Техника взятия крови на бруцеллез

Рекомендации

по правилам взятия проб крови от крупного рогатого скота

Условия взятия крови и ее сохранность до начала лабораторных исследований имеют важное значение при получении достоверных результатов. Во многом эти результаты зависят от техники взятия крови и используемых при этой инструментов.

При венепункции прокол окружающих вену тканей и стенки вен делают в один прием.

На результаты лабораторных исследований могут влиять факторы, связанные с индивидуальными особенностями и физиологическим состоянием организма животного, такие как: возраст; эмоциональное состояние и психический стресс; климатические и метеорологические условия и др.

Брать кровь надо по возможности утром, до кормления животных.

Рекомендуется произвести дегельминтизацию животных за 2 недели до взятия крови.

В целях отсутствия получения ложно-положительных результатов исследований рекомендуют брать кровь не позднее, чем за три недели до отела и не ранее чем через 3 недели после отела.

На точность и правильность результатов также оказывает влияние техника взятия крови, используемые при этом инструменты (иглы, шприцы и др.), пробирки, в которые берется, а в последующем хранится и транспортируется кровь, а также условия хранения и подготовки пробы к анализу.

Традиционные и широко используемые в настоящее время способы взятия крови с помощью иглы и/или шприца оказываются основными источниками лабораторных ошибок, приводящих к низкому качеству результатов анализов. Кроме того, эти методы не могут быть стандартизованы и не обеспечивают безопасность персонала, берущего кровь.

При взятии проб венозной крови методом самотека с использованием иглы и обычных пробирок высока вероятность попадания крови животного на руки ветеринарного специалиста. В этом случае руки ветеринарного работника могут стать источником передачи и распространения возбудителей гемоконтактных инфекций другому животному путем контаминации кровью инъекционной ранки. Ветеринарный работник сам может заразиться от источника инфекции.

Использование медицинского шприца с иглой для взятия крови следует также избегать из-за его недостаточной безопасности для ветеринарного персонала и невозможности исключения гемолиза крови при переносе пробы под давлением в пробирку.

Взятие крови с использованием вакуум-содержащих систем:

Для взятия проб венозной крови наиболее предпочтительно использовать вакуум-содержащие системы. Этот способ имеет ряд преимуществ, основным из которых является то, что кровь попадает непосредственно в закрытую пробирку, предотвращающую любой контакт ветперсонала с кровью животного.

Речь идёт не только об упрощении процедуры взятия крови, что само по себе немаловажно, но и о значительном снижении процента преаналитических ошибок, увеличении безопасности процедуры, снижении риска заражения скота, сохранения уровня надоев после процедуры и отсутствия осложнений у животных после взятия крови.

Вакуум-содержащая система представляет собой закрытую двухкомпонентную систему - вакуумный шприц-контейнер и специальную иглу. Выделение сыворотки или соединение крови с антикоагулянтом происходит в том же объёме шприца, в который берётся кровь, то есть после взятия крови сам шприц является транспортной пробиркой с антикоагулянтом или сывороткой.

Под действием вакуума кровь втягивается через иглу вакуумной системы напрямую из вены в пробирку и сразу же смешивается с химическим реактивом. Тщательно дозированный объем вакуума обеспечивает точное соотношение кровь/реагент в пробирке.

На основе возможностей вакуум-содержащихх систем был разработан новый метод взятия крови у крупного рогатого скота из хвостовой вены:

1. Кровь берут из v .с occygea (хвостовая вена).

2. Для взятия крови животное не фиксируют.

3. Хвост животного берут рукой в области средней трети и медленно поднимают вверх.

4. Место взятия крови, область 2-5 хвостовых позвонков, дезинфицируют спиртом или 5% раствором йода.

5. Кровь берут в средней трети тела 2-5 хвостовых позвонков, находящейся на линии, идущей вдоль хвоста и делящей его на 2 симметричные части.

6. Иглу вводят под углом 90° до упора на глубину 5-10 мм.

Преимущества взятия крови безопасными системами из хвостовой вены:

1. Сокращение времени взятия крови ветврачом; (до 200 животных за 2 часа)

2. Отсутствие фиксации животного;

3. Исключение контакта ветврача с кровью на всех этапах взятия и транспортировки крови;

4. Предупреждение распространения инфекций через кровь и загрязнения (контаминации) объектов окружающей среды; (особенно актуально при лейкозе КРС)

5. Минимизация осложнений и стресса у животных;

6. Отсутствие сокращения надоев в результате стресса и осложнений

7. Возможность получения стерильной крови.

Взятие крови с использованием кровобрательных игл и пробирок:

Иглы для взятия крови должны быть с коротким срезом и достаточно большим диаметром, чтобы не травмировать противоположную стенку вены и не вызвать повреждения эритроцитов. Иглы перед взятием крови обязательно стерилизуют кипячением. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, а кожу дезинфицируют дезинфицирующим раствором.

У крупного рогатого окота кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи.

Брать кровь для получения сыворотки надо по возможности утром, до кормления животных. Для серологического исследования берут по 7-10 мл крови от крупного рогатого скота.

При взятии крови из яремной вены иглу вкалывают на границе перехода верхней трети шеи в среднюю. Чтобы вызвать достаточное наполнение вены и уменьшать ее подвижность, вену сдавливает в середине шеи резиновым жгутом или пальцем. При проколе вены необходимо держать иглу в руке так, чтобы направление ее совпало с линией хода вены и чтобы срез иглы был направлен вверх, к голове. Иглу вкалывают под острым углом – в 20–30°. При попадании в вену из иглы вытекает кровь.

Кровь должна стекать по стенке пробирки по избежании разрушения эритроцитов и при необходимости немедленно смешиваться с достаточным количеством антикоагулянта.

Перед извлечением иглы из вены резиновый жгут снимают, пережимают вену пальцем выше места вкола, иглу извлекают, а место вкола некоторое время сдавливают тампоном для предотвращения образования гематомы. В заключении область венепункции дезинфицируют дезинфицирующим раствором.

Недостатки устоявшегося метода взятия крови из яремной вены кровопускательной иглой:

1. Разбрызгивание крови; (попадание крови на руки, кормушки и др. объекты окружающей среды).

2. Высокий риск распространения инфекций, опасных не только для животных, но и для человека; (туберкулез, бруцеллез, лейкоз КРС).

3. Необходимость фиксации животного.

4. Стресс у животного, ведущий к потерям молока (более 5%).

5. Осложнения после взятия крови; (гематомы, абсцессы).

6. Взятая кровь – нестерильна (т.е. контаминирована).

Хранение проб крови и сыворотки крови:

Цельную кровь, плазму и сыворотку для непродолжительного хранения помещают в холодильник (+2…+4°С), длительное хранение сыворотки требует температуры – 20°С.

Сыворотку крови получают методом отстоя. Для свертывания крови и отстаивания сыворотки пробирки с кровью выдерживают 30-60 мин при 20-30°С или 37-38°С, сгусток крови от стенок отделяют стальной спицей, а затем пробирки выдерживают при 4-10°С 20-24 ч.

Отстоявшуюся сыворотку сливают в сухие стерильные пробирки, закрывают пробками и направляют в лабораторию в течение первых суток и в исключительных случаях не позднее третьего дня после взятия крови.

Нарушение условий хранения проб может стать причиной погрешностей анализа. В результате длительного стояния сыворотки, над эритроцитами могут наступить сдвиги в концентрации ряда компонентов: повышается концентрация калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы, понижается содержание глюкозы вследствие гликолитических процессов.

При температуре около 20°С в цельной крови возрастает содержание аммиака, многие ферменты даже при температуре холодильника быстро теряют свою активность (креатинкиназа, кислая фосфатаза), в лактатдегидрогеназа, напротив, быстрее теряет активность при низких температурах.

Возникший при взятии или хранении гемолиз эритроцитов приводит к повышению концентрации калия, активности кислой фосфатазы, аминотрансфераз, лактатдегидрогеназы, гидроксибутиратдегидрогеназы.

Неумелое встряхивание проб при перемешивании их содержимого или при транспортировке также может вызвать гемолиз эритроцитов.

Мутные, проросшие, гемолизированные сыворотки исследованию не подлежат.

Сыворотку или кровь можно консервировать также борной кислотой (в порошке) из расчета 0,05-0,07 г (на кончике скальпеля) на одну пробирку с кровью (сывороткой).

Пробирки с кровью и сыворотками плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении.

Зимой сыворотки упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзли.

Пробы направляют с сопроводительной в двух экземплярах (см. приложение 1).

Взятие крови для гематологических исследований

Кровь для гематологических исследований берут из ярёмной или каудальной (хвостовой) вены в специальные системы забора крови с антикоагулянтом или в пробирки с антикоагулянтами. В качестве антикоагулянтов используют трилон Б (ЭДТА-динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1 мл 10 %-ного раствора на 1 мл крови, гепарин (5ед. на 1 мл крови) или 6%-ный раствор лимоннокислого натрия (0,1 мл на 1 мл).

Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2-4 0 С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия.

СЛУЖБА ВЕТЕРИНАРИИ ИРКУТСКОЙ ОБЛАСТИ

ОБЛАСТНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ

_____________ СТАНЦИЯ ПО БОРЬБЕ С БОЛЕЗНЯМИ ЖИВОТНЫХ

Город (поселок, село) _____, улица _____, дом ___ Е- mail ----. vet @ govirk . ru

должность, Ф.И.О. наименование подразделения

В ___________________________________ ветеринарную диагностическую лабораторию

Направляется____________ проб крови (сыворотки крови) от ________________________

(наименование хозяйства, населенного пункта, района)

Для ___________________ исследования на _______________________________________

(вид исследования) (наименование заболевания) _____________________________________________________________________________Благополучное по _____________________________________________________________

(благополучное, неблагополучное, наименование заболевания)

Исследование проводится первично, повторно (подчеркнуть)

Дата и результат предыдущего исследования __________.___________________ 20 ____г.

Дата взятия крови _____________________________________________________________

Опись прилагается в двух экземплярах.

Ведомость (опись) животных, от которых взята кровь для исследования

Наименование предприятия, хозяйства, , Ф.И.О. владельца животного

Код	Наименование услуг	Цена, руб.	Доступность экспресс	Ед. измер.	Материалы	Заказать
003	Бруцеллез (ПЦР)	800 p (Время исполнения до 72 часов)	1 исслед.	J N V E C U C

Животные: Собаки, КРС, МРС

Выявление ДНК возбудителя бруцеллеза (микроорганизмов рода Род Brucella: Brucella melitensis, Brucella abortus, Brucella suis, Brucella ovis, Brucella canis методом ПЦР в реальном времени.

Материал для исследовнаия: Материал НЕ требующий оформления пробоподготовки: - сперма, моча - молоко от абортировавших животных - содержимое бурс и гигром - выделения из половых путей, взятые в первые 5 дней после аборта Материал требующий оформления дополнительной пробоподготовки. - Абортированный плод целиком или пат материал от него (содержимое брюшной полости и желудка, околоплодная жидкость или слизь между оболочками и плодом), парензиматозные органы (селезенка, печень, сердце, почки)). - плацента и плодовые оболочки от абортировавших животных; - в случае диагностического убоя животных для исследования отбирают парные лимфатические узлы (не менее 7 пар) подчелюстные, заглоточные, предлопаточные, надколенные, подколенные, надвыменные, парааортальные, тазовые и кусочки паренхиматозных органов (печень, селезенка); - от самцов с признаками орхита или эпидидимита отбирают семенники с придатками. Для пат органов и абортированных плодов необходимо дополнительная утилизация отходов по весу на момент поступления в лабораторию Правила отбора проб для исследования: 1) Лимфоузлы берут целиком. 2) Жидкости для исследования, кроме молока, отбирают в объеме 5 - 10 мл в стерильные контейнеры. 3) Из органов и тканей вырезают кусочки не более 5 х 5 х 5 см, каждый орган помещается в отдельный герметичный пакет, подписывается. Органы, расфасованные в пакеты, от одного животного складываются в общий пакет и маркируются идентификатором животного. Доставляются в лабораторию в течение 2-х часов после отбора. При не возможности соблюсти данное требование, отобранный пат материал замораживается и через 1 сутки в замороженном виде доставляется в лабораторию, размораживание при транспортировке не допускается. 4) Взятие содержимого гигром, бурс. В области поражения выстригают шерсть, кожный покров дезинфицируют 70%-ным спиртом и смазывают настойкой йода. Затем стерильным шприцем с иглой большого диаметра делают пункцию, отсасывают содержимое гигромы (бурсы) и переносят его в стерильную пробирку с плотной пробкой. 5) Молоко. Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой, соски обрабатывают 70%-ным спиртом. Для исследования из каждой доли вымени берут последние порции молока в количестве 10 - 15 мл в отдельные стерильные пробирки с резиновыми пробками.У собак при взятии проб молока соски обмывают теплой водой и обрабатывают 70%-ным спиртом. Для исследования из каждого соска сцеживают около 0,5-1 мл молока в стерильнуюпробирку с крышкой без консервантов, без активаторов свертывания. У овец и коз пробы молока берут путем пункции цистерны вымени. Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания соска протирают 70%-ным спиртом и смазывают настойкой йода. Стерильным шприцем с иглой делают пункцию у основания соска и после попадания иглы в цистерну (о чем судят по свободному движению конца иглы) набирают в шприц молоко и переносят его в стерильную пробирку с крышкой без консервантов, без активаторов свертывания. Молоко должно быть доставлено в лабораторию в день взятия пробы. 6) Абортированные плоды весом до 1 кг берется целиком. Плод помещается в отдельный чистый пакет, маркируется. Если вес плода более 1 кг, то необходимо провести вскрытие плода и взятие органов для исследования. Хранение: в холодильнике не более 48 часов при температуре +2-+8⁰С моча храниься не более суток (24 часа) при температуре +2-+8⁰С более длительное хранение при температуре не выше -16⁰С, кроме кровии мочи. Молоко и моча должны быть доставлены в лабораторию в день взятия пробы.

Подготовка пациента к процедуре сдачи крови

Подготовка может отличаться в зависимости от анализа. По поводу каждого конкретного анализа, при необходимости, информацию можно получить в лаборатории.
Забор крови происходит по утрам до 12.00, предпочтительно в промежуток времени 8.00-10.00.
До процедуры взятия крови пациент должен бодрствовать не менее 1 часа.
В день, предшествующий анализу, пациент может пить и есть, как обычно, следует лишь ограничить употребление алкоголя, кофе и жирной пищи.
Между последним приемом пищи и жидкости и взятием крови должно пройти не менее 10-14 часов. При необходимости можно выпить не более одного стакана воды без каких-либо добавок.
Перед взятием крови следует избегать:
- Большой физической и эмоциональной нагрузки
- Приема лекарственных препаратов (по возможности)
- Употребления алкоголя
- Курения
Для стабилизации кровообращения перед взятием крови следует спокойно посидеть не менее 15 минут.
Во время забора крови пациент не должен пить, есть, жевать жевательную резинку (полость рта должна быть пустая).

Важно знать

Процедура взятия венозной крови

1. Идентифицировать пациента.
2. Оформить /проверить направления.
3. Выяснить, соблюдал ли пациент предписанную диету и нет ли у него аллергии на вещества, содержащиеся в дезинфицирующем средстве для очищения кожи в месте венепункции.
4. Обеспечить пациенту удобное и подходящее для взятия крови положение – рука пациента должна быть разогнута так, чтобы рука от плеча до запястья образовывала прямую линию.
5. Надеть перчатки.
6. Подготовить необходимые пробирки – легко встряхнуть их, чтобы удалить возможные капельки добавок с пробки. Пробирки установит в нужной очередности.
7. Выбрать пункционную иглу нужного диаметра и убедиться, что игла устойчива в месте крепления. Проследить, чтобы защитный колпачок не мешал пункции вены.
8. Выбрать место пункции. Попросить пациента сжать руку в кулак, чтобы вены были лучше видны.
9. Очистить место предполагаемой пункции дезинфицирующим средством и дать коже высохнуть.
10. При необходимости наложить на руку жгут.
11. Удалить защитный колпачок с иглы. Проверить свободно ли отверстие иглы.
12. Произвести пункцию вены – для этого следует зафиксировать вену пальцем несколько ниже от места пункции и слегка натянуть кожу, чтобы вена не двигалась; иглой проколоть стенку вены под углом 15-30 градусов, отверстие иглы должно быть направлено вверх.
13. Во время взятия крови следить за тем, чтобы пробка пробирки располагалась выше, а дно ниже, во избежание попаданий веществ из пробирки в иглу.
14. Крепко держа одной рукой за место крепления иглы, поместить вакуумную пробирку как можно ближе к месту крепления иглы, чтобы острие иглы, покрытой латексным колпачком, прошло через пробку пробирки.
15. Держать пробирку следует так, чтобы кровь поступала по стенке пробирки вниз.
16. Сразу ослабить жгут, убедившись, что кровь поступает в пробирку.
17. Когда пробирка заполнится нужным количеством крови и кровь перестанет поступать в пробирку, удалить пробирку из крепления и при необходимости поместить туда следующую пробирку.
18. Пробирку с добавками, сразу после наполнения, следует спокойными движениями перевернуть вверх дном и обратно 4-5 раз, чтобы кровь перемешалась с добавками.
19. На место пункции положить сухую салфетку и удалить иглу из вены.
20. После использования иглу сразу закрыть защитным колпачком. Для этого нужно надвинуть пальцем на иглу защитный колпачок .
21. Придавливать салфеткой место пункции 3-5 минут, рука пациента должна быть выпрямлена. При необходимости наложите на место пункции пластырь.
22. Маркировать пробирки.
23. Спокойными движениями перевернуть пробирку вверх дном и обратно ещё 4-5 раз. Пробирки установить на штатив в вертикальном положении.
24. Выбросить используемую иглу и иглодержатель в соответствующий контейнер для отходов.

MEIE VEEBILEHE PARIMA KASUTAMISE HUVIDES PAIGALDATAKSE TEIE ARVUTISSE “KÜPSISEID”, MIS JÄLGIVAD LEHE KASUTAMIST. VEEBILEHE KÕIKIDE FUNKTSIONAALSUSTE KASUTAMISEKS, KLIKAKE NUPUL “OK”. LINKIDELE VAJUTADES LEIATE LÄHEMAT TEAVET MEIE ANDMEKAITSEPOLIITIKA JA “ KÜPSISTE” POLIITIKA KOHTA.

Серологическое исследование: Реакция Хеддельсона

Реакция Хеддельсона - один из методов экспресс-диагностики бруцеллеза. Достаточно проста в проведении, не занимает много времени, не требует особых условий. Может применяться с первых дней заболевания.

Для проведения анализа берется кровь из пальца исследуемого, капельки сыворотки крови помещаются на предметное стекло в количестве четырех штук. Далее в исследуемый материал капается бруцеллезный диагностикум, кроме последней капли - это контрольная, в нее добавляется физраствор. В случае появления хлопьев - реакция агглютинации на стекле считается положительной.

Сроки выполнения	до 7-8 дней
Синонимы (rus)	Реакция агглютинации на стекле
Cинонимы (eng)	Heddelson reaction
Методы анализа	Агглютинация на стекле
Подготовка к исследованию	Перед анализом ограничить физические нагрузки.
	За сутки до теста не употреблять алкоголь.
	Перед взятием крови не есть.
Биоматериал и способы его взятия	Кровь из пальца

Бруцеллез - повсеместно распространенная инфекция, источником заражения которой являются домашние животные. Это заболевание отличается многообразием путей передачи, склонностью к хроническому течению и способностью поражать многие органы и системы человека.

В сельских хозяйствах основным способом передачи является контактный и аэрозольный. Заражение, в основном, происходит во время ухода за мелким и крупнорогатым скотом, свиньями и оленями (стрижка, уборка сараев, прием родов и т.д.). Жители городов чаще заражаются алиментарным путем при употреблении в пищу козьего или коровьего молока, не прошедшего этап кипячения, а также брынзы и плохо проваренного мяса зараженных животных.

Бруцеллез протекает с периодами повышения температуры до критических цифр, однако состояние больного в эти моменты особо не страдает. Лихорадка принимает волнообразный характер, сопровождается болями в мышцах и суставах. Могут поражаться нервная и сердечно-сосудистая системы. Опасен бруцеллез развитием выкидышей на ранних сроках и формированием женского и мужского бесплодия. При отсутствии лечения заболевание может привести к инвалидности.

Реакция Хеддельсона проводится людям в местах вспышек бруцеллеза для выявления зараженного контингента.

Недостаток этого метода в большом проценте ложноположительных результатов. Однако простота и скорость методики позволяют выявить людей, которых необходимо направить на более тщательное исследование.

Реакция Хеддельсона - анализ качественный. Результат может быть положительным или отрицательным.

Если агглютинация появилась в трех или двух каплях из четырех исследуемых - результат считается положительным. Только в одной - сомнительный результат.

Агглютинация во всех каплях отсутствует- реакция отрицательная, бруцеллез не обнаружен.

При положительных и сомнительных результатах пациенты должны быть направлены на другие исследования, которые окончательно подтвердят или опровергнут наличие бруцелл в организме.

Бюджетное учреждение Удмуртской Республики

Кровь берут утром до кормления животных (у жвачных в любое время) в количестве не менее 5-7 мл. Для многоразовых пробирок кровь выдерживают при температуре 30-38°С (в термостате),на инфекционный эпидидимит — при температуре 20-30°С — 1ч или при комнатной температуре 8-10ч, для свертывания. Сгусток крови от стенок пробирки отделяют стальной спицей, затем пробирки выдерживают при 4-10 0 С (в прохладном месте). Через сутки сыворотку отделяют в сухие стерильные пробирки. Пробы нумеруют в соответствии с описью животных и направляют для исследования в лабораторию в свежем или консервированном виде.

Можно направлять в лабораторию цельную кровь, не отделяя сыворотку, но при условии, что в пути ее не будут встряхивать, и она не подвергнется гемолизу. Пробирки закрывают пробками и устанавливают для транспортировки в строго вертикальном положении. Зимой пробы с кровью (сывороткой) упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзали. Так же кровь можно отбирать в вакуумные системы для забора крови (пробирки для получения сыворотки с активатором свертывания или активатором свертывания с гелем).

С момента отбора проб крови до доставки ее в лаборатории должно пройти не более 48 часов.

Консервирование сывороток проводят:

-добавлением 1 капли 5%-ного раствора фенола на каждый мл сыворотки при тщательном перемешивании;

-сухой борной кислотой до получения насыщенного раствора и образования на дне пробирки небольшого осадка (не подлежат консервированию борной кислотой сыворотки крови для исследования на хламидиоз, лейкоз крупного рогатого скота);

-путем однократного замораживания (не подлежат замораживанию сыворотки крови для исследования на паратуберкулезный энтерит, случную болезнь, инфекционный эпидидимит баранов).

Консервированию подлежит только сыворотка крови. Кровь консервировать запрещено.

Неконсервированные сыворотки пригодны для исследования в течение 6 суток со дня взятия крови при условии хранения их при 4-8 0 С.

Сыворотки консервированные фенолом или борной кислотой, пригодны для исследования в течение 30 суток, замороженные сыворотки – в течении 3 суток после однократного оттаивания. Мутные, проросшие, гемолизированные сыворотки исследованию не подлежат.

Кровь от абортировавших или подозрительных в заболевании животных для получения сыворотки отбирают дважды: при выявлении аборта, в период клинического проявления болезни и повторно, от них же, через 14-21 день. Сыворотки хранят при -20°С (морозильная камера) и доставляют в лабораторию одномоментно.

Животных, вакцинированных против хламидийного аборта, серологически не исследуют в течение 1 года.

На лептоспироз пробы крови берутся не ранее чем через 5-7 суток после проявления клинических признаков болезни или не ранее чем через 90 суток после вакцинации крупного рогатого скота, для свиней и животных других видов после вакцинации через 60 суток, а также не ранее, чем через 10-12 дней после проведенного лечения.

Для исследования на лейкоз гематологическим методом направляется кровь. Ее отбирают в пробирки с антикоагулянтом (трилон Б из расчета 0,1 мл 10%-ного раствора на 1 мл крови). Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают, путем переворачивая пробирки несколько раз. Так же кровь можно отбирать в вакуумные системы для забора крови (пробирки для гематологических исследований с ЭДТА К2/К3). Стабилизированную кровь направляют для исследования в лабораторию в день взятия, от момента взятия крови до исследования ее в лаборатории должно пройти не более 36 часов.

Отбор проб для исследования на сибирскую язву. Для исследования берут пробы размером 5 х 5 см с периферических незагнивших и незаплесневевших участков шкуры. Тара для проб должна быть металлическая, внутри выстланная бумагой и закрыта крышкой, плотно охватывающей снаружи края тары. После упаковки тару пломбируют или опечатывают и помещают в тканевый чехол.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — метод лабораторной диагностики, позволяющий обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях.

ИФА — один из самых распространенных и точных методов для выявления инфекций, передающихся половым путем, в частности ВИЧ, ВПЧ, гепатита В.

Для того чтобы результаты анализов были максимально достоверными, необходимо правильно подготовиться к их сдаче.

Спецпредложения, скидки и акции помогут существенно сэкономить на медицинском обследовании.

Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, — дополнительная гарантия точности результатов анализов.

Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:
- IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
- IgG к ВИЧ;
- Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
- Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
- Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
- Ig M и IgG к токсоплазмозу;
- Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
- IgG к паразитарным заболеваниям;
- Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
- IgG к хеликобактерной инфекции.
Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.
Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).
Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
IgM и IgA (совместное присутствие) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

Информативность ИФА делает этот анализ важным инструментом в работе многих медицинских центров. Но можно ли доверять такую диагностику государственным лабораториям или лучше самим выбрать, где провести такое исследование?

Читайте также: