Как вводить сыворотку при ботулизме

1 доза, амп. (5) + сыворотка лошадиная
очищенная разведенная 1:100, амп. 1мл (5)

Сыворотки противоботулинические типов А, В, Е представляют собой белковую фракцию сыворотки крови лошадей, иммунизированных ботулиническим анатоксином или токсином одноименного типа, содержащую специфические иммуноглобулины.

Сыворотки выпускают в виде моновалентных препаратов, содержащих антитоксин одного из типов А, В, Е.

Одна ампула сыворотки содержит одну лечебную дозу, которая для типов А и Е составляет 10000 МЕ, для типа В-5000 МЕ.

Препарат представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую бесцветную или с желтоватым оттенком жидкость без осадка.

Препарат содержит антитоксины, нейтрализующие ботулинические токсины соответствующего типа.

Лечение и профилактика ботулизма.

Противоботулинические сыворотки применяют с лечебной и профилактической целью.

С лечебной целью сыворотку вводят в максимально ранние сроки от момента появления первых симптомов ботулизма. До введения сыворотки у больного следует взять кровь в объеме 10 мл; мочу, промывные воды желудка (рвотные массы) для исследования на ботулинический токсин и возбудитель ботулизма. На исследование посылается также пищевой продута, вызвавший заболевание.

Для лечения заболеваний, вызванных неизвестным типом токсина (возбудителя) ботулизма используют смесь моновалентных сывороток. При известном типе токсина (возбудителя) используют монова¬лентную сыворотку соответствующего типа.

Вне зависимости от степени выраженности клинической симптоматики внутривенно капельно вводят одну лечебную дозу препарата, которую разводят в 200 мл стерильного изотонического 0,9 % раствора натрия хлорида, подогретого перед введением в теплой воде до температуры (37±1) °С. Скорость введения 60-90 капель в минуту. В исключительных случаях, при невозможности осуществления капельной инфузии, допускается медленное струйное введение лечебной дозы сыворотки шприцем без предвари¬тельного разведения. Во избежание возможных аллергических реакций до начала внутривенного вливания сыворотки больному струйно вводят 60-90 мг преднизолона.

Сыворотку вводят однократно.

С профилактической целью сыворотку вводят людям, употреблявшим одновременно с больным продукты, которые вызвали заболевание ботулизмом. Вводят половину лечебной дозы (половину содержимого ампулы) сыворотки того лее типа, что и тип токсина, вызвавшего заболевание. Если тип токсина не установлен, вводят по половине лечебной дозы всех типов моноватентных сывороток. Препарат вводят внутримышечно.

Перед использованием ампулу с препаратом тщательно осматривают. Не пригоден к применению препарат в ампулах с нарушенной целостностью, отсутствием маркировки, при изменении физических свойств препарата ( изменение цвета, наличие неразбивающихся хлопьев, при истекшем сроке годности, неправильном хранении.

Перед введением ампулу с сывороткой нагревают, выдерживая в воде при температуре (37±1)°С 5 мин.

Вскрытие ампул с сывороткой, процедуру введения препарата и хранение вскрытой ампулы (не более часа) осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики.

Введение сыворотки проводят под наблюдением врача.

Перед введением противоботулиннческой сыворотки для выявления чувствительности к чужеродному белку в обязательном порядке проводят внутрикожную пробу с разведенной 1:100 сывороткой лошадиной, которая находится в комплекте с препаратом.

Ампулы с разведенной 1:100 сывороткой маркированы красным, а с противоботулинической сывороткой - синим цветом.

Разведенную сыворотку вводят в дозе 0,1 мл внутрикожно в сгибательную поверхность пред¬плечья.

Проба считается отрицательной, если через 20 минут отек или покраснение на месте введения менее 1 см. Проба считается положительной, если отек или покраснение достигают 1 см и более.

При отрицательной внутрикожной пробе подкожно вводят 0,1 мл неразведенной противоботулинической сыворотки. При отсутствии реакции на последнюю через 30 минут вводят внутривенно или внутримышечно всю назначенную дозу сыворотки.

При положительной внутрикожной пробе с разведенной сывороткой или в случаях появления аллергических реакций на подкожную инъекцию неразведенной сыворотки, противоботулыническую сыворотку вводят только в лечебных целях под наблюдением врача и с особыми предосторожностями: вначале, после внутримышечного введения 60 мг преднизолона и антигистаминных препаратов, вводят подкожно разведенную 1:100 сыворотку, предназначенную для внутрикожной пробы, с интервалом в 20 мин в дозе 0,5 мл, 2,0 мл и 5.0 мл. При отсутствии реакции на эти дозы подкожно вводят 0,1 мл неразведенной противоботулинической сыворотки. При отсутствии реакции через 30 мин внутримышечно вводят всю дозу сыворотки.

В случае положительной реакции на одну из вышеуказанных доз, больному внутривенно струйно вводят 180-240 мг преднизолона и. спустя 5- 10 минут, внутримышечно всю лечебную дозу сыворотки.

Противопоказанием к введению противоботулинической сыворотки у больных ботулизмом является только развитие анафилактического шока при определении чувствительности к чужеродному белку.

Введение противоботулинической сыворотки иногда сопровождается развитием различных аллергических реакций: немедленной- наступающей сразу после введения или через несколько часов, ранней – на 2-6 сутки после введения и отдаленной - на 2 неделе и позднее, реакции проявляются симптомокомплексом сывороточной болезни и, в редких случаях, у особо чувстви-тельных людей - анафилактическим шоком. Учитывая возможность возникновения шока, необходимо обеспечить медицинское наблюдение за привитыми в течение 30 мин после окончания введения препарата. Места проведения прививок должны быть оснащены средствами противошоковой терапии.

Введение сывороток (противоботулинической и разведенной) должно быть зарегистрировано в истории болезни с обязательным указанием дозы, способа и времени введения, реакции больного, номера серии, названия предприятия, изготовившего препарат.

Моновалентные противоботулинические сыворотки выпускают в ампулах, содержащих лечебную дозу для каждого типа - по 10 000 МЕ для типов А и Е и 5000 МЕ типа В. Объем препарата в ампуле зависит от активности сывороток. Препарат комплектуется с сывороткой лошадиной очищенной 1:100.

5 ампул противоботулинической сыворотки и 5 ампул сыворотки лошадиной разведенной 1:100 (по 1 мл в ампуле) в пачке с инструкцией по применению, ножом ампульным или скарификатором.

Для лечебно-профилактических и санитарно-профилактических учреждений.

Срок годности 2 года. Препарат хранят (в недоступном для детей месте) и транспортируют в соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8 °С. Замораживание не допускается.

Действующее вещество

Сыворотка противоботулиническая типа A лошадиная очищенная концентрированная жидкая
Инструкция по медицинскому применению - РУ № ЛС-001212

Дата последнего изменения: 05.07.2017

Раствор для инъекций.

В 1 мл сыворотки содержится:

Антитоксин ботулинический типа А - не менее 2500 ME (международных единиц активности антитоксина).

Одна ампула содержит 10000 ME (одна лечебная доза).

Препарат представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость с желтоватым оттенком, без осадка.

Выпускается в комплекте с сывороткой лошадиной очищенной разведенной 1:100, которая представляет собой прозрачную бесцветную жидкость без осадка.

Представляет собой белковую фракцию сыворотки крови лошадей, иммунизированных ботулиническим анатоксином или токсином типа А, содержащую специфические иммуноглобулины (антитоксины), нейтрализующие ботулинический токсин типа А. Одна лечебная доза содержит не менее 10000 ME .

Лечение и профилактика ботулизма.

1.Наличие в анамнезе системных аллергических реакций и осложнений на предыдущее введение сыворотки лошадиной разведенной 1:100, смеси моновалентных сывороток (типа А, В и Е), либо на моновалентную сыворотку противоботулиническую или повышенной чувствительности к препаратам.

2.Развитие анафилактического шока при определении чувствительности к лошадиному белку.

Применение при беременности и в период грудного вскармливании.

Применение препарата допускается по жизненным показаниям с учетом возможной пользы для матери и риска для плода или ребенка.

Сыворотку противоботулиническую применяют с лечебной и профилактической целью.

С лечебной целью сыворотку вводят в максимально ранние сроки от момента появления первых симптомов ботулизма. До введения сыворотки у больного следует взять кровь в объеме 10 мл, мочу, промывные воды желудка (рвотные массы) для исследования на ботулинический токсин и возбудитель ботулизма. На исследование необходимо отобрать пробы пищевых продуктов, вызвавших заболевание.

Для лечения заболеваний, вызванных неизвестным типом токсина (возбудителя) ботулизма, используют смесь моновалентных сывороток (типа А, В и Е). При известном типе токсина (возбудителя) используют моновалентную сыворотку соответствующего типа.

Вне зависимости от степени выраженности клинической симптоматики внутривенно капельно вводят одну лечебную дозу препарата, которую разводят в 200 мл натрия хлорида раствора для инъекций 0,9 %, подогретого перед введением в теплой воде до температуры (37±1) °С. Скорость введения 60-90 капель в минуту. В исключительных случаях, при невозможности осуществления капельной инфузии, допускается медленное струйное введение лечебной дозы сыворотки шприцем без предварительного разведения. Во избежание возможных аллергических реакций до начала внутривенного вливания сыворотки больному струйно вводят 60-90 мг преднизолона.

Сыворотку вводят однократно.

С профилактической целью сыворотку вводят людям, употреблявшим одновременно с больным продукты, которые вызвали заболевание ботулизмом. Вводят половину лечебной дозы (половину содержимого ампулы) сыворотки того же типа, что и тип токсина, вызвавшего заболевание. Если тип токсина не установлен, вводят по половине лечебной дозы всех типов моновалентных сывороток. Препарат вводят внутримышечно.

Перед использованием ампулу с препаратом тщательно осматривают. Не пригоден к применению препарат в ампулах с нарушенной целостностью, отсутствием маркировки, при изменении физических свойств препарата (изменение цвета, наличие неразбивающихся хлопьев), при истекшем сроке годности, неправильном хранении.

Перед введением ампулу с сывороткой нагревают, выдерживая в воде при температуре (37±1)°С 5 мин.

Вскрытие ампул с сывороткой, процедуру введения препарата и хранение вскрытой ампулы (не более часа) осуществляют при строгом соблюдении правил асептики и антисептики.

Введение сыворотки проводят под наблюдением врача.

Перед введением сыворотки противоботулинической для выявления чувствительности к чужеродному белку в обязательном порядке проводят внутрикожную пробу с сывороткой лошадиной очищенной разведенной 1:100, которая находится в комплекте с препаратом.

Ампулы с сывороткой лошадиной очищенной разведенной 1:100 маркированы красным, а с сывороткой противоботулинической - синим или черным цветом.

Сыворотку лошадиную очищенную разведенную 1:100 вводят в дозе 0,1 мл внутрикожно в сгибательную поверхность предплечья.

Проба считается отрицательной, если через 20 минут отек или покраснение на месте введения менее 1 см. Проба считается положительной, если отек или покраснение достигают 1 см и более.

При отрицательной внутрикожной пробе подкожно вводят 0,1 мл сыворотки противоботулинической. При отсутствии реакции на последнюю через 30 мин вводят внутривенно или внутримышечно всю назначенную дозу сыворотки.

При положительной внутрикожной пробе с сывороткой лошадиной очищенной разведенной 1:100 или в случаях появления аллергических реакций на подкожную инъекцию неразведенной сыворотки, сыворотку противоботулиническую вводят только в лечебных целях под наблюдением врача и с особыми предосторожностями: в начале, после внутримышечного введения 60 мг преднизолона и антигистаминных препаратов, вводят подкожно сыворотку лошадиную очищенную разведенную 1:100, предназначенную для внутрикожной пробы, с интервалом в 20 мин в дозе 0,5 мл, 2,0 мл и 5,0 мл. При отсутствии реакции на эти дозы подкожно вводят 0,1 мл сыворотки противоботулинической. При отсутствии реакции через 30 мин внутримышечно вводят всю дозу сыворотки.

В случае положительной реакции на одну из вышеуказанных доз, больному внутривенно струйно вводят 180-240 мг преднизолона и, спустя 5-10 мин, внутримышечно всю лечебную дозу сыворотки.

Введение сыворотки противоботулинической может сопровождаться развитием аллергических реакций немедленного типа, включая анафилактический шок, а также сывороточной болезни.

Симптомы передозировки, меры по оказанию помощи при передозировке не установлены.

Перетрухина А. Т., Блинова Е. И.,

Возбудитель ботулизма относится к роду Clostridium, виду C. botulinum и входит в группу 17 (Спорообразующие грамположительные палочки и кокки) определителя Берджи.
C. botulinum - это крупные палочки, образующие субтерминальные споры. Подвижны, перитрихи. Капсулы не имеют Грамположительны. Облигатные анаэробы. Обладают выраженной биохимической активностью.
Возбудитель ботулизма имеет ряд целлюлярных и экстрацеллюлярных антигенов. Последние представлены антигенами экзотоксина. Известно 7 типов токсинов C. botulinum (A, B, C, D, E и G). Наиболее распространены типы A, B и Е.
Фактором вирулентности C. botulinum является продукция экзотоксина.
C. botulinum широко распространены в природе; их обнаруживают в организме различных животных, рыб, ракообразных, в почве и воде. Благодаря образованию спор C. botulinum длительно сохраняется во внешней среде. Из почвы и воды он может попадать в пищевые продукты и при несоблюдении технологии приготовления пищевых продуктов размножаться в них и выделять экзотоксин.
Экзотоксин C. botulinum - самый сильный из всех биологических ядов. Действие экзотоксина обусловлено блокированием освобождения ацетилхолина или его образования в синапсах и нейромышечных соединениях, в результате чего развиваются параличи.
Ботулизм как самостоятельная нозологическая форма относится к пищевым токсикозам, это сапронозная или зоонозная острая инфекция, характеризующаяся тяжелой интоксикацией, с преимущественным поражением ЦНС. Развиваются зрительные расстройства, нарушения координации глазных мышц, диплопия, затруднение глотания и расстройство речи. Признаки бульбарного паралича прогрессируют, и наступает смерть от паралича дыхательных мышц или остановки сердца.
Постинфекционный иммунитет вариант-специфический.
Микробиологическая диагностика основана на обнаружении экзотоксина в исследуемом материале методами иммуноиндикации и постановке биологической пробы на белых мышах (реакция токсиннейтрализации).
Для лечения обязательно используют антитоксическую противоботулинистическую сыворотку. Специфическая профилактика не применяется.
Противоботулиновые антитоксические сывороткиочищенные и концентрированные
Единственно надежным, всеми признанным средством для лечения заболевших ботулизмом являются специфические типовые антитоксические сыворотки, выпускают в жидком виде.
Препарат изготовляют из нативных противоботулиновых сывороток, получаемых от лошадей, гипериммунизированных анатоксинами или токсинами возбудителей ботулизма соответствующих типов.
Противоботулиновые сыворотки выпускают в виде комплекта моновалентных сывороток, включающего по 1 ампуле сыворотки каждого типа (A, B, C, D, E, F), или в виде поливалентной сыворотки, содержащей в 1 ампуле антитоксины трех, четырех или более типов.
В ампуле с моновалентной сывороткой содержится одна лечебная доза антитоксина соответствующего типа, которая составляет для типа А - 10000 МЕ, типа В - 5000 МЕ, типа С - 10000 МЕ, типа Е - 10000 МЕ, типа F - 3000 МЕ. В ампуле с поливалентной сывороткой содержится указанное количество международных единиц антитоксинов всех типов.
Сыворотки представляют собой прозрачную или незначительно опалесцирующую жидкость от бледно золотистого до желтоватого цвета. В коробки с противоботулинистическими сыворотками вкладывают также необходимое количество ампул с разведенной 1:100 лошадиной сывороткой, применяемой для внутрикожной пробы с целью выявления чувствительности пациента к лошадиному белку.
С лечебной целью при первых признаках заболевания ботулизмом больному вводят поливалентную сыворотку или смесь моновалентных сывороток в соответствующих количествах:
10000 - 15000 МЕ типа А, 5000 - 7500 МЕ типа В и 15000 МЕ типа Е. Сыворотку предварительно подогревают до 37 °С. Вводят внутривенно.
С профилактической целью сыворотку вводят людям, употреблявшим одновременно с больным продукты, которые вызвали отравление. Сыворотку вводят в дозе 1000-2000 МЕ каждого типа внутримышечно строго в соответствии с наставлением по ее применению.
Сыворотки необходимо хранить в темном сухом помещении при температуре 3-10 °С. Сыворотки, подвергшиеся замораживанию и оттаиванию, но с сохранившимися физическими свойствами, годны к применению.
Срок годности сывороток - 2 года. По истечении этого срока сыворотки могут быть направлены для переконтроля и продления годности в изготовивший их институт.
Диагностические типовые сыворотки
Для подтверждения клинического диагноза ботулизма у человека и уточнения случаев, подозрительных на ботулизм, производят исследование крови и выделений больного, а также подозрительных продуктов, послуживших причиной отравления, в двух направлениях: получение чистой культуры и обнаружение токсина.
Для определения типовой принадлежности выделенной чистой культуры возбудителя ботулизма, кроме изучения морфологии, культуральных и биохимических свойств, ставится реакция агглютинации с известными типовыми агглютинирующими сыворотками, а также реакция нейтрализации с антитоксическими типовыми сыворотками для обнаружения ботулинового токсина.
С целью обнаружения ботулинового токсина в организме больного и во внешней среде выпускаются типовые антитоксические и агглютинирующие сыворотки.
Для получения антитоксических типовых сывороток применяются лошади. Животные гипериммунизируются типовыми анатоксинами, полученными из токсинов, продуцируемых тщательно проверенными штаммами возбудителей ботулизма типов А, В, С, Е, и F.
Диагностические сыворотки выпускаются только моновалентными, нативными, в сухом виде. Разливаются по 1 мл в ампулы с титром для А типа 200-400 МЕ, В типа 100-200 МЕ, С типа
200-300 МЕ, Е типа 200-400 МЕ, F типа 50-100 МЕ.
Перед разливкой и сушкой сыворотка проверяется на содержание антитоксина в перекрестной реакции нейтрализации со стандартными токсинами всех типов возбудителей ботулизма, а также на стерильность. Н а ампулы наклеиваются этикетки, заполненные по стандарту. Диагностические антитоксические типовые ботулинистические сыворотки применяются для постановки реакции нейтрализации с целью распознания токсина, находящегося в различных субстратах и в бульонных культурах при выделении возбудителя.
Агглютинирующие типовые сыворотки получают для определения видовой и типовой принадлежностей возбудителя ботулизма при выделении чистой культуры его; ботулинические агглютинирующие сыворотки готовятся на кроликах. Для иммунизации применяют односуточную культуру, к которой добавляют 0,5-0,8 % формалина.
После проверки суспензии бактерий на стерильность и безвредность кроликам вводят в вену уха по 0,5; 1,0; 2,0 и 2,0 мл убитой культуры с промежутками в 5-6 дней.
При первой инъекции вводится 500 млн. микробных тел. В дальнейшем дозы удваиваются и достигают 20-50 млрд. микробных тел. На 6-8 день полсе последней инъекции у кроликов берется кровь. Полученная сыворотка проверяется на стерильность и титруется. Агглютинирующие сыворотки выпускаются с титром от 1:5000 до 1: 20000.
Срок годности диагностических сывороток - 2 года.

Содержимое (Table of Contents)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Сыворотки противоботулинические ФС.3.3.1.0042.15

типов А, В, Е лошадиные Взамен ГФ Х, ст. 608,

ФС 42-3814-99

Настоящая фармакопейная статья распространяется на сыворотки противоботулинические типов А, В и Е, представляющие собой иммуноглобулиновые фракции сыворотки крови лошадей, содержащие специфические антитела, нейтрализующие ботулинические токсины типов А, В или Е. Сыворотки предназначены для экстренной профилактики и лечения ботулизма.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство сывороток противоботулинических типов А, В и Е должно быть валидировано с целью подтверждения установленных требований и гарантирующее качество и безопасность их применения.

Сыворотки получают из плазмы крови лошадей, гипериммунизированных соответствующими ботулиническими анатоксинами/токсинами. Полученную иммуноглобулиновую фракцию плазмы крови лошади, содержащую антитела (антитоксины), нейтрализующие ботулинический токсин соответствующего типа, очищают и концентрируют методами солевого фракционирования, ферментолиза и мембранной фильтрации.

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость с желтоватым оттенком, без осадка. Определение проводят визуально.

Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость. Показатель оптической плотности не должен превышать 0,05. Определение проводят фотометрическим методом при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм, если нет других указаний в нормативной документации.

Жидкость с желтоватым оттенком. Показатель оптической плотности не должен превышать 0,15. Определение проводят фотометрическим методом при длине волны 400 нм в кювете с толщиной слоя 3 мм, если нет других указаний в нормативной документации.

Не менее 2500 международных единиц (МЕ) в 1 мл – для противоботулинической сыворотки типа А, не менее 600 МЕ/мл – для противоботулинической сыворотки типа В и не менее 1200 МЕ/мл – для противоботулинической сыворотки типа Е. Специфическую активность противоботулинических сывороток каждого серотипа в отдельности определяют в тесте нейтрализации соответствующих токсинов (1 МЕ ботулинического антитоксина – это специфически нейтрализующая активность антитоксической сыворотки в отношении ботулинического токсина одноименного типа, которая содержится в определенном количестве международного стандартного образца, представляющего собой противоботулиническую лиофилизированную лошадиную сыворотку определенного серотипа).

Определение опытной дозы ботулинических токсинов. Опытная доза (L+/5) ботулинических токсинов типа А, В и Е представляет собой наименьшее количество токсина, которое в смеси с 0,2 ME антитоксической противоботулинической сыворотки одноименного типа при введении мышам вызывает гибель 50 % животных (при явлениях ботулизма) на 4 сут.

Для определения опытной дозы готовят несколько разведений ботулинического токсина, различающихся между собой на 10 – 20 %.

При определении L+/5 токсина используют стандартный образец (СО) активности противоботулинической сыворотки соответствующего типа, калиброванный в МЕ, который разводят 0,9 % раствором натрия хлорида с таким расчетом, чтобы в 1 мл раствора содержалась 1 ME (0,2 ME в 0,2 мл). Смешивают 1 мл СО активности противоботулинической сыворотки с 1,5 мл раствора ботулинического токсина одноименного типа разной концентрации, начиная с наименьшей. Смеси токсина с сывороткой осторожно перемешивают, выдерживают при температуре от 18 до 22 °С в течение (45 ± 1) мин, затем вводят по 0,5 мл внутривенно 4 белым мышам массой 16 – 18 г. За животными наблюдают 4 сут, отмечая у них появление симптомов ботулизма. Определяют то разведение токсина, которое в смеси со стандартным образцом соответствующего антитоксина вызвало гибель 50 % животных при явлениях ботулизма.

Определение специфической активности (титра) противоботулинической сыворотки. Исходя из предполагаемой активности, сыворотку разводят 0,9 % раствором натрия хлорида до концентрации 1 МЕ/мл. Готовят несколько последовательных разведений сыворотки, отличающихся по активности одно от другого на 10 – 20 %.

По 1 мл каждого разведения сыворотки переносят во флаконы, добавляют по 1,5 мл ботулинического токсина одноименного типа, содержащего 5 опытных доз. Полученные смеси осторожно перемешивают, избегая пенообразования и после выдерживания при температуре от 18 до 22 ºС в течение (45 ± 1) мин вводят 4 белым мышам массой 16 – 18 г внутривенно в объеме 0,5 мл. За животными наблюдают 4 сут, отмечая клинику заболевания и число павших от ботулизма мышей.

Опыт сопровождают контролем опытной дозы токсина, для чего готовят смесь, содержащую 1 мл СО активности противоботулинической сыворотки соответствующего типа с исходной концентрацией 1 МЕ/мл и 1,5 мл токсина, содержащего 5 опытных доз. Смесь инкубируют при тех же условиях, что и испытуемую сыворотку и вводят ее внутривенно 4 белым мышам массой 16 – 18 г в объеме 0,5 мл. За животными наблюдают 4 сут, отмечая клинику заболевания и число мышей, павших от ботулизма.

Специфическую активность (титр) сыворотки рассчитывают, исходя из наибольшего ее разведения, которое в смеси с опытной дозой токсина обеспечивает защиту 100 % мышей от ботулизма. Тест не учитывают, если более 50 % мышей контрольной группы остались живы.

Не менее 2000 МЕ на 0,1 г белка для противоботулинической сыворотки типа А, не менее 500 МЕ — для противоботулинической сыворотки типа В, не менее 1000 МЕ — для противоботулинической сыворотки типа Е.

Расчет удельной активности (Х) производят по формуле:

Т – титр сыворотки, МЕ/мл;

С – концентрация белка, г/мл;

10 – постоянный коэффициент.

Не более 0,025 %. Определение проводят колориметрическим методом. К 5 мл испытуемого образца и 5 мл рабочего эталонного раствора прибавляют по 0,5 мл 5 % раствора бария хлорида и перемешивают. Через 15 мин пробы перемешивают и измеряют оптическую плотность суспензий при длине волны 540 нм в кюветах с толщиной слоя 10 мм против контрольного раствора, содержащего 5 мл образца и 0,5 мл воды очищенной, для эталонного раствора – вода очищенная (5 мл).

Испытание проводят в 2 повторностях. Для расчета используется среднее значение.

Расчет содержания сульфат-ионов (X) в процентах производят по формуле:

Аопыт – значение оптической плотности испытуемого образца;

Аэталон – значение оптической плотности рабочего эталонного раствора.

1. Приготовление основного раствора калия сульфата (1 мг/мл сульфат-ионов). В мерной колбе вместимостью 1000 мл в воде очищенной растворяю 1,8140 г калия сульфата, высушенного до постоянной массы при температуре 100 – 105 °C, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор хранят при комнатной температуре в течение 1 года.
2. Приготовление рабочего эталонного раствора калия сульфата (0,002 % сульфат-ионов). В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 1 мл основного раствора калия сульфата, доводят водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

Не более 0,1 %. Определение проводят колориметрическим методом, основанным на способности хлороформа образовывать с резорцином в щелочной среде соединение хиноидной структуры, которое дает цветную реакцию.

В пробирки вносят по 0,1 мл испытуемого образца и образца сравнения (0,1 % раствор хлороформа), добавляют 0,9 мл 0,9 % раствора натрия хлорида, 2 мл 20 % раствора натрия гидроксида, 1 мл 10 % раствора резорцина и перемешивают. Содержимое пробирок перемешивают и нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 мин. Пробы осторожно охлаждают до температуры 15 – 18 0 С, затем измеряют оптическую плотность окрашенного раствора при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм по сравнению с контрольным раствором, состоящим из 1 мл воды очищенной, 1 мл 0,9 % раствора натрия хлорида и 2 мл 20 % раствора натрия гидроксида. Раствор резорцина в контрольный раствор не добавляют, т.к. продукты его окисления окрашиваются в зеленый цвет.

Расчет содержания хлороформа проводят путем сравнения оптической плотности испытуемого образца и образца сравнения (0,1 % раствор хлороформа).

Содержание хлороформа (Х) в процентах в испытуемом образце вычисляют по формуле:

А_исп – значение оптической плотности испытуемого образца;

А_ст – значение оптической плотности образца сравнения — 0,1 % раствора хлороформа.

1. Приготовление 0,1 % раствора хлороформа. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,1 мл хлороформа, доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают. Раствор используют через 24 часа.
2. Приготовление 10 % раствора резорцина. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 5 г резорцина, растворяют в 30 мл воды очищенной, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.

При температуре от 2 до 8 ºС, если не указано иначе в нормативной документации. Замораживание не допускается.

Показания.Лечение больных ботулизмом.

Общие сведения.Противоботу.шнические сыворотки представляет собой белковую фракцию сыворотки крови лошадей, гипериммунизированных анатоксинами возбудителей ботулизма. Сыворотки выпускают в виде комплекта моновалентных сывороток, содержащего по 1 ампуле сыворотки каждого типа ( тип А- 10000МЕ, тип В- 5000МЕ, тип С- 10000МЕ) или в виде поливалентной сыворотки, содержащей антитоксины 3-х, 4-х типов. Сыворотки представляют собой прозрачную жидкость от бледно-золотистого до желтоватого цвета. В коробки с сыворотками прилагается разведенная сыворотка (1:100). Ампулы с разведенной сывороткой маркируются красным цветом, с неразведенной - синим или черным. Сыворотку вводят по методу Безредко с определением индивидуальной чувствительности к чужеродному белку лошадиной сыворотки. Для этого проводится внутрикожная и подкожная пробы.

Больной, получивший сыворотку, должен находиться под наблюдением врача не менее I часа. При введении ПБС медицинские работники должны быть обеспечены средствами противошоковой терапии.

Оснащение рабочего места:1) комплект ампул с сывороткой, штатив для ампул, пилка; 2) шприцы однократного применения инсулиновый (туберкулиновый) — 1 шт., шприц 1 (2) мл — 1 шт., шприцы по 10 мл, иглы для набора сыворотки из ампул, иглы для внутри-кожных, подкожных, внутримышечных инъекций; 3) стерильный материал (ватные шарики, марлевые треугольники) в упаковках; 4) лоток для стерильного материала; 5) лоток для использованного материала; 6) пинцет в дезинфицирующем растворе; 7) спирт этиловый 70% или другой антисептический раствор для обеззараживания кожи, другой дезинфицирующий раствор для обработки ампул (флаконов); 8) емкость с теплой водой для подогрева сыво­ротки, водный термометр; 9) медицинские перчатки, маска; 10) водонепро­ницаемый обеззараженный фартук; 11) пинцет в дезинфицирующем растворе для работы с использованным инструментарием; 12) емкости с дезинфици­рующим раствором для обработки поверхностей, промывания и замачивания использованных шприцев, игл, обеззараживания ватных и марлевых шари­ков, использованной ветоши; 13) чистая ветошь; 14) инструментальный сто­лик.

Подготовительный этап выполнения манипуляции.

1. Вымыть и просушить руки, провести гигиеническую антисептику рук.

2. Проверить наличие сыворотки в комплекте, срок годности, наличие этикетки, целостность ампул, внешний вид препарата.

3. Надеть фартук, маску, перчатки.

4. Обработать дезинфицирующим раствором лотки, инструментальный сто­лик, фартук. Провести гигиеническую антисептику рук.

5. Поставить на инструментальный столик необходимое оснащение.

Основной этап манипуляции.

Выполнение 1-й пробы,

6. Извлечь из коробки ампулу с сывороткой, разведенной в соотношении 1:100. Поставить ампулу в штатив на обеззараженный лоток.

7. Вымыть и просушить руки.

8. Обработать ампулу шариком, смоченным в спирте, надпилить, повторно обработать спиртом, вскрыть, поставить в штатив.

9. Вскрыть упаковку инсулинового (туберкулинового) шприца, зафиксиро­вать на канюле иглу для набора лекарственных средств.

10. Набрать в шприц 0,2 мл разведенной сыворотки.

11. Зафиксировать на канюле шприца иглу для внутрикожного введения и, не снимая колпачок, вытеснить воздух и избыток сыворотки на ватный шарик, плотно прижатый к канюле иглы.

12. Положить шприц в лоток. Обработать руки спиртом или другим антисеп­тиком.

13. Обработать кожу средней трети предплечья двукратно шариками со спир­том (широко, затем узко). Сухим шариком удалить остатки спирта.

14. Зафиксировать предплечье кистью руки и, натянув кожу в области предстоящей инъекции, ввести внутрикожно 0,1 мл разведенной сыворотки. При правильном введении должна образоваться папула белого цвета диа­метром около 8 мм,

15. Наблюдать в течение 20 мин за общей и местной реакциями. Проба счи­тается отрицательной, если диаметр отека и (или) гиперемии кожи менее 10 мм. Проба положительна, если отек и (или) гиперемия кожи 10 мм и более.

16. Вскрытую ампулу сбросить в лоток для отработанного материала. Если проба отрицательная,

выполнить 2-ю пробу.

17. Извлечь из коробки ампулу с неразведенной сывороткой. Поставить в штатив на обеззараженный лоток. Вымыть и просушить руки.

18. Обработать ампулу с неразведенной сывороткой спиртом, надпилить, по­вторно обработать, вскрыть и поставить в штатив на обеззараженный лоток.

19. Вскрыть упаковку шприца объемом 1 (2) мл, зафиксировать иглу для на­бора лекарственного средства.

20. Набрать в шприц 0,2 мл неразведенной сыворотки, иглу оставить в ампу­ле и накрыть ее марлевым треугольником. Вскрытую ампулу с неразведен­ной сывороткой поставить в штативе в холодильник или хранить при темпе­ратуре 20 ± 2 °С не более 1 ч.

21. Зафиксировать иглу для подкожного введения и, не снимая колпачок, вы­теснить воздух и избыток сыворотки. Положить шприц в лоток. Обработать руки спиртом или другим антисептиком.

2. Обработать кожу средней трети наружной поверхности плеча двукратно шариками со спиртом.

23. Ввести подкожно 0,1 мл неразведенной сыворотки, обработать место инъекции спиртом.

24. Наблюдать в течение 45 ± 15 мин за общей и местной реакцией.

При отсутствии аллергических реакций и осложнений (отек Квинка, крапив­ница, другая сыпь, анафилактический шок или его начальные проявления — головная боль, боль в крестце, животе, бронхоспазм, снижение давления, та­хикардия и др.) ввести лечебную дозу сыворотки.

25. Вымыть и просушить руки.

26. Подогреть ампулу с неразведенной сывороткой до температуры 36 ± 1 °С (см., п. 20).

27. Вскрыть упаковку шприца объемом 10 мл, зафиксировать иглу для набора лекарственного средства.

28. Набрать в шприц неразведенную сыворотку в назначенной врачом дозе.

29. Зафиксировать иглу для внутримышечного введения и, не снимая колпа­чок, вытеснить воздух и избыток сыворотки. Положить шприц в лоток.

30. Обработать руки спиртом или другим антисептическим раствором.

31. Обработать кожу ягодицы ребенка двукратно шариками со спиртом.

32. Ввести внутримышечно назначенную дозу сыворотки. Кожу обработать шариком со спиртом.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском: