качественной или количественной. Цена за определение одной инфекции составляет от 200 до 800 рублей в разных клиниках. Кроме того, к стоимости анализа добавится и плата за забор биоматериала — около 400 рублей. Средняя стоимость ПЦР-диагностики разных видов приведена в таблице 1.

Таблица 1 . Примерные цены на анализы ПЦР в Москве

Название анализа	Цена, руб.
Определение ДНК хламидия	750
Определение ДНК микоплазмы хоминис	540
Определение микоплазмы гениталиум	350
Определение ДНК уреаплазмы	350
Гонококк, определение ДНК	350
Определение ДНК герпеса (разные типы)	350–600
Определение ДНК кандиды	570
Вирус краснухи, определение РНК	800
Дифференцированное определение ДНК ВПЧ (разные типы)	350–1900 [1]

Наименование теста / услуги

МОЛЕКУЛЯРНАЯ (ДНК/РНК) ДИАГНОСТИКА МЕТОДОМ ПЦР

Соскоб из цервикального канала, соскоб из уретры, соскоб из влагалища, смешанный соскоб из урогенитального тракта, секрет простаты, соскоб с эрозивно-язвенных элементов, мазок с поверхности миндалины, мазок из носоглотки, мазок из ротоглотки, отделяемое конъюнктивы, биоптат легких, биоптат лимфоузлов, биоптат печени, биоптат ЖКТ, бронхо-альвеолярный лаваж, мокрота, моча, амниотическая жидкость, плевральная жидкость, синовиальная жидкость, слюна, спинномозговая жидкость, сперма, другое (указать)

ДНК хламидии (Chlamydia trachomatis)