Анаэробная дизентерия ягнят лабораторная диагностика

Анаэробная дизентерия ягнят (лат. — Dysenteria neonatorum anaerobica, Dysetenteria anaerobica agnellorum; англ. — Lamb dysentery; белый понос, анаэробная энтеротоксемия ягнят) — остро протекающая токсико-инфек-ционная болезнь новорожденных ягнят, характеризующаяся геморрагической диареей, токсемией и гибелью.

Историческая справка, распространение, степень опасности и ущерб. Дизентерию ягнят впервые как кровавый понос описали в 1885 г. П. А. Кулешов и соавт. Этиологию болезни изучили Деллинг и Гайгер (1922), которые определили возбудитель и дали название болезни. Анаэробная дизентерия регистрируется во многих овцеводческих странах (на североамериканском континенте эпизоотологического значения не имеет) и наносит ущерб из-за падежа ягнят.

Возбудитель анаэробной дизентерии ягнят. Clostridium perfringens типа В (см. Инфекционная энтеротоксемия).

Эпизоотология. Анаэробной дизентерией болеют новорожденные ягнята в возрасте от нескольких часов до 10 дней, чаще 2. 5 дней. В более старшем возрасте животные заболевают редко.

Источник возбудителя анаэробной дизентерии ягнят — больные животные, выделяющие возбудитель с калом, а также здоровые взрослые овцы-бациллоносители, в кишечнике которых возбудитель может размножаться и периодически выделяться во внешнюю среду с фекалиями, инфицируя почву, подстилку, предметы ухода. Споры могут длительное время сохраняться в почве, что определяет стационарность (энзоотичность) анаэробной дизентерии.
Болезнь неконтагиозна. Заражение ягнят происходит алиментарным путем при сосании вымени, загрязненного выделениями больных животных, при облизывании инфицированных объектов (кормушка, подстилка и др.). Не меньшую опасность представляют собой неубранные трупы павших ягнят, оставленные непродезинфицированными места, где они лежали, и т. д.
Болезнь имеет сезонный характер и проявляется в период массового окота. Одна из причин возникновения болезни — неполный охват вакцинацией поголовья овцематок, снижение активности формирования колострального иммунитета вследствие низкой упитанности животных.
В одних хозяйствах заболевание регистрируется ежегодно, в других не отмечается в течение ряда лет, что зависит от наличия факторов, способствующих заболеванию (переохлаждение организма, неудовлетворительные условия содержания ягнят, теснота в кошарах, плохое кормление овцематок). Характерно нарастание эпизоотической вспышки от единичных случаев до массового поражения ягнят к 15. 20-му дню после появления первых заболевших.
В неблагополучных хозяйствах заболеваемость колеблется из года в год —от единичных случаев до 15. 30% ягнят неблагополучной отары, летальность может достигать 100 %.

Патогенез. Заболевание развивается по типу кишечной интоксикации. Возбудитель, попав в желудочно-кишечный тракт, быстро размножается и выделяет в большом количестве комплекс токсинов (в основном бета-токсин), которые оказывают некротизирующее действие на ткани кишечника, вызывая язвочки и очаговые некрозы. Проникнув через поврежденные стенки кишечника в другие органы и ткани, токсин вызывает общую интоксикацию организма.
Возникновение дизентерии ягнят только в первые дни жизни объясняется меньшей выработкой трипсина в этот период, а также наличием ингибитора трипсина в молозиве овец. Животные старше 15-дневного возраста не болеют, так как у них вырабатывается достаточное количество трипсина, который нейтрализует бета-токсин.

Течение и клиническое проявление. Инкубационный период при анаэробной дизентерии до 5. 6 ч, редко 2. 3 дня. В большинстве случаев ягнята заболевают в первые 3 дня после рождения. Течение болезни сверхострое, острое, подострое и редко хроническое.
При сверхостром течении ягнята погибают неожиданно, без выраженных клинических симптомов, или же болезнь длится не более 2. 4 ч. При этом характерны признаки поражения нервной системы — нарушение координации движения, судороги. Иногда незадолго до смерти фекалии становятся жидкими и кровянистыми. При остром течении отмечают угнетенное состояние, диарею с пузырьками газа. Фекалии в дальнейшем становятся густыми, темными, с примесью слизи и часто крови. Больной ягненок стоит согнувшись, с взъерошенной шерстью, втянутым животом и слабо реагирует на окружающее. Шерсть вокруг анального отверстия и на хвосте запачкана испражнениями, склеена. В начале болезни возможно повышение температуры тела до 41. 42°С, дыхание и пульс учащаются. Болезнь длится от нескольких часов до нескольких дней, и ягненок погибает при явлениях быстро нарастающей общей слабости.
При подостром течении болезнь принимает затяжной характер с менее выраженными признаками. У отдельных животных может длиться до 2 нед. Больной ягненок лежит в состоянии прострации, он истощен; возникает диарея, испражнения вначале жидкие, желтого или зеленого цвета, в дальнейшем становятся более густыми, черного цвета, с примесью крови, пузырьков газа и слизи. Животные тужатся, позвоночник выгнут, живот втянут, шерсть взъерошена. Больные ягнята угнетены, залеживаются, отказываются сосать молоко, пульс и дыхание учащены. В начале болезни температура тела может повышаться до 41 °С. Затем отмечают истощение и гибель.
В редких случаях при хроническом течении болезни симптомы могут быть неярко выражены, болезнь затягивается и ягнята выздоравливают. Выздоровление идет очень медленно, ягнята отстают в росте и развитии и часто погибают от различных причин.

Патологоанатомические признаки. Трупное окоченение выражено хорошо. Область ануса запачкана фекалиями. При вскрытии в грудной и брюшной полостях, а также в сердечной сорочке находят желтый или красноватый экссудат, иногда студенистую массу. Сердце несколько расширено, сердечная мышца дряблая, серо-красного цвета, с точечными и полосатыми кровоизлияниями под эпикардом и эндокардом. Печень часто увеличена, кровенаполненная, дряблой консистенции. Селезенка без видимых изменений. Легкие отечны, почки гиперемированы. Наиболее характерные изменения находят в желудочно-кишечном тракте, особенно в тонком отделе. Сычуг слегка воспален, часто наполнен свернувшимся молоком. В одних случаях кишечник на всем протяжении геморрагически воспален, темно-красного цвета, наполнен слизисто-кровя-нистым содержимым. В других случаях воспалены отдельные отрезки кишечника, покрытые изъязвлениями и круглыми некротическими очагами диаметром от 3 до 6 мм, окруженными геморрагической зоной. Мезентериальные лимфатические узлы увеличены, сочные, иногда с кровоизлияниями. При сверхостром течении видимые патологоанотомические изменения отсутствуют.

Диагностика и дифференциальная диагностика. Предварительно болезнь диагностируют на основании эпизоотологических данных, клинической картины и патологоанатомических изменений. Наличие у павших ягнят геморрагического энтерита или некротических язв на стенке кишечника можно рассматривать как диагностический признак. Окончательный диагноз ставят на основании результатов бактериологического и серологического исследований.
Материалом для лабораторного исследования служат свежий труп или перевязанный отрезок пораженного кишечника, части паренхиматозных органов, брыжеечные лимфатические узлы, трубчатая кость и стерильно взятое содержимое тонкого отдела кишечника. Материал берут не позднее чем через 3 ч после гибели животного.
Лабораторный диагноз (микроскопия, культуральное и биологическое исследование) устанавливают аналогично таковому на инфекционную энтеротоксемию. При обнаружении токсина в фильтрате содержимого кишечника или выделенной культуры определяют его тип в РН на белых мышах с типоспецифическими сыворотками к С. perfringens.
При дифференциальной диагностике необходимо исключить сальмонеллез, эшерихиоз, кокцидиоз.

Иммунитет и специфическая профилактика. При дизентерии, как и при других клостридиозах, формируется антитоксический иммунитет — переболевшие животные приобретают стойкую невосприимчивость к повторному заболеванию. У ягнят, полученных от вакцинированных овцематок, возникает колостральный иммунитет, сохраняющийся до 1,5 мес.

Для профилактики дизентерии ягнят вакцинируют овцематок перед окотом. Для этого применяют поливалентную концентрированную гидроокисьалюминиевую вакцину или поливалентный анатоксин против клостридиозов овец. Для пассивной иммунизации применяют антитоксическую сыворотку против анаэробной дизентерии ягнят и инфекционной энтеротоксемии овец (см. Инфекционная энтеротоксемия овец).

Профилактика анаэробной дизентерии ягнят. Суягных овцематок обеспечивают полноценным кормлением, особенно в последнюю треть беременности, когда рост плода наиболее интенсивный. Необходимо строго соблюдать правила гигиены при подготовке к проведению окота. В помещениях обеспечивают ветеринарно-санитарный режим. Периодически проводят очистку и дезинфекцию помещений для новорожденных, родильных отделений, профилакториев и инвентаря, предназначенного для ухода за животными. Объягнившихся овец содержат отдельно небольшими группами в специальных утепленных помещениях. Проводят своевременное кормление новорожденных молозивом. Первая выпойка молодняка должна быть осуществлена не позднее 1. 2 ч после рождения.

Лечение анаэробной дизентерии ягнят. Лечение эффективно только в начале болезни. При появлении дизентерии заболевших ягнят вместе с овцематками изолируют и лечат антитоксической сывороткой против анаэробной дизентерии ягнят и инфекционной энтеротоксемии овец. Сыворотку можно применять в сочетании с антибиотиками тетрациклинового ряда. Больных содержат изолированно (подсосные ягнята с матерями) и обслуживают отдельно от здорового поголовья.

Меры борьбы. В неблагополучном хозяйстве вакцинации подвергают все поголовье овец, начиная с 3-месячного возраста, согласно наставлению по применению вакцины или полианатоксина. В хозяйствах, неблагополучных по дизентерии ягнят и злокачественному отеку овец, профилактическую вакцинацию суягных маток проводят за 1,5.„2 мес до начала окота. По достижении 6-месячного возраста ягнят ревакцинируют двукратно в дозах, предусмотренных для взрослых овец. Вынужденную вакцинацию в случае появления заболевания среди непривитого поголовья овец проводят в любые сроки. В период проведения прививок кастрация и стрижка овцепоголовья запрещены. В хозяйствах (отарах), стационарно неблагополучных по анаэробной дизентерии, всем родившимся ягнятам вводят антитоксическую сыворотку.

Купить бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку "Купить" и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль"

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Оглавление

Иммунофлуоресцентный метод диагностики

Методика постановки реакции иммунофлуоресценции при диагностике инфекционной энтероксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят в патологическом материале

Обнаружение возбудителей инфекционной энтеротоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят в патологическом материале

Определение возбудителей инфекционной энтеротоксемии и анаэробной дизентерии в культуре

Окрашивание мазков прямым методом

Дата введения 01.02.2020
Добавлен в базу 01.01.2019
Актуализация 01.02.2020
  • Раздел Экология
    • Раздел 11 ЗДРАВООХРАНЕНИЕ
      • Раздел 11.220 Ветеринария
15.02.1984 Утвержден Главное управление ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР
Издан Россельхозиздат 1984 г.

Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР

Российская сельскохозяйственная академия

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОЙ ЭНТЕРОТОКСЕМИИ ЖИВОТНЫХ И АНАЭРОБНОЙ ДИЗЕНТИРИИ ЯГНЯТ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ЛАБОРАТОРНОЙ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОЙ ЭНТЕРОТОКСЕМИИ ЖИВОТНЫХ И АНАЭРОБНОЙ ДИЗЕНТИРИИ ЯГНЯТ

Утверждены Главным управлением ветеринарии Министерства сельского хозяйства СССР 15 февраля 1984 г.

„40902—87 (С) Россельхозиздат, 1984 т.

Иммупофлуоресцсктныи метод диагностики 3

Методика постановки реакции иммулофлуорссцснции при диагностике инфекционной эитсротокссмин опец

н анаэробной дизентерии ягнят. 7

Обнаружение возбудителей инфекционной энтсротокссмин овец н анаэробной дизентерии ягнят в патологическом

Определение возбудителей инфекционной эптеротокссмии

и анаэробной дизентерии в культуре. 8

Непрямой метод . 8

Окрашивание мазков прямым методом. 9

Микроскопия мазков . * 9

Оценка результатов . 10

ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД ДИАГНОСТИКИ

Одним -из важнейших резервов в овцеводстве, особенно в условиях отгонно-пастбищного содержания поголовья, наряду с укреплением кормовой базы, улучшением кормления и условий содержания овец, является снижение заболеваемости и падежа животных опт различных инфекционных, инвазионных и незаразных болезней. Анализ причин падежа овец в ДАССР показал, что от анаэробных заболеваний <энтеротоксемия овец, дизентерия япнят) гибнет животных больше, чем от всех инфекционных болезней вместе взятых.

Успех лечебно-профилактических мер против указанных клост-ридиозов во многом зависит от точно и своевременно поставленного диагноза. По существующей инструкции он устанавливается в течение восьми суток путем проведения сложных лабораторных исследований с использованием множества белых мышей.

Поэтому перед ветеринарной наукой стоит задача разработать более ускоренные и чувствительные методы диагностики клосТ|риди-оз-oiB и внедрить их в лабораторную практику.

Одним из таких методов является люминесцентно-серологический, сущность которого заключается в соединении меченых флуорохромами антител со специфическими антигенами и выявлении образовавшихся светящихся комплексов при люминесцентной микроскопии.

В настоящее время этим методом диагностируются такие инфекционные заболевания животных, как сибирская язва, туберкулез, лист ери оз, сальмонеллезы, бешенство и др.

На возможность использования реакции иммунофлуоресценции для дифференциации типов Кл. перфрингенс указали Козловский Е, Г. и Ефанова М. И. (1970). Однако исследования Полынико-ва Д. Г. (1969) не дали положительных результатов.

В ВИЭВ под руководством профессора И. И. Архангельского и зав. лаб. болезней овец Ю. Д. Караваева выполнены исследования по идентификации микробояз Кл, перфрингенс с использованием реакции иммунофлуоресценции. При этом было установлено, что эта реакция, хотя и вызывает свечение в-сей группы микроорганизмов, но типизировать Кл. перфрингенс не позволяет.

Учитывая перспективность реакции иммунофлуорееценции, мы применили ее для экспресс-дивпностики инфекционной энтероток-семии овец и анаэробной дизентерии ягнят.

Для этого мы изготовили антигены из микробов Кл. перфрингенс пипов А, В, С, Д, а также из mix токсинов. Путем гипериммунизации баранов этими ант*- генами получили противобактериальные и антитоксические сыворотки, глобулиновые фракции, которых после конъюгирования с изотиоционатом флусресцеина использовали для идентификации микробов Кл. перфрингенс методом флуоресцирующих антител.

Сцецифичность окрашивания меченых иммуноглобулинов проверяли на препаратах, приготовленных и.з различных штаммов музейных культур Кл. перфрингенс типа А, В, С и Д, а также Кл. оеде-матиенс и Кл. сепии кум.

Результаты многократно проведенных исследований показали, что полученные антибактериальные флуоресцирующие сыворотки типа А, В, С и Д специфически окрашивают соответствующие гомологичные микробы Кл. перфрингенс. Характерным для них было четкое золотисто-зеленого цвета свечение периферийных участков микробной клетки, тогда как центральная часть выглядела более темной. Такое -свечение микробов считали специфичным и оценивали на три или четыре креста. За счет образования вокруг клеток светящегося комплекса ободка микробы выглядят несколько длиннее и толще, чем при обычной световой микроскопии. Иногда указанные антибактериальные сыворотки, особенно типа А и С, вызывали слабо заметное межтиповое свечение микробов Кл. перфрингенс, оцениваемое на один и, очень редко, на два креста.

При использовании непрямого варианта препараты обрабатывали первоначально немечеными антибактериальными сыворотками (А, В, С и Д), затем — во второй стадии — антмеидовой флуоресцирующей сывороткой.

В этих случаях микробы Кл. перфрингенс светились так же, как и в прямом методе.

При отрицательном результате бактерии просматривались в поле зрения микроскопа в виде слабо заметных серых палочек.

Следует отметить, что специфическое окрашивание микробов во многом зависит от правильной техники приготовления препаратов. Для этого мы предварительно готовили взвесь микробов, содержащую 0,5—1 млрд, клеток в 1 мл, из которой затем изготавливали тонкие мазки площадью примерно 0,5 ем 2 .

В мазке, приготовленном из неразведенной культуры клеток, микробы располагались очень густо и слабо окрашивались, что не давало возможности судить о специфичности свечения.

Мы испытывали различные способы фиксации мазков перед окрашиванием: ацетоном, этиловым и метиловым спиртами, над пламенем спиртовки, а так же соляной кислотой при температуре 4°, 18—20° продолжительностью от 2 до 40 минут.

Установлены хорошие результаты гяри фиксации этиловым или метиловым спиртами при комнатной температуре в течение 7— 10 минут. Оптимальное время окрашивания мазков в термостате при 37° составляло 20 минут, е при комнатной температуре — 40 минут.

При микроскопировании мазков рекомендуется на покровное стекло наносить нефлуоресцирующее иммерсионное масло или же его заменитель — диметилфталат. Исследованиями установлено, что эти дефицитные препараты с успехом можно замернить чистым глицерином или вазелиновым маслом. Положительно окрашенные с использованием глицерина препараты при хранении в холодильнике не теряли специфического свечения в течение восьми месяцев (срок наблюдения). При исследовании таких мазков под микроскопом еще можно увидеть красивую панораму, представляющую собой равномерно расположенные микробы с ярко светящимся золотистого цвета ободком вокруг темного тела клетки.

При постановке люминесцентно-серологической реакции определенное значение имеет и возраст изучаемых культур. Наибольшая интенсивность свечения у Кл. перфрингенс начиналась с 6— 7-часового роста и удерживалась на этом уровне в еченм,е суток, а в последующие сутки снижалась с 4-х крестов до 3-х- Наряду с этим уменьшалось количество специфически окрашенных клеток.

Помимо идентификации музейных штаммов этот метод, параллельно с бактериологическими исследованиями,, испытывали в Республиканской и Кочубейокой ветлабораториях при установлении диагноза на вышеуказанные анаэробные болезни.

В процессе типизации 67 выделенных токоиген1ных культур Кл. перфрингенс антибактериальными флуоресцирующими сыворотками в реакции иммунофлуоресценции в 46 случаях установлен пип Д, в четырнадцати — С, в трех — (В, в двух — А. В то же время микро орган и з м ы двух культур не реагировали ни с одним

из меченых глобулинов.

Ценным диагностическим тестом является люминесцентно-микроскопическое исследование мазков-отпечатков из пораженных участков кишечника, брыжеечных лимфоузлов и паренхиматозных органов.

В положительных случаях на препаратах, приготовленных из различных участков кишечника и мезентериальных лимфоузлов, наблюдали большое количество микробов Кл, перфрингенс, ярко окрашенных мечеными глобулинами.

При энтеротоксемии, вызванной типом С, аналогичных микробов обнаруживали также в мазках-отпечатках из печени, селезенки, почек, сердца и надпочечников

В результате исследования препаратов, изготовленных из кишечника и мезентериальных лимфатических узлов овец, павших от других причин, очень редко обнаруживались специфически светящиеся микробы Кл. перфрингенс при просмотре даже в 20—30 и более полях зрения.

Этот тест позволяет не только обнаружить в течение одного-двух часов обеемененность органов микроорганизмами Кл. 'перфрингенс, но и одновременно установить типы возбудителя знте-ротоксемии.

Наряду с испытанием изготовленных в нашей лаборатории антибактериальных и антитоксических сыврроток Кл. лерфрин-генс мы проводили исследования, направленные на /выяснение возможности использования фабричных типоспецифических антитоксических сывороток для люминесцентно-серологической диагностики инфекционной энтеротоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят.

Результаты этих исследований показали, что антитоксичеокие сыворотки типа А, В, С, Д также окрашивали гомолюпичные музей мые штаммы и выделенные культуры Кл. перфрингенс на три и четыре креста. Однако при их использовании нередко отмечалось межтиповое свечение микробных тел, оцениваемое на один или два креста. Это затрудняло точную типизацию культур Кл. перфрингенс, В то же время этот метод позволяет дифференцировать микробы группы Кл. перфрингенс от других видов шю-стридий.

Таким образом, исследованиями уста новлемо, что предлагаемый метод иммунофлуоресцентной дифференциации микроорганизмов группы Кл. перф|рингенс с использованием антибактериальных меченых глобулинов очень удобен прост и весьма эффективен, а главное — требует минимального /времени для пос-танов!ки диагноза на инфекционную эн те р от о ксемию овец и анаэробную дизентерию ягнят*

ПОСТАНОВКИ РЕАКЦИИ ИММУНОФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ПРИ ДИАГНОСТИКЕ ИНФЕКЦИОННОЙ ЭНТЕРОТОКСЕМИИ ОВЕЦ И АНАЭРОБНОЙ ДИЗЕНТЕРИИ ЯГНЯТ

Рекомендуется ветеринарным лабораториям Дагестанской АССР.

Метод основан на выявлении различных типов Кл. перфрин-гене в мазках из кишечника и других паренхимато зных .органов, а также из культур, выделенных из патмет-ерлала, путем .иополь-завання реакции и!мму!нофлуоре|С)Це1нции.

1. ЛЮМИ1Несцентньi:й микрОс-лок любой марки (МЛ-2, МЛ-4, МЯД, ЛЮМАМ или обычный биологический микроскоп МБИ-1, МБИ-3, МБ'И-4) в сочетании с люминесцентным Осветителем ОИ-17.

3. Этиловый или метиловый спирт.

4. Предметные и покровные стекла.

5. Смесь глицерича с физиологическим раствором в соотношении 9:1 иш нефЛ'уюреюцир^щее иммерсионное масло.

6. 0,15 или 0,88%-ный раствор хлористого натрия.

7. Кюветы или чашки Петри,

Обнаружение возбудителей инфекционной энтеротоксемии овец и анаэробной дизентерии ягнят в патологическом материале

Препараты готовят из исследуемых орланов (кишечник, мезентериальный лимфатический узел, печень, селезенка, сердце, пачки и надпочечники) в виде отпечатков или мазков. В последнем случае Органы разрезают на мелке кусочки, которые тщательно растирают б ступке с физиологическим раствором >в соотношении 1 : 5.

После осаждения крупных частиц из разных участков поверхности суспензии .готовят по 3—4 мазка на тщательно обезвреженных предметных стеклах. Для изготовления отпечатков из органов вырезают кусочки размером 1X1 см и слегка

фламбируют их над пламенем. Затем стерильными ножницами отсекают часть кусочка и срезом делают на предметных стеклах отпечатки.

Часть мазков и отпечатков окрашивают по Граму и микросюо-пируют для определения микробов Кл. перфрингенс.

Вторую часть отпечатков после высушивания в течение 7— 10 минут фиксируют метиловым или этиловым спиртом.

Определение возбудителей инфекционной энтеротоксемии и анаэробной дизентерии в культуре

Для выделения культур возбудителя, не дожидаясь результатов первичной световой и люминесцентной микроскопии, из патм-атериала делают посевы на общепринятые для этих -возбудителей среды.

Исследуют только чистые или смешанные культуры сразу же после появления макроскопически видимого роста. Обычно такой рост у Кл. перфрингенс типа В наблюдается через 3 часа-, у типа С и Д — через 6 часов. Мазки готовят очень тонкими, чтобы в поле зрения микроскопа было несколько десятков микробных клеток. Густые мазки для исследований непригодны. На одном предметном стекле готовят 3—4 мазка площадью не более 1 см й . Место нанесения микробов очерчивают восковым карандашом, подоуш;ив1ают, маркируют и фиксируют спиртами. После фиксации и испарения спирта мазки ополаскивают физраствором. На слегка подсушенный мазок наносят соответствующую сыворотку, предварительно раз веденную физраствором СрН 7,4), как указано на этикетке ампулы.

Окрашивание .мазков производят прямым или непрямым методами.

При непрял ом методе на мазок наносят по 1—2 кашли фабричной типо-специфической сыворотки Кл. перфрингенс тиле А, В, С и Д (каждой в -отдельности). Предварительно устанавливают их красящий титр и рабочее разведение. Красящий питр этих сывороток определяют путем их титрования в разведениях 1 : 1 1 :2, 1 : 4, 1 : 8, 1 : 16 и т. д. с люминесцирующей сывороткой. Затем микроскопией устанавливают максимальное разе едение, которое дает характерное свечение гомологичных микробов Кл. перфрингенс, оцениваемое в три и четыре креста. Это раз-

ведение является титром сыворотки, Концентрация рабочего разе едения сыворотки должна быть -в две раза больше «концентрации красящего титра. В дальнейших исследованиях их используют без предварителынюй проверки.

Окрашивание мазков прямым методом

На мазки наносят 1—2 капли флуоресцирующей антибактериальной сыворотки типа В, С и Д каждую в отдельности е рабочем титре, указанном на ампуле, «помещают во влажную камеру (закрытые чашки Петри или кюветы) м 20 мин. выдерживают в термостате при температуре 37°, а «в условиях комнаты —40 мин. Затем предметные стекла в течение 10 мин, тщательно промывают в физио логическом растворе или дистиллированной -воде, препараты подсушивают на воздухе и просматривают под люминесцентным микроскопом.

На поверхность препаратов, окрашенных прямым или непрямым методом, наносят буферную смесь из 9 частей глицерина и 1 части физраствора, накрывают покровным стеклом. «На покровное стекло наносят ту же буферную смесь или нефлуорес-цмрующее иммерсионное масло и исследуют под люминесцентным микроскопом с использованием светофильтров СЗС-14-4, БС-8-2, ФС-1-2 при силе тока 4А, объективе 90, апертуре 1,25, окуляре 5. Люминесцентный микроскоп устанавливают в затемненной части комнаты.

Результаты люминесцентной микроскопии оценивают по четырехкрестовой системе:

++ + Н--очень яркая золотисто^зеленого цвета люминесцен

ция по периферии морфологически типичных микробов, четко контрастируемая с телом клетки;

Н“ + + — яркая люминесценция периферии микробной клетки;

“Н- — недостаточно яркое, зеленовато-желтое свечение микробов;

4- — еле заметный светящийся ободок вокруг микробной клетки;

--отсутствие свечения микробных клеток.

При положительных случаях в мазках-отпечатках из кишечника, мезентериальных лимфоузлов, а также в м-азках из вьделенных культур обнаруживается огромное количество Кл. перфрин-генс, светящихся на +++ и ++++ при окрашивании типоспецифическими сыворотками В, С и Д. При свечении микробных тел на ++ и + результат следует считать сомнительным.

Реакцию иммунофлуоресценции необходимо ставить с-о следующим контролем:

1. Окрашивание м-аз^в одной антибараньей меченой сывороткой <отрицательная реакция).

2. Окрашивание мазков после присоединения типоопецифи-ческой сыворотки гетерологичной меченой сывороткой (отсутствие свечения).

3. Окрашивание известных микробов Кл. перфрингенс непрямым методом (положительный контроль).

Таким образом, диагноз на инфекционную энтеротоксемию ец и анаэробную дизентерию ягнят следует считать установленным при наличии к л и н и ко-эни зоот ол отчески х и лаггологоана-томических данных и обнаружении специфически светящихся микробов Кл. перфрингенс в мазках-отпечатках из пораженных органов и свежевыделен1ных культур, окрашенных сыворотками типа В, С и Д. При сомнительном или отрицательном результате реакции иммунофлуоресценции проводят полное бактериологическое исследование.

Анаэробная дизентерия ягнят - остро протекающее инфекционное заболевание новорожденных ягнят, отличающееся геморрагической энтеротоксемией.

Возбудитель болезни - анаэробный микроб Clostridium perfringens - в споровой форме сберегается в грунте до четырёх лет: кипячение переносит 5-9 минут, при 90° С - 30 минут, В вегетативной форме микроб сберегается в грунте 10-35 суток, в навозе - 3-5 суток.

Десятипроцентная эссенция гидроокиси натрия, десятипроцентная эссенция сернокарболовой смеси, эссенция хлорной извести, включающей 5 % активного хлора, пятипроцентная эссенция формальдегида уничтожают возбудителя через 15-20 минут.

Эпизоотология. В обычных условиях заболевают в основном ягнята тонкорунных пород в возрасте до 5 суток, более старшие заболевают реже. Заболевание носит эпизоотический характер, проявляет себя в зимний период и в ранний весенний период в этап массового окота. Инфицируются также поросята, пушные звери, молодняк КРС и цыплята.

Источник возбудителя анаэробной дизентерии ягнят – являются ягнята и взрослые овцы-бациллоносители, в кишечнике которых возбудитель болезни способен размножаться и время от времени выделяться во внешнюю среду с испражнениями.

Это приводит к заражению почвы, подстилки, вещей для ухода за животными и служит первопричиной стационарности заболевания.

Инфицирование ягнят случается алиментарным путем при сосании вымени, загрязненного истечениями заболевших животных. В начале эпизоотической вспышки регистрируют единичные случаи заболевания ягнят, потом количество заболевших понемногу нарастает.

Нерациональная и недостаточная подкормка овцематок, неисполнение зоогигиенических нормативов их содержания в срок суягности, охолаживание либо перегрев новорожденных ягнят содействуют возникновению и распространению этого заболевания.

Заболевание охватывает 15- 30 % ягнят неблагополучной отары. Летальный исход составляет от 50 до 100 %.

Иммунитет. Перенёсшие заболевание животные получают напряженный иммунитет.

Признаки. Инкубационный этап при анаэробной дизентерии продолжается от нескольких часов до 2-3 суток.

Заболевание проходит остро и подостро.

При остром продолжении заболевания ягнята погибают через несколько часов после появления на свет без явно выраженных клинических симптомов, а порой перед летальным исходом наблюдаются кровянистые фекалии.

При подостром продолжении первый симптом заболевания - жидкий стул. Экскременты первоначально жидкие, желтого либо зеленоватого цвета, в дальнейшем делаются более густыми и темными, с вкраплениями крови, пузырьков газа и слизи.

Нездоровые ягнята подавлены, практически все время стоят, перестают сосать мать, хвост и шерсть вокруг анального отверстия загрязнены и склеены калом.

Сначала температура тела у животного тела возрастает до 41 °С, потом быстро падает. Вскоре настаёт упадок сил, и ягнята погибают при явлениях увеличивающейся слабости и интенсивного истощения.

В отдельных случаях заболевание приобретает затяжной характер. Животное как будто медленно поправляется, однако впоследствии очень часто гибнет от разных осложнений.

Патологоанатомические изменения. У павших ягнят находят геморрагическое воспаление слизистой оболочки сычуга и кишечника. Слизистая оболочка толще обычного размера, покрыта язвами, с очагами некроза, просвет наполнен кровянистой слизью. При остром продолжении заболевания только лишь сосуды кишечника гиперемированы. Печень нередко больше нормы, дряблая по составу, заполнена кровью. Селезенка без заметных изменений. Мышца сердца дряблая, усыпана точечными и полосчатыми кровоизлияниями. Почки дряблые, немного больше нормы, под капсулой могут находится кровоизлияния. Патологоанатомическая картина типична для общего токсикоза.

Диагностика. Диагноз устанавливают на основе анализа эпизоото-логических данных, специфических клинических симптомов, патолого-анатомических изменений и итогов бактериологического и токсикологического изучения. Выделять культуру возбудителя дизентерии ягнят из паренхиматозных органов и крови получается в редких случаях. Выявление CI. perfringens типа В и его токсинов в кишечнике новорожденных ягнят фактически представляет собой доказательство их заболевания.

Дизентерию ягнят нужно уметь различать от диспепсии, колибактериоза и сальмонеллеза, что реализовывается на основе клинико-эпизоотологических данных, картины анатомирования и результатов лабораторного изучения.

Лечение. Результативно оно только лишь в начале заболевания. Советуется использовать гипериммунную сыворотку и антибиотики (такие как биомицин, синтомицин).

Отличным целебным действием обладает синтомицин, назначаемый в размере 0,1-0,2 грамм перорально 2-3 раза в день в течение трёх суток. Норсульфазол дают с кормом 2-3 раза в день в размере 0,04-0,06 г/кг массы животного. Во всех случаях используют симптоматическое лечение.

Предупреждение и меры борьбы. Суягных овцематок необходимо обеспечить полноценным питанием, в особенности в последней трети беременности, когда рост плода в наибольшей степени интенсивен.

Для суягных овец и новорожденных ягнят необходимо создавать очень хорошие условия содержания. В помещениях необходимо строго блюсти ветеринарно-санитарный режим, не позволять появляться сырости, грязи и сквозняков.

Время от времени производят чистку и обеззараживание помещения и инвентаря. В зимний период овец с приплодом содержат незначительными группами в преднамеренно утепленных кошарах.

При возникновении дизентерии нездоровых ягнят совместно с овцематками отделяют от всех и производят лечение.

В кошарах производят чистку и обеззараживание десятипроцентным раствором хлорной извести, 5 %-ной эмульсией креолина.

Используют антибиотики, антитоксическую сыворотку и вакцину. Сыворотку необходимо вводить ягнятам в течение 1-2 часов после их появления на свет. Более разумно создание иммунитета у ягнят через молозиво во время вакцинированных маток.

Советуется производить вакцинацию суягных маток за месяц до окота. Для предупреждения дизентерии ягнят применяют поливалентную концентрированную ГОА-вакцину и полианатоксин.

Для пассивного иммунизирования ягнят используют бивалентную сыворотку против инфекционной энтеротоксемии овец и дизентерии ягнят.

Читайте также:

Пожалуйста, не занимайтесь самолечением!
При симпотмах заболевания - обратитесь к врачу.

Copyright © Иммунитет и инфекции