Экспресс тест на криптоспоридиоз

Назначение

Краткая информация

Криптоспоридиоз – это кишечное заболевание, вызываемое одноклеточными простейшими Cryptosporidium parvum. Криптоспоридиоз передается фекально-оральным путем. Основные симптомы криптоспоридиоза – водянистая диарея, острые желудочные боли, потеря веса, тошнота, иногда жар. Симптомы обычно появляются в течение первой недели после инфицирования.

Принцип метода

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце клеток Cryptosporidium parvum они вступают в реакцию с нанесенными на стартовую зону специфическими моноклональными антителами против Cryptosporidium parvum, меченными окрашенными частицами, и продолжают движение с током жидкости. В аналитической зоне тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенного иммунного комплекса.

В контрольной зоне тест-полоски специфический окрашенный иммунный комплекс образуется независимо от наличия в тестируемом биологическом материале клеток Cryptosporidium.

В том случае, если в анализируемом образце присутствуют клетки Cryptosporidium, на тест-полоске образуются две параллельные линии (красная аналитическая, обозначенная буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа. В случае отсутствия в анализируемом образце клеток Cryptosporidium на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа.

Состав

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем.

Необходимые оборудование и материалы, не входящие в состав набора

контейнеры для сбора образцов кала;
одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
часы или таймер.

Аналитические характеристики

Меры предосторожности

При проведении определения следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. исследуемые образцы биологического материала следует рассматривать как потенциально инфицированные.

Использованные тесты и остатки биологического материала должны быть помещены в специальный контейнер для санитарных отходов.

Анализируемые образцы

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.

Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер. Следует отбирать образцы кала для анализа в течение первой недели после появления симптомов заболевания, т.к. спустя неделю после инфицирования количество клеток Cryptosporidium значительно уменьшается.

Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С и ниже.

Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.

Подготовка образцов

1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество анализируемого образца. Для этого ввести стержень в 3 разные зоны образца, собрав примерно 150 мг кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, отобрать 150 мкл с помощью пипетки. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).

2. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).

Проведение анализа

3. Встряхнуть пробирку с раствором образца. Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы (рис. 2-1).

6. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.

Интерпретация результатов

Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала клеток Cryptosporidium (рис. 3-1).

Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (С и Т) свидетельствует о положительном результате анализа, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала клеток Cryptosporidium (рис. 3-2). Интенсивность красной аналитической линии (Т) в тестовом окошке кассеты может меняться в зависимости от концентрации клеток Cryptosporidium в образце.

Условия хранения и эксплуатации

Москва, Кулакова ул., 20, Телефоны: , 757-99-15, 757-96-96, 8 (800) 600-54-27, e-mail: tender@bioworld.ru

N1123 RIDA Quick Криптоспоридии/Лямблии - Комби, экспресс-тест, опред. в кале (R-Biopharm), пипетки

N1123 RIDA Quick Криптоспоридии/Лямблии - Комби, экспресс-тест, опред. в кале (R-Biopharm), тестовые устройства

N1123 RIDA Quick Криптоспоридии/Лямблии - Комби, экспресс-тест, опред. в кале (R-Biopharm), буфер для экстракции

Назначение и особенности

Тест предназначен для быстрого качественного определения антигенов Cryptosporidium parvum и Giardia lamblia в образцах кала человека с целью одновременной дифференциальной диагностики криптоспоридоза и лямблиоза.

Введение

Криптоспоридоз – инфекция, вызываемая простейшими класса криптоспоридий, безжгутиковыми организмами, содержащими споры (спорозоиты) внутри ооцист. Они инфицируют желудочно-кишечный тракт людей и животных, в особенности телят, вызывая развитие энтерита. В различных странах эту инфекцию человека можно наблюдать чаще, чем думали ранее. Паразит вызывает эндемическую и эпидемическую диарею, в особенности у детей, живущих в тропических районах развивающихся стран. Обычной клинической картиной криптоспоридиоза является диарея. Течение заболевания напрямую связано с иммунокомпетентностью хозяина. У иммунокомпетентных людей эта болезнь обычно самокупируется. Симптомами заболевания являются обильная холеро-подобная водянистая диарея и схватки в брюшной полости, тошнота и рвота. Диарея продолжается от 3 до 10 дней. У пациентов с нарушениями в иммунной системе наблюдается бoльшая продолжительность и более тяжелые симптомы заболевания. Как и в случае холеры, инфекция приводит к угрожающему жизни обезвоживанию организма. Описаны случаи, когда потеря жидкости составляла от 3 до 12 л в день. Инфекция криптоспоридиями передается через загрязненную воду от животных к человеку, а также от человека к человеку. Особенно подвержены опасности дети в детских учреждениях, мужчины- гомосексуалисты и ВИЧ-инфицированные, а также пациенты госпиталей и больниц, работники здравоохранения и путешественники. Giardia lamblia относится к жгутиковым простейшим организмам; проглатывание цист лямблий, приводит к инфицированию, главным образом, тонкого кишечника. Из-за повсеместного распространения этот организм имеет решающее значение в развитии хронической ослабляющей диареи, а также диареи путешественников. Инфицирование происходит путем заглатывания цист Giardia lamblia с водой или пищей, загрязненными фекалиями. В Соединенных Штатах Giardia lamblia – наиболее распространенный инфицирующий агент, обнаруживаемый во время вспышек диареи, вызываемой загрязненной водой. В развивающихся странах Giardia стоит на первом месте среди кишечных патогенов, инфицирующих детей моложе 10 лет, с частотой заболеваний около 15-20%. Обычно лямблиозы распространены в слоях населения c низким уровнем личной гигиены и антисанитарными условиями приема пищи и посещения туалета. Лямблиозы передаются от человека к человеку. Такие пути передачи инфекции наблюдают среди детей в центрах медицинской помощи, среди сексуально активных мужчин-гомосексуалистов (до 19%), а также среди людей, живущих в учреждениях закрытого типа (больница, тюрьма). У многих инфицированных маленьких детей есть симптомы заболевания, которое распространяется внутри семьи и среди лиц, их окружающих. Дети более старшего возраста иногда инфицируются цистами простейших без видимых симптомов заболевания, при этом они являются носителями цист, периодически выделяя их и оставаясь источником инфекции для других людей. Лямблиозы можно характеризовать как острую или хроническую диарею. Инкубационный период длится от 3 до 42 дней. Клиническим проявлением симптомов острой инфекции является внезапный водянистый кал, спазмы в брюшной полости и вздутие живота. У пациентов возникает чувство недомогания, тошнота и потеря аппетита, реже бывает рвота и лихорадка; кровь, гной и слизь обычно отсутствуют. В прошлом наиболее обычным способом диагностики криптоспоридийного энтерита было исследование кала на наличие ооцист, а лямблиоза – на наличие трофозоитов или цист. Исследование кала проводилось методами микроскопии и окрашивания, требующими наличия квалифицированного опытного лабораторного персонала. Кроме того, такое исследование необходимо проводить в течение всего времени, когда может происходить периодическое выделение паразита. Эквивалентный метод диагностики – иммунохроматографический тест для обнаружения антигенов Cryptosporidium parvum и Giardia lamblia в образцах кала. Метод демонстрирует ту же чувствительность, что и микроскопия, не нуждается в опытном лабораторном персонале микробиологов и специалистовиммуноферментных тестов, он легок в исполнении, не требует много времени и не требует, чтобы в образцах кала присутствовали интактные организмы (ооцисты, трофозоиты или цисты).

Принцип метода

RIDA®Quick Cryptosporidium/Giardia Combi является одностадийным тестом, основанным на иммунохроматографическом принципе. Для определения подходят только свежеприготовленные образцы кала.

Регистрационное удостоверение

Тест-системы для экспресс-диагностики без использования приборов - обзорный буклет (наборы экспресс-тестов Human, R-Biopharm, Standard Diagnostics, Veda.Lab)

Инструкция

(За версией инструкции для конкретного лота диагностического набора/реагента обращайтесь в отдел продукции ЗАО " Аналитика " )

Стоимость услуги:

860 руб.* 1720 руб. Заказать Срочно

Срок исполнения: до 1 к.д. 3 - 5 ч.** Заказать Срочно Указанный срок не включает день взятия биоматериала

Условия подготовки определяются лечащим врачом.

Нельзя собирать кал из памперсов, после клизмы, после введения ректальных свечей или приема медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника, с примесями мочи или выделений из половых органов.

Кал собирается после естественной дефекации на чистый лист бумаги или в чистую ёмкость (ёмкость предварительно вымыть с мылом, обдать кипятком, и высушить). Нельзя отбирать пробу из унитаза. Испражнения собираются специальной лопаточкой из разных мест, вмонтированной в крышку контейнера, в объёме примерно с грецкий орех.

Для исследований предпочтительно использовать утреннюю порцию фекалий. Следует избегать попадания кусочков непереваренной пищи и мочи. Крышку контейнера плотно закрутить.

Доставка в лабораторию в день взятия биоматериала.

Метод исследования: иммунохроматографический экспресс-тест.

Cryptosporidium parvum – представитель типа споровиков, относится к классу кокцидий (Coccidea), вызывает протозойное заболевание криптоспоридиоз, протекающее с поражением эпителия пищеварительного тракта, наблюдается преимущественно у детей и лиц с иммунодефицитом. Тяжесть клинических проявлений, риск развития осложнений зависят от состояния иммунной системы. Заболевание протекает в острой форме, клинически проявляется водянистой диареей до 10 и более раз в сутки, схваткообразными болями в животе, стул становится зловонным без примеси крови и слизи. За сутки потеря жидкости может достигать 15-17 литров. Помимо частого жидкого стула пациентов беспокоят: лихорадка, до 38 °С, снижение аппетита, отсутствие сил, головные боли. У больных с хорошей иммунореактивностью заболевание обычно длится 5-7 дней, и заканчивается самопроизвольным выздоровлением. Более тяжелые симптомы и последствия наблюдаются у пациентов с иммунодефицитом; в этом случае диарея может продолжаться долго, протекать очень тяжело, и приводить к угрожающему жизни обезвоживанию организма.

Источник инвазии – человек. Заразиться можно от животных (котят, щенят, телят, поросят, ягнят и т.д.), при контакте с больным животным. Инфекция может передаваться через воду и грязные руки, фекально-оральным путем, контактным от больного человека здоровому. Изредка происходит передача аэрозольным и половым путем (у гомосексуалистов).

Чувствительность и специфичность.

Чувствительность >99%
Специфичность >99%

Показания к исследованию

первичная диагностика инфекции, особенно среди детей с наличием диарейного синдрома;
скрининговое исследование в местах вспышек ОКИ;
обследование взрослых с диарейным синдромом.

Интерпретация результатов.

Пример результата (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
Криптоспоридии парвум (Cryptosporidium parvum), качественное определение антигена (иммунохроматографический экспресс-метод)	Не обнаружено

Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.

" ["serv_cost"]=> string(3) "860" ["cito_price"]=> string(4) "1720" ["parent"]=> string(2) "25" [10]=> string(1) "1" ["limit"]=> NULL ["bmats"]=> array(1) < [0]=>array(3) < ["cito"]=>string(1) "Y" ["own_bmat"]=> string(2) "12" ["name"]=> string(6) "Кал" > > >

Биоматериал и доступные способы взятия:

Тип	В офисе
Кал

Подготовка к исследованию:

Условия подготовки определяются лечащим врачом.

Доставка в лабораторию в день взятия биоматериала.

Метод исследования: иммунохроматографический экспресс-тест.

Чувствительность и специфичность.

Чувствительность >99%
Специфичность >99%

Показания к исследованию

первичная диагностика инфекции, особенно среди детей с наличием диарейного синдрома;
скрининговое исследование в местах вспышек ОКИ;
обследование взрослых с диарейным синдромом.

Интерпретация результатов.

Пример результата (вариант нормы):

Параметр	Референсные значения
Криптоспоридии парвум (Cryptosporidium parvum), качественное определение антигена (иммунохроматографический экспресс-метод)	Не обнаружено

Интерпретация проводится врачом с учетом клинических проявлений.

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

! Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, пользовательских данных (сведения о местоположении; тип и версия ОС; тип и версия Браузера; тип устройства и разрешение его экрана; источник откуда пришел на сайт пользователь; с какого сайта или по какой рекламе; язык ОС и Браузера; какие страницы открывает и на какие кнопки нажимает пользователь; ip-адрес) в целях функционирования сайта, проведения ретаргетинга и проведения статистических исследований и обзоров. Если вы не хотите, чтобы ваши данные обрабатывались, покиньте сайт.

Сергей Куторов, ветеринарный врач (медицина рептилий и амфибий)

В. Что такое криптоспоридиоз?

О. Заболевание, вызываемое криптоспоридиями (простейшие паразиты), проявляющееся, как правило, расстройствами в желудочно-кишечном тракте.

В. Кто болеет?

О. Это актуально для змей и ящериц, в первую очередь.

В. Откуда он взялся у моего животного?

О. Логично предположить, что паразит, локализирующийся в желудочно-кишечном тракте, должен туда попасть так же, как туда попадает всё остальное - через рот. Соответственно, речь идет в первую очередь о корме и воде, содержащих ооцисты криптоспоридий. Также немаловажное значение имеет гигиена, поскольку ооцисты криптоспоридий весьма выносливы и могут находиться в самом террариуме, что обусловливает загрязнение даже "чистого" корма уже на месте. Также от террариума к террариуму их могут переносить насекомые (тараканы, бегающие по помещению и заползающие в террариумы - не есть хорошо). То есть необходимо понимать, что криптоспоридиоз - это, в первую очередь, болезнь грязных террариумов (пусть и любители чистоты также от него не застрахованы).

В. Как он проявляется?

О. Есть три формы его проявления: желудочная, кишечная и ауральная. Желудочная форма характерна для змей: патология заставляет просвет желудка уменьшиться или вовсе закрыться, ход КО по ЖКТ таким образом блокирован и здесь ничего не остается, кроме как эвакуировать КО обратно (срыги). Кишечная форма характерна для ящериц: диарея (быстрое исхудание и обезвоживание, поскольку при любая диарея подразумевает потерю жидкости). Ауральная форма проявляется в виде абсцессов в ушной области (описана только у игуан). Соответственно, с такими проблемами, животное себя не будет нормально чувствовать, поэтому плохой аппетит или его отсутствие вкупе с общей слабостью также ожидаемы.

В. Как узнать, что у моего животного "крипто"?

О. Для начала нужно понимать, что есть непосредственно заболевание, а есть, так называемое, носительство. Потенциальный носитель - животное, пролеченное в прошлом от проблем, которыми страдало из-за паразита. Рептилия вполне может жить дальше, но будет выделять ооцисты, которые будут заражать восприимчивых животных. Сама по себе диагностика сводится к нахождению паразита или его следов при анализах: смыв с желудка (если речь о змее) или анализ кала (если речь о ящерицах). Далее проводят исследование окрашенных мазков (окраска по Цилю-Нильсену) на месте. Кроме того, могут назначаться дополнительные исследования: экспресс-тест на криптоспоридиоз (быстро) или отправка материала на ПЦР (дольше). Мы используем в своей практике экспресс-тесты, но только для того, чтобы в сомнительных случаях проверить результат исследования окрашенного мазка. Следует отметить вероятность нахождения транзитных ооцист криптоспоридий (опасных для других видов животных). При необходимости назначаются и другие методы диагностики (гистологическое исследование).

В. Змея срыгнула! Криптоспоридиоз?!

О. Массовая истерия по этому поводу бессмысленна и как минимум забавна. Змей с рвотой проверяют на криптоспоридиоз не потому, что он там обязательно есть, а потому, что из болезней, подразумевающих рвоту, исключить/подтвердить криптоспоридиоз проще всего, на месте сделав мазок, а потом приступить к остальной диагностике. Так или иначе, лишним это точно не будет. Прежде чем впадать в истерику и судорожно искать "великий и ужасный" там, где вообще не факт, что он есть, нужно перепроверить наличие погрешностей в работе самого кипера (перепад температур, слишком большой КО, привычка тревожить поевшую змею), пока животное транспортируется к ветеринарному врачу. Еще раз: криптоспоридиоз у змей, как правило, подразумевает рвоту, но не любая рвота у змеи подразумевает криптоспоридиоз. То же самое и с диареей. Нужно просто перепроверить себя и посетить врача.

В. И как теперь относиться к этой болезни [паника]?

В. Как лечить криптоспоридиоз?

О. Походами к врачу и выполнением соответствующих назначений. Скажем так, существует ряд схем лечения животных с криптоспоридиозом, но ни одна из них не гарантирует излечение по ряду причин, а препараты - не из дешевых. Кроме того, необходима также и дополнительная терапия по ситуации, в зависимости от состояния. Животных с запущенными случаями эвтаназируют. Мониторинг состояния животных и эффективности терапии проводят путем систематических анализов (в среднем каждые 3 недели).

В. Что делать с трупами?

О. В морозильной камере криптоспоридий не обезвредить, поэтому специально хранить их там нецелесообразно. От трупов нужно избавляться; полезно будет доставить их ветеринарному врачу для проведения вскрытия и дополнительного взятия материала на исследования. Это нередко оказывается весьма полезно.

В. Моя ящерица/змея больна криптоспоридиозом, лечение расписал врач, но каковы конкретно мои действия, как владельца?

О. Нужно изолировать больных и подозрительных животных. Ооцисты криптоспоридий устойчивы к основной массе доступных дезинфектантов. По литературным данным рабочим методом является применение аммиака или формалина с экспозицией на сутки (самим только не стоит экспериментировать с этими веществами — это очень опасно для здоровья и жизни человека; предварительно проконсультируйтесь со своим ветеринарным врачом — он расскажет о применении этих веществ предметно), затем отмывание террариумов, прокаливание инструментов и предметов декора. От всего, что не получилось прокалить, предпочтительнее избавиться вовсе. После всех мероприятий лучше оставить террариумы пустыми и не заселять туда никого хотя бы пару-тройку месяцев. Если же речь идет не о коллекции, а об одиночно содержащихся особях, то тогда, раз нет других восприимчивых животных, можно посоветовать все отмыть, что возможно - прокалить, и не подселять к пролеченному животному никого во избежание возможности заражения новоприбывших (пролеченные нередко остаются носителями - см.выше). И пересмотрите свой подход к вашей коллекции с точки зрения гигиены: быть может, дело в ней.

В. У меня в коллекции все хорошо, но очень боюсь что-то проглядеть и допустить возникновение криптоспоридиоза, как быть?

О. Гигиена, карантин новоприбывших, анализ кала. У нас, к примеру, "стандартный пакет" для новоприбывших исследование кала методом флотации и исследования мазков кала - нативного и окрашенных по Цилю-Нильсену и Diff-Quick (модификация по Романовскому).

В. Что делать с носителями?

О. Содержать отдельно — вне коллекции, не допуская пересечения с любыми восприимчивыми животными. Больные ящерицы вряд ли заразят змей, а больные змеи вряд ли заразят ящериц, но вероятность этого всё равно есть. Самый идеальный вариант, альтернативный крайнему (эвтаназии) — любитель, содержащий лишь одну особь и о коллекции не задумывающийся.

В. Это опасно для людей?

О. Опасность возможна, но ее вероятность мала. Есть некоторые виды криптоспоридий, поражающие людей с иммунодефицитом, но не о них, как правило, стоит вопрос при заболевании у рептилий. Не стоит забывать о гигиене.