Правила забора крови на вич инфекцию по алгоритму

Взятие, доставку и оформление материалов для проведения лабораторных исследований методом ИФА на ВИЧ-инфекцию и СПИД - индикаторные заболевания, для проведения лабораторных исследований методом ПЦР на ВИЧ - инфекцию, вирусные гепатиты В и С, а также для иммунологических исследований в КДЛ ГБУЗ РЦПБ СПИД и ИЗ производить строго в соответствии с правилами (приложение 1, 2, 3).

Наиболее частыми нарушениями указанных правил являются следующие:

1) при оформлении сопроводительной документации не указывается наименование диагностической тест-системы, ее серия, срок годности

2) не полностью указываются паспортные данные обследуемых, а также дата и место взятия материала

3) зачастую в лабораторию ГБУЗ РЦПБ СПИД и ИЗ доставляется материал, уже непригодный для исследования: сыворотки, хранившиеся дольше установленного срока хранения (для разных методов исследования сроки хранения составляют от 3 до 48 часов); проросшие, гемолизированные сыворотки, в недостаточном для исследования количестве (в зависимости от метода минимально необходимый объем материала составляет от 2 до 5 мл);

4) номера, проставленные на флаконах, не соответствуют указанным в направлении; количество проб крови не соответствует количеству, указанному в направлении;

5) неправильно производится взятие материала, в пробах крови, доставляемых для исследований методом ПЦР и для иммунологические исследований, обнаруживаются сгустки,

6) при заборе материала не всегда медицинский персонал ЛПУ обращает внимание на сроки годности пробирок.

Правила взятия и доставки крови для проведения лабораторных исследований методом ИФА на ВИЧ-инфекцию и СПИД-индикаторные заболевания.

Взятие крови производится из локтевой вены в чистую сухую пробирку в количестве 3-5 мл. У новорожденных можно брать пуповинную кровь с указанием об этом в направлении. Полученный материал не рекомендуется хранить более 12 часов при комнатной температуре и более 1 суток в холодильнике при +4-8 0С. Наступающий гемолиз может повлиять на результаты анализа. В случае невозможности доставки материала в течение суток следует сразу после взятия крови отобрать из нее сыворотку. Сыворотка отделяется центрифугированием. Отделенная сыворотка переносится в чистую (лучше стерильную) пробирку, флакон или пластиковый контейнер, и в таком виде она может храниться до 7 дней при температуре +4-8 0С. На пробирке следует указать порядковый номер, фамилию и инициалы пациента, в строгом соответствии с направлением. Для транспортировки в КДЛ диагностики ВИЧ штативы с пробирками помещают в термоконтейнер, легко подвергающийся дезинфекции. Полученный материал в КДЛ диагностики ВИЧ доставляет медицинский персонал, прошедший специальный инструктаж в установленном порядке.

Утв. МЗ СССР от 05.09.1988 г. №690

Направление №__________________

на исследование образца крови в ИФА на ВИЧ-инфекцию

В_________________________________________________________
(наименование учреждения)

Должность лица, направляющего материал___________________________________

Взятие материала для исследования производить только при предъявлении пациентами паспорта или иного документа, удостоверяющего его личность (кроме анонимного обследования).

Коды контингентов

Наименование кода

код

Доноры (крови, биологических жидкостей, органов и тканей)

Медицинский персонал, работающий с ВИЧ - инфицированными лицами и инфицированным материалом

Гомо- и бисексуалисты

Больные заболеваниями, передающимися половым путем

Лица, находящиеся в местах лишения свободы

Обследованные по клиническим показаниям

Беременные (доноры плацентарной и абортной крови)

Обследованные при эпидемиологическом расследовании

Для лабораторий диагностики ВИЧ-инфекции в обменном журнале и направлении обязательно дополнительно указываются результаты исследования (ОП сыворотки, ОП критическое), а также дата постановки, название, серия, срок годности используемой тест-системы.

Правила взятия, хранения и доставки материала для проведения исследований методом полимеразной цепной реакции (ПЦР).

В направлении должны быть четко указаны: учреждение, направившее материал, Ф.И.О. (полностью), год рождения, код контингента, домашний адрес, дата, точное время и место взятия материала, фамилия и подпись ответственного лица с указанием номера контактного телефона.

Правила взятия и доставки материала для проведения иммунологических исследований.

Материал должен быть доставлен в лабораторию сразу после взятия. Недопустимо замораживание биологического материала. Флаконы должны быть четко промаркированы с указанием фамилии пациента, даты и времени взятия. Маркировка флаконов должна строго соответствовать данным, указанным в направлении.

В направлении должны быть четко указаны: учреждение, направившее материал, Ф.И.О. (полностью), год рождения, код контингента, домашний адрес, дата, время и место взятия материала, фамилия и подпись ответственного лица с указанием номера контактного телефона.

При исследовании на инфекционные маркеры необходимо соблюдать все правила преаналитического этапа, который включает в себя комплекс мероприятий, выполняемых от назначения на инфекционные маркеры до осуществления лабораторных измерений взятого биоматериала.

Преаналитический этап-это условия, в которых находится пациент перед взятием у него биоматериала, его первичной обработки, хранения и доставки в лабораторию. Соблюдение правильного проведения преаналитического этапа важно, так как до 60% погрешностей в КДЛ по России приходится на преаналитический этап.

Преаналитический этап включает: правильное взятие биоматериала, хранение, транспортировка.

При исследовании аналитов в цельной крови, сыворотке или плазме образец крови берут чаще всего из локтевой вены. При плановом назначении лабораторного теста с исследованием крови материал для его выполнения следует брать натощак (после примерно 12ч. голодания и воздержания от приема алкоголя и курения), сразу после пробуждения обследуемого (между 7-ю и 9-ю часами утра), при минимальной физической активности непосредственно перед взятием (в течение 20-30 мин), в положение пациента лежа или сидя.

Рационально применение пробирок для взятия крови небольшого объема (10мл.) при соотношении диаметра и высоты пробирки 16,8 на 95 мм.

Взятие венозной крови облегчается применением вакуумных пробирок. Под влиянием вакуума кровь из вены быстро поступает в пробирку, что упрощает процедуру взятия и сокращает время наложения жгута. В зависимости от назначенного вида исследования образец крови должен собираться при наличии строго определённых добавок. Для получения плазмы кровь собирают с добавлением антикоагулянтов: этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА), цитрата, оксалата, гепарина. Для исследований системы свертывания крови применяется только цитратная плазма. В большинстве гематологических исследований используют венозную кровь с солями этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА, К2 или К3-ЭДТА). Взятие биоматериала для иммуносупрессантов (такролимус и циклоспорин) проводят в пробирке с ЭДТА, К2 до верхней метки, содержимое пробирки незамедлительно, с осторожным переворачиванием 5-10 раз, перемешать.

Направления на исследование в иммуноферментном анализе образца крови на ВИЧ-инфекцию заполняется всеми ЛПУ независимо от организационно-правовой формы и формы собственности (приложение №1).

Дотестовое консультирование предполагает разъяснение в доверительной форме сути теста и болезни и ответы на все вопросы до того, как будет проведен тест. При проведении добровольного тестирования на ВИЧ инфекцию пациент обязательно подписывает информированное согласие на данное тестирование.

При тестировании населения на ВИЧ инфекцию необходимо строго соблюдать правила заполнения сопроводительных документов.

При конфиденциальном тестировании персональные данные на пациента приводятся без сокращений (по паспорту или заменяющему его документу, удостоверяющему личность обследуемого): полные Ф.И.О. ,полная дата рождения, гражданство, адрес места жительство, код контингента (приложение №2).

При анонимном тестировании (без паспорта) указывается только цифровой код, включающий порядковый номер освидетельствуемого, год рождения, место жительства. Фамилия, имя, отчество освидетельствуемого не указывается.

Для предупреждения контаминации (механический перенос инфекционного агента из одного образца в другой) необходимо строго соблюдать правила забора биоматериала и его транспортировки.

Доставка образцов крови происходит с соблюдением всех этапов холодовой цепи. Холодовая цепь – это соблюдение температурного режима от момента взятия биоматериала до лабораторного тестирования.

Транспортировка в лабораторию пробирок с образцами осуществляется в специальных контейнерах при температуре от +17c до +24c при условии недопущения прямого воздействия света и встряхивания.

Прием и разборка доставленного материала (проб) должны проводиться с соблюдением мер предосторожности. Емкости с ПБА должны помещаться на поднос или лоток, покрытый многослойной марлевой салфеткой, смоченной дезинфицирующим раствором. Персонал должен использовать маску и резиновые перчатки.

Пробирки с образцами крови после оседания эритроцитов или оседания сгустка крови (не ранее чем через 30мин. после взятия крови) подвергаются центрифугированию. При необходимости более длительного транспортирования в лабораторию образцы свернувшейся крови, предназначенные для получения сыворотки, должны быть отцентрифугированы на месте не позднее, чем через 1ч после взятия образца. Кровь для получения сыворотки или плазмы центрифугируют в течение 10-15 мин при 800-1600 х g .

Забор крови при ПЦР исследовании, как правило, проводят с использованием антикоагулянтов (веществ, препятствующих свертыванию крови). Важно помнить, что некоторые антикоагулянты являются эффективными ингибиторами ПЦР и их использование крайне нежелательно (например, гепарин). Другим неприятным ингибитором ПЦР является гемоглобин цельной крови (гемолиз).

При ПЦР исследовании кровь с ЭДТА может храниться при температуре +2+30 c до 72 часов со времени сбора, после этого может храниться ещё два дня при +2+8 c. Для хранения более пяти дней отделить плазму от красных клеток крови центрифугированием при 800-1600 х g в течение 20минут. После отделения плазмы она может храниться при +2+8º ещё семь дней. Также плазма может храниться при -20C длительное время.

Несоблюдение правил преаналитического этапа приводит к возникновению неспецифических реакций.

Критерии для отказа в принятии лабораторией биоматериала на исследования:

• расхождение между данными заявки и этикетки;
• отсутствие этикетки на емкости для взятия пробы;
• невозможность прочесть на заявке или этикетке паспортные данные пациента;
• отсутствие названия отделения, номер истории болезни, фамилии лечащего врача, подписи процедурной сестры, точного перечня необходимых исследований;
• гемолиз эритроцитов (выход в жидкую часть плазмы различных внутриклеточных компонентов);
• липемия - мутная плазма или сыворотка, обусловливается высоким содержанием в них хиломикронов;
• взятый материал находится в несоответствующей емкости;
• наличие сгустков в пробах с антикоагулянтом ( определение концентрации иммуносупрессантов такролимуса и циклоспорина) ;
• материал взят в вакуумные емкости с просроченным сроком годности.

Общие правила по подготовке к исследованиям на ВИЧ-инфекцию, вирусный гепатит В (HbSAg), вирусный гепатит С, сифилис.

1. кровь сдавать утром натощак;
2. исключить физические нагрузки в течение 24 часов;
3. накануне избегать пищевых нагрузок;
4. исключить курение минимум за 2 часа до исследования;
5. исключить приём алкоголя накануне исследования;
6. при себе иметь паспорт или заменяющий его документ с фотографией.

Выдача результата с 16-00 -17-00ч. При себе иметь паспорт.

Внимание! При положительных и сомнительных реакциях, срок выдачи результата может быть увеличен до 14 дней для ВИЧ инфекции и до 7 дней для вирусного гепатита В, вирусного гепатита С и сифилиса.

Действия медицинского работника при аварийной ситуации

• немедленно снять перчатки;
• вымыть руки с мылом под проточной водой (дать крови свободно вытекать из раны под струей воды либо слегка выдавить кровь из ранки);
• обработать руки 70% спиртом;
• смазать края раны 5% раствором йода;
• при необходимости заклеить поврежденные места лейкопластырем.

В случае порезов:

• немедленно снять перчатки;
• вымыть руки с мылом под проточной водой (дать крови свободно вытекать из раны под струей воды, НЕ ДАВИТЬ, НЕ ТЕРЕТЬ);
• обработать руки 70% спиртом;
• смазать края раны 5% раствором йода;
• при необходимости поврежденные места заклеить пластырем.

При попадании крови или других биологических жидкостей пациента

На кожные покровы: обработать 70% спиртом, промыть водой с мылом и повторно обработать спиртом.

На слизистую глаз: обильно промыть их проточной (питьевой) водой, НЕ ТЕРЕТЬ.

Рекомендуется сесть, запрокинув голову осторожно полить на глаза воду (самостоятельно или попросить коллегу). Чтобы вода и раствор затекали и под веки, их осторожно оттягивают.

ВАЖНО! Не снимайте контактные линзы на время промывания, они создают защитный барьер. После промывания глаз контактные линзы необходимо снять и стандартно обработать (после обработки они безопасны для использования).

На слизистую ротовой полости: немедленно выплюнуть попавшую в рот жидкость, промыть большим количеством воды и прополоскать 70% раствором спирта.

На слизистую носа: обильно промыть водой (НЕ ТЕРЕТЬ).

На халат (одежду): снять рабочую одежду и погрузить в дезинфицирующий раствор или в бак для автоклавирования.

При возникновении аварийной ситуации необходимо в кратчайшие сроки:

• опросить пациента (наличие симптомов острой ВИЧ-инфекции, употребление наркотиков, незащищенный секс и пр.);
  
• обследовать пациента и медработника на ВИЧ-инфекцию (экспресс-тест + стандартный ИФА на антитела к ВИЧ той же порции крови; код направления медработника 118а или 120) с до- и послетестовым консультированием, получением информированного согласия, а также на HBsAg, анти-HCV;
• при наличии ВИЧ у пациента – назначить экстренную ПКП заражения ВИЧ тремя антиретровирусными препаратами в течение первых 2-х часов, но не позднее 72 часов после аварийной ситуации по схеме;
• при выявлении у пациента ВГВ, ВГС – консультация врача для выбора и назначения препаратов ПКП (начало приема препаратов – не позднее 72 часов после аварийной ситуации);
  
• поставить в известность руководителя отделения, учреждения, дежурного врача;
• связаться для консультации со специалистами СПИД-центра;
• зафиксировать ситуацию в журнале аварийных ситуаций.

Медицинского работника, пострадавшего в результате аварийной ситуации, необходимо обследовать на ВИЧ, вирусные гепатиты В и С через 3, 6 и 12 месяцев.

Факторы, повышающие риск заражения:

• ранение, при котором на инструменте визуально обнаруживается кровь;
• ранение полой иглой, при котором игла находилась в кровеносном сосуде;
• глубокое (внутримышечное) повреждение;
• высокий уровень вирусной нагрузки у пациента.

Состав аптечки (Анти ВИЧ/СПИД) для профилактики парентеральных инфекций при аварийных ситуациях:

Согласно Распоряжению МЗ КО №1074:

- 70% этиловый спирт – 100 мл в заводской упаковке;

- салфетки антисептические спиртовые в заводской упаковке;

- 5% спиртовой раствор йода – 1 флакон в заводской упаковке;

- лейкопластырь бактерицидный – 1 упаковка;

- перевязочные средства в заводской упаковке/напальчники;

- шприцы стерильные однократного применения или пипетки.

Наличие условий для промывания под проточной (питьевой) водой.

Согласно Приказу Минздрава России №1н

Антисептики и дезинфицирующие средства:

- йод – раствор для наружного применения 5%;

- этанол – раствор для наружного применения 70%.

- бинт марлевый медицинский стерильный (5 м x 10 см) – 2 шт.;

- лейкопластырь бактерицидный (не менее 1,9 см x 7,2 см) – 3 шт.;

- салфетка марлевая медицинская стерильная (не менее 16 см x 14 см, N№10) – 1 уп.

Государственное автономное учреждение здравоохранения Свердловской области Городская больница город Первоуральск

Юридический адрес: г.Первоуральск, ул.Металлургов 3а

Главный врач: Шайдуров Николай Григорьевич

пн.-пт. с 8-00 до 20 -00
сб. с 9-00 до 15-00

вс. выходной
Регистратуры
пн. - пт. с 7-30 до 20-00
сб. с 9-00 до 15-00

вс. выходной
Стационарные подразделения, приемные покои стационаров, травмпункт

Министерство здравоохранения Свердловской области

Новости Министерства здравоохранения Свердловской области

Известные артисты дарят хорошее настроение для пациентов детского онкоцентра онлайн

Выявление, лечение и профилактика ВИЧ инфекции

Более подробно с информацией можно ознакомиться по следующим ссылкам:

Синдром приобретенного иммунодефицита уже на протяжении более сорока лет является одной из ключевых проблем современного общества. Поэтому ВИЧ-диагностика сейчас привлекает много внимания и ресурсов. Ведь чем раньше будет обнаружен вирус, разрушающий иммунную систему организма, тем более высокими окажутся шансы избежать летального исхода.

Под аббревиатурой ВИЧ скрывается определение вируса иммунодефицита человека - одного из самых опасных среди ныне существующих. Под его воздействием происходит глубокое угнетение всех защитных свойств организма. Это, в свою очередь, приводит к возникновению различных злокачественных образований и вторичных инфекций.

Протекать ВИЧ-инфекция может по-разному. Иногда заболевание уничтожает человека за 3-4 года, в некоторых же случаях может длиться более 20 лет. Стоит знать о том, что данный вирус является нестойким и быстро гибнет, если находится вне организма носителя. Содержаться ВИЧ может в сперме, крови, менструальных выделениях и секрете вагинальных желез. В качестве причин инфицирования нужно вспомнить о таких проблемах, как пародонтоз, ссадины, травмы и др. ВИЧ может передаваться искусственно, гемоконтактным путем и посредством биоконтактного механизма. Если имел место единичный контакт с носителем вируса, то риск заражения будет низким, но при постоянном взаимодействии он значительно повышается. Диагностика ВИЧ-инфекции - это то, чем нельзя пренебрегать, особенно при смене полового партнера Уделить внимание стоит и парентеральному пути заражения. Оно может произойти во время гемотрансфузий зараженной крови, инъекций с использованием игл, которые загрязнены кровью ВИЧ-инфицированных, а также при нестерильных медицинских манипуляциях (татуировки, пирсинг, стоматологические процедуры с использованием инструментов, не обработанных должным образом).

Конечно, лучший способ идентифицировать проблему или ее отсутствие - это диагностика ВИЧ-инфекции. Но какие причины могут быть у человека, ведущего здоровый образ жизни, идти и проверять себя на факт заражения? Естественно, что подобная инициатива должна быть чем-то обоснована. Поэтому важно знать, какие симптомы могут свидетельствовать о разрушительных процессах, угнетающих иммунную систему. Стадию инкубации вируса без анализа крови выявить вряд ли получится, поскольку организм в это время еще никак не реагирует на враждебные элементы. Вторая стадия (первичные проявления) без помощи врача также может протекать незаметно. Но иногда происходит активная репликация вируса, и организм на это начинает реагировать - отмечается лихорадка, различные полиморфные высыпания, лиенальный синдром и фарингит. На второй стадии возможно присоединение таких вторичных заболеваний, как герпес, грибковые инфекции, пневмония и др. Для третьей, латентной стадии, характерно постепенное нарастание иммунодефицита. Из-за того, что клетки защитной системы гибнут, динамика их производства повышается, и это позволяет компенсировать ощутимые потери. На данном этапе несколько лимфатических узлов, принадлежащих разным системам, могут воспалиться. Но сильные болезненные ощущения при этом не наблюдаются. В среднем латентный период длится от 6 до 7 лет, но может затянуться и на 20.

Методы диагностики ВИЧ-инфекции

Говоря о глубоком угнетении защитных механизмов организма вследствие воздействия вируса, стоит отметить, что будущее пациента в этом случае напрямую зависит от своевременной и точной диагностики. Для этого в современной медицине используются различные тест-системы, в основе которых лежит иммунохемилюминесцентный, а также иммуноферментный анализ крови. Эти методики позволяют определить наличие антител, принадлежащих различным классам. Такой результат помогает ощутимо увеличить информативность методов аналитической, клинической специфичности и чувствительности при работе с инфекционными заболеваниями. Интересным также является тот факт, что именно метод полимеразной цепной реакции позволил вывести диагностику ВИЧ на принципиально новый уровень. В качестве материала для исследования подходят самые разные биологические материалы: плазма крови, биоптат, соскоб, сыворотка, спинномозговая или плевральная жидкость. методы диагностики вич инфекции Если говорить о методах лабораторных исследований, они прежде всего ориентированы на выявление нескольких ключевых заболеваний. Речь идет о ВИЧ-инфекции, туберкулезе, всех инфекциях, которые передаются половым путем, и вирусных гепатитах. Для идентификации вируса иммунодефицита используются также молекулярно-генетические и серологические тесты. В первом случае определяется РНК вируса и ДНК провируса, во втором случае проводится анализ антител к ВИЧ и выявляется антиген Р24. В клиниках, применяющих, так сказать, классические способы диагностики, используется преимущественно стандартный протокол серологического тестирования.

Ранняя диагностика ВИЧ

Этот вид определения факта заражения необходим для того, чтобы выявить угрозу поражения иммунной системы как можно раньше. Это, во-первых, позволяет избежать распространения инфекции, во-вторых, повлиять на заболевание в начальной стадии. Если рассматривать пример России, то в армии и на флоте РФ была введена клиническая классификация ВИЧ-инфекции. Это дало свои положительные результаты: процесс ранней клинической диагностики стал значительно легче. ранняя диагностика вич В качестве распространенных симптомов, свидетельствующих о возможном поражении иммунной системы, можно определить головную боль, ночную потливость и немотивированную утомляемость. Возможно также развитие лихорадки, сопровождающейся признаками тонзиллита. Это означает, что повышается температура до 38 градусов и выше, и при этом увеличиваются небные миндалины, а также появляются боли во время глотания. Все это дополняется быстрой потерей веса. При этом данные симптомы часто имеют комплексный характер. В некоторых случаях ВИЧ-инфекция на ранних стадиях может проявляться в виде различных изменений состояния кожи. Речь идет о пятнах, розеолах, гнойничках, фурункулезах и др. Ранняя ВИЧ-диагностика также включает работу с такими симптомами, как генерализованное или ограниченное увеличение периферических лимфатических узлов. Если наблюдается одновременный рост нескольких лимфоузлов, длящийся на протяжении трех месяцев и более, причем в разных группах, за исключением паховой области, то есть все основания подозревать вирус иммунной системы человека. Говоря о диагностике в более поздний период, нужно обратить внимание на проявление вторичного иммунодефицита, который часто протекает под видом разных клинических симптомов. Речь идет о следующих проявлениях: немотивированная генерализованная периферическая лимфаденопатия; артралгия невыясненной этиологии, которая имеет волнообразное течение; ОРВИ (ОРЗ), воспалительные поражения легких и дыхательных путей, которые дают о себе знать достаточно часто; лихорадки неясного генеза и длительный субфебрилитет; общая интоксикация, которая проявляется посредством немотивированной слабости, быстрой утомляемости, вялости и др. методы лабораторной диагностики вич инфекции ВИЧ-диагностика на позднем этапе включает обследование при таком заболевании, как саркома Капоши, проявляющаяся появлением множественных новообразований часто в верхней части тела у молодых людей с последующим динамичным развитием и метастазированием.

Всемирная организация здравоохранения предлагает следующие методы борьбы с ВИЧ-инфекцией: Профилактика заражения половым путем. Это защищенный секс, распространение презервативов, лечение ЗППП и обучающие программы. Для беременных женщин, у которых была выявлена ВИЧ-инфекция, - диагностика, профилактика с использованием соответствующих химических препаратов, а также профессиональное консультирование и лечение. Организация профилактики через препараты крови. В этом случае речь идет об антивирусной обработке и проверке доноров. Социальная и медицинская помощь больным, а также их семьям. диагностика лечение профилактика вич инфекции Для того чтобы ВИЧ-диагностика не выявила наличие вируса, нужно следовать простым правилам безопасности: если кровь инфицированного попала на кожу, ее нужно сразу же смыть водой с мылом, после чего обработать место контакта спиртом; если было получено повреждение предметом с элементами вируса, то ранку нужно сжать, выдавить кровь, обработать это место перекисью водорода, а края прижечь йодом; никогда не пользоваться шприцами, стерильность которых была нарушена; при половых контактах использовать презерватив, а лучше изначально проверить партнера на предмет заражения.

Благодаря тому факту, что ВИЧ-диагностика не стоит на месте, тысячи людей получают возможность вовремя начать лечение и значительно увеличить продолжительность жизни. Главное, не игнорировать очевидные симптомы и не бояться идти к врачу.

Аннотация научной статьи по клинической медицине, автор научной работы — Богословская Елена Владимировна, Шипулин Г. А.

В работе описана проблема постановки диагноза ВИЧ-инфекции детям, рожденным от ВИЧ-инфицированных матерей . Представлен алгоритм и методы диагностики детей , которые позволяют поставить диагноз ВИЧ-инфекции в первые месяцы жизни ребенка.

Похожие темы научных работ по клинической медицине , автор научной работы — Богословская Елена Владимировна, Шипулин Г. А.

DIAGNOSIS OF HIVINFECTION IN CHILDREN OF THE FIRST MONTHS OF LIFE, BORN FROM HIVINFECTED MOTHERS

The article deals with a problem of diagnosis of HIVinfection in children, born from HIVinfected mothers . The algorithm and methods of diagnostics in children , which allows to make the diagnosis of HIVinfection in the first months of a child’s life.

Е. В. Богословская, Г. А. Шипулин

ДИАГНОСТИКА ВИЧ-ИНФЕКЦИИ У ДЕТЕЙ ПЕРВЫХ МЕСЯЦЕВ ЖИЗНИ, РОЖДЕННЫХ ОТ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ МАТЕРЕЙ

ФБУНЦентральный научно-исследовательский институт эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва

В работе описана проблема постановки диагноза ВИЧ-инфекции детям, рожденным от ВИЧ-инфицированных матерей. Представлен алгоритм и методы диагностики детей, которые позволяют поставить диагноз ВИЧ-инфекции в первые месяцы жизни ребенка.

Ключевые слова: ВИЧ-инфицированные матери, ВИЧ-инфицированные дети, алгоритм и методы диагностики детей

DIAGNOSIS OF HIVINFECTION IN CHILDREN OF THE FIRST MONTHS OF LIFE, BORN FROM HIVINFECTED MOTHERS

Bogoslovskaja E.V., Shipulin G.A.

The article deals with a problem of diagnosis ofHIVinfection in children, born from HIVinfected mothers. The algorithm and methods of diagnostics in children, which allows to make the diagnosis of HIVinfection in the first months of a child's life.

Key words: HIVinfected mothers, HIVinfected children, the algorithm and methods of diagnostics in children

Введение. Одной из важнейших задач в диагностике ВИЧ-инфекции является выявление ВИЧ у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей. Среди зарегистрированных в РФ случаев ВИЧ-инфекции на конец 2010 г. на долю детей до 15 лет приходится более 5000 случаев, из них 3651 ребенок инфицирован при перинатальном контакте с матерью [1]. Еще более 25 000 детей в возрасте до полутора лет, рожденных в 2009—2010 гг. от зараженных ВИЧ матерей, находятся под наблюдением до окончательного установления диагноза [1].

Диагностика ВИЧ-инфекции у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, затруднена в связи с тем, что в крови таких детей в течение длительного времени сохраняются материнские антитела к ВИЧ. Однако далеко не каждый ребенок, рожденный инфицированной женщиной, заражен ВИЧ, несмотря на то что дети подвергаются высокому риску заражения ВИЧ внутриутробно, во время родов и при кормлении грудью. Если не предпринимать никаких профилактических мер, то риск передачи ВИЧ от матери ребенку у детей, находящихся на искусственном вскармливании, составляет 25—30% [3]; грудное вскармливание повышает риск до 45% [2]. На сегодняшний день разработаны эффективные методы профилактики вертикальной передачи ВИЧ: антиретровирусная (АРВ) терапия, которая проводится у матери во время беременности и родов и у ребенка в первые недели жизни; акушерские вмешательства, включая плановое кесарево сечение; отказ от грудного вскармливания. Там, где эти методы доступны и применяются, частоту передачи ВИЧ от матери ребенку удается снизить до 1—2% [4, 5].

Поскольку материнские антитела сохраняются в крови новорожденных детей в течение нескольких

Информация для контакта.

Богословская Елена Владимировна — ст. науч. сотр. ФБУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Москва, e-mail:lenabo@pcr.ru

месяцев, с помощью серологических методов диагноз ВИЧ-инфекции не подтвердился у детей только в возрасте 15—18 мес с последующим подтверждением результата в иммунном блоте. По существовавшим до 2011 г. в России рекомендациям постановка или снятие диагноза ВИЧ-инфекции детям, рожденным от ВИЧ-инфицированных матерей, проводилась на основании результатов серологического обследования не ранее 18 мес [2].

Для более ранней диагностики ВИЧ у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, необходимо выявлять сам вирус, а не антитела к нему. На сегодняшний день оптимальным методом прямого выявления вируса в организме является метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), позволяющий с высокой специфичностью и чувствительностью определять нуклеиновые кислоты инфекционных агентов.

Проблема более ранней диагностики ВИЧ-инфекции у новорожденных детей за рубежом была решена несколько лет назад с появлением молекулярно-генетиче-ских методов, которые позволяют выявлять фрагменты генома ВИЧ в периферической крови на ранних сроках инфицирования. Было показано, что у большинства инфицированных детей ДНК вируса ВИЧ в лимфоцитах крови определяется к 1-му месяцу жизни и практически у всех к 6-му месяцу [6—8].

За рубежом была разработана тест-система, предназначенная для выявления ДНК провируса ВИЧ (Amplicor HIV-1 test, фирма "Хоффманн-Ла Рош"). В силу высокой изменчивости вируса оказалось, что данная тест-система не может быть использована в ряде стран, в том числе России, из-за недостаточной эффективности выявления ВИЧ ряда субтипов [9], в частности субтипа А, наиболее распространенного в России. В 2003 г. было официально признано, что тест-система Amplicor HIV-1 test не пригодна для использования на территории РФ. Причинами тому были невысокая эффективность выявления ВИЧ субтипа А, отсутствие внутреннего контрольного образца

ВОПРОСЫ КЛИНИЧЕСКОЙ АНЕСТЕЗИОЛОГИИ У ДЕТЕЙ

(ВКО), что часто приводило к появлению ложноотри-цательных результатов [10].

В странах, где тест система Amplicor HIV-1 test не может быть использована, рекомендуется проводить диагностику новорожденных детей с помощью тест-систем, предназначенных для определения концентрации РНК ВИЧ в плазме крови [11]. Помимо высокой стоимости таких исследований, есть и другие существенные ограничения для замены. В частности, если новорожденному ребенку назначают профилактический курс АРВ-терапии сразу после рождения, выявление РНК ВИЧ для постановки диагноза у него будет неэффективным, поскольку лекарственные препараты приводят к быстрому подавлению репликации вируса и тем самым к уменьшению содержания РНК ВИЧ.

Проблема ранней диагностики ВИЧ у новорожденных детей была решена в России, когда на базе Центрального НИИ эпидемиологии Роспотребнадзо-ра были разработаны ПЦР-тест-системы АмплиСенс ДНК-ВИЧ-96 (М) и АмплиСенс ДНК-ВИЧ-FRT, предназначенные для выявления ДНК провируса ВИЧ в лейкоцитах крови. К отличительным особенностям тест-систем относятся:

1) праймеры, комплиментарные наиболее консервативной области генома ВИЧ — гену полимеразы, позволяющие выявлять с высокой эффективностью большинство субтипов ВИЧ-1, особенно субтип А, наиболее распространенный на территории РФ;

2) стандартизованный метод выделения ДНК и наличие внутреннего контрольного образца, позволяющие полностью исключить риск получения ложноо-трицательных результатов, приближая эффективность ДНК-диагностики ВИЧ-инфекции к 100%.

На сегодняшний день описанные тест-системы являются единственными зарегистрированными и разрешенными в России для ранней диагностики ВИЧ у детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей. В ходе клинических и государственных испытаний (на базе ГИСК им. Л. А. Тарасевича) инфицированным детям удалось поставить диагноз ВИЧ-инфекции на несколько месяцев раньше, чем при использовании стандартных подходов, основанных на серологических методах.

Наличие зарегистрированных тест-систем в России и их высокая эффективность для ранней диагностики ВИЧ у новорожденных детей способствовали появлению в 2011 г. санитарно-эпидемиологических правил СП 3.1.5.2826—10 "Профилактика ВИЧ-инфекции", согласно которым диагноз ВИЧ-инфекции может быть снят у новорожденного ребенка в возрасте 4—6 мес на основании результатов ПЦР-диагностики.

Для проведения исследования по выявлению про-вирусной ДНК ВИЧ используется цельная кровь или сухие пятна крови. У новорожденных детей нельзя исследовать пуповинную кровь, так как при взятии возможно попадание материнской крови в образец. Цельную кровь следует собирать в одноразовую пробирку с 3% раствором этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) в соотношении 1:20 или в специализированную вакуумную пробирку с ЭДТА. После взятия крови пробирку перемешивают 3—4-кратным переворачиванием и хранят при температуре 2—8°C не более 2 сут (замораживать цельную кровь нель-

зя). При необходимости сохранения образца до проведения исследования необходимо в течение 2 сут от момента взятия образца крови провести процедуру осадка лейкоцитов, который допускает хранение при температуре не выше -16°C в течение 2 нед либо длительно при температуре -70°C. Транспортирование подобных образцов необходимо проводить со строгим контролем температуры, недопустимо оттаивание материала. Для получения образцов сухой капли крови 50 мкл цельной крови наносят в 5 повторах на карточки из специализированной фильтровальной бумаги (например Whatman 903) и высушивают на воздухе при комнатной температуре в течение 4—12 ч (допустимо высушивание в течение ночи). Полученные карточки упаковывают с осушителем в индивидуальные пакеты типа "зип-лок". Высушенные и упакованные карточки при низкой влажности могут храниться при температуре 2—8°C в течение 6 мес. Карточки с сухими пятнами крови могут быть транспортированы в лабораторию в течение 2 нед при комнатной температуре.

Обследование ребенка, рожденного от ВИЧ-инфицированной матери, на ДНК провируса ВИЧ желательно проводить в возрасте: до 48 ч жизни; 1—2 мес; 3—6 мес.

Выявление ДНК провируса ВИЧ в первые часы жизни ребенка может свидетельствовать о внутриутробном инфицировании и отчасти о более тяжелом течении заболевания. Отсутствие ДНК провируса в ранние сроки и появление ДНК ВИЧ в более поздние сроки может свидетельствовать об инфицировании в процессе родов или при возможном грудном вскармливании.

Положительный результат на наличие ДНК прови-руса ВИЧ должен быть подтвержден, для повторного анализа необходимо использовать дополнительный образец крови, полученный в более поздние сроки по сравнению с предыдущим образцом. Положительные результаты обследования на ДНК провируса ВИЧ в двух отдельно взятых образцах крови у ребенка старше 1 мес являются лабораторным подтверждением диагноза ВИЧ-инфекции.

Получение двух отрицательных результатов обследования на ДНК провируса ВИЧ в возрасте старше 4—6 мес (при отсутствии грудного вскармливания) свидетельствует против наличия у ребенка ВИЧ-инфекции, однако снять ребенка с диспансерного учета по поводу интранатального и перинатального контакта по ВИЧ-инфекции можно в возрасте старше 1 года при одновременном наличии следующих условий:

два отрицательных результата исследования ДНК ВИЧ методом ПЦР, один из которых выполнен в возрасте 4 мес или старше;

два отрицательных результата исследования и более на наличие антител к ВИЧ методом ИФА, выполненные в возрасте 12 мес или старше;

отсутствие гипогаммаглобулинемии на момент исследования крови на наличие антител к ВИЧ;

отсутствие клинических проявлений ВИЧ-инфекции.

Таким образом, на сегодняшний день в России диагноз ВИЧ-инфекции новорожденным детям может быть выставлен в максимально короткие сроки (до

АНЕСТЕЗИОЛОГИЯ И РЕАНИМАТОЛОГИЯ № 1, 2012

4—6 мес жизни ребенка) с использованием высокоэффективных отечественных ПЦР-тест-систем, предназначенных для выявления ДНК провируса ВИЧ. Вышеописанный алгоритм тестирования позволяет практически полностью исключить вероятность получения ложных результатов.

1. Информационный бюл. "ВИЧ-инфекция" 2010; № 34.

2. Инструкция по профилактике передачи ВИЧ-инфекции от матери ребенку и образца информированного согласия на проведение химиопрофилактики ВИЧ (Утв. приказом МЗ РФ 19.12.2003, № 606).

3. Connor E. M., Sperling R. S., Gelber R. et al. Reduction of maternal—infant transmission of human immunodeficiency virus type 1 with zidovudine treatment. N. Engl. J. Med. 1994; 331: 1173—1180.

4. Cooper E. R., Charurat M., Mofenson L. M. et al. Combination an-tiretroviral strategies for the treatment of pregnant HIV-1 infected women and prevention of perinatal HIV-1 transmission. J. Acquir. Immune Defic. Syndr. Hum. Retrovirol. 2002; 29 (5): 484—494.

5. Townsend C. L., Cortina-Borja M., Peckham C. S. et al. Low rates of mother-to-child transmission of HIV following effective pregnan-

cy interventions in the United Kingdom and Ireland, 2000—2006. AIDS 2008; 22 (8): 973—981.

6. Bremer J. W., Lew J. F., Cooper E. et al. Diagnosis of infection with human immunodeficiency virus type 1 by a DNA polymerase chain reaction assay among infants enrolled in the Women and Infants' Transmission Study. J. Pediatr. 1996; 129 (2): 198—207.

7. Charbonneau T. T., Wade N. A., WeinerL. et al. Vertical transmission of HIV in New York State: a basis for statewide testing of newborns. AIDS Patient Care STDs 1997; 11 (4): 227—236.

8. Pugatch D. Testing infants for human immunodeficiency virus infection. Pediatr. Infect. Dis. J. 2002; 21 (7): 711—712.

9. Respess R. A., Butcher A., Wang H. et al. Detection of genetically diverse Human Immunodeficiency Virus type 1 group M and O isolates by PCR. J. Clin. Microbiol. 1997; 35: 1284—1286.

10. БобковаМ. Р., Буравцова Е. В., Суханова А. Л. и др. Применение тест-системы Amplicor HIV-1 для диагностики ВИЧ-инфекции у новорожденных детей в России: первые результаты (2001—2002 гг.). Клин. лаб. диагн. 2003; 6: 49—53.

11. Guidelines for the use of antiretroviral agents in pediatric HIV infection. (Working Group on Antiretroviral Therapy and Medical Management of HIV-Infected Children). 2011.

Т. С. Агзамходжаев, А. С. Юсупов, М. Т. Мелибаев

АНЕСТЕЗИОЛОГИЧЕСКАЯ ЗАЩИТА НУБАИНОМ ПРИ ОПЕРАТИВНЫХ ВМЕШАТЕЛЬСТВАХ У ДЕТЕЙ

Ташкентский педиатрический медицинский институт; Кафедра детской анестезиологии

и реаниматологии, Узбекистан

Мы изучали изменения параметров центральной и периферической гемодинамики при сочетанной анестезии с нубаином во время хирургических вмешательств у детей.

Исследование проводилось на этапах операции и анестезии у 64 детей в возрасте от 2 до 14 лет с сопутствующими заболеваниями и врожденными пороками развития. Физическое состояние детей А^ЗА I-II. Было показано, что в условиях анестезии нубаином течение операционного периода сопровождалось незначительными, компенсированными изменениями центральной и периферической гемодинамики, что свидетельствует об эффективности анестезиологической защиты от операцонной травмы. Этот вид анестезии создает благоприятные условия для оптимального функционирования центральной и периферической гемодинамики. Целью исследования было изучение клинических проявлений и изменений уровня гормона стресса (кортизола) при многокомпонентной анестезии с использованием нубаина.

ANESTHESIOLOGY NUBAINE PROTECTION DURING OPERATIVE INTERVENTIONS IN CHILDREN

Adzamhodjaev T.S., YusupovA.S., MelibaevM.T.

We studied the changes in central and peripheral hemodynamic parameters under combined nubaine anesthesia during surgical interventions in children.

The study was carried out at the stages of operation and anesthesia in 64 children at the age from 2 to 14 years with concomitant diseases and congenital malformations. The physical status of the children was ASA - I-II. It was shown, that under nubaine anesthesia , the run of the operational period was accompanied by a insignificant, compensated changes of the central and peripheral hemodynamics, which testified of the effectiveness of anesthesia protection from operative trauma. This type of anesthesia creates favorable conditions for optimal functioning of the central and peripheral hemodynamics. The aim of the research was to study the clinical manifestations and changes of the level of the stress hormone (cortisol) during nubaine multi-anesthesia.

На сегодняшний день актуальной медицинской проблемой остается защита детей от хирургической агрессии [4, 9, 10]. Для обезболивания больных в интраопе-

рационном периоде основной группой лекарственных средств остаются опиоидные анальгетики, которые применяют у 60% больных [2, 7—9]. Нубаин является