Коронавирусный энтерит кошек расшифровка анализа ифа

Н.Г. Решетникова, главный ветеринарный врач клиники "БИОСФЕРА" Краснодар

К ороновирусная инфекция широко распространена в популяциях домашних кошек по всему миру. Не мало неприятностей доставляет это заболевание и владельцам крупных питомников породистых кошек. Заболевание имеет широкий спектр клинических проявлений - от диареи до классического выпотного перитонита. Однако, болезнь может длительно протекать совершенно бессимптомно.

Короновирусы кошек принято подразделять на две группы по степени патогенности штаммов.

• Высокопатогенные штаммы – вирус инфекционного перитонита кошек (ВИПК).
• Штаммы, вызывающие легкие энтериты или вообще безопасные для здоровья – кишечные короновирусы кошек (ККВК).

Обе группы штаммов считаются единой популяцией вирусов, но с различной степенью патогенности. Однако, было установлено, что ВИПК является мутацией ККВК, которая происходит спонтанно в организме кошек во время течения болезни (Рedersen, 1981).

Несомненно, все штаммы короновируса кошек очень тесно взаимосвязаны и их трудно отличить в лабораторных условиях, но было обнаружено, что с помощью моноклональных антител можно осуществить дифференциацию между ВИПК и ККВК (Fiscu & Teramoto 1987).

Короновирусная инфекция кошек имеет множество клинических осложнений, включая влажный и сухой инфекционный перитонит (ИПК). Классический или выпотный перитонит характеризуется появлением тягучей соломенного цвета жидкости в перитониальной и плевральной полостях. При сухом ИПК развиваются хронические гранулематозные патологические изменения во многих органах, что соответственно, ведет к большому разнообразию клинических проявлений болезни. Оба вида перитонита почти всегда приводят к летальному исходу болезни.

Впервые заболевание было описано в 1963 году (Холзворс, 1963), однако, вирус был выявлен значительно позднее в 1977 году (Horzinek & Osterhaus, 1977) и только в 1981 году энтерит кошек, вызванный короновирусом, был официально зарегистрирован документально (Pedersen, 1981).

Так же установлено, что кошки могут быть инфицированы некоторыми штаммами короновируса собак.

ЭТИОЛОГИЯ

Короновирус - плеоморфный РНК-вирус, имеющий характерную оболочку в виде кольца или короны, с большими лепестками в форме выступов ( пепломеры или спайки). С помощью этих пепломеров вирус прикрепляется к клеткам и, по предположению ряда исследователей, они же являются мишенью для вируснейтрализующих антител ( Vennema, 1990). Диаметр вируса около100 нм.

Короновирус крайне не устойчив во внешней среде. Вирусы кошек становятся неактивными вне организма хозяина в течение одного дня. Они легко инактивируются как посредством нагревания, так и большинством дезинфицирующих средств. Но вирус довольно устойчив к низким температурам, низкому уровню рН и к фенолам.

ПАТОГЕНЕЗ

Путем внедрения вируса считается оронозальный. Репликация вируса происходит в носоглотке и на кончиках ворсинок эпителия. Воздушно- капельным путем кошки были заражены экспериментально, однако, многие авторы считают, что этот путь передачи инфекции не распространен в естественных популяциях. В естественных условиях основным путем передачи вируса считают оральный. Также существуют данные о возможности трансплацентарного заражения (Pederson, 1987).

После того, как произошло заражение, вирус может быть выделен как из слюны, так и из фекальных масс. При оральном заражении репликация вируса происходит в первую очередь, в миндалинах и тонком отделе кишечника, хотя вирус был обнаружен и в мезентеральных лимфатических узлах, куда он может попадать, вероятно, посредством макрофагов. Кишечная форма может проявляться слабым поносом, но чаще протекает бессимптомно.

Согласно исследованиям (Pederson 1987), если вирус имеет низкую патогенность или у кошки проявляется сильная реакция клеточного иммунитета, вирус из организма может быть удален или его распространение достаточно контролируется, и, в дальнейшем, нет проявления никаких клинических симптомов заболевания. Именно это и происходит после инфицирования ККВК. Число животных, которые выздоровели после экспериментального заражения ИПК, составляет одно из пяти. Даже те кошки, в организме которых еще находится вирус, перестают распространять его в течение нескольких недель. Однако, существует вероятность длительного вирусоносительства, с повторяющимися периодами выделения вируса во внешнюю среду со слюной и фекальными массами (Stoddart, 1988).

Какой перитонит разовьется у инфицированного животного - выпотный или сухой, напрямую зависит от силы реакции клеточного иммунитета животного. Если клеточный иммунитет средней степени, заболевание развивается медленно, давая начало сухому перитониту. В случае со слабым иммунным ответом организма происходит очень быстрое развитие выпотного перитонита. В случае с экспериментальным заражением таких животных, первые признаки выпотного перитонита развиваются уже на третьей неделе после заражения.

Считается, что применение кортикостероидов во время лечения нецелесообразно, так как в результате снижения иммунитета, после применения препаратов этой группы, происходит значительное усиление степени проявления болезни, которая принимает более тяжелую и затяжную форму.

Роль антител в патогенезе ИПК является весьма сложной. Несмотря на то, что у экспериментально зараженных кошек, вырабатывается большое количество антител, способных нейтрализовать вирус, существующий для этого гуморальный иммуноглобулин класса IgG в большинстве случае вызывает активизацию болезни. Механизм этого до сих пор остается точно не выясненным, но ряд авторов считает, что это связанно с усилением поглощения вирусов макрофагами, в которых они активно размножаются. Этот феномен усиления синтеза антител необходимо учитывать при рассмотрении вопроса о вакцинации.

КЛИНИЧЕСКИЕ ПРИЗНАКИ

В естественных условиях существует несколько клинических синдромов короновирусной инфекции кошек, но в большинстве случае не наблюдается никаких клинических симптомов болезни.

Энтерит, вызванный ККВК, является скоротечным заболеванием средней тяжести. Чаще проявляется у котят, особенно в период отъема от матери. Первые симптомы появляются спустя 2-7 дней после заражения, как правило, это диарея, иногда ей предшествует скоротечная рвота. В 1981г Маккирнаном были описаны случаи геморрагической летальной диареи у котят, но в естественных популяциях они отмечаются крайне редко.

Начальные симптомы ИПК в обоих случаях, как правило, являются неспецифическими и не ярко выраженными. Температура тела может подниматься до 39,5, животное становится менее активным, несколько заторможенным, возможны отказ от пищи и редкая рвота. Иногда на начальной стадии болезни могут отмечаться респираторные симптомы или диарея.

При выпотном ИПК, после неспецифических симптомов быстро развивается асцит, сопровождающийся депрессией, потерей веса и анемией. Наряду с асцитом, примерно у 20% кошек наблюдается выпот в плевральной полости. В этом случае диспноэ является основным клиническим симптомом. На поздних стадиях болезни часто наблюдается желтуха, болезнь быстро завершается летальным исходом.

При сухом ИПК во многих органах развиваются гранулематозные патологические изменения, при этом клинические симптомы отражают нарушения работы тех органов, которые имеют патологию. Наиболее часто поражаются органы брюшной полости, особенно печень и почки. Также, не редки случаи поражения центральной нервной системы и глаз.

Несмотря на многообразие клинических признаков, наиболее частыми проявлениями болезни являются гипертермия, потеря веса, асцит. При поражении ЦНС неврологические симптомы могут быть различными, например атаксия, парез или паралич конечностей, поведенческие изменения, нистагм, судороги и т.д. Реже отмечаются поражения глаз, такие как иридоциклит и ретинит, гифема в различной степени проявления.

Стоит отметить, что, по мнению ряда авторов, выпотный и сухой перитонит не являются взаимоисключающими формами развития болезни и нередко переходят одна в другую. Примерно у 10% кошек с выпотным ИПК отмечаются патологии глаз и центральной нервной системы. Кроме того, известны случаи, когда на фоне ремиссии выпотного ИПК развивался сухой перитонит.

ДИАГНОСТИКА

Постановка диагноза ИПК, особенно в случае сухого ИПК, может быть затруднена. Вследствие разнообразного течения болезни и отсутствия специфического синдрома сухого ИПК, многие авторы говорят о том, что практикующие врачи должны подразумевать короновирусную инфекцию у кошек с такими клиническими проявлениями как потеря веса, на фоне угнетенного аппетита и устойчивой гипертермии. Однако, необходимо провести дифференциальную диагностику от таких заболеваний как токсоплазмоз, вирусный лейкоз кошек и вирусный иммунодефицит кошек. Таким животным следует провести максимально полное офтальмологическое обследование, так как поражение глаз может быть единственным симптомом, подтверждающим наличие сухой формы ИПК. При наличие асцита и выпота в плевральную полость ИПК является основным дифференциальным диагнозом, это справедливо и в отношении клинических проявлений неврологических патологий.

Выпотный ИПК следует дифференцировать от других причин асцита, например от лимфоцитарного холангита, опухолей, пиоторакса, бактериального асцита, сердечной недостаточности и цирроза печени.

Проведение анализа асцитной жидкости, дает возможность наиболее точно поставить диагноз, однако при лимфоцитарном холангите биохимический состав жидкости практически идентичен.

При выпотном ИПК, перитониальная жидкость желтого или серого цвета. Из-за высокой концентрации белка (32-118г/л) она липкая и вязкая, поскольку, в основном белок представлен гаммаглобулиновыми фракциями. Жидкость при встряхивании пенится, а при отстаивании коагулируется. При микроскопии в ней обнаруживаются нейтрофилы, лимфоциты, макрофаги и мезотелиальные клетки.

Гематологические изменения при выпотном и сухом ИПК схожие. Имеет место лейкоцитоз с нейтрофелией, но без лимфопении. Примерно в половине случаев, присутствует нерегенеративная анемия.

Выделение короновируса, как правило, невозможно. Это связано, в первую очередь, с относительно малым количеством циркулирующих вирусов и с трудностями, связанными с выращиванием полевых штаммов короновируса в клеточных культурах. Современные методы, используемые в научно-исследовательских лабораториях, такие как анализ циркулирующих иммунных комплексов, антиген-связывающий иммуноферментный анализ, нуклеотидный зонд и полимеразная цепная реакция, наиболее эффективны, но пока малодоступны для практикующих врачей. Серологические тесты используются гораздо чаще, но имеют ряд недостатков, связанных с трудностью идентификации штаммов короновирусной инфекции, а также между прошедшей и настоящей инфекцией. Однако, высокие титры антител в сочетании с клиническим проявлением болезни могут считаться диагностическими, тогда как низкие тиры следует интерпретировать как показатель наличия скрытой кишечной инфекции. Но в лабораторных условиях было выявлено достаточное количество животных с низким или неопределяемым уровнем антител, но имеющие клинически выраженный выпотный ИПК. И, наоборот, высокий уровень антител в сыворотке крови был многократно выявлен у клинически здоровых кошек. В любом случае, при интерпретации результатов серологического исследования, необходимо быть крайне осторожным и учитывать как клиническую картину, так и результаты гематологических анализов.

Дифференциальная диагностика ИПК, зачастую, возможна только при проведении гистологического анализа биоптатов из внутренних органов.

Патология

При вскрытии животных с выпотным ИПК, наиболее заметным признаком является наличие в брюшной полости большого количества желтой или грязно-серой жидкости, как правило прозрачной, но могут присутствовать хлопья фибрина, жидкость в плевральной полости идентична. На поверхности серозных оболочек часто серовато-белые отложения фибрина, а сальник темный, утолщенный и зернистый. Гранулематозные изменения в виде белых очагов хорошо видны на срезах внутренних органов.

При сухом ИПК асцитная жидкость в брюшной полости либо отсутствует, либо ее количество крайне незначительное, но гранулематозные изменения в органах идентичны выпотному ИПК, однако, чаще значительно большего диаметра, особенно в печени и почках.

ЛЕЧЕНИЕ

При развитии клинических симптомов выпотного или сухого ИПК прогноз должен быть крайне осторожным.

Аспирация асцитной жидкости малоэффективна, как правило, жидкость довольно быстро набирается вновь и данная манипуляция приносит временное облегчение. Применение больших доз кортикоидов так же дает кратковременное улучшение. Но выраженное иммунодепрессивное действие при длительном их применении, в большинстве случаев вызывает стабильное ухудшение общего состояния пациента, что связано с угнетением клеточного иммунитета.

Применение противовирусных препаратов, достаточно эффективно для профилактики заболевания в питомниках, но эффективность в схеме лечения заболевших животных спорна. В любом случае должно проводится симптоматическое лечение заболевших животных. Начинать лечение необходимо как можно раньше, при соблюдении режимов кормления и гигиены содержания больного животного.

ЭПИЗОТОЛОГИЯ И ПРОФИЛАКТИКА

Заболевание широко распространено среди домашних кошек по всему миру, кроме того, большинство видов диких кошачьих также могут болеть ИПК. Случаи заболевания обеими формами ИПК были многократно зарегистрированы среди диких кошек в зоопарках. Серологические исследования подтверждают факт широкого распространения ИПК среди домашних кошек. Около 25% свободно живущих кошек и до 95 % кошек питомников имеют антитела к короновирусной инфекции кошек. Конечно, эти исследования не дают точной информации о дифференциации на штаммы. Но спорадически возникающие вспышки ИПК в питомниках, притом, что заболевание затрагивает не боле 5-10% поголовья, говорит в пользу достаточно широкого распространения именно патогенных штаммов. Клинически ИПК может проявляться у кошек любого возраста, но подавляющее большинство случаев было зарегистрировано среди молодых животных, до 2 лет или у старых кошек, старше 11 лет.

По результатам исследований, большинство кошек инфицируются от матерей в раннем возрасте или от других заболевших животных, при контакте в первые недели жизни. (Addie&Jarret, 1990, 1991), хотя в настоящее время есть данные, подтверждающие и горизонтальное распространение инфекции среди взрослых животных.

В экспериментальных исследованиях, было доказано, что короновирусы начинают выделяться во внешнюю среду со слюной и фекальными массами за долго до клинического проявления ИПК ( Stoddart, 1988). Следовательно, инфицированные кошки, становятся источником заражения здоровых животных еще до проявления у них клинических признаков. Это значительно усложняет контроль за распространением инфекции. Кроме того, многие животные могут быть вирусоносителями и стабильно выделять вирус во внешнюю среду, без каких либо клинических проявлений болезни.

Эффективных вакцин против ИПК в настоящее время не разработано, хотя работы в этом направлении ведутся с начала 90-х годов.

В настоящее время существует лицензированная в США аттенуированная живая ИПК-вакцина, которая наносится на слизистую верхних дыхательных путей и индуцирует стабильный иммунитет слизистых, однако, эта вакцина еще не зарегистрирована в России и большинстве Европейских стран. В настоящее время, единственным, надежным методом защиты от заболевания, особенно в питомниках кошек, является гигиена содержания здоровых животных и контроль за перемещением животных. Карантин для вновь приобретенных в питомник животных может быть малоэффективным, в связи с длительным периодом скрытого носительства короновирусной инфекции.

Серологические обследования питомников позволяют без дифференциации штаммов выявить всех серопозитивных животных. И, не смотря на то, что среди них могут быть животные позитивные к штаммам кишечного короновируса, их следует изолировать от здоровых, серонегативных животных. Котята, рожденные от инфицированных матерей, также должны быть изолированы от них не позднее 6 недельного возраста, с последующим серологическим исследованием. В настоящее время только эти мероприятия могут дать питомникам кошек возможность защитить здоровое поголовье и предотвратить распространение этого опасного заболевания среди породистых племенных животных.

Коронавирус кошек

Коронавироз кошек – вирусное заболевание, вызываемое пока еще малоизученным вирусом семейства Coronaviridae. Различают два основных вида коронавироза – Коронавирусный энтерит и Коронавирусный инфекционный перитонит кошек. (Подробнее про вирусный перитонит: Статья в Энциклопедии "Шанс Био")

Вирус может вызывать серьезные последствия у животных вплоть до летального исхода. Чаще всего коронавирусом заражаются молодые кошки, содержащиеся в питомниках.

Основной путь заражения – фекально-оральный, а для котят источником заражения становится их мать.

Коронавирус содержится в значительно высоком количестве в фекалиях зараженных особей. Сам процесс заражения происходит в момент вдыхания вируса, либо при его проглатывании. Коронавирус отличается устойчивостью, и очень легко распространяется, поэтому, даже находясь у лотка больного животного, здоровая кошка может заразиться. Вирулентность вируса высокая, поэтому для заражения достаточно небольшого его количества.

Стойкость вируса впечатляет: он может сохранять свою жизнеспособность в окружающей среде до семи недель

Вирус проникает в организм через рот, после чего происходит поражение эпителиальных клеток тонкого кишечника. Далее иммунная система кошек начинает активно работать над борьбой с вирусом, и в большинстве случаев здоровое животное справляется с ним. При этом, вирус может находится в организме без признаков заболевания в течение нескольких месяцев.

Коронавирус кошек не передается котятам через плаценту, а маленькие особи заражаются от матери в момент, когда уровень защитных антител в молоке становится меньше, и тогда организм становится более чувствительным. Происходит это в среднем в возрасте 5-7 недель.

Опосредованный путь передачи (перенос инфекции на предметах одежды, сумках и т.д.) крайне невелик, но возможен в случае непосредственного ее загрязнения зараженными фекалиями.

Коронавирус кошек разделяют на два вида:

FCoV – кишечный вирус.

FIPV – вирус, вызывающий инфекционный перитонит кошек.

Оба вируса являются родственными по отношению друг к другу по антигенному составу, при этом FIPV является мутированным вирусом, который образуется в организме кошки после инфицирования кишечным вирусом под воздействием негативных факторов. Вирус FCoV практически безопасен для здоровья кошек, так как здоровый организм справляется самостоятельно с ним. А вот при мутировании кишечного вируса в FIPV и развитии инфекционного перитонита вероятность летального исхода равна почти 100%.

Несмотря на то, что оба вида вирусов имеют родственный состав, следует понимать, что коронавирусный энтерит и инфекционный перитонит – это абсолютно разные заболевания. Если кошка заболела кишечным вирусом FCoV, это не значит, что она заразится инфекционным перитонитом, и наоборот, FIPV не является осложнением FCoV.

Коронавирусный энтерит чаще всего протекает без ярко выраженных признаков. Отмечают кишечные расстройства (диарея, возможно со слизью или примесью крови), что происходит из-за поражения клеток тонкого кишечника. Возможна потеря веса, исчезновение аппетита. Обычно симптомы не вызывают каких-либо опасений, а прогноз заболевания благоприятный, за исключением случаев снижения иммунитета, вторичного инфицирования, либо наличия сопутствующих заболеваний в анамнезе.

Инфекционный перитонит кошек. (Подробнее про вирусный перитонит: Статья в Энциклопедии "Шанс Био") Несмотря на то, что коронавирус мало опасен для животного, при определенных условиях он может мутировать в FIPV, и закончиться смертью животного. Основные признаки Инфекционного перитонита: напряжённость брюшной стенки и болезненность при пальпации живота; повышение температуры тела, быстрая потеря веса, снижение активности, накопление жидкости в брюшной полости (асцит), может наблюдаться желтушность слизистых оболочек, частое затрудненное дыхание.

Как правило, вирусный перитонит кошек в течение короткого времени (от нескольких недель до нескольких месяцев) приводит к летальному исходу. Однако при сильном иммунитете в некоторых случаях болезнь может перейти в стадию ремиссии (хроническое течение, при котором животное удовлетворительно себя чувствует). В этих случаях инфекция не выходит за пределы кишечных лимфатических узлов, здесь вирус подавляется и дальше не распространяется. Либо, процесс может перейти в гранулематозную стадию без выпота, так называемый, сухой перитонит. Заболевание при хроническом течении может давать рецидивы. Это объясняет, почему у пожилых кошек может развиваться FIP.

Цель исследования: полуколичественное определение титра циркулирующих специфических антител класса G (Ig G) к коронавирусу кошек в сыворотке и плазме. Метод определения: модифицированный иммуноферментный анализ (dot ELISA) Материал: - кровь в пробирку для б/х или пробирку с ЭДТА 1-1,5 мл; - сыворотка/плазма 100 мкл; гемолиз не влияет Хранение пробы: - пробы цельной крови допустимо хранить одни сутки в холодильнике, - сыворотку/плазму – до 3-х дней в холодильнике;

Цель исследования: выявление РНК коронавируса Требования к пробе: - венозная кровь в пробирке с антикоагулянтом ЭДТА - мин. объем - 1 мл. Плазму и эритроциты не разделять! - асцитная жидкость в стерильном контейнере без антикоагулянта- мин.объем - 0,5 мл - асцитная жидкость в стерильной пробирке с антикоагулянтом ЭДТА - мин.объем - 1 мл Будьте внимательны: - кровь с гепарином не подходит для исследований методом ПЦР! - кровь в пробирке для биохимии

Метод исследования: биохимический анализ выпотной жидкости Определяемые показатели: альбумин, глобулин, амилаза, холестерин, глюкоза, триглицериды, липаза, общий белок Требования к пробам: Выпотная (асцитная) жидкость может быть доставлена в лабораторию непосредственно в шприце или в пробирке для биохимии без активаторов свертывания. Минимальный объем - 0,5- 1 мл Хранение пробы: при +2-+8⁰С

Метод исследования: биохимический анализ выпотной жидкости Требования к пробам: Выпотная (асцитная) жидкость может быть доставлена в лабораторию непосредственно в шприце или в пробирке для биохимии без активаторов свертывания. Минимальный объем - 0,5 мл Хранение пробы: при +2-+8⁰С

Кроме того, необходимо проведение

Борьба с вирусным перитонитом должна быть направлена прежде всего на его профилактику, в основном, предотвращение заражения котят кишечной коронавирусной инфекцией. Для этого требуется изоляция беременных кошек за 2 недели до родов, отлучение котят в возрасте 5 недель от матери и изоляция от остальных кошек; а в возрасте 6 месяцев - подтверждение лабораторным методом (ПЦР) отсутствия коронавируса в фекалиях животных.

Ключевые слова: биохимические тесты, инфекционный перитонит кошек, иммуноферментный анализ

Key words: feline infectious peritonitis, biochemical tests, enzyme linked immunosorbent assay

В данной статье описаны клинические признаки и патогенез инфекционного перитонита кошек (ИПК). Для диагностики ИПК можно использовать как биохимические тесты, так и иммунологические методы (иммуноферментный анализ, реакцию непрямой гемагглютинации, метод флюоресцирующих антител и др.). Динамика титров антител к вирусу ИПК, определяемая с помощью ИФА, имеет важное прогностическое значение при данном заболевании.

Feline infectious peritonitis (FIP) clinical signs and pathogenesis are described. To diagnose FIP both biochemical tests and immunoassays (ELISA, immunofluorescent method, indirect hemagglution reactions et al.) are currently used. Dynamics of ELISA antibody titers against FIP virus is important for prognosis of the disease.

Инфекционный перитонит кошек (ИПК, Feline infectious peritonitis, FIP) — чрезвычайно тяжелая форма течения коронавирусной инфекции, получившая свое название из-за наиболее часто встречающегося клинического проявления: воспаления брюшной полости (перитонита). Возбудитель данной инфекции — РНК-содержащий вирус порядка Nidovirales семейства Coronaviridae рода Coronavirus вида Felinae Coronavirus (FCoV). В эту группу входят также таксономически близкие коронавирусы: вирус трансмиссивного гастроэнтерита свиней (ВТГС, TGEV) и коронавирус собак (CCV) [4, 10, 13].

Болезнь поражает многих представителей семейства кошачьих: чаще всего встречается у домашних кошек, но зарегистрирована также у львов, леопардов, гепардов, ягуаров, рысей, каракалов и других представителей семейства Felidae [1, 3, 13].

Болеют кошки всех возрастов, но наиболее чувствительны к заболеванию молодые животные в возрасте до 2 лет, а также взрослые старше 10 лет [8]. Количество зарегистрированных случаев ИПК не зависит от времени года (не наблюдается сезонности заболевания), соотношение по полу больных животных существенно не отличается (болеют как коты, так и кошки), особой чувствительностью к инфекции обладают кошки британской породы голубого и серого окраса. Не отмечено какой-либо устойчивости к инфекции у беспородных животных. В России заболевание ИПК начали регистрировать с середины 90-х годов прошлого века у привозных чистопородных животных [5].

Клиника и патогенез ИПК

Клинически болезнь проявляется в двух формах: влажной (инфузионной), сопровождающейся скоплением экссудата в брюшной и/или плевральной полостях, и сухой (неинфузионной), проявляющейся в гранулематозном поражении внутренних, преимущественно паренхиматозных органов и не сопровождающейся накоплением экссудата в полостях тела. Инфузионный ИПК считается классической формой проявления и составляет приблизительно 75% клинических случаев. ИПК может иметь длительный инкубационный период (от одной недели до полугода) [9, 12], во время которого клинические признаки не наблюдаются. Кроме того, существует скрытая форма заболевания, при которой возможно выделение вируса во внешнюю среду.

Передача вируса от больных животных происходит вертикально (трансплацентарно), либо горизонтально (контактно от животного к животному или через предметы ухода).

Первоначально коронавирус попадает в ротовую или носовую полость, где в фарингеальных эпителиальных клетках происходит первичная репликация вируса. Затем вирус проникает в клетки столбчатого эпителия кишечника — основное место его размножения и персистенции [12]. При таком варианте заражения инфекция может протекать бессимптомно или проявляться в виде энтерита, легкого недомогания, диареи, снижения аппетита и не представляет опасности для жизни животного. Кошки с персистирующей коронавирусной инфекцией являются основным источником вируса, выделение которого может происходить со слюной, мочой, но основное количество выделяется с калом [9].

Однако в некоторых случаях коронавирус приобретает способность поражать моноциты и макрофаги, и тогда инфекционный процесс формируется совершенно по другому пути, приводящему к развитию ИПК. После попадания в макрофаги, вирус разносится по всему организму. Пораженные макрофаги скапливаются под серозной оболочкой стенок кровеносных сосудов, вызывая системный васкулит, что приводит к повышению проницаемости сосудов и скоплению выступающей жидкости (выпота) в полостях тела (инфузионная форма ИПК). В случае незначительного поражения кровеносных сосудов паренхиматозных органов (печени, селезенки, легких, брыжеечных лимфатических узлов, стенок кишечника, поджелудочной железы, увеального глазного тракта) происходит образование отдельных пиогранулем (гранулематозная, сухая форма ИПК) [11]. Однако, разделения на формы течения болезни условны, поскольку нередко обе формы проявляются одновременно, или в течение болезни одна сменяет другую. Обе формы заболевания могут привести к смерти животного.

Изменение тропности коронавируса и поражение макрофагов — ключевого компонента в системе иммунной защиты организма — является основной причиной, обуславливающей тяжесть заболевания ИПК. Заражение макрофагов приводит к так называемому антителозависимому усилению инфекции. Поскольку макрофаги, содержащие вирус, не экспрессируют вирусные антигены на поверхности, то специфические антикоронавирусные антитела (АТ) не узнают инфицированные вирусом клетки [14]. В то же время, сывороточные иммунные комплексы АТ с вирусом продолжают распространять вирус в организме и инфицировать макрофаги. Таким образом, наличие АТ не только не защищает, но и, напротив, способствует развитию ИПК.

На вопрос о том, в результате чего вирус ЭК приобретает способность поражать макрофаги и развивать ИПК, до сих пор нет однозначного ответа.

Несмотря на то, что зараженность и носительство коронавируса среди большинства домашних, диких и бездомных кошек по всему миру составляет 20-100%, ИПК развивается менее чем в 10% случаев [13].

Раньше считалось, что существуют два отличных варианта коронавируса (высокопатогенный и низкопатогенный), одновременно циркулирующих в популяции кошек, и только высокопатогенный вирус способен привести к развитию ИПК [8, 15]. Однако в некоторых случаях даже при наличии в организме высокопатогенного вируса ИПК, заболевание не развивается [12]. Это может быть связано с устойчивостью макрофагов к высокопатогенному вирусу, что в свою очередь обусловлено генетическими особенностями конкретного животного, либо особенностями иммунного статуса — ослабленным клеточным иммунитетом, но повышенным уровнем гуморального иммунитета.

Согласно более поздней теории считалось, что коронавирус, вызывающий ИПК, образуется в результате мутации низкопатогенного кишечного вируса ЭК [8, 15]. Мутировавший вирус приобретает способность поражать макрофаги и провоцировать ИПК [13].

К сожалению, прижизненная диагностика не всегда дает возможность оградить животное от летального исхода — заболевание почти всегда заканчивается смертью животного [2]. Прижизненная диагностика должна быть комплексной. Она основана на анализе данных анамнеза, гематологических исследованиях и использовании различных вспомогательных диагностических тестов.

Биохимические параметры сыворотки крови при ИПК не имеют стабильно существенных отклонений, однако за счет специфики воспаления растет содержание гамма-глобулина и острофазных белков, в частности фибриногена как в сыворотке крови, так и в экссудатах. Увеличение концентрации белка в биологических жидкостях прямо пропорционально степени тяжести инфекционного процесса [3]. Именно для выявления этих показателей направлены тесты неспецифической экспресс-диагностики: йодно-агглютинационный тест и проба Ривалта, обладающие высокой достоверностью результатов.

Йодно-агглютинационный тест — неспецифическая биохимическая реакция. Метод основан на способности йодного реактива образовывать агглютинаты (визуально обнаруживаемые хлопья) при смешивании с образцами сыворотки крови или асцитной (плевральной) жидкости, содержащей гамма-глобулин, если его показатели превышают физиологическую норму (30%). Метод очень прост в применении и имеет высокую степень соответствия результатам РНГА, что позволяет рекомендовать его при исследовании сывороток и экссудатов для быстрой диагностики ИПК в клинических условиях. Тест Ривалта применяется для исследования выпотов. Метод основан на том, что по своим биохимическим и цитологическим показателям эффузионная жидкость при ИПК является фибринозным экссудатом и характеризуется значительным содержанием белка (32 – 118 г/л), особенно гамма-глобулина (отражая состав сыворотки), и высокой концентрацией фибрина, но при этом имеет низкое содержание клеток (1000 кл/мл).

Для выполнения этого теста используется 2%-ный раствор уксусной кислоты, в пробирку с которым вносится капля исследуемого экссудата.

Если капля растворяется, то проба считается отрицательной. При положительном тесте капля экссудата сохраняет очертания и некоторое время держится вверху пробирки или медленно опускается вниз в форме медузы, оставляя за собой линейный след. Прогностическая ценность результатов Ривалт теста составляет в положительном случае 86%, в отрицательном — 97% [8].

Для специфической диагностики используют как методы обнаружения непосредственно возбудителя (ИФА, МФА, ПЦР), так и методы выявления АТ (РНГА, МФА, ИФА, иммуноблоттинг).

Результаты выявления возбудителя указанными методами малоинформативны, поскольку вирусы ЭК и ИПК практически идентичны по генетическим и антигенным свойствам.

Сложность серологической диагностики ИПК связана с тем, что большой процент здоровых кошек имеют АТ против коронавирусов: 20-60% среди

домашних животных и до 100% у животных из приютов или питомников [13].

Установлено, что тяжесть клинических проявлений при ИПК имеет прямую корреляцию с величиной титра АТ к возбудителю заболевания [2].

Другими словами, важен не сам факт наличия в сыворотке крови АТ к коронавирусу, а высокий уровень титров с тенденцией к быстрому нарастанию.

В последнее время широкое применение находит иммуноферментный анализ (ИФА) для определения точной величины титра АТ к вирусу ИПК [6].

В качестве дополнительного подтверждающего теста при диагностике ИПК можно применять метод иммуноблоттинга [7].

Данный метод дает возможность определить специфичность АТ к основным структурным белкам коронавируса (N, S, M). Сыворотки крови с низким титром АТ (≤1:200) реагировали только с одним белком N вируса ИПК, однако, по мере повышения титров АТ увеличивался и спектр детектируемых вирусных антигенов. Сыворотки крови с высокими титрами АТ 1:3200) выявляли все основные структурные белки коронавируса (N, S, M). То есть, чем больше величина титра АТ в сыворотке, тем больше спектр детектируемых ей белков вируса. При выявлении в сыворотке крови кошек АТ к высокомолекулярным белкам коронавируса (М.м. > 85 кД), прежде всего к S-белку, диагноз на ИПК можно считать подтвержденным.

Прогноз при установлении диагноза ИПК крайне неблагоприятный. Лечение основано исключительно на симптоматической терапии, поскольку специфических средств лечения не существует. По причинам, указанным выше, применение иммуноглобулина при данной инфекции может только усугубить развитие болезни.

При развитии экссудативной формы ИПК применяют меры к механическому удалению экссудата из брюшной полости при помощи пункций. Прибегают к симптоматической терапии: назначают мочегонные средства (верошпирон, диакарб и др.) в терапевтических дозах, антибиотики (тилозин, ампициллин и др.), кортикостероиды, витамины (С, группа В, мультивитамины). К применению других средств следует относиться с большой осторожностью. Поскольку гуморальный иммунитет (антитела к коронавирусу кошек) усиливает развитие болезни, и вирус блокируется только за счет клеточного иммунитета [2], может быть оправдано применение иммунных и противовирусных средств: полипринолы, препараты интерферонов или интерфероногены.

Для специфической профилактики ИПК на сегодняшний день предложена только одна вакцина – примуцелл, производимая фирмой Пфайзер (США). Вакцина вводится интраназально и способствует развитию местного гуморального и клеточного им­мунитета к коронавирусу. Однако её эффективность нередко ставится под сомнение, кроме того не рекомендуется её применение у коронапозитивных животных [2].

Профилактика ИПК направлена на улучшение условий содержания кошек, профилактику стрессов и сопутствующих заболеваний. Обязательно поддержание чистоты в помещениях и дезинфекция. Вирус не стойкий и легко разрушается при обработке 3% раствором гипохлорита натрия, нашатырным спиртом, раствором щелочи (мыла), кварцеванием и т.д.

1. Гильмутдинов Р. Я., Иванов А. В., Панин А. Н. Инфекционный перитонит кошек / Инфекционные болезни экзотических и диких животных. М.: Колос, 2010, С. 105-106.

2. Панин А. Н., Уласов В. И, Рахманина М. М., Элизбарашвили 3. И, Кокорина Е. Г. Проблемы защиты здоровья домашних кошек // Вестник Российской академии естественных наук, 2009; Т.9; №3, - С. 85-90.

3. Рахманина Н. А., Ольшанская А. А., Уласов В. И. Некоторые эпизоотологические особенности инфекционного перитонита кошек // Материалы международной научно-практической конференции: Актуальные проблемы инфекционной патологии и иммунологии животных, М.: 2006; 16-17 мая, - С. 100-102.

4. Сергеев В.А., Непоклонов Е. А., Алипер Т. И. Вирусы и вирусные вакцины, М.: Библионика, 2007.

5. Смирнова Т., Стенина С. Инфекционный перитонит (FIP, FIPV) //Друг, 2000; №3-№4.

6. Терехова Ю. О., Цибезов В. В., Рахманина М. М, Элисбарашвили Э. И., Рахманина Н. А., Верховский О. А. Иммуноферментный метод выявления антител к коронавирусу для диагностики инфекционного перитонита кошек (ИПК) // Российский ветеринарный журнал, 2012; №2, - С. 24-28.

7. Терехова Ю. О, Цибезов В. В, Рахманина Н. А., О. А. Верховский. Метод иммуноблоттинга для выявления антител к коронавирусу при диагностике инфекционного перитонита кошек // Российский ветеринарный журнал, 2012; №4, - С.26-28.

9. Desmarets L MB, TheunsS., Olyslaegers D. AJ., Dedeurwaerder A, et al. Establishment of feline intestinal epithelial cell cultures for the propagation and study of feline enteric coronaviruses // Vet Res, 2013; 44(1), 71.

10. Horzinek M. C, Lutz H., Pedersen N. C. Antigenic relationships among homologous structural polypeptides of porcine, feline, and canine coronaviruses // Infect. Immun., 1982; 37(3), 1148-1155.

11. Kipar A., May H, Menger S., Weber M, Leukert W. and Reinacher M. Morphologic features and development of granu-lomatous vasculitis in feline infectious peritonitis // Vet Pathol.,

12. Kipar A, Meli M.L., Baptiste K.E., et al. Sites of feline coronaviral persistence in healthy cats// J Gen Virol, 2010; 91, 1698-1707.

13. Pedersen N. C. A review of feline infectious peritonitis virus infection: 1963-2008//J. Feline Med. Surg., 2009; 44, 225-258.

14. Takano T., Kawakami C., Yamada Sh., Satoh R., Hohdatsu T. Antibody- dependent enhancement occurs upon re-infection with the identical serotype virus in feline infections peritonitis virus infection // J. Vet. Med. Sci, 2008; 70(12), 1315-1321.

15. Wabderley Murrha L., Figueira Silva F. M. et al. The paradox of feline coronavirus pathogenesis: a review // Advances in Virology, 2011.