Лабораторная диагностика сифилиса презентация

Кафедра микробиологии, вирусологии и иммунологии КазНМУ Электронное пособие на тему: Алгоритм лабораторной диагностики сифилиса Подготовлено: Профессором Акышбаевой К.С.

Сифилис- LUES — хроническое инфекционное заболевание, вызываемое Treponema pallidum (бледная трепонема), характеризуется полиорганным поражением, и стадийным прогредиентным течением.

КЛАССИФИКАЦИЯ: Семейство: Spirochaetaceae Род: Treponema Вид: Treponema pаllidum

МОРФОЛОГИЯ Форма- спиралевидная 8-14 завитков, одинаковых по высоте и ширине. Подвижная: - поступательные - вращательные - маятникообразные движения

ТИНКТОРИАЛЬНЫЕ СВОЙСТВА: Плохо окрашиваются анилиновыми красителями По Романовскому-Гимзе - в бледно- розовый цвет При серебрении по Морозову - в черный цвет

Эпидемиология Болеет только человек В эксперименте – обезьяны, кролики, хомяки Пути передачи: Половой - основной Контактный- реже (белье, предметы быта) Через плаценту.

Заражение T.pallidum ПАТОГЕНЕЗ СИФИЛИСА Бессимптомный период (3-30 лет) *- У нелеченых пациентов через несколько лет возникают разные формы позднего нейросифилиса. Инкубационный период (около 3 нед.) Локальное размножение T.pallidum Диссеминирование по кровотоку Первичный сифилис (2-6 нед) Локальные язвенные поражения Вторичный сифилис (2-6 нед) Заживление дефекта Латентный сифилис Депонирование возб.в тканях вокруг кр.сосудов Высыпания на коже, слиз., поражение ЦНВ Сохранение Т.р. В селезенке, л\\узлах Повторное размножение Четвертичный сифилис* Реакция ГЗТ Поражения органов и тканей Гуммы кожи, костей, яичка и т.д Кардиоваскулярный сифилис, поражения сердца, апорты Нейросифилис, параличи, спинная сухотка Возможно заражение Здоровых лиц Возможно заражение Здоровых лиц ПЕРИОДЫ СИФИЛИСА

Первичный период: твердый шанкр ч/з 7-10 дн – регионарный лимфоаденит (в это время становятся (+) серологические реакции) ч/з 5-6 нед полиаденит генерализованная спирохетемия. вторичный период

Диагностика Первичного сифилиса: * абсолютный критерий для диагностики сифилиса ** прямая РИФ- наличие флюоресцирующих трепонем *** обнаружение спец.ДНК трепонем **** модификации РИФ-200 (разведение исслед.сывор. в 200 раз для уменьшения количества ложно (+) результатов); РИФ-ц (с цельной спинномозговой жидкости для выявления специфических поражений ЦНС); РИФ-абс – реакция с абсорбцией (групповые АТ удаляются из исследуемой сыворотки с помощью разрушенных ультразвуком культуральных трепонем, что существенно повышает специфичность реакции). на основании клинической картины и лабораторного подтверждения любым из нижеперечисленных методов: Исследование в темном поле * РИФ-Тр** ПЦР*** Микрореакция РИФ **** ИФА РПГА РВ

Диагностика вторичного сифилиса (фаза генерализованной спирохетемии и поражения внутренних органов) : * проводиться при наличии эрозированных папул **Необходимо учитывать, что в течении 7-14 дней серологические тесты могут быть отрицательными на основании клинической картины и лабораторного подтверждения любым из нижеперечисленных методов: Исследование в темном поле * Микрореакция** РИФ ** ИФА ** РПГА ** РВ

Лабораторная диагностика третичного* сифилиса *развивается у недостаточно пролеченных пациентов или больных, вообще не проходивших лечение. РИФ и РИБТ положительны в 92-100% поражения соматических систем и органов (ЭКГ, УЗИ сердца и печени, аортография, рентгенография костей, риноскопия и фарингоскопия, гастроскопия, печеночные пробы, рентгенографию легких, люмбальную пункцию с исследованием цереброспинальной жидкости и пр.. РИФ РИБТ

Скрининг на сифилис Массовое обследование определенных групп населения: Беременные женщины Доноры крови и органов для трансплантации Некоторые профессиональные контингенты (работники питания,образования,здравоохранения) Военнослужащие Лица,отбывающие наказание в местах лишения свободы Больные,готовящиеся к оперативному хирургическому вмешательству Лица,поступившие на стационарное лечение Для скрининга применяются дешевые, простые и быстрые по исполнению тест системы,основанные на нетрепонемных тестах.

АЛГОРИТМ* лабораторного скрининга на СИФИЛИС * Данная схема диагностики позволяет снизить риск получения ложно(+) результатов и повысить чувствительность выявления инфекции. (+) результат в нетрепонемном тесте не может трактоваться как (+) серологический диагноз на сифилис без подтверждения в трепонемном тесте. НЕТРЕПОНЕМНЫЕ СКРИНИНГОВЫЕ ТЕСТЫ (МР, VDRL) (+) ( - ) Трепонемные тесты (РИФ,РСК, РПГА, ИФА,РВ) Нет серологического подтверждения сифилиса Позитивные Сифилис (+) Непозитивные Сифилис (-)

2 Динамика заболеваемости сифилисом в Российской Федерации ( гг.) [на 100 тыс.населения]

3 Динамика заболеваемости сифилисом по федеральным округам РФ ( гг.) [на 100 тыс. населения ]

4 Заболеваемость сифилисом в странах Европы [на населения] 2008 г. Заболеваемость сифилисом в странах Европы [на населения] 2008 г.

5 Перераспределение в структуре скрытого сифилиса с возрастанием Перераспределение в структуре скрытого сифилиса с возрастанием эпидемически опасных ранних форм инфекции эпидемически опасных ранних форм инфекции Рост осложнений: мертворождения, врождённый сифилис, нейросифилис, третичный сифилис, серорезистентность Рост осложнений: мертворождения, врождённый сифилис, нейросифилис, третичный сифилис, серорезистентность Оседание в стационарах соматического профиля до 30-32% от всех зарегистрированных случаев Оседание в стационарах соматического профиля до 30-32% от всех зарегистрированных случаев

6 Серологические исследования являются в настоящее время основным элементом клинической лабораторной диагностики сифилиса. Они решают три задачи: скрининг на сифилис; диагностика сифилиса при наличии подозрений на него; контроль эффективности лечения диагностированного сифилиса

7 Методы диагностики сифилиса Прямые Темнопольная микроскопия Прямая иммуно- флюоресценция ПЦР Непрямые (серологические) Нетрепонемные тесты Трепонемные тесты 8 Окончательный диагноз Предварительный диагноз

8 ПЦР-исследование наT.pallidum Все ПЦР – тесты собственного производства перед использованием должны быть апробированы путем тестирования: Все ПЦР – тесты собственного производства перед использованием должны быть апробированы путем тестирования: не менее 10 образцов от больных сифилисом, положительных в методе ТПМ (образец) с положительными серореакциями (кровь) не менее 10 образцов от больных сифилисом, положительных в методе ТПМ (образец) с положительными серореакциями (кровь) не менее 10 образцов от пациентов, у которых в методе ТПМ (образец)и при серологическом исследовании (кровь) получен отрицательный результат не менее 10 образцов от пациентов, у которых в методе ТПМ (образец)и при серологическом исследовании (кровь) получен отрицательный результат В настоящее время ПЦР для диагностики сифилиса имеет исследовательский статус В настоящее время ПЦР для диагностики сифилиса имеет исследовательский статус

9 тесты Нетрепонемные тесты Сифилис VDRL –тест (Veneral Disease Research Laboratory) Рекомендован к применению ВОЗ Микрофлокуляционный тест на основе кардиолипинового антигена Применение микроскопа с Х100 позволяет рассмотреть микрокомплексы АГ-АТ Исследование образцов cмж редко даёт ложноположительный результат в отличие от исследования инактивированной сыворотки Традиционный диагностический тест для постановки диагноза нейросифилиса Мониторинг эффективности лечения

10 РИФ – реакция иммунофлуоресценции (FTA Fluorescent treponemal antibody) набор реагентов для определения антител к антигенам T.pallidum Сифилис-IgG-РИФ и Сифилис-IgM-РИФ

12 Трепонемные тесты ИФА-Антипаллидум-скрин ИФА-Антипаллидум-одностадийный ИФА-Антипаллидум-IgG (Аналитическая чувствительность методов–0,01- 0,02 МЕ/мл) ИФА-Антипаллидум-IgM Сифилис РПГА-тест (Аналитическая чувствительность метода –0,05МЕ/мл) Все системы контролируются международным стандартом ВОЗ(NIBS, London, UK) для выпуска с одинаковой аналитической чувствительностью всех серий

13 ТТ не могут быть использованы для контроля эффективности проведенной специфической терапии, так как антитрепонемные антитела могут длительно циркулировать в организме больного, перенесшего сифилитическую инфекцию Дают положительные результаты при тропических трепонематозах (фрамбезия - вызывается T.pertenue и пинта - вызывается T.carateum) Могут давать ложные положительные реакции у больных с аутоиммунными заболеваниями, проказой, онкологической и эндокринной патологией, а также и при некоторых других заболеваниях и состояниях Ограничения применения ТТ

14 Лайн-Блот Сифилис Вариант иммуноферментного анализа в формате линейного блота для регистрации антител к наиболее иммуногенным детерминантам Вариант иммуноферментного анализа в формате линейного блота для регистрации антител к наиболее иммуногенным детерминантам

15 Расположение антигенов в Лайн Блот Сифилис Контроли Контроли Антигены TpN47 TpN17 TpN15 TmpA ± Контроль А/г

16 Принцип технологии иммуноблоттинга Иммобилизация на нитроцеллюлозную мембрану рекомбинантных белков - аналогов антигенов Treponema pallidum p17, p 47, p 41, p15 Иммобилизация на нитроцеллюлозную мембрану рекомбинантных белков - аналогов антигенов Treponema pallidum p17, p 47, p 41, p15 Проведение иммуноферментного анализа для Проведение иммуноферментного анализа для одновременного дифференцированного выявления антител к каждому из нанесённых на мембрану антигенов одновременного дифференцированного выявления антител к каждому из нанесённых на мембрану антигенов Антитела к белкам T. pallidum в разной степени Антитела к белкам T. pallidum в разной степени регистрируются на всех стадиях инфекции регистрируются на всех стадиях инфекции Выявлена зависимость появления антител к различным белкам на разных стадиях инфекции Выявлена зависимость появления антител к различным белкам на разных стадиях инфекции

19 Реактивность сыворотки оценивают по каждому антигену отдельно, путём сравнения интенсивности окрашивания полученных полос с окрашиванием трёх калибровочных линий Реактивность сыворотки оценивают по каждому антигену отдельно, путём сравнения интенсивности окрашивания полученных полос с окрашиванием трёх калибровочных линий Отслеживание белкового профиля помогает при уточнении стадии инфекции и в оценке эффективности Отслеживание белкового профиля помогает при уточнении стадии инфекции и в оценке эффективности проведённого лечения проведённого лечения

20 Частота выявления антител к основным иммунореактивным белкам Tr.Pallidum TpN15 – 67,5% TpN15 – 67,5% TpN17 – 98,5% TpN17 – 98,5% TmpA – 95,0% TmpA – 95,0% TpN47 – 92,5% TpN47 – 92,5% За счет высокой степени очистки рекомбинантных антигенов и одновременного выявления антител к наиболее иммуногенным детерминантам возбудителя сифилиса метод обладает высокой чувствительностью ( 99,6-100%) и специфичностью (100%), что позволяет рассматривать его как новый подтверждающий тест на сифилис. За счет высокой степени очистки рекомбинантных антигенов и одновременного выявления антител к наиболее иммуногенным детерминантам возбудителя сифилиса метод обладает высокой чувствительностью ( 99,6-100%) и специфичностью (100%), что позволяет рассматривать его как новый подтверждающий тест на сифилис.

21 Применение метода иммуноблоттинга целесообразно: Для ранней диагностики сифилиса. В возможном инкубационном периоде и при первичном сифилисе Для ранней диагностики сифилиса. В возможном инкубационном периоде и при первичном сифилисе Для подтверждения диагноза скрытого раннего сифилиса ( при противоречивых результатах традиционных серологических методов) Для подтверждения диагноза скрытого раннего сифилиса ( при противоречивых результатах традиционных серологических методов) При необходимости проведения дифференциальной диагностики с л/положительными результатами серологических реакций на сифилис, особенно, при аутоиммунных заболеваниях: ревматизме,СКВ При необходимости проведения дифференциальной диагностики с л/положительными результатами серологических реакций на сифилис, особенно, при аутоиммунных заболеваниях: ревматизме,СКВ В сложных диагностических ситуациях, как референс- метод. В сложных диагностических ситуациях, как референс- метод. При оценке результатов лечения При оценке результатов лечения При необходимости установления ретроспективного диагноза. При необходимости установления ретроспективного диагноза. 21

23 Автоматическая станция ProfiBlot 48 для исследования в иммуноблоттинге

24 Основные направления развития диагностики сифилиса Автоматизация и объективизация выполнения исследований Автоматизация и объективизация выполнения исследований (роботизированные (роботизированные станции, фотометры)

Презентация была опубликована 3 года назад пользователемЮлия Романова

Презентация на тему: " Микробиологическая диагностика заболеваний, передающихся половым путем (ИППП) Сифилис, гонорея, урогенитальный хламидиоз." — Транскрипт:

1 Микробиологическая диагностика заболеваний, передающихся половым путем (ИППП) Сифилис, гонорея, урогенитальный хламидиоз

2 Сифилис Сифилис – венерическое заболевание с длительным рецидивирующим течением, в ходе которого происходит смена нескольких периодов с разными клиническими проявлениями. При сифилисе могут поражаться практически все системы и органы

3 Таксономическое положение возбудителя сифилиса Семейство Spirochaetaceae Род Treponema Вид Treponema pallidum Подвиды T.pallidum – возбудитель сифилиса T.endemicum – возбудитель беджель T.carateum – возбудитель пинты T.pertenue – возбудитель фрамбезии

4 Трепонемы (лат. сгибающаяся, вращающаяся нить) – тонкие спиралевидные грамотрицательные прокариоты. Среднее количество завитков Снаружи трепонема иногда покрыта слизистым чехлом типа псевдо капсулы из кислых полисахаридов, спор не образует. Размножается бинарным делением и распадом на зерна. Формы выживания: листовая (сворачивается в клубочек и образует вокруг себя непроницаемую оболочку), L-форма, зернистые формы Окраска по Романовскому- Гимзе

5 Электронная микроскопия. Увеличение Подвижность обеспечивает внутриклеточный аппарат движения: пучки миофибрилл, обвивающие тело трепонемы. Крепятся к базальным телам у полюсов клетки, в середине заканчиваются свободно ч - чехол; б - блефаропласт; ф - фибриллы

6 Трепонемы в электронном микроскопе

7 Методы микроскопии T.pallidum T.pallidum плохо окрашивается. Чаще всего ее изучают в живых нативных препаратах в темном поле зрения. Для окрашивания трепонем применяют метод импрегнации серебром по Морозову или Метод Романовского-Гимзе

8 Трепонема в темном поле зрения

9 Трепонема, окрашенная методом серебрения по Морозову

12 Факторы патогенности T.pallidum Адгезин – поверхностный белок, взаимодействует с фибронектином слизистой. Инвазивность - обеспечивает спиралевидная форма и подвижность Антифагоцитарные свойства - способность связывать на своей поверхности фибронектин Поверхностные липопротеины могут участвовать в активации воспаления Способность размножаться в межклеточном пространстве и поражать эндотелий сосудов Способность к антигенным вариациям – ускользание от иммунного ответа

13 Путь заражения Характеристика Половой путь Основной путь инфицирования, при нарушении целостности кожных покровов и слизистых оболочек Контактно-бытовой при поцелуях, укусах, кормлении грудью, а также при профессиональных прямых контактах медицинского персонала. Гемотрансфузионный При переливании крови больного сифилисом (трансплантации) Трансплацентарный Инфицирование происходит через сосуды пораженной плаценты в период беременности и ведет к внутриутробному заражению сифилисом плода. Источник и пути передачи Источник – больной человек, антропоноз

14 Периоды заболевания сифилисом Классическое течение сифилиса в виде первичного, вторичного и третичного периодов наблюдается у больных при отсутствии лечения. В настоящее время сифилис излечивается в первичном или вторичном периоде.

15 Периоды заболевания сифилисом и методы лабораторной диагностики Первичный период – твердый шанкр - безболезненный воспалительный процесс в месте входных ворот инфекции в виде небольшой эрозии или язвы на плотном основании. В тканевом отделяемом содержится много трепонем. Через 3-4 недели в сыворотке появляются антитела.

16 Периоды заболевания при сифилисе – вторичный период Вторичный сифилис продолжается 2-3 года. В результате генерализация инфекции в процесс вовлекаются кровеносные сосуды, лимфатическая система, внутренние органы, костная система, ЦНС. Течение рецидивирующее, приступообразное. На коже и слизистых оболочках появляются различные высыпания, содержащие множество трепонем. Высыпания продолжаются 1,5-2 месяца, затем исчезают и вновь появляются. Серологические реакции на протяжении всего периода положительные

18 Третичный период сифилиса Третичный период – наиболее тяжелый, имеет рецидивирующее течение, продолжается многие годы. Трепонемы не всегда обнаруживаются. Развивается ГЗТ. Для этого периода характерны сифилитические гранулемы – гуммы, они склонны к некрозу и распаду, при их заживлении образуются грубые втянутые рубцы и участки склерозированной ткани. Гуммы могут образовываться в любых органах и тканях, в том числе и в жизненно важных. Серологические реакции положительны менее чем у 70% больных.

20 Осложнения Ранние осложнения (первичный и вторичный сифилис) Гангрена и самоампутация полового члена Ранний нейросифилис:сифилитический менингоневрит с поражением слухового и зрительных нервов (с последующей их атрофией - слепотой и глухотой) Поражение яичек (сифилитический орхоэпидидимит) Поражение печени и почек Косметические осложнения - сыпь,выпадение волос,образование рубцов на месте шанкров Осложнения во время беременности Преждевременное прерывание беременности Смерть плода Ранний врожденный сифилис и смерть новорожденного Поздний врожденный сифилис ведущий к инвалидности и ранней смерти

21 Поздние осложнения (поздний скрытый сифилис,третичный сифилис) Осложнения,которые могут привести к смерти больного: Сифилитический аортит Сифилитическая аневризма аорты Сифилитический пневмосклероз и бронхоэктазия Осложнения,приводящие к инвалидности больного: Перфорация твердого неба (невозможность приема пищи) Седловидный нос (затруднение дыхания) Гуммозные периоститы,оститы и остеомиелиты (ограничение передвижения) Осложнения,приводящие к стойким психоневрологическим расстройствам: (Поздний нейросифилис) Поздний менинговаскулярный сифилис с поражением зрительного и слухового нервов Сухотка спинного мозга Прогрессивный паралич

22 Особенности иммунитета Иммунитет нестерильный В его формировании участвуют гуморальные и клеточные факторы, развивается ГЗТ Незавершенный фагоцитоз Образуются специфические АТ – реагины (антилипидные) и специфические (антитрепонемные) После истечения заболевания иммунитет не сохраняется

23 Лабораторное исследование сифилиса Методы диагностики: Микроскопический серологический

24 Микроскопическое исследование проводят в первичном и вторичном периоде сифилиса. Исследуемый материал: отделяемое твердого шанкра, язв, эрозий, содержимое разных высыпаний на коже или слизистых оболочках и др. Применяют темнопольную микроскопию, реже окрашивают препараты

25 Серологическая диагностика сифилиса Серологические реакции применяют для выявления Ат. Они подразделяются на: - Неспецифические – выявляющие противолипидные Ат (реагины), в них используют неспецифический кардиолипиновый антиген. - Специфические – в них используют специфические трепонемные антигены.

26 Серологическая диагностика сифилиса (продолжение) Серологическая диагностика сифилиса проводится в нашей стране согласно приказу 87 МЗ РФ от г с применением следующих тестов: -Отборочные (скрининговые) тесты; -Подтверждающие тесты.

27 Отборочные серологические тесты Антиген - стандартный кардиолипин-лецитин -холестерол новый антиген и ультразвуковой дезинтегратор культуральных трепонем (трепонемный антиген). Нетрепонемные тесты, в связи с дешевизной,доступностью простотой и быстрым сроком исполнения, применяются для скрининга сифилиса как отборочные реакции. По изменению количественных нетрепонемных тестов судят о степени эффективности лечения сифилиса и устанавливают его излеченность.Поэтому нетрепонемные тесты применяются в комбинации с трепонемными тестами для установки диагноза сифилиса и проводятся до начала лечения,в процессе лечения и после окончания лечения в определенные временные интервалы. Снижение титров нетрепонемных тестов в 4 и более раза в течении года после лечения подтверждает эффективность проведенной терапии сифилиса и является критерием его излеченности 1. Реакция микропреципитация (РМП) или ее модификации (РПР и др.) 2. РПНГ и ИФА

28 Механизм реакции микропреципитации (РМП) с кардиолипиновым антигеном

29 РПР - тест 1. Отрицательный результат 2. Положительный? 3, 4. Положительный Ложноположительные результаты в отборочных тестах : беременность, прием накануне жирной пищи или алкоголя,острые воспалительные процессы, инфаркт, переломы, туберкулез, цирроз,аутоиммунные заболевания и др.

30 Подтверждающие серологические тесты В качестве антигенов применяются трепонемные антигены - либо интактные трепонемы либо очищенные и ультра озвученные трепонемы либо рекомбинантные антигены Трепонемные тесты применяются только для диагностики сифилиса и не используются для проведения контроля излеченности. 1. РПГА (РНГА) – реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации 2. ИФА – иммуноферментный анализ 3. Иммуноблот – при сомнительном результате РПГА или ИФА

31 Эти реакций ставят в специализированных институтах и в качестве антигена используют живые тканевые T.pallidum штамма Никольс. 4. МИФ – метод иммунофлуоресценции непрямой 5. РИТ – реакция иммобилизация трепонем Подтверждающие серологические тесты ( продолжение)

32 Положительная РИБТ Противотрепонемные IgG положит. РИФ,ИФА,РПГА Противотрепонемные IgM положит. Ig M - ИФА/IgM -иммуноблоттинг Реагины (IgM + IgG) положит. МР (RPR/VDRL) лимфаденитполиаденит инкубац. период шанкр первичная розеола нед Сроки появления положительных серологических реакций при сифилисе

33 Реакция непрямой гемагглютинации со специфическим трепонемным антигенов

к.м.н. Коноплева Е.В.

• Сифилис
• Гонорея
• Мягкий шанкр является эндемичным заболеванием для многих стран, как например, для некоторых районов США, Африки, Азии, Ла­тинской Америки и городов Европы. В нашей стране заболеваемость мягким шанкром ликвидирована полностью еще в 50-е годы, одна­ко единичные случаи завозной инфекции в настоящее время регис­трируются в портовых городах.
• Венерическая лимфогранулема хроническое заболевание, передающееся половым путем. Широко распространено в Африке, Азии, Австралии, Южной и Латинской Америке. Периодически встречается в городах Северной Америки, Европы и России.
• Паховая гранулема Чаще встречается в Индии, в южных областях Китая, Гвинее, Индонезии, Южной и Латинской Америке, в Австралии и Африке. Описаны случаи болез­ни в США, Франции, Испании, Португалии, Турции.
• Фрамбезия Для многих тропических стран фрамбезия, пинта и беджель представляют не только медицинскую, но и социальную проблему
• Пинта
• Беджель

Основные проблемы современной венерологии

• Сифилис (syphilis) — хроническая венерическая болезнь, вызванная бледной трепонемой, характеризующаяся волнообразностью течения, с поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей и нервной системы.

• Вероятнее всего, сифилис появился на Земле почти одновременно с человеком. В индуистских ведах описано заболевание, напоминающее по симптоматике сифилис, лечить его предлагалось все теми же растворами сулемы, киновари и каломели — то есть ртутными препаратами. Аналогичные рецепты были обнаружены в древних китайских манускриптах, датированных 2600 г. до н.э. и обнаруженных в 1863 г. французским консулом Дабри в Китае. В них образующийся при сифилисе твердый шанкр назывался кан-ту, а помогающий при заболевании ртутный порошок — шун-ин.

• Впервые полное описание сифилиса дал итальянский врач из Вероны Джироламо Фракастро в 1530 году. В поэме "Сифилис, или Галльская болезнь" он рассказал о мифическом свинопасе по имени Сифилус (Sys - свинья, Philos -друг), наказанном Богами за грехи ужасной болезнью. В настоящее время часто применяется второе название заболевания - люес, предложенное в 1554 году французским врачом Жаком Фернелем. Lues veneria -это название произошло от латинского слова Lues, что значит "мор, зараза, гибель".

• Создателем лабораторной диагностики сифилиса по праву можно считать немецкого врача-иммунолога Августа Вассермана (1866–1925).

• Возбудитель заболевания - бледная трепонема (Treponema pallidum) была открыта в 1905 году немецкими учеными Шаудинном и Гофманом. Микроорганизм получил название из-за слабой способности окрашиваться красителями. В заразных стадиях заболевания возбудитель имеет вид спирали из 8-12 равномерных упругих завитков, толщиной 1 мкм, длиной от 6 до 20 микрон. Микроорганизм является активно подвижным. Бледная трепонема размножается путем поперечного деления, может существовать в 4 формах (спиралевидная, зернистая, цистная и L-форма), что вызывает разные клинические варианты течения болезни.

• Возбудитель устойчив к низким температурам (при t -78°С его вирулентность сохраняется в течение года), длительно сохраняет свою жизнеспособность в цельной крови или сыворотке. Вне человеческого организма при температуре 40-42°С погибает в течение 3-6 часов. Быстро инактивируется при высушивании, высокочувствителен к воздействию химических средств.

Сифилис передается в основном при половых контактах. Заражение происходит через мелкие генитальные или экстрагенитальные дефекты кожи либо через эпителий слизистой оболочки при контакте.

Изредка инфицирование может произойти при тесном бытовом контакте, в исключительных случаях — через предметы обихода или при контакте с экспериментальными животными. Возможно заражение через молоко кормящей женщины, больной сифилисом, у которой отсутствуют клинические признаки поражения соска молочной железы. Отмечено внутриутробное инфицирование плода путем трансплацентарной передачи возбудителя сифилиса от инфицированной матери. Заражение может также произойти в момент родов при прохождении плода через инфицированные сифилисом родовые пути.

Презентацию на тему "Серологическая диагностика сифилиса" можно скачать абсолютно бесплатно на нашем сайте. Предмет проекта: Разные. Красочные слайды и иллюстрации помогут вам заинтересовать своих одноклассников или аудиторию. Для просмотра содержимого воспользуйтесь плеером, или если вы хотите скачать доклад - нажмите на соответствующий текст под плеером. Презентация содержит 15 слайд(ов).

Слайды презентации

Серологическая диагностика сифилиса

Выполнила студентка 3 группы 4 курса лечебного факультета Молчанова Анастасия

Все раекции можно разделить:

Прямые и непрямые (косвенные) Трепонемные (специфические) и нетрепонемные (неспецифические) Отборочные (скрининговые) и подтверждающие (диагностические) Приборные, бесприборные.

Микрореакции преципитации (МР) (непрямой скрининговый метод) Реакции пассивной непрямой агглютинации (РПГА) Реакции иммунофлуоресценции (РИФ) Реакции иммобилизации бледных трепонем (РИБТ) Иммуноферментный анализ не требуют отдельной регламентации в связи с чем в приказе № 87 не указаны.

VRDL – с инактивированной сывороткой крови RPR – с плазмой крови USR – с активной сывороткой крови ART – автоматизированный реагин-комплемент

Микропреципитация с кардиолипиновым АГ

Реакция иммобилизации бледных трепонем Феномен обездвиживания бледных трепонем в присутствии противотрепонемный антител исследуемой сыворотки и комплемента Иммобилизины появляются к 10-му месяцу б. Оценка реакции производится при иммобилизации до 20 % бледных трепонем — реакция отрицательная; при иммобилизации от 21 до 50 % бледных трепонем — слабоположительной; при иммобилизации от 50 до 100 % — положительной.

Выявление флюоресцирующих антител, меченных флюорохромом и соединяющихся с соответствующими антигенами Люминесцентная микроскопия становится положительной на 3—4-й неделе после заражения сифилисом IgA

Реакцию ставят в нескольких модификациях:

РИФ-10, - более чувствительная РИФ-200, более специфические РИФ-abc АГ: взвесь бледных трепонем из пораженных сифилисом яичек кролика, фиксированная ацетоном на предметном стекле.

Трепонемы на твердофазном носителе(лунки полиэстерового планшета) Затем в лунку антивидовую(против глобулинов человека) сыворотку, меченую ферментом (пероксидазой, ЩФ) Затем аминосалициловая кислота Изменяется цвет

ЕСТЬ АГ Комплекс АГ+АТ

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА)

формализированные тонизированные бараньи эритроциты соединяются с экстрактом из патогенных бледных трепонем и образовавшийся комплекс фиксируется на эритроцитах иммунный комплекс, который вызывает агглютинацию эритроцитов.

РИБТ(87,7%) > РИФ(99,1%) > РПГА(99,4%) РСК кардиолипиновый АГ 90,2% РСК с трепонемным АГ 95,8% РПГА – легче всего

НТТ(+)ТТ(+) – ранний нелеченный, поздний нелеченный и успешно леченный НТТ(+)ТТ(-) – аутоиммунные заб-я, преклонный возраст, наркомания, беременность, инф, злокачественные образования НТТ(-)ТТ(-) – начало раннего сифилиса, первичный сифилис после лечения, человек, не болеющий сифилисом ранее.

Диагностика сифилидов(лимфоциты, плазматические клетки) Анализ ликвора(цвет, плотность, рН, содержание белка, форменные элементы, реакция Ланге с хлорным золотом) ДНК-зонды, полимеразная цепная реакция ПЦР-диагностика