Стафилококк единичные колонии что это

Микробиологическое исследование, позволяющее выявить инфицированность золотистым стафилококком и определить количество возбудителя. При выявлении патогенных и/или условно-патогенных микроорганизмов будет определена их чувствительность к антимикробным препаратам (антибиотикам и бактериофагам). В ином случае чувствительность к антибиотикам и бактериофагам не определяется, т.к. не имеет диагностического значения.

Staphylococcus aureus culture, MRSA culture (Methicillin-resistant S. aureus culture), quantitative.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Грудное молоко, кал, мазок из зева, мазок с конъюнктивы, мазок из носа, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), мокроту, отделяемое раны, отделяемое уха, ректальный мазок, среднюю порцию утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

• Рекомендуется употребить большой объем жидкости (воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
• Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
• Исключить прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
• Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др.) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
• Женщинам исследование (процедуру взятия урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2-3 дня после ее окончания.

Общая информация об исследовании

Золотистые стафилококки (Staphylococcus aureus) – грамположительные условно-патогенные бактерии рода Staphylococcus, являющиеся наиболее частой причиной стафилококковых, в частности внутрибольничных, инфекций. Золотистые стафилококки в норме могут располагаться на коже, слизистой оболочке носа и реже в гортани, влагалище, кишечнике. Они встречаются у 30 % здоровых людей.

Если у человека слабая иммунная система или нарушен нормальный состав микрофлоры, то при повреждении кожи (слизистых оболочек) золотистый стафилококк может приводить к разнообразным местным и системным инфекционно-воспалительным поражениям:

• кожи (карбункулам, импетиго, фолликулиту),
• молочных желез (маститу),
• дыхательных путей и ЛОР-органов (тонзиллиту, гаймориту, отиту, фарингиту, ларинготрахеиту, пневмонии),
• мочевыводящих путей (уретриту, циститу, пиелонефриту),
• пищеварительной системы (энтероколиту, аппендициту, перитониту, парапроктиту, холециститу),
• костно-суставной системы (остеомиелиту, артриту).

В отдельных случаях возможна генерализация инфекции с развитием септикопиемии. Производимый золотистым стафилококком энтеротоксин вызывает пищевые отравления и синдром токсического шока. Основные источники инфекции: здоровые (носители) и больные люди, домашние и сельскохозяйственные животные, а также пища, содержащая возбудителя инфекции (чаще всего это сахаросодержащие молочные продукты). Инфицирование может происходить контактным и воздушно-пылевым путем. Возможно аутоинфицирование.

Для идентификации золотистого стафилококка проводится посев клинического материала на питательные среды, где при наличии S. aureus через 18-24 часа наблюдается рост колоний золотистого цвета.

Определение количества бактерий может потребоваться, например, чтобы понять, нужно ли проводить лечение: в некоторых случаях, если количество небольшое, лечение не проводится. Решение о его необходимости зависит от клинических проявлений, а также от количества стафилококка. При небольшом содержании микробов и отсутствии симптоматики лечение может вообще не понадобиться, т. к. и в норме на слизистой могут находиться эти микробы. Стафилококк в кишечнике обнаруживается постоянно, это не повод для лечения, но если его количество превышено, тогда нужны меры (бактерия может вызывать колики и расстройства). Стафилококк в мазке без симптомов вагинита также является нормой, в то время как большие количества стафилококка в мазке, наряду с повышением лейкоцитов, требуют лечения.

Наличие стафилококка не обязательно означает инфекцию, это может быть бессимптомное носительство, например при посеве мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 10 3 . Однако более высокие показатели говорят нам о золотистом стафилококке как о причине заболевания, и это уже далеко не бессимптомное носительство.

Многое зависит от возраста пациента. Например, золотистый стафилококк в количестве 10 4 является вполне нормальным показателем для детей старше 1 года, но у грудных детей в таком количестве уже потребует лечения.

В любом случае наличие стафилококка при отсутствии симптомов болезни – еще не повод к назначению лекарств.

Количество стафилококка может определяться до и после лечения. Если выясняется, что рост возбудителя обильный, значит, инфекция набирает обороты, предыдущая терапия была неудачной и срочно требуется новый курс лечения; умеренный и скудный рост микроорганизмов по результатам последних анализов говорит об успешности терапии. Кроме того, в дальнейшем необходимо контролировать количество стафилококков в течение 1 или 2 месяцев после пройденного лечения.

Отмечено также, что после пребывания больных в хирургической клинике стафилококк обнаруживался у них вдвое чаще, чем при поступлении. У больных, поступающих в стационары, наблюдается замена антибиотикочувствительных стафилококков на антибиотикоустойчивые.

Лечение больных стафилококковой болезнью препаратами пенициллина или другими давно применяемыми антибиотиками часто остается безрезультатным, поскольку такие препараты нередко только усугубляют тяжесть течения инфекции. Поэтому так важно установить, какие антибиотики будут эффективны при лечении стафилококка.

Для чего используется исследование?

• Для определения целесообразности лечения.
• Для дифференциации бактерионосительства и опасного инфицирования.
• Для контроля за состоянием пациента после проведенного лечения.
• Для того чтобы подтвердить, что стафилококк является причиной возникшего заболевания (об этом свидетельствуют высокие показатели посева).

Что означают результаты?

Референсные значения: нет роста.

Золотистый стафилококк в мазке в небольших количествах является частью нор­мальной микрофлоры человека. Значительное повышение стафилококка в мазке может быть симптомом воспалительного процесса, кожных инфекций (угри и пр.) и очень опасных заболеваний (пневмония, остеомиелит, эндокардит и др.). Результат посева интерпретирует врач исходя из того, в каком количестве выделены микроорганизмы.

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, педиатр, ЛОР, инфекционист.

За последние 20 лет увеличилась частота внeбольничных и внутрибольничных инфекций, связанных со Staphylococcus aureus. Причина этому - повсеместная антибиотикорезистентность. Поэтому штаммы золотистого стафилококка принято делить на:

Метицилин – чувствительные S. aureus (methicillin-sensitive S. aureus - MSSA)

Метицилин - устойчивые S. aureus (methicillin-resistant S. aureus - MRSA)

Ванкомицин-устойчивые S. aureus (vankomycin – resistant S.aureus - VRSA)

Их клеточная стенка содержит тейхоевую кислоту, что свойственно только Г+ организмам.

Стафилококки устойчивы в окружающей среде: они переносят температуру >50°C, высокие концентрации соли и высушивание.

Основной представитель рода стафилококков – вездесущий Staphylococcus aureus (золотистый стафилококк). До 40% всего человечества являются его постоянными носителями. S.aureus колонизирует верхние дыхательные пути, кожу подмышечных впадин, паховую область, промежность, влагалище.

Выделяют постоянное и интермиттирующее носительство, а также его отсутствие. Первые два варианта – высокий риск для развития инфекции. Третий — снижает риск инфицирования практически до нуля. Что интересно, будет ли человек являться носителем стафилококка или нет, обусловлено генетически.

Чтобы совершить “вторжение" в организм хозяина, стафилококку необходимы определенные условия: сам же хозяин должен руками “разнести" его по телу в те места, где кожа травмирована (порезы после бритья, операционные разрезы, экзема, место введения сосудистого катетера и т.д).

В месте внедрения образуется абсцесс — отличительный признак стафилококковой инфекции. Он состоит из фибриновой стенки, окруженной воспаленными тканями, и центрального ядра - гноя с патогенными организмами и лейкоцитами. Из такого, даже самого маленького, очага стафилококки могут гематогенно распространяться по телу. А их способность вырабатывать протеолитические энзимы способствует процессу.

Стафилококк вызывает заболевание посредством инвазии в ткани и продукции токсина. Токсин оказывает действие не только непосредственно в месте внедрения и колонизации стафилококка, но и на отдалении.

Энтеротоксин-продуцирующие штаммы стафилококков вызывают пищевую токсикоинфекцию, характеризующуюся острым приступом рвоты и мощной диареей через 2-6 часов после приема пищи. Симптомы проходят самостоятельно. Причиной является размножение токсин-продуцирующих организмов в необработанных или плохо обработанных пищевых продуктах.

Эксфолиативный (отслаивающий) токсин, который продуцируют стафилококки, относящиеся к фагогруппе 2, вызывает редкое, но хорошо описанное заболевание, встречающееся в младенческом и детском возрасте, - болезнь Риттера (синдром ошпаренной кожи).

Первые проявления - лихорадка, эритема, волдыри. Характерный признак - симптом Никольского - когда даже малейшее надавливание на кожу (на внешне здоровые участки) вызывает отслоение эпидермиса.

TSST-1 (toxic shock syndrome toxin) – токсин, вызывающийсиндром токсического шока (СТШ).

Этот токсин - супер АГ, митоген Т-клеток, он связывается с главным комплексом гистосовместимости II, вызывая распространение клональных Т-клеток и массивное высвобождением цитокинов, которые инициируют развитие СТШ.

Стафилококковая инфекция может проявляться:

• Эритемой, фолликулитом, фурункулами, карбункулами;
• Болезнью Риттера;
• Остеомиелитом;
• Эндокардитом;
• Синдромом токсического шока;
• Пневмонией;
• Тромбофлебитом;
• Абсцессами в скелетной мускулатуре и во внутренних органах.

Каждое из этих проявлений имеет свою специфическую клиническую картину, методы диагностики и лечения.

Общим является синдром интоксикации разной степени выраженности, а также некоторые рекомендации по антибиотикотерапии:

• Эмпирическая терапия пенициллинами и цефалоспоринами неэффективна ввиду распространения MRSA.
• Против MSSA -комбинированная терапия пенициллиназа-устойчивыми пенициллинами (оксациллин, диклоксациллин) или цефалоспоринами; • Для борьбы с MRSA применяют клиндамицин, триметоприм-сульфаметоксазол (TMP-SMX/ ко-тримаксозол), доксициллин или фторхинолоны.• Клиндамицин (вместо ко-тримаксозола) - препарат выбора для амбулаторной терапии в регионах с относительно низкой резистентностью к клиндамицину.

S.aureus является одной из самых частых причин внутрибольничных инфекций.

Смертность от стафилококковых инфекций варьируется в зависимости от пораженного органа и клинической картины. Большинство смертельных исходов происходят из-за несвоевременного обращения за медицинской помощью.

Мужчины больше подвержены стафилококковой инфекции ввиду более частой травматизации.

Золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus) – грамположительная условно-патогенная бактерия, распространенная повсеместно. В норме золотистый стафилококк могжет находиться у человека на слизистой оболочке носа, в брюшной полости и на коже.

Попав в организм человека, золотистый стафилококк вырабатывает токсины и может стать источником сепсиса при снижении иммунитета, вызывая генерализованные инфекции с очагами воспаления во внутренних органах, коже и костно-мышечной системе.

Основные источники инфекции: здоровые (носители) и больные люди, домашние и сельскохозяйственные животные, а также пища, содержащая золотистый стафилококк и его мощные токсины (чаще всего это сахаросодержащие молочные продукты, мороженное, кондитерские изделия без термообработки, салаты и т.п.).

Дети могут инфицироваться от взрослых стафолококконосителей. У детей грудного возраста возможно выделение стафилококка в посевах фекалий.

В эпидемиологических целях анализ на выявление патогенного стафилококка обязательно проводят во время ежегодных профилактических осмотров и при предварительных осмотрах для приема на работу в сферы обслуживания населения: медицины, образования, питания и торговли. В данном случае посев выполняется из носа и зева.

При наличии патогенного стафилококка в пробе обследуемого, через 18-24 часа наблюдается рост колоний золотистого цвета. В этом случае обязательно определяется количество стафилококка. Это необходимо врачу для решения вопроса о том, нужно ли проводить лечение.

Наличие золотистого стафилококка не обязательно означает инфекцию, это может быть бессимптомное носительство, например, при посеве мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 10 3 КОЕ. Однако более высокие показатели говорят о том, что это уже не бессимптомное носительство, а то, что выявленный золотистый стафилококк может являться причиной заболевания.

• Для выяснения бактерионосительства или опасного инфицирования.
• Для подтверждения, что стафилококк является причиной возникшего заболевания (об этом свидетельствуют высокие показатели посева).
• Для определения целесообразности лечения.
• Для контроля за состоянием пациента после проведенного лечения.

Исследование можно пройти по направлению от лечащего врача вашей поликлиники, если есть клинические показания или на платной основе.

Лаборатория клинической микробиологии (бактериологии) Мурманской областной больницы предлагает следующие услуги по обнаружению патогенного стафилококка:

Микробиологическое (культуральное) исследование отделяемого зева на патогенный стафилококк

Микробиологическое (культуральное) исследование отделяемого носа на патогенный стафилококк

Микробиологическое (культуральное) исследование испражнений на стафилококк

Срок выполнения анализа: от 2 до 5 рабочих дней.

Подготовка к исследованию:

• Сбор материала проводится до начала лечения антибактериальными, иммунобиологическими препаратами (общего и местного значения).
• При контроле эффективности лечения (после окончания курса лечения) исследование проводится через 14 дней.

• Мазок из зева собирают натощак или через 3–4 часа после приема пищи.

• Перед взятием мазка из носа нельзя промывать носовые ходы.

• Желательно за 2–3 дня до взятия пробы находиться на диете, исключающей приём продуктов, усиливающих процессы брожения в кишечнике и молочнокислые продукты, а также алкоголь.
• За 3–4 дня до исследования необходимо отменить приём слабительных препаратов, касторового и вазелинового масла и прекратить введение ректальных свечей.
• Фекалии собираются ложечкой в стерильный одноразовый контейнер с завинчивающейся крышкой в количестве не более 1/3 объёма.
• Для получения достоверного результата - пробы фекалий храните в темном месте при температуре не выше 20—25 °С, во избежание чрезмерного размножения кишечной микрофлоры.
• Пробы фекалий не замораживайте.

У большинства людей, страдающих хроническим ринитом, обнаруживается золотистый стафилококк

— Ваш доктор прав, — говорит врач-отоларинголог Киевской городской клинической больницы № 9 Владимир Динец. — Если вы сдадите бактериологический посев, то сможете узнать, какой микроб поселился в носу. Такой анализ лучше сделать, если в течение года постоянно возникает насморк и врач не находит других причин. Конечно же, чаще высевается золотистый стафилококк. Из 20 пациентов, страдающих хроническим ринитом, примерно у 18 обнаруживается именно эта анаэробная бактерия. Но бывает, что выявляем стрептококк, кишечную палочку или другие бактерии, грибок кандида. Поэтому лечение назначается по результатам исследований. Кстати, я бы советовал сдавать мазок из носа и из горла. Если стафилококк обнаруживается только в горле, человек является носителем.

К слову, врачей, например, обследуют дважды в месяц, так как они постоянно контактируют с больными и часто могут заражаться как стафилококковой, так и другими инфекциями.

— Всегда ли нужно лечиться от стафилококка, ведь считается, что бактерия в норме может быть в организме?

— Если в чашке Петри обнаруживаются единичные колонии (одна-две), то лечение не требуется. А если их больше, человека постоянно беспокоит насморк или заболевания горла, скорее всего, нужно будет принимать антибиотики. Такие препараты назначают только по результатам антибиотикограммы, которая проводится после выявления микробов. Ведь стафилококк устойчив ко многим антибиотикам.

— Лечение длительное?

— В некоторых случаях может даже потребоваться три курса антибиотиков. Одной нашей пациентке никак не удавалось избавиться от золотистого стафилококка с помощью антибактериальных препаратов в таблетках. Женщина излечилась лишь тогда, когда легла в стационар и ей прокапали десять капельниц с антибиотиком.

Если пациенту нельзя принимать антибактериальные препараты (например, беременной женщине, ребенку), могут назначить средства на основе хлорофиллипта (ингаляции, полоскания). Этот антисептик убивает опасных микробов, но лечение растительными препаратами может быть очень длительным и, к сожалению, не всегда эффективным.

Стафилококки — въедливые патогенные микроорганизмы. Они могут вызывать не только ринит, но и гайморит, ангину, отит, пневмонию.

— Если стафилококк выявили у одного члена семьи, то стоит обследоваться всем?

— Конечно. Кто-то в семье может быть здоров, и ему лечение не требуется. А бывает, что человек — носитель стафилококка, но сам не болеет. В таком случае тоже надо лечиться, чтобы не заражать окружающих. Носитель становится опасным, когда простужается. А наиболее уязвимы именно члены семьи, особенно дети, пожилые люди, у которых не сформирован или снижен иммунитет.

У нас недавно обследовалась семья: супружеская пара с двумя детьми и бабушкой. Золотистый стафилококк в большом количестве обнаружили у мамы и одного из детей. Все остальные оказались здоровыми.

— Выходит, чтобы не заболеть, надо укреплять иммунитет?

— Да, ведь другой профилактики нет. Важно полноценно питаться, заниматься физкультурой, закаливанием. Полезна молочно-растительная диета: кефир, йогурт, творог, сыры, свежие овощи и фрукты. Также рекомендуются кислые продукты: лимон, квашеная капуста. А вот сладости лучше ограничивать — это питательная среда для бактерий и грибков. Взрослым рекомендую готовить в турке кофе с имбирем, мускатным орехом, корицей, кардамоном.

Интересно, что у некоторых людей формируется естественный иммунитет к той же стафилококковой инфекции. Например, в многодетной семье многие малыши могут не заражаться от носителей бактерии, так как ежедневно получают минимальную дозу — по типу прививки.

— Что, кроме бактерий, может стать причиной хронического насморка?

— Любые проблемы, которые нарушают вентиляцию полости носа: полипы, аденоиды, искривление носовой перегородки. Кстати, идеально ровная перегородка встречается не так часто. У 80 пациентов из ста она искривлена. Но исправлять ее нужно лишь в том случае, если возникают проблемы, в том числе хронический ринит. Постоянный насморк может появиться весной из-за аллергии на пыльцу растений. Такому пациенту врач-отоларинголог кроме сосудосуживающих капель и других лекарств для лечения насморка назначает также гормональные и противоаллергические препараты, рекомендует консультацию аллерголога.

При оценке чувствительности Staphylococcus spp. в первую очередь необходимо тестировать препараты, имеющие основное клиническое значение: бета-лактамы, макролиды, фторхинолоны, аминогликозиды и ванкомицин.

Критерии интерпретации результатов определения чувствительности Staphylococcus spp. (пограничные значения диаметров зон подавления роста и МПК АБП) приведены в таблице 14.

Таблица 14.

Бета-лактамы

Препаратами выбора для лечения стафилококковых инфекций (вызванных как Staphylococcus aureus, так и коагулазанегативными стафилококками) являются бета-лактамные антибиотики, следовательно, в первую очередь необходимо определять чувствительность стафилококков к этим препаратам.

Устойчивость стафилококков к бета-лактамным АБП связана либо с продукцией бета-лактамаз, либо с наличием дополнительного пенициллино-связывающего белка - ПСБ2а. Выявление и дифференцировка этих двух механизмов резистентности позволяет надежно прогнозировать активность всех бета-лактамных антибиотиков без непосредственной оценки чувствительности к каждому из этих препаратов. При этом необходимо учитывать следующие закономерности:

• Штаммы Staphylococcus spp., лишенные механизмов резистентности, чувствительны ко всем бета-лактамным АБП.
• Бета-лактамазы (пенициллиназы) Staphylococcus spp. способны гидролизовать природные и полусинтетические пенициллины за исключением оксациллина и метициллина. Чувствительность или резистентность к бензилпенициллину является индикатором активности природных и полусинтетических амино-, карбокси- и уреидопенициллинов. Остальные бета-лактамы с потенциальной антистафилококковой активностью (антистафилококковые пенициллины, цефалоспорины I, II и IV поколений и карбапенемы) сохраняют активность в отношении бета-лактамазпродуцирующих штаммов.
• Штаммы Staphylococcus spp, обладающие ПСБ2а, клинически устойчивы ко всем бета-лактамным АБП. Маркером наличия ПСБ2а является устойчивость к оксациллину и метициллину. Такие штаммы исторически получили название метициллинорезистентных стафилококков (methicillin-resistant Staphylococcus spp -MRSS). Другими терминами для обозначения подобных штаммов являются MRSA - methicillin-resistant S.aureus и MRSE - methicillin-resistant S.epidermidis.
• Метициллин в настоящее время в клинической практике и в лабораторной диагностике не применяется, его практически полностью вытеснил оксациллин, соответственно появился термин "оксациллинорезистентность", являющийся полным синонимом термина "метициллинорезистентность".

Таким образом, определение чувствительности Staphylococcus spp. к бета-лактамным АБП должно включать выполнение двух тестов:

• Определения чувствительности к бензилпенициллину или выявления продукции бета-лактамаз (пенициллиназ).
• Определения чувствительности к оксациллину или выявления ПСБ2а или кодирующего его гена mecA.

Определение чувствительности к бензилпенициллину или выявление продукции бета-лактамаз (пенициллиназ)

Определение чувствительности Staphylococcus spp. к бензилпенициллину несколько затруднено тем фактом, что синтез бета-лактамаз у этого микроорганизма является индуцибельным процессом (продукция фермента усиливается после контакта с антибиотиком). В результате этого при использовании стандартных методов серийных разведений и ДДМ возможно получение результатов ложной чувствительности.

Решением данной проблемы может быть использование метода непосредственного выявления бета-лактамаз, основанного на использовании дисков с нитроцефином. Нитроцефин представляет собой хромогенный цефалоспорин, который легко гидролизуется под действием всех бета-лактамаз с образованием окрашенного продукта.

Для проведения исследования используют чашку, на которой оценивали чувствительноcть исследуемого штамма Staphylococcus spp. к пенициллину и/или оксациллину ДДМ. С границы зоны ингибиции роста вокруг диска с оксациллином бактериологической петлей забирается незначительное количество культуры и наносится на предварительно увлажненный диск с нитроцефином. Диск инкубируют при комнатной температуре до 1 ч.

Появление красного окрашивания свидетельствует о продукции бета-лактамаз исследуемым штаммом микроорганизма.

Штамм, продуцирующий бета-лактамазу, рассматривают как устойчивый к природным и полусинтетическим пенициллинам (за исключением оксациллина) независимо от конкретных результатов тестирования к перечисленным АБП.

При определении чувствительности к оксациллину стандартными методами необходимо учитывать некоторые особенности:

• для приготовления инокулюма используют только прямой метод суспендирования колоний;
• длительность инкубации до момента учета результатов определения чувствительности к оксациллину должна составлять не менее 24 ч.

• Необходимо использовать диски, содержащие 1 мкг оксациллина.
• При учете результатов необходимо обращать внимание даже на единичные мелкие колонии стафилококков, обнаруженные в пределах зоны подавления роста.

• В питательную среду целесообразно добавлять NaCl (до конечной концентрации 2 %).

• Штаммы стафилококков, резистентные к оксациллину, должны рассматриваться как устойчивые ко ВСЕМ бета-лактамным АБП.
• Результаты определения чувствительности стафилококков к оксациллину и к другим бета-лактамным АБП могут быть противоречивыми, при этом результаты определения чувствительности к оксациллину являются решающими.
• Определять чувствительность стафилококков к бета-лактамным АБП, кроме бензилпенициллина и оксациллина, нецелесообразно.
• Для метициллинорезистентных стафилококков характерно наличие ассоциированной резистентности к АБП других групп. Выявление у стафилококков множественной резистентности при чувствительности к оксациллину требует проведения повторных исследований.
• Следует обратить внимание на различия в критериях метициллинорезистентности для S.aureus и коагулазанегативных стафилококков.
• При получении сомнительных результатов необходимо использовать дополнительные методы (скрининг на агаре - метод приведен ниже, прямое выявление гена mecA или белка ПСБ2а).

• При выделении пенициллино- и метициллино-чувствительных штаммов стафилококков микроорганизм считается чувствительным ко всем бета-лактамным АБП, а препаратами выбора будут природные и аминопенициллины.
• При выявлении продукции бета-лактамаз и чувствительности к оксациллину микроорганизм является резистентным к природным пенициллинам, амино-, карбокси- и уреидопенициллинам, но чувствителен к оксациллину, ингибиторозащищенным пенициллинам и цефалоспоринам I - II поколений, которые являются препаратами выбора в данном случае. В отношении данных штаммов будут также активны цефалоспорины IV поколения и карбапенемы, однако преимуществами в сравнении с препаратами выбора они не обладают.
• При выявлении метициллинорезистентности штамм считается устойчивым ко ВСЕМ бета-лактамным антибиотикам, для лечения необходимо использовать препараты других групп, из которых препаратами выбора считаются гликопептиды.

Наиболее надежным методом выявления метициллинорезистентнсти у стафилококков является непосредственное определение наличия гена mecA молекулярно-генетическими методами (с помощью полимеразной цепной реакции - ПЦР). Кроме того, разработан коммерческий метод выявления дополнительного пенициллиносвязывающего белка - ПСБ2а в реакции агглютинации.

В то же время скрининг на агаре для выявления метициллинорезистентности является высоко чувствительным и специфичным методом, легко выполнимым в условиях рутинной работы микробиологической лаборатории, однако он может быть использован только для штаммов S.aureus.

Для проведения скрининга готовят чашки с агаром Мюллера-Хинтон, содержащие 4 % NaCl и 6,0 мкг/мл оксациллина. Хлористый натрий вносят в питательную среду в необходимом количестве до автоклавирования. Рабочий раствор оксациллина добавляют в питательную среду после автоклавирования и охлаждения среды до 45 - 50 °С. Для приготовления рабочего раствора оксациллина используют субстанцию АБП с известной активностью.

Микробную взвесь следует готовить только методом прямого суспендирования из нескольких однотипных изолированных колоний стафилококка, выросших на чашке с неселективным питательным агаром, в стерильном физиологическом растворе и доводить до мутности 0,5 по Мак-Фарланду (1,5 x 10 8 КОЕ/мл).

Для инокуляции чашек с агаром можно использовать два метода: с помощью микропипетки или с помощью стерильного ватного тампона.

• готовят разведение 1:100 стандартного инокулюма, соответствующего стандарту мутности 0,5 по Мак-Фарланду, для получения бактериальной взвеси, содержащей 1,5 x 10 6 КОЕ/мл (например, добавить 0,1 мл стандартной суспензии к 9,9 мл стерильного физиологического раствора);
• с помощью микропипетки наносят каплю (10 мкл) разведенной стандартной суспензии на поверхность агара с оксациллином.

• стерильный ватный тампон погружают в пробирку со стандартизированной суспензией (0,5 по Мак-Фарланду), затем отжимают избыток влаги о стенку пробирки;
• культуру наносят тампоном либо на ограниченную поверхность (диаметром 10 - 15 мм), либо на всю поверхность агара с оксациллином в чашке Петри.

Штаммы S.aureus инкубируются при температуре 35 °С в течение полных 24 ч, а коагулазанегативных стафилококков - в течение 48 ч.

После инкубации чашки тщательно просматривают в проходящем свете:

• появление видимого роста более 1 колонии или вуалеобразного роста на месте нанесения культуры означает устойчивость данного штамма к оксациллину (метициллину);
• при отсутствии роста на месте нанесения культуры исследуемый штамм учитывается как чувствительный к метициллину (оксациллину).
• при сомнительных результатах, а также для штаммов, выделенных у больных с клинически неэффективной терапией и у больных с серьезными инфекциями, необходимо провести развернутое исследование с определением МПК к оксациллину и гена mecA.

• Исследование проводят при обязательном контроле роста испытуемых культур на агаре Мюллера-Хинтон с 4 % NaCl без оксациллина (культуру наносят так же, как на агар с оксациллином).
• Параллельно с исследуемыми тестируют также контрольные штаммы: S.aureus ATCC 38591 - резистентный; S.aureus ATCC 29213 - чувствительный.

Макролиды и линкозамиды являются альтернативными препаратами для лечения стафилококковых инфекций. В исследование необходимо включать:

• Одного из представителей 14-ти и 15-членных макролидов. Полная перекрестная резистентность между отдельными представителями.
• Клиндамицин. Полная перекрестная резистентность между 16-членными макролидами и линкозамидами.

Приведенный выбор препаратов определяется закономерностями перекрестной резистентности между антибиотиками указанных подгрупп.

В последнее время отмечается повышение интереса к фторхинолонам как к препаратам для лечения стафилококковых инфекций (особенно кожи и мягких тканей). Новые представители этой группы АБП (антипневмококковые фторхинолоны - левофлоксацин, спарфлоксацин, моксифлоксацин и др.) обладают повышенной активностью в отношении Staphylococcus spp. в сравнении с традиционными препаратами. Между перечисленными подгруппами препаратов нет полной перекрестной резистентности. Антипневмококковые препараты часто сохраняют активность в отношении штаммов, устойчивых к другим фторхинолонам.

На практике необходимо учитывать некоторые особенности интерпретации результатов, полученных in vitro. Так, при детекции устойчивости к гентамицину выделенный штамм следует рассматривать как устойчивый ко всем аминогликозидам. В этой связи гентамицин должен включаться в набор для тестирования в обязательном порядке. В тоже время крайне редко могут встречаться штаммы, устойчивые к другим аминогликозидам при чувствительности к гентамицину.

Ванкомицин является одним из препаратов выбора (наряду с оксазолидинонами) для лечения инфекций, вызываемых оксациллинрезистентными штаммами. Появление сообщений об устойчивости стафилококков к гликопептидам требует внимательного отношения к оценке результатов исследования.

Оксазолидиноны являются важным достижением в лечении инфекций, вызываемых оксациллинрезистентными штаммами, в том числе и устойчивыми к гликопептидам. В то же время, необходимо иметь ввиду, что уже известно о формировании устойчивости к антибиотикам этой группы.

• Ко-тримоксазол.
• Хлорамфеникол.
• Фузидиевая кислота.
• Тетрациклины.
• Рифампицин.

Значение перечисленных препаратов в лечении стафилококковых инфекций, вызванных метициллинчувствительными штаммами, невелико, так как они уступают по активности бета-лактамам. Их клиническая эффективность при инфекциях, вызываемых оксациллинрезистентными штаммами, изучена недостаточно.

Рифампицин, ко-тримоксазол и фузидиевую кислоту нельзя рекомендовать как средство монотерапии из-за высокой частоты селекции резистентности в процессе лечения.

Формировать конкретный набор антибиотиков для оценки антибиотикочувствительности стафилококков наиболее целесообразно на основании данных о частоте распространения в стационаре метициллинрезистентности. При отсутствии или низкой частоте метициллинрезистентности вполне достаточно ограничиться оценкой чувствительности к оксациллину (в плане надзора), макролидам и, возможно, еще к 1 - 2 препаратам, реально применяемым в конкретном стационаре для лечения стафилококковых инфекций. В случае же высокой частоты распространения метициллинрезистентности в исследование необходимо включать достаточно широкий круг антибиотиков.