Оптическая плотность анализ на герпес

Описание

Антитела к вирусу простого герпеса 2 типа lgG, HSV IgG количественный — позволяет определить наличие антител класса G к вирусу простого герпеса 2 типа, что говорит об инфицированности вирусом простого герпеса 2 типа.

Антитела класса IgG начинают вырабатываться через 10–14 дней с момента инфицирования, и остаются в крови на всю жизнь, что обеспечивает иммунитет человека от повторного заражения. Антитела класса G вырабатываются в период хронической инфекции вирусом простого герпеса первого или второго типа.

ВПГ-1 (Herpes Simplex virus I)
Вирус простого герпеса (Herpes simplex) первого типа чрезвычайно распространён.

ВПГ-2 (Herpes simplex II)
Вирус генитального герпеса Herpes simplex 2 типа поражает, преимущественно, покровные ткани (эпителий) шейки матки у женщин и полового члена у мужчин, вызывая боль, зуд, появление прозрачных пузырьков (везикул) на месте которых образуются эрозии/язвочки. Однако при оральных контактах возможно поражение покровной ткани губ и ротовой полости. У беременных вирус может проникнуть через плаценту в плод и вызвать у него врождённые дефекты. Герпес может вызвать также самопроизвольный аборт или преждевременные роды. Но особенно вероятна опасность заражения плода в процессе родов, при прохождении через шейку матки и влагалище при первичной или рецидивирующей генитальной инфекции у матери. Такое заражение на 50% повышает смертность новорожденных или развитие у них тяжёлых повреждений головного мозга или глаз. При этом определённый риск инфицирования плода существует даже в тех случаях, когда у матери ко времени родов отсутствуют какие-либо симптомы генитального герпеса. Ребёнок может заразиться и после рождения, если у матери или у отца имеются поражения, во рту, или получить вирус с материнским молоком. Вирус простого герпеса типа II, по-видимому, связан с раком шейки матки и раком влагалища и повышает восприимчивость к ВИЧ-инфекции, вызывающей СПИД.

Диагностическое значение при первичной инфекции вирусом герпеса имеет выявление четырёхкратное увеличение титров специфических иммуноглобулинов IgG в парных сыворотках крови, полученных от больной с интервалом в 10–12 дней.

Рецидивирующий герпес обычно протекает на фоне высоких показателей IgG, свидетельствующих о постоянной антигенной стимуляции организма.

HSV и TORCH
HSV-инфекция входит в группу TORCH-инфекций (название образовано начальными буквами в латинских наименованиях — Toxoplasma, Rubella, Cytomegalovirus, Herpes), считающихся потенциально опасными для развития ребенка. В идеальном случае проконсультироваться с врачом и пройти лабораторное обследование на TORCH-инфекции женщине нужно за 2–3 месяца до планируемой беременности, поскольку в этом случае будет возможность предпринять соответствующие лечебные или профилактические меры, а также при необходимости в будущем сравнить полученные результаты исследований до беременности с результатами обследований во время беременности.

Показания:

• подготовка к беременности (рекомендуется обоим партнёрам);
• признаки внутриутробной инфекции, фето-плацентарная недостаточность;
• ВИЧ-инфекция;
• иммунодефицитные состояния;
• дифференциальная диагностика урогенитальных инфекций.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.

Интерпретация результатов


Единицы измерения: УЕ*

Положительный результат будет сопровождаться дополнительным комментарием с указанием коэффициента позитивности пробы (КП*):

• КП >= 11,0 — положительно;
• КП *Коэффициент позитивности (КП) — это отношение оптической плотности пробы пациента к пороговому значению. КП — коэффициент позитивности, является универсальным показателем, применяемым в иммуноферментных тестах. КП характеризует степень позитивности исследуемой пробы и может быть полезен врачу для правильной интерпретации полученного результата. Поскольку коэффициент позитивности не коррелирует линейно с концентрацией антител в пробе, не рекомендуется использовать КП для динамического наблюдения за пациентами, в том числе контроля эффективности лечения.
  

*Импакт фактор за 2018 г. по данным РИНЦ

Журнал входит в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК.

Читайте в новом номере

Цель исследования: изучение взаимосвязи иммунологических показателей с маркерами вируса герпеса человека 8 типа (ВГ-8) для выявления лабораторных вариантов состояния вирусной репродукции и иммунитета человека у пациентов с саркомой Капоши (СК) и выделения прогностических маркеров обострения заболевания.
Материал и методы: проведено комплексное обследование 22 пациентов с СК. Применялся метод иммуноферментного анализа для определения иммуноглобулинов класса G (IgG) к малому капсидному протеину (МКП) ВГ-8, метод полимеразной цепной реакции для определения ДНК ВГ-8 в мононуклеарах периферической крови человека (МПК) и в биоптате из очага СК. Оценивалась продукция интерферона α (ИФН-α), интерлейкинов: ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-8, рецепторного антагониста к ИЛ-1 (РА-ИЛ-1).
Результаты исследования: обнаружена корреляция между IgG к МКП ВГ-8 и пониженными значениями ИФН-α, а также между выявлением ДНК ВГ-8 и повышенным количеством РА-ИЛ-1. Самое высокое содержание ИФН-α у пациентов с СК отмечается при отсутствии антител к ВГ-8. Медиана количества РА-ИЛ-1 у пациентов с выявленной ДНК ВГ-8 составила 838 пг/мл, а у пациентов с невыявленной ДНК — 187,5 пг/мл (р=0,0015). Показано повышение уровня провоспалительного ИЛ-1β в сыворотке крови пациентов с наличием IgG к ВГ-8 (р=0,0016). Показано, что при обнаружении ДНК ВГ-8 в МПК выявляются более высокие значения ИЛ-6 и наименьшие значения ИЛ-8 в сыворотке крови пациентов с СК.
Заключение: выявлены прогностические маркеры обострения герпес-вирусной инфекции 8 типа и выделены 4 лабораторных варианта СК, что позволит повысить эффективность диагностики и проводить комплекс профилактических мер по предотвращению прогрессирования СК.

Ключевые слова: вирус герпеса человека 8 типа, саркома Капоши, иммуноферментный анализ, полимеразная цепная реакция, иммуноглобулины класса G, интерферон α, интерлейкин, рецепторный антагонист к ИЛ-1.

Для цитирования: Н.Д. Львов, Е.М. Панюкова, М.В. Мезенцева Оптимизация диагностики герпес-вирусной инфекции 8 типа. РМЖ. 2019;1(II):62-65.

Diagnosis optimization for the human herpesvirus type 8

N.D. Lvov, E.M. Panyukova, M.V. Mezentseva

National Research Center for Epidemiology and Microbiology named after N.F. Gamaleya, Moscow

Aim: to study an association of immunological parameters with human herpesvirus type 8 (HHV-8) markers for the laboratory variants determination of viral reproduction and human immunity condition in patients with Kaposi’s sarcoma (KS) and prognostic markers selection of the disease exacerbation.
Patients and Methods: 22 patients with KS underwent a comprehensive study. The following methods were applied in this study: ELISA for the HHV-8 small capsid protein (SCP) IgG determination in human serum and polymerase chain reaction for the HHV-8 DNA determination in human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and in a biopsy sample from the KS focus. The production of interferon α (IFN-α), interleukins IL-1β, IL-6, IL-8, IL-1 receptor antagonist (IL-1 RA).
Results: a correlation between the HHV-8 SCP IgG detection and reduced IFN-α values, as well as between the HHV-8 DNA detection and increased IL-1 RA values, were found. The highest IFN-α levels in patients with KS were observed in the absence of HHV-8 antibodies. The IL-1 RA median value in patients with detected HHV-8 DNA was 838 pg/ml, and in patients without detected DNA — 187.5 pg/ml (p=0.0015). The proinflammatory IL-1β level increase in the patients’ serum with the HHV-8 IgG presence (p=0.0016) was shown. It was also shown that the HHV-8 DNA detection in the PBMC revealed higher IL-6 values and lower IL-8 values in patients’ serum with KS.
Conclusion: prognostic markers determination of the HHV-8 exacerbation and 4 KS laboratory variants selection were conducted, which can improve the HHV-8 diagnosis effectiveness to carry out a set of prophylactic measures for KS progression prevention.

Keywords: human herpesvirus type 8, Kaposi’s sarcoma, enzyme immunoassay, polymerase chain reaction, immunoglobulin G, interferon α, interleukin, IL-1 receptor antagonist.
For citation: Lvov N.D., Panyukova E.M., Mezentseva M.V. Diagnosis optimization for the human herpesvirus type 8. RMJ. 2019;1(II):62–65.

В статье представлены результаты оригинального исследования, посвященного изучению взаимосвязи иммунологических показателей с маркерами вируса герпеса человека 8 типа для выявления лабораторных вариантов состояния вирусной репродукции и иммунитета человека у пациентов с саркомой Капоши и выделения прогностических маркеров обострения заболевания.

Введение

Материал и методы

Результаты и обсуждение

Заключение

Только для зарегистрированных пользователей

Информация об исследовании

Простой герпес – заболевание, характеризирующееся поражением различных органов и сопровождающееся везикулезными высыпаниями на коже и слизистых половых органов. Инфицирование и рецидивирующее течение данной инфекции протекает на фоне пониженной сопротивляемости организма в отношении вирусных инфекций.

Вызывается ДНК-содержащим вирусом простого герпеса 2 (ВПГ-2).
Передается от матери - плоду и новорожденному, контактно-бытовым, воздушно-капельным и половым путем. Наиболее часто генитальный герпес вызывает ВПГ 2 типа.

Клинически инфекция начинается с зуда, жжения и чувства боли, затем появляются высыпания в виде отдельных или сгруппированных везикул. Высыпания могут сопровождаться нарушением общего состояния, повышением температуры.

Характерная локализация: для женщин – малые и большие половые губы, влагалище, шейка матки; у мужчин – головка полового члена, уретра, крайняя плоть. На внедрение вируса организм вырабатывает специфические антитела, при первичной инфекции антитела представлены классом М, антитела класса G появляются через 2-3 недели от начала заболевания. Диагноз рецидивирующей герпетической инфекции подтверждается нарастанием титров антител G не менее, чем в 4 раза при исследовании парных сывороток, взятых с интервалом 7-10 суток.

Данное исследование позволяет определить антитела IgG к 2 типу вируса простого герпеса в сыворотке крови. Антитела IgG к вирусу простого герпеса 2 типа обнаруживают у 80-90% взрослых людей, поэтому однократное их определение не имеет клинического значения. Важно наблюдать за динамикой изменения уровня антител. При острой инфекции или реактивации вируса выявляется нарастание уровня антител IgG. Антитела IgG могут циркулировать пожизненно. 4-кратное нарастание уровня антител при исследовании в парных сыворотках, взятых с интервалом 7-10 суток, свидетельствует о рецидивирующей герпетической инфекции. Определение IgG в сыворотке крови к вирусу простого герпеса 2 типа показано всем беременным, так как установлено, что инфицированные имеют в 2-3 раза больший риск спонтанного аборта и инфицирования новорожденного по сравнению с интактными пациентами. При инфицировании вирусом простого герпеса 2 типа концентрации антител IgG на ранних стадиях инфекции могут не обнаруживаться. Уровни антител могут быть очень низкими или не обнаруживаемыми в периоды между реактивациями. В подобных ситуациях можно получить отрицательный результат даже при наличии предшествующего контакта с вирусом. Вирусы простого герпеса - наиболее известные представители герпесвирусов, так как вызывают поражения практически у каждого человека. Имеются две разновидности вируса простого герпеса - ВПГ-1 (лабиальный) и ВПГ-2 (генитальный), они обладают генетическим сродством, но различаются по антигенным свойствам.

Источником заражения является больной человек или вирусоноситель. Основные пути заражения: контактный, воздушно-капельный и половой. Возможно заражение внутриутробно и непосредственно в родах при прохождении через родовые пути. При инфицировании плода в ранние сроки гестации возможно формирование пороков развития. Первичное заражение чаще всего происходит в раннем детстве (от 6 мес. до 2 лет) и протекает либо бессимптомно, либо вызывая незначительные клинические проявления. Дети первого полугодия могут не болеть ввиду наличия пассивного материнского иммунитета. Взрослые имеют (до 90%) защитный титр антител, однако колебания его возможны в течение жизни. Чувствительность к инфекции при отсутствии иммунитета близка к 100%.

Вирус проникает в слизистые оболочки (глаз, ротовой полости и гениталий) и размножается локально. Размножение вируса происходит в местах внедрения, затем развивается вирусемия, при этом возможны локализованный и генерализованный вариант течения. После исчезновения симптомов заболевания вирус не покидает организм, через нервные окончания он проникает в ближайшие нервные сплетения - ганглии. В нервных клетках вирус не размножается. К факторам, способствующим реактивации вируса, относят переохлаждение, стресс, солнечный загар, инфекции, менструации.

Инкубационный период длится 1-4 дня. Различают клинические варианты течения герпетической инфекции, вызванной вирусом простого герпеса 1 и 2 типа: герпетическое поражение слизистых (гингивит, стоматит, тонзиллит); герпетическое поражение глаз (конъюнктивит, блефароконъюнктивит, кератит, кератоиридоциклит, хориоретинит, увеит, периваскулит, неврит зрительного нерва); герпетические поражения кожи (герпес губ, носа, век, лица, рук и др. участков кожи); герпетическая экзема; генитальный герпес (поражение полового члена, вульвы, влагалища, цервикального канала, промежности, уретры, эндометрия); герпетическое поражение ЦНС (менингит, менингоэнцефалит, неврит и др.); висцеральные формы (пневмония, гепатит); герпес новорожденных; генерализованный герпес. По течению выделяют: острое, абортивное, рецидивирующее, латентное. По распространенности поражения герпес может быть локализованным, распространенным, генерализованным.

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической вирусологии, и может быть использовано для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к вирусам, а также для контроля эффективности лечения. Сущность способа состоит в том, что для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к возбудителям вирусных инфекций соответствующие иммуноглобулины, меченные пероксидазой, добавляют только в разведения сыворотки 1: 200 и 1:3200 и далее из сывороток крови больных с высокими значениями титров готовят разведения сыворотки таким образом, чтобы значения показателя оптической плотности (ОП) находились в пределах прямопропорциональной зависимости от концентрации иммуноглобулинов и за титр антител принимают наименьшее разведение сыворотки, после которого ОП остается на одном уровне. Техническим результатом является повышение точности способа оценки результата ИФА. 7 табл., 2 ил.

Изобретение относится к медицине, в частности к клинической вирусологии, и может найти применение для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к вирусам, а также для контроля эффективности лечения.

В настоящее время определение титров антител методом ИФА является одним из скрининговых тестов для диагностики многих вирусных инфекций.

В литературе приводятся многочисленные данные по оценке гуморального иммунитета с помощью ИФА и конкретные цифры значений титров антител: от 1: 20000 до 1:102400 ("Организацию и проведение мероприятий против Крымской геморрагической лихорадки на территории природных очагов России", методические рекомендации, г. Москва, 2001 г.; авт. свидетельство "Способ диагностики степени тяжести вирусного гепатита В" 4662993/14 от 16.03.89 г.). Однако исследователи, занимающиеся этим вопросом, сталкиваются с рядом трудностей: невозможностью точного установления титра, несовпадением его величины с клиническими симптомами болезни, целесообразностью назначения противовирусного лечения на основании величины показателя титров специфических антител. Значение количественного показателя титра антител играет существенную роль при клинической оценке активности вирусной инфекции, определении тактики ведения пациента, а также при назначении лечения и проведении контроля его эффективности.

Особенно наглядно эти проблемы можно показать на примере инфекций, вызванных цитомегаловирусом (ЦМВ) и вирусом простого герпеса (ВПГ). Диагностика цитомегаловирусной и герпетической инфекций остается до настоящего момента актуальной, подтверждением чего является большое количество методов и тест-систем для их выявления.

Поскольку ЦМВ и ВПГ являются персистирующими в организме человека возбудителями, то у иммунокомпетентных лиц после первичного инфицирования вырабатываются антитела, которые сохраняются в невысоких титрах (от 1:50 до 1: 800) в течение всей жизни и не имеют диагностического значения.

При выявлении у пациента антител в титре более 1:800 необходимо установить причину повышенного значения показателя, особенно при отсутствии клинической симптоматики. Как правило, в этих случаях назначают повторный анализ через определенный срок (2-3 недели), после чего на основании полученных результатов с учетом данных анализа и клинических симптомов ставят окончательный диагноз. Совершенно очевидно, что от качественной точной оценки показателя титра антител зависит тактика назначения лечения специфическими препаратами, которые являются дорогостоящими и обладающими рядом серьезных побочных действий на организм (Руководство по лабораторной диагностике цитомегаловирусной инфекции для врачей. М., 1996).

Основным тестом определения антител является в настоящее время метод ИФА. Однако большинство выпускаемых различными предприятиями тест-систем для ИФА не позволяют дать количественную оценку содержащихся в сыворотке крови человека специфических антител, проследить динамику их роста или снижения в процессе лечения, т.к. предназначены только для определения иммунного статуса: тест-система иммуноферментная для выявления антител к вирусу герпеса простого 1 и 2 типов "Герпес-скрин", ЗАО "Биосервис", г. Москва; тест-система иммуноферментная для выявления антител к цитомегаловирусу "ЦМВ-скрин", ЗАО "Биосервис", г. Москва и другие.

Наиболее близкими аналогами являются: "Инструкция по применению иммуноферментной тест-системы для определения Ig класса G к цитомегаловирусу ЦМВ-IgG" (ЗАО "ИмДи", Кольцово Новосибирской области), "Инструкция к тест-системе Beктo-BПГ-IgG-стрип" (ЗАО "Вектор-Бест", Кольцово Новосибирской области), "Инструкция к тест-системе Цитомега Стрип G" (ЗАО "НИАРМЕДИК ПЛЮС", г. Москва), "Инструкция по применению тест-системы иммуноферментной для выявления антител к вирусу краснухи Краснуха-скрин" (ЗАО "Биосервис", г. Москва), которые предполагают при определении титра антител двукратное разведение сыворотки.

Известно, что титр антител - это максимальное разведение сыворотки, содержащее специфические антитела. При определении иммунного статуса делают одно разведение сыворотки, соответственно прилагаемой к тест-системе инструкции (1: 50, 1: 100) и затем при необходимости рекомендуют ее дальнейшее титрование путем последовательных двукратных разведений. Нами установлено, что при наличии в сыворотке крови антител в титре до величины обратной 1: 600-1:800 существует прямопропорциональная зависимость между значением оптической плотности и показателем титра антител исследуемой сыворотки (фиг.1). Выше этой обратной величины титра прямопропорциональная зависимость нарушается и при дальнейшем двукратном шаге титрования (1:1600, 1:3200, 1:6400 и т. д.) получают ошибку, которая тем больше, чем больше разведение. Это показано прямым титрованием сыворотки, при котором каждое разведение сыворотки делают из цельной сыворотки, при этом установлено, что чем меньше шаг при типировании, тем меньше ошибка.

Такие данные соответствуют основному закону колориметрии Бугера-Ламберта-Бера. В реальных условиях аналитических определений окрашенные вещества при разбавлении или при действии посторонних веществ разрушаются с образованием бесцветных (или иначе окрашенных) продуктов взаимодействия. Вследствие этого наблюдается нарушение прямопропорциональной зависимости между концентрацией и оптической плотностью. Эти нарушения называют положительными или отрицательными отклонениями от закона Бугера-Ламберта-Бера.

Целью настоящего изобретения является повышение точности способа оценки результата ИФА при определении титра антител в сыворотках крови больных при диагностике вирусных инфекций.

Поставленная цель достигается тем, что сыворотку крови, взятой из локтевой вены, в количестве 3-5 мл, получают путем центрифугирования при 2500 об/мин в течение 10-15 мин, инактивируют при 56 o С 30 мин, предварительно готовят из нее ряд последовательных двукратных разведений, добавляют иммунопероксидазные коньюгаты и учитывают результаты реакции на АКИ-Ц-01 при длине волны 492 нм, а затем для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к возбудителям вирусных инфекций соответствующие иммуноглобулины, меченные пероксидазой, добавляют только в разведения сыворотки 1:200 и 1:3200 и далее из сывороток крови больных с высокими значениями титров готовят разведения сыворотки таким образом, чтобы значения показателя ОП находились в пределах прямопропорциональной зависимости от концентрации иммуноглобулинов: если величина ОП сыворотки, полученная при обычном двукратном титровании в разведении 1:200 выше 1,6-2,0 по шкале прибора, а в разведении 1: 3200 - меньше 1,0, то сыворотку 1:200 разводят в 2,5 раза и в дальнейшем титруют с интервалом 1:500, а если величина ОП сыворотки в разведении 1:3200 больше 1,0 по шкале прибора, то сыворотку 1:200 разводят в 5 или 10 раз и готовят последующие разведения с интервалом 1:1000 или 1:2000, и за титр антител принимают наименьшее разведение сыворотки, после которого ОП остается на одном уровне (ОП пробы - ОП контроля не менее 0,21).

Примеры конкретного выполнения.

Пример 1. Больная П. наблюдалась в женской консультации по поводу отягощенного акушерского анамнеза.

При исследовании сыворотки больной в ИФА тест-система производства ЗАО "ИмДи", Кольцово, Новосибирской обл. с титрованием сыворотки путем последовательных двукратных разведений титр антител (IgG) к ЦМВ составил 1:25600.

При прямом разведении сыворотки 1:1000 из 1:200 и далее с шагом 1:2000 титр антител (IgG) в сыворотке составил 1:5000 (см. табл. 1).

Диагноз был подтвержден путем обнаружения антигенов ЦМВ методом флюоресцирующих антител.

Пример 2. Больной К. обратился с жалобами на высыпания в области половых органов.

При обследовании сыворотки крови больного в ИФА (тест-система производства "Биосервис", г. Москва), приготовленной путем последовательных двукратных разведений на наличие антител (IgG) к ВПГ у него были обнаружены антитела в титрах: 1:6400 к ВПГ I типа и 1:3200 к ВПГ II типа (см. табл. 2).

Методом прямого титрования сыворотки шагом 1:500 (с разведения 1:1000) титр антител составил к ВПГ I типа - 1:2000 и 1:1500 к ВПГ II типа (см. табл. 3).

Диагноз был подтвержден путем обнаружения антигенов ВПГ методом флюоресцирующих антител.

Пример 3. Женщина во второй половине беременности обратилась к врачу по поводу контакта с ребенком, которому был поставлен диагноз краснушной инфекции. Беременная не знала, болела ли она краснухой в детстве - при серологическом исследовании в ИФА у нее были обнаружены антитела (IgG) к вирусу краснухи в титре 1:1600 при двукратном разведении сыворотки.

Через две недели был проведен повторный забор крови и исследованы парные сыворотки при аналогичном способе титрования. Титр антител остался прежним (см. табл. 4).

При анализе парных сывороток с шагом разведения 1:500 (из исходных 1: 200) титр антител составил 1:1000 (см. табл. 5).

Пример 4. Больной Е. обратился в глазное отделение с жалобами со стороны органов зрения и ему был поставлен диагноз вирусное заболевание глаз.

При исследовании в ИФА (тест-система производства ЗАО "НИАРМЕДИК ПЛЮС", г. Москва) сыворотки больного, приготовленные путем последовательных двукратных разведений, были выявлены иммуноглобулины класса G к ЦМВ в титре 1:3200 (см.фиг.2), (см. табл. 6).

Исследование той же сыворотки титрованием с шагом 1:200, начиная с разведения 1:1000 показало, что в сыворотке больного Е, титр антител к ЦМВ составил 1:1200. (см. табл. 7).

Диагноз был подтвержден путем обнаружения антигенов ЦМВ методом иммунофлюоресцентного анализа.

Таким образом, предлагаемый способ определения титров антител методом ИФА позволяет более точно оценивать величины титров антител в пределах прямопропорциональной зависимости ОП от их концентрации в сыворотке крови, контролировать их изменения как в ходе заболевания, так и в процессе лечения. Данный способ может быть рекомендован для определения титров специфических антител и при других инфекциях.

Способ определения титров антител методом иммуноферментного анализа при диагностике вирусных инфекций путем приготовления ряда последовательных двукратных разведений сыворотки, добавления иммуно-пероксидазных конъюгатов и учетом результатов реакции на АКИ-Ц-01 при длине волны 492 нм, отличающийся тем, что для более точной оценки результата ИФА при выявлении антител к возбудителям вирусных инфекций соответствующие иммуноглобулины, меченные пероксидазой, добавляют только в разведения сыворотки 1: 200 и 1: 3200 и далее из сывороток крови больных с высокими значениями титров готовят разведения сыворотки таким образом, чтобы значения показателя оптической плотности (ОП) находились в пределах прямопропорциональной зависимости от концентрации иммуноглобулинов: если величина ОП сыворотки в разведении 1: 200 выше 1,6-2,0 по шкале прибора, а в разведении 1: 3200 - меньше 1,0, то сыворотку 1: 200 разводят в 2,5 раза и в дальнейшем титруют с интервалом 1: 500, а если величина ОП сыворотки в разведении 1: 3200 больше 1,0 по шкале прибора, то сыворотку 1: 200 разводят в 5 или 10 раз и готовят последующие разведения с интервалом 1: 1000 или 1: 2000 и за титр антител принимают наименьшее разведение сыворотки, после которого ОП остается на одном уровне (ОП пробы - ОП контроля не менее 0,21).

Антитела к вирусу герпеса 8 типа IgG (anti-HSV-8 IgG)

Иммунологический тест на наличие специфических иммуноглобулинов класса G к вирусу герпеса 8 типа. Рекомендуется для проведения при лимфопролиферативных заболеваниях.

Подготовка к исследованию:

• Исследование проводится утром, натощак
• С последнего приема пищи должно пройти не менее 8 часов
• Исключить прием алкоголя не менее чем за 24 часа до взятия биоматериала
• Не рекомендуется сдавать кровь на серологию после флюорографии, рентгена, физиотерапевтических процедур

Тип биоматериала: венозная кровь

Синонимы (rus): Иммунологический тест на специфические антитела к вирусу герпеса 8 типа

Синонимы (eng): Anti-HHV-8 IgG, Human Herpes Virus type 8 IgG antibodies, KSHV IgG, Kaposi"s sarcoma associated herpes virus IgG

Методы исследования: серологический анализ

Сроки выполнения: 5-7 дней

Иммунологический тест на наличие антител к герпетическому вирусу 8 типа IgG является одним из главных в диагностике:

• ангиоэндотелиомы кожи (саркомы Капоши);
• первичной экссудативной лимфомы;
• болезни Кастелмана;
• используется при эпидемиологических исследованиях.

Герпетический вирус 8-го типа разрушает лимфоцитные клетки. Он может длительное время не проявлять себя в организме здоровых людей, находясь в латентном состоянии. Он – серологический маркер саркомы Капоши, которая представляет собой полиочаговые сосудистые новообразования, поражающие кожные покровы, лимфоузлы и внутренние органы. Инфекция ассоциируется с ВИЧ-инфекцией и СПИДом, так как ее развитие идет на фоне иммунодефицита. Изначально HHV-8, был обнаружен у ВИЧ-инфицированных, имеющих саркому Капоши. Доказано, что его наличие является непременным, но не единственным, условием для ее развития. С ростом числа людей с иммунодефицитом (перенесших трансплантацию органов и тканей, имеющих различные виды онкологии, или системные заболевания хронического характера), герпесвирус типа 8 стал для медицины серьезной проблемой его диагностики и дифференциации.

До конца механизм передачи вируса не выяснен. В основном заражение происходит через половой контакт с инфицированным человеком, или вирусоносителем. Известны случаи внутриутробного поражения плода герепесвирусом типа 8.Также, вирус проникает в организм с трансплантируемыми органами. Он может активизироваться при проведении онкологическим больным лучевой терапии. Проникая в организм, вирус не сразу проявляет себя, выжидая подходящих условий: ослабления иммунитета при развитии различных заболеваний. Клинических проявлений заболевания в этот период не проявляется, хотя вирус уже поражает эндотелий кровеносной и лимфатической системы. В результате иммунитет организма прогрессивно снижается, что ведет к развитию заболевания.

Назначают исследование больным с кожными онкологиями, вытоной лимфомой, миеломой, болезнью Кастельмана. Цель проведения анализа – дифференцирование патологий, уточнение диагноза. Так как антитела IgG являются маркером HHV-8 , то их присутствие в крови, рассчитывается как диагностический признак саркомы Капоши (в 90 % случаев).

Результаты тестирования выдаются в виде ответов:

• Отрицательный;
• Положительный;
• Сомнительный.

При положительном результате проводится расчет КП – коэффициента позитивности. Это отношение оптической плотности образца крови пациента к пороговому показателю. Знать КП необходимо для более точной расшифровки результата анализа. При сомнительном результате исследование повторяется.

Интерпретация результатов исследования на наличие антител IgG к вирусу HHV-8 рассматривается вместе с другими результатами назначаемых исследований. Направить пациента на анализ могут такие специалисты как дерматологи, иммунологи, онкологи.