Чума собак научные статьи

канд. ветеринар наук, и.о. доц. Кыргызского национального аграрного университета им. К.И. Скрябина,

Кыргызская Республика, г. Бишкек

канд. ветеринар наук, и.о. доц. Кыргызского национального аграрного университета им. К.И. Скрябина,

Кыргызская Республика, г. Бишкек

HISTOLOGICAL AND IMMUNOHISTOCHEMICAL STUDY OF SPLEEN IN CANINE DISTEMPER

Nurbek Aldaiarov

candidate of Vet. Sciences, Assistant Professor,

Kyrgyz-Turkish Manas University,

Lyudmila Lykhina

candidate of Vet. Sciences, Acting Assistant Professor, Kyrgyz National Agrarian University named after K.I. Scriabin,

АННОТАЦИЯ

С применением гистологических и иммуногистохимических методов исследования проанализировано морфофункциональное состояние селезенки в норме и при чуме у собак. При патологии отмечены очаговые некротизированные участки в белой пульпе органа, и они окружены с AK10H3 позитивными или зараженными клетками. В белой пульпе органа количество Т- и В-лимфоцитов незначительно, а их пролиферативная активность низкая. Функционирующие лимфоидные фолликулы не обнаруживались. Вирусосодержащие клетки диффузно распространены и в красной пульпе.

ABSTRACT

Applying histological and immunohistochemical methods of study were analyzed morphofunctional state of normal spleen and in canine distemper. In pathology, there revealed focal necrotizing areas in white pulp and they surrounded with AK10H3 positive cells. In white pulp of spleen quantity of T-and B-lymphocytes are not significant, and their proliferative activity were low. Functionally active lymphoid follicles weren’t determined. Virus inclusion cells were diffusely located in red pulp of organ.

Ключевые слова: селезенка; морфофункциональное состояние; маркеры иммуногистохимии; чума собак.

Keywords: spleen; morphofunctional state; immunohistochemistry markers; canine distemper.

Введение. Исследования патологии различного генеза с точки зрения функциональной иммуноморфологии является одним из современных направлений изучения болезней животных. Суть данного направления заключается в установлении участия и роли органов и тканей иммуногенеза при развитии патологии разной этиологии.

Чума плотоядных – характеризуется лихорадкой, катаральным воспалением слизистых оболочек, пневмонией, расстройством нервной системы, желудочно-кишечного тракта, мочевыделительной системы и других систем организма, т. е. болезнь является мультисистемной. Заболевание распространено во всех странах мира.

В данный момент доступны многие виды вакцин против этой болезни. Однако спорадические случаи заражения чумой собак иногда имеют место даже среди вакцинированной популяции [4, с. 527]. Научные работы, посвященные исследованию чумы плотоядных в странах СНГ, носят фрагментарный характер, а в нашей республике исследования такого рода не проводились. В доступной русскоязычной литературе встречаются только отдельные труды по выработке вакцин против чумы плотоядных [1; 2; 3].

Значительное количество научных трудов посвящены фундаментальному исследованию патологии чумы плотоядных при ее различных формах [5; 6; 7; 8].

Однако эти исследования не комплексны и не сочетаются с иммунологическими ответными реакциями организма, что и послужило причиной изучения данной научной проблемы.

Цель данной статьи – сравнение нормального морфофункционального состояния Т- и В-зон с их морфофункциональным состоянием при заражении ВЧП.

Объекты и методы исследования. Данная работа выполнялась в КНАУ им. К.И. Скрябина (Кыргызская Республика), Институте ветеринарной патологии высшей ветеринарной школы города Ганновера (ФРГ, 2004) и в Институте ветеринарной патологии Цюрихского университета (Швейцария, 2007–2008).

Тканевые пробы от селезенки были получены от 58 собак, больных чумой, в течение 2004–2007 года в г. Бишкеке и зафиксированы в 10 %-ном водном растворе нейтрального формалина. Обезвоживание кусочков производилось в специальной машине в вакууме.

Серийные срезы готовились на полуавтоматическом микротоме новой модификаций толщиной 2–4 мкм. Для общего обзора гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Восстановление антигена для иммуногистохимии производили с помощью автоклава Паскаль (20 минут, +98 0 С и 2 минуты при +125 0 С под давлением) при использовании антиген восстанавливающих буферных растворов PH 9.0 (EDTA или основной буферный раствор PH 9.0) и цитратный буфер (PH 6.0) в соответствии с инструкцией производителя. Был использован SABC (Streptavidin and Biotinylated horseradish peroxidase macro-molecular Complex) метод иммуногистохимии.

Для выявления Т-лимфоцитов использовали антитело Polyclonal Rabbit Anti-Human T cell, CD 3; для выявления В-лимфоцитов – антитело Monoclonal Mouse Anti-Human B cell, CD 79ά cy; для выявления макрофагов – антитело Monoclonal Mouse Anti-Human Myeloid/Histocyte Antigen, Clon MAC 387; для выявления пролиферацию клеток – антитело Monoclonal Mouse Anti-Proliferating Cell Nuclear Antigen (PCNA); для выявления ВЧП использовали антитело – mono AK 10H3.

Окрашивание производили вручную в специальной влажной камере. Срезы дополнительно окрашивали гематоксилином Майера. При положительной реакции клетки были окрашены в красный или коричневый цвета.

Результаты исследования. Как известно, в белой пульпе селезенки у клинически здоровых собак отмечаются две структурно отличающиеся зоны лимфоидной ткани. Первая – лимфоидная ткань шарообразной структуры (лимфоидные фолликулы, или В-зоны) и вторая – присоединенные к ним муфты (в виде диффузной лимфоидной ткани Т-зоны), окружающие центральные артерии, или артериолы.

Лимфоидные фолликулы образованы в основном В-лимфоцитами и соответственно это зона называется В-зоной. По данным иммуногистохимических исследований, эта зона в основном заселена В-лимфоцитами, имеется также незначительное количество Т-лимфоцитов и единичные макрофаги. Лимфоидные фолликулы имеют разные формы и структуры. Так, лимфоидные фолликулы с четко выраженным герминативным центром окружены тонким ободком плотно расположенных клеток – мантийной зоной, и периферической (диффузно заселенными лимфоцитами и макрофагами) – маргинальной зоной – они называются вторичными лимфоидными фолликулами. В морфофункциональном отношении они оцениваются как активно функционирующиеся структуры гуморального иммунитета. Пролиферативная активность клеток, особенно в герминативном центре, высокая. Отмечаются отдельные фигуры апоптоза. Также встречаются лимфоидные фолликулы с плотным скоплением диффузных лимфоцитов без выраженных зон. Они называются первичными или в функциональном отношении находятся в состоянии покоя. Лимфоидные фолликулы с рыхло расположенными клетками, с множественными фигурами апоптоза (отмечаются в основном в герминативном центре) – в функциональном отношении являются фолликулами, истратившими свои ресурсы. Селезеночные макрофаги заселены более компактно, окружают белую пульпу и располагаются диффузно по всей красной пульпе.

Т-клетки, или эффекторы клеточного иммунитета, расположены около В-зоны. В Т-зоне клетки заселены диффузно и беспорядочно по сравнению с В-зоной. Иммуногистохимия указывает, что в этой зоне заселены в основном Т-лимфоциты и незначительное количество макрофагов.

В красной пульпе имеются диффузно заселенные клетки лимфоидной ткани (Т- и В-лимфоциты) и значительное количество селезеночных макрофагов.

При патологии микроскопически в белой пульпе селезенки четко выделяются некротизированные участки разной формы и величины (рис. 1А, Б). Эти участки окружены макрофагами, и отдельные макрофаги находятся среди некротизированной массы. Отмечается увеличение количества макрофагов. ВЧП позитивные клетки встречаются по всей пульпе диффузно, и более компактное заселение зараженных клеток заметно в В-зоне лимфоцитов (среди и вокруг некротизированной массы) (рис. 1В). Не наблюдаются активно функционирующие и первичные лимфоидные фолликулы. Отмечается сильное сокращение количества В-лимфоцитов и нарушение структуры лимфоидных фолликулов (рис. 1Г). Наряду с клетками, подвергнутыми некрозу, отмечаются фигуры апоптоза и мелкие апоптосомы (рис. 2Б). Т-зона клеток также подвержена сильной атрофии, и CD3 позитивные клетки наблюдаются по всей пульпе селезенки диффузно (рис. 2Д).

Рисунок 1. Парафиновые срезы селезенки собаки, зараженной ВЧП

Глубокие структурные нарушения белой пульпы селезенки: А – некроз В-зоны и истощение Т-зоны белой пульпы. Гем. и эозин. х62,5; Б – некротизированный участок и рыхло заселенные клетки белой пульпы. Гем. и эозин. х250; В – ВЧП позитивные клетки. AK 10H3. х62,5; Г – некроз и истощение В-зоны белой пульпы и CD79 позитивные клетки. CD79αсу. х125; Д – диффузное заселение Т-клеток в пульпе органа. CD3. x125.

В заключение мы полагаем, что сильное истощение Т- и В-зоны лимфоидной ткани селезенки при заражении ВЧП указывает на полное уничтожение защитных клеток организма и доказывает иммуносупрессорную природу ВЧП.

Лечение и профилактика чумы плотоядных

Вирусы вызывают у собак ряд тяжелых заболеваний, которые при отсутствии адекватного лечения часто заканчиваются смертельным исходом. Вирусные частицы попадают в организм различными путями: через поврежденные наружные покровы, кожу, слизистые оболочки, пищеварительный тракт, с кормом, питьем, через дыхательные органы - с капельками мокроты, пылью и т.п.

Важно подчеркнуть, что источниками возбудителя являются не только больные животные, но и животные-вирусоносители, которые выделяют вирусные частицы с калом, мочой, истечениями из глаз, носа и т.д. Во внешней среде вирусы не размножаются, но могут долго сохраняться в ней, особенно при низких температурах, оставаясь опасными для других животных.

Передача вирусов происходит как при непосредственном контакте больного животного (или вирусоносителя) с восприимчивым животным при обнюхивании, укусах, царапинах и т.п., так и через воздух при совместном содержании больных и здоровых животных, через подстилки, клетки, посуду и т.д. Распространению вирусов способствуют такие факторы, как скученное содержание животных (особенно на выставках), несоблюдение элементарных гигиенических мероприятий, несвоевременная или некачественная вакцинация, безнадзорный выгул, а также стрессовые факторы (длительная транспортировка, чрезмерные физические нагрузки, неправильное питание, переохлаждение).

Лечение этих заболеваний весьма трудоемко и недостаточно эффективно, так как вплоть до 90-х г. ХХ века в арсенале ветеринарных врачей не было препаратов (за исключением сывороток), обладающих непосредственно противовирусной активностью, и лечение фактически сводилось к борьбе с симптоматическими проявлениями таких инфекций. Печально, но даже в наши дни продолжают появляться ветеринарные справочники, в которых при многих тяжелых вирусных инфекциях рекомендуется лишь симптоматическая терапия, ввиду "отсутствия противовирусных средств". Цель настоящих публикаций - восполнение пробела в данной области. Однако следует помнить, что предлагаемых рекомендаций ни в коем случае не достаточно для самостоятельного лечения ваших питомцев, поэтому при малейших симптомах инфекционного заболевания следует обращаться к ветврачу.

Мы рассмотрим наиболее распространенные вирусные заболевания собак и современные подходы к их лечению. Особое внимание будет уделено таким заболеваниям, как чума плотоядных, парвовирусный энтерит, аденовирусные инфекции (инфекционный гепатит и аденовироз или инфекционный ларинготрахеит), герпес, инфекционный трахеобронхит, а также парагрипп.

Чума плотоядных (чума собак, болезнь Каррэ) - острое вирусное заболевание, характеризующееся поражением органов дыхания, пищеварения, кожи, нервной системы. Болеют собаки всех возрастов, но чаще от 2 мес. до 3 лет. Возбудителем является вирус чумы плотоядных, относящийся к семейству парамиксовирусов (род морбилливирус) и передающийся через пищеварительный тракт и дыхательные пути. Во внешней среде вирус крайне неустойчив.

Относительно резистентны к заболеванию дворняжки, терьеры и боксеры. Наименее резистентны собаки культурных и декоративных пород. Смертность среди собак составляет около 50%. У переболевших собак развивается, как правило, пожизненный иммунитет, хотя устойчивость переболевших животных к повторной инфекции не абсолютная. Щенки от иммунных матерей, а также подсосные невосприимчивы к чуме в течение 2-3 месяцев.

Заражение происходит воздушно-капельным путем. Инкубационный период продолжается от 2 дней до 2-3 недель, а само заболевание может носить острый, сверхострый и даже молниеносный характер, при котором собаки могут погибнуть внезапно, без проявления клинических признаков. При сверхостром течении болезнь продолжается 2-3 дня, температура резко повышена, животное отказывается от пищи, наступает коматозное состояние и собака погибает. При остром течении болезнь длится 2-4 недели. Различают катаральную (легочную), кишечную и нервную формы заболевания. Течение основного заболевания нередко может осложняться вторичными (секундарными) бактериальными инфекциями.

Симптомы: в "классических" случаях температура поднимается до 40-41°С уже через неделю после заражения, а клинические симптомы генерализованного заболевания развиваются через несколько недель. Они включают: вялость - собака много спит, стремится забиться в темные углы, отказывается от пищи; глаза красные, из них выделяется гнойный экссудат; кончик носа абсолютно сухой, шершавый, характерны слизисто-гнойные истечения; на безволосистых участках живота может наблюдаться мелкая красная сыпь; возможны понос и рвота; дыхание затруднено, собака покашливает, хрипы в горле; в каловых массах можно заметить прожилки или сгустки крови. При нервной форме (может быть острой и хронической) - подергивание конечностей, дрожание нижней челюсти, поскуливание, возможен полный паралич (обычно при длительном течении болезни) и эпилептические припадки. У выздоровевших от чумы собак персистирующая в ЦНС инфекция может через несколько лет привести к "энцефалиту пожилых собак".

"Классическая" форма заболевания встречается довольно редко, а чаще инфекция поражает только одну систему организма: дыхательную, пищеварительную или центральную нервную.

Первая помощь: переведите собаку в теплое помещение, замените воду на сладкий чай или раствор регидрона. Глаза промывайте спитым чаем и 0,15%-ным максидином (капли глазные-интраназальные) или фоспренилом 2-3 раза в день.

Если после оказания первой помощи животному стало лучше, ни в коем случае нельзя успокаиваться. Дальнейшее наблюдение и лечение должен осуществлять специалист, поэтому обязательно вызовите ветврача. Дело в том, что нервные явления могут возникнуть на фоне уже полного видимого благополучия. Поэтому лечение необходимо продолжать еще 2-3 недели после исчезновения всех признаков болезни.

Из медикаментов показаны: в первые дни витакан (сыворотки и глобулины, которые вводят п/к, 3-4-кратно с интервалом 12-24 часа в зависимости от тяжести заболевания), максидин, камедон, фоспренил - в/м, по схеме. Для снижения синдрома "отека-набухания" мозга - мочегонные (лазикс, диакарб). Для восстановления деятельности мозга - витамины группы В или гамавит.

Кроме того, симптоматическая терапия должна включать сердечные препараты, седативные и противосудорожные средства и др. Для восстановления кишечной нормофлоры - лактоферон, лактобифид, для снятия интоксикации - гамавит. На стадии "нервной чумы" (эпилептические припадки, судороги, резкая хромота и др.), когда вирус, размножаясь в нейронах и глиальных клетках, вызывает демиелинизацию, многие специалисты рекомендуют применять глюкокортикоидные гормоны, поскольку применение на этой стадии иммуностимуляторов (например, Т-активина) способно убить собаку с "нервной чумой" за 1-2 дня (Е. Ильченко), причем перед гибелью состояние животных резко обостряется.

То же относится к применению на нервной стадии и некоторых других стимуляторов иммунитета (А.В. Бокарев, А.В. Переверзева, 2000). Например, гамма-интерферон способствует повреждению нервных клеток посредством активации цитотоксических Т-клеток, поэтому иммуностимуляторы, повышающие его синтез, очень часто обостряют протекание нервной чумы у собак или ускоряют наступление этой стадии заболевания. С другой стороны, на фоне иммунодепрессии добиться выздоровления от вирусной инфекции невозможно, и врачу при подборе терапевтических средств приходится буквально ступать по лезвию ножа, подбирая тонкий баланс между иммуностимуляцией и иммуносупрессией.

Вот почему на первый план при лечении чумы плотоядных выступают препараты, способные к модуляции иммунитета, с одной стороны, и к непосредственному воздействию на вирусные частицы - с другой. Одним из наиболее эффективных препаратов такого действия, безусловно, является фоспренил. Кроме того, по данным доктора А.А. Ильченко, прекрасных результатов удается добиться при использовании максидина (0,5 мл, 1-2 раза в день) в сочетании с гентамицином и сывороткой. Хороший эффект дает и дополнительное к внутримышечному лечению применение фоспренила в качестве капель в нос и, в случае необходимости, в глаза.

Сульфаниламиды при чуме противопоказаны, поскольку очень часто провоцируют поражения ЦНС, а что касается антибиотиков, то к их применению следует относиться с некоторой осторожностью, поскольку нередко их неоправданные назначение и смена служат для собаки, по образному выражению специалистов, "прямым путем в могилу". Однако при сильно выраженной симптоматике поражения респираторного тракта хорошие результаты дают цефалоспориновые антибиотики, а при сильно выраженной диарее врач может назначить антибиотик, к которому чувствительна кишечная флора.

Профилактика: предотвратить заболевание чумой вы можете при строгом соблюдении схем прививок, которую назначает и проводит курирующий врач. Применяются отечественные вакцины: ЭПМ, дипентавак, вакчум, а также импортные поливалентные вакцины: Nobivac DHР и др. Перед вакцинацией собакам проводят дегельминтизацию.

А. В. Санин, доктор биологических наук, профессор;
С. В. Ожерелков, доктор биологических наук, ,
И. К. Васильев, ветеринарный врач, научн.сотр. - НИИЭМ им.Н.Ф.Гамалеи РАМН, Москва

АННОТАЦИЯ

Небная миндалина собак при алиментарном заражении вирусом чумы плотоядных подвергается глубоким деструктивным изменениям лимфоидной ткани и покровного эпителия. Зоны Т- и В-лимфоцитов не различимы и они в количественном отношении сильно атрофированы. Соответствующие эозинофильные вирусные тельца включения обнаруживаются внутри эпителиоцитов, лимфоцитов, макрофагов и ретикулярных клеток. Отмечаютсяотдельныегигантскиеклетки.

ABSTRACT

Dogs by alimentary infection with canine distemper virus the lymphoid tissue and surface epithelium of palatine tonsil undergoes deep destructive alterations. T- and B-lymphocyte zones are indistinguishable and are quantitatively highly atrophied. Appropriate eosinophilic viral inclusion bodies found in epithelial cells, lymphocytes, macrophages and reticular cells. There have been some giant cells.

Введение. Вирус чумы собак, относящиеся к роду морбилливирусов и семейству пармиксовирусов, выявляется в разных клетках, тканях и органах инфицированных животных [4]. Как известно, данный вирус обладает иммуносупрессорным свойством [8; 9], который приводит к макро- и микроскопическим изменениям лимфоидной ткани, включая атрофию тимуса, истощению Т- и В-зон лимфоцитов с исчезновением вторичных лимфоидных фолликулов, гиперплазию ретикулярных клеток, формированию гигантских клеток, внутриклеточных вирусных телец включений в ретикулярных и лимфоидных клетках [1, c. 84; 2, c. 89; 6; 7; 9].

Глубокие исследования в области иммуноморфологии и изучение патологий различного генеза с точки зрения иммунных реакций являются актуальными в биологии, медицине и ветеринарии.

Небная миндалина располагается в начале желудочно-кишечного тракта и является передовой линией иммунного надзора против алиментарных антигенов, играет ключевую роль в инициации иммунного ответа против них [3, c. 277; 5]. Wunschmann A., Kremmer E., Baumgartner W. с помощью маркеров иммуногистохимии CD3, CD4, CD5, CD8 и IgG экспрессирующие В-лимфоциты изучали клеточный состав небной миндалины в норме при чуме плотоядных [9].

Чума плотоядных, несмотря на широкую известность и изученность, в настоящее время не теряет свою актуальность среди патологов, так и вирусологов. Особый интерес вызывает уникальная способность этого вируса проникать в клетки разных тканей и органов, и за счет этих клеток размножаться, распространяясь по всему организму. Мультисистемность и иммуносупрессорное свойство ВЧП, может быть использоватся в качестве модели для изучения иммунодефицитных вирусных болезней человека, придавая этой болезни биомедицинское значение.

Целью данного исследования является изучение морфофункционального состояния небной миндалины при чуме собак и сравнивание их с результатами других исследователей.

Объекты и методы исследования. Данная работа выполнялась в Кыргызском национальном аграрном университете им. К.И. Скрябина (Кыргызстан) и Институте ветеринарной патологии Цюрихского университета (Швейцария, 2007-08). Тканевые пробы от небной миндалины были получены от 8 собак инфицированной вирусом чумы плотоядных и зафиксированы в 10%-ном водном растворе нейтрального формалина. Обработка тканевых проб проведена согласно общепринятой процедуре гистологической техники. Серийные срезы готовились на полуавтоматическом микротоме новой модификаций толщиной 2-4 мкм.

Для общего обзора гистологические срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Восстановление антигена для иммуногистохимии (ИГХ) производили с помощью автоклава Паскаль (20 минут, +98 0 С) при использовании антиген восстанавливающего буферного раствора рH 6.0 (цитратный буфер) в соответствии с инструкцией производителя. Был использован SABC (Streptavidin and Biotinylated horseradish peroxidase macro-molecular Complex) метод ИГХ. Для выявления вируса чумы плотоядных использовали антитело mono AK 10H3. Окрашивание производили вручную в специальной влажной камере. Срезы дополнительно окрашены гематоксилином Майера.

Результаты исследования. В норме у собак небная миндалина содержит компактное скопление лимфоидной ткани в виде лимфоидных фолликулов разного размера и формы (В-зону), диффузно-локализованную группу клеток (Т-зону) и покрыть многослойным плоским эпителием (Рис. 1 А 0 ). Кроме Т- и В-лимфоцитов, лимфоидную ткань миндалины образуют макрофаги, заселяясь в определенных местах диффузно и мелкими группами. Пролиферативная активность лимфоидной ткани отмечается во вторичных лимфоидных фолликулах и среди клеток Т-зоны органа (Рис. 1 А 0 ).

При чуме собак, орган в структурном и функциональном отношении подвергается глубоким деструктивным изменениям. Покровный эпителий органа истончен, в отдельных местах он полностью разрушен. В поверхностных слоях эпителиальные клетки, потеряв межклеточные связи, разрыхлены. Покровный эпителий диффузно-инфильтрировано иммунокомпетентными клетками. Соскообразная структура между базальным слоем покровного эпителия и рыхлой соединительной тканью собственного слоя слизистой оболочки не наблюдается. Отмечается прямолинейная структура базального слоя и в нем видны лишь единичные фигуры митоза (Рис. 1 А). Эпителиоциты всех слоев, особенно клетки базального слоя, содержат одиночные или множественные внутрицитоплазматические (внутриядерные) эозинофильные вирусные тельца включения разного размера и формы (Рис. 1 Б). Собственно-соединительнотканый слой и подслизистая основа слизистой оболочки не различимы. Сразу же после базальной мембраны начинается рыхлое расположение, в петлях ретикулярной сети, лимфоцитов, плазматических клеток, макрофагов, гигантских и других клеток (Рис. 1 Б). Большинство клеток в этой зоне содержат эозинофильные вирусные тельца включения. Отмечаются двуядерные клетки и значительное количество фигур апоптоза и мелкие апоптосомы. Т- и В-зоны лимфоидной ткани не различимы. По сравнению с нормой лимфоидная ткань небной миндалины при данной патологии сильно атрофировано. Пролиферативная активность клеток лимфоидной ткани встречаются в единичных случаях на разных участках миндалины. Вирусосодержащие клетки дали интенсивную реакцию на маркер ИГХ AK 10H3, что наиболее ярко выделяется в эпителиальном покрове и в местах локализации лимфоидных фолликулов (Рис. 1 В). AK 10H3 положительные клетки рассеяны повсеместно в небной миндалине одиночно и небольшими группами.

Рисунок 1. Парафиновый срез небной миндалины клинически здоровой и инфициированной вирусом чумы собак. А 0 – нормальная гистоструктура небной миндалины. Пролиферативно-активные клетки окрашены на красно-коричневый цвет. Monoclonal Mouse Anti-Proliferating Cell Nuclear Antigen. Clone PC10. SaBC метод ИГХ. х25; А – глубокие деструктивные изменения органа при чуме. Окраска гематоксилином и эозином. х25; Б – эпителиальные и лимфоидные клетки с эозинофильными вирусными тельцами включениями (указаны стрелкой). Окраска гематоксилином и эозином. х250; В – вирусосодержащие клетки дали положительную реакцию на антитело AK 10H3.CDV mono AK 10H3. SaBC метод ИГХ. х62,5.

Анализируя результаты собственных исследований и данные научной литературы, мы полагаем, что вирус чумы плотоядных обладая уникальным лимфотропным свойством, разрушает небную миндалину в структурном и функциональном отношениях, и приводит организм собак к иммунодефицитному состоянию.

Информация об авторах:

ДИАГНОСТИКА ЧУМЫ ПЛОТОЯДНЫХ

Диагноз устанавливают на основании анализа эпизоотической ситуации, клинических признаков болезни, патологоанатомических изменений и результатов лабораторных исследований [2].

Чумой плотоядных болеют собаки, серебристо-черные и красные лисицы, песцы, норки, уссурийские еноты, белые африканские и бурые хорьки, куницы, медведи, ласки, горностаи, барсуки, выдры, шакалы, гиены, волки. Для различных видов животных патогенность вируса неодинакова - от скрытого бессимптомного течения болезни до острого, сопровождающегося 100%-ной смертностью. Наиболее чувствительны хорьки и тхорзофретки (помесь белого африканского хоря с черным лесным хорем). Вирус передается от больных и переболевших животных, также животных в инкубационном периоде болезни, выделяющих вирус во внешнюю среду с истечениями из носа, глаз, со слюной, мочой и калом. Инфицирование проходит через слизистые оболочки, может происходить при непосредственном контакте, респираторно и алиментарно. Переносить вирус могут человек, грызуны, а также птицы и насекомые. Возможны передача возбудителя чумы через различные предметы, контаминированные вирусом. Болезнь может возникнуть в любое время года и проявляться эпизоотией или спорадически.

Инкубационный период, при экспериментальном заражении составляет 2-7 дней, при естественном он более длительный - до 40 дней. Болезнь начинается, как правило, с повышения температуры тела на 1-3 ˚С. При этом наблюдается общее, всеохватывающее поражение наиболее важных систем организма: дыхательной, иммунной, кровеносной, лимфатической, нервной, пищеварительной, эндокринной и др. [2,7].

Нервная форма. Проявляется судорогами, спазмами, нервным тиком, животное может начать хромать, постепенно наступает паралич задних конечностей. Проявляется агрессия, повышается температура. Когда болезнь прогрессирует, начинаются эпилептические припадки, паралич мышц.

Легочная форма. Воспаляются миндалины, температура выше на 2-3 градуса, животное не ест и не пьет. Уже через несколько дней оно ослабевает, у него появляются гнойные выделения из носа, может открыться рвота, понос, начаться кашель.

Кишечная форма. Сопровождается поносом, сильной рвотой, отсутствием аппетита и сильной жаждой. Язык животного покрывается белым налетом, на эмали зубов заметны характерные темные пятна, от повышения температуры животное может терять сознание.

Кожная форма. Самая легкая форма болезни, характеризуется появлением нарывов и сыпи на лапах, ушах, носу животного. Язвы превращаются в сухую корку, которая трескается, в нее попадают микроорганизмы – начинается воспалительный процесс [9].

В лабораторном диагнозе на чуму плотоядных, в частности для индикации (обнаружения) возбудителя и его идентификации (определение видовой принадлежности) применяют метод флуоресцирующих антител прямой (МФА), ИФА, обнаружение телец-включений, реакции: РН, РДП, РСК, РНГА, РТГА и биопробу на восприимчивость животных. Реакции выполняются общепринятыми методами. Наличие АТ, выявляемых в любой из указанных реакций, в сыворотке крови животных свидетельствует о переболевании их чумой [4].

Для исследования в ветеринарную лабораторию доставляют: сыворотку крови больных животных, кровь берут в период лихорадочного состояния, как можно быстрее после проявления клинических признаков и повторно спустя 14-21 день. Также берут мазки из носа и конъюнктивы. От свежих трупов берут кусочки легких, трахеи, селезенки, почек, головного мозга и мочевой пузырь с диагностической целью для гистологического исследования.

Метод флуоресцирующих антител прямой (МФА), Иммуноферментный анализ (ИФА) – для установления раннего прижизненного диагноза. МФА - материалом служат мазки-отпечатки; в основе люминесцентная микроскопия соединений антигена, с меченным антителом; ИФА - разработаны промышленные диагностикумы на полистироловых пластинах для выявления специфического антигена вируса; материал – пробы крови, смывы из глаз и глотки. При исследовании недавно вакцинированных, возможны ложноположительные результаты.

Реакция нейтрализации (РН) – для идентификации вируса в культуре клеток.

Реакция диффузной преципитации (РДП) – позволяет обнаруживать возбудитель на 3-4-й день болезни.

Реакция связывания комплемента (РСК) – для обнаружения антигена в органах и тканях больных животных и в культуре клеток.

Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) – для выявления специфических антител к возбудителю. [6]

Микроскопия телец-включений. Цитоплазматические и реже внутирядерные тельца-включения являются патогномоническими для ЧС. Для обнаружения телец-включений предложен метод окраски мазков гамотоксилином Делафильда с эозином [8].

При вскрытии трупов собак, павших от чумы, вокруг глаз и носа находят корочки засохшего экссудата. Тело истощено, глаза впавшие, зрачок расширен, на роговице, губах и вокруг ноздрей возможны эрозии. Легкие переполнены кровью, с очагами красной и серой гепатизации, возможны отек легких и пневмония. Точечные и полосчатые кровоизлияния отмечают на плевре, в сердечной мышце, корковом слое почек, мочевом пузыре. В сердечной мышце видны сероватые и желтые очаги; печень рыхлая, полнокровная, с желтым оттенком; селезенка по краям имеет инфаркты; почки полнокровные; на слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки эрозии, язвы, признаки катарального воспаления; в мочевом пузыре слизистая оболочка гиперемирована; брыжеечные и мезентериальные лимфатические узлы на разрезе сочные, с кровоизлияниями; сосуды головного мозга инъецированы.[2]

Биопробу ставят на животных того вида, от которых исследуют материал. Лучше ее проводить на щенках через 15 дней после отъема от самок. Животные заболевают на 10-14 день, а иногда и через 1-2 месяца с характерными признаками болезни [8].

При дифференциальной диагностике необходимо исключить болезни, имеющие подобные с чумой клинические признаки: инфекционный гепатит, бешенство, болезнь Ауески, парво - и коронавирусный энтерит, лептоспироз, пастереллез, сальмонеллез, авитаминоз В₁, отравление и др.

Лечение больных животных при чуме, как и при многих других инфекционных болезнях, наиболее эффективно на ранних стадиях заболевания. Учитывая, что чума плотоядных является полисистемной болезнью, поражающей многие важные физиологические системы организма, следует проводить научно обоснованное индивидуальное комплексное лечение больных животных [3].

Комплекс терапевтических воздействий включает:

- введения в организм животного иммунных сывороток, иммуноглобулинов, антибиотиков;

- применение общеукрепляющих медикаментов, средств дезинтоксикации для ослабления и прерывания патологических процессов;

- использование сердечных, болеутоляющих и других средств для воздействия на отдельные проявления заболевания;

- введение в организм водно-солевых растворов и витаминов для возмещения веществ, содержание которых понижено из-за болезни [5].

Важно учитывать, что все химиотерапевтические средства не обладают достоверным свойством, но помогают повысить общий тонус организма [3].

Единственный способ профилактики заболевания – вакцинация, первую прививку делают в 3-х месячном возрасте здоровым щенкам. Перед вакцинацией животным обязательно нужно дать препараты от глистов. Повторную ревакцинацию назначит ветеринар, переносятся прививки хорошо, зачастую это поливалентные вакцины, направленные на создание иммунитета к нескольким заболеваниям [9].

Библиографический список

Госманов Р.Г. Ветеринарная вирусология. [Текст] - Учебники и учеб. Пособия для студентов высш. учеб. Заведений / Р.Г. Госманов, Н .М. Колычев - М.: КолосС, 2006. – С. 157-159.