Что такое бруцеллез вакцина против бруцеллеза

К.В. Шумилов, О.Д. Скляров, А.И. Климанов,Д.С. Зверев
И.Л. Никифоров

Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов (ФГУ "ВГНКИ"), г. Москва

Алтайский государственный аграрный университет, г. Барнаул

Заражению бруцеллезом подвержены все виды млекопитающих, в том числе человек. Бруцеллез имеет тенденцию к широкому распространению и проявляется в виде массовых абортов, бесплодия и яловости маточного поголовья, снижения жизнеспособности приплода, уменьшения продуктивности животных. Это обусловлено при­способляемостью и способностью возбудителя бруцеллеза размножаться в организме животных и долго сохранять жиз­неспособность во внешней среде.

В России бруцеллез крупного рогатого скота впервые зарегистрировали в 1902 году. Заболевание животных было связано с импортом больного племенного скота.

Анализ эпизоотологических данных с 1946 года по на­стоящее время показывает, что бруцеллез крупного рогатого скота на территории России не регистрировался только в Кам­чатской области.

До 1952 года борьба с бруцеллезом в стране сводилась к проведению диагностических исследований и удалению из стад больных животных, без применения противобруцеллез-ных вакцин. В связи с осложнением эпизоотической ситуации в 1953 году в систему противобруцеллезных мероприятий была включена иммунизация животных вакциной из штамма В. аЬогт.и5 19. Вакцину применяли до 1970 года. За время применения вакцины многие хозяйства, и даже целые облас­ти, были оздоровлены от болезни. Однако, в регионах с ши­роким распространением бруцеллеза эффективность оздоро­вительных мероприятий оказалась недостаточной. В первую очередь это было обусловлено высокой агглютиногенностью вакцины. Агглютинины и комплементсвязывающие антитела сохраняются в организме иммунизированных животных до 5-8 лет, что чрезвычайно осложняет дифференциацию таких животных от больных бруцеллезом.

С 1974 года в России в общем комплексе противобру­целлезных мероприятий применяются вакцины из штаммов В. аЬог1из 82 и 19, а с 1997 года еще и из штаммов В. аЬоПиз 75/79-АВ и 17/100.

За 33 года проведения противобруцеллезных мероприя­тий с применением указанных вакцин и смены 5-6 поколений коров количество неблагополучных по бруцеллезу пунктов в стране значительно скоратилось. Так, если на конец 1974 года в России числилось 5570 неблагополучных пунктов, то на 1 января 2008 года их осталось 68. За 33 года работы с приме­нением этих вакцин и смены 5-6 поколений коров к 2008 году количество неблагополучных пунктов по бруцеллезу и заболев­ших животных значительно сократилось.

Вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма В.аЬогШз 75/79-АВ сухая живая (ФГУ "ВГНКИ" и Ал­тайская НИВС) и инактивированная адъювант-вакцина против бруцеллеза крупного рогатого скота из штамма В.аоогтиз КВ 17/100 (ФГУ "ВГНКИ") были разработаны с учетом формиро­вания новых форм собственности и складывающейся эпизо­отической ситуации по бруцеллезу, обусловивших необходи­мость иммунизировать ранее не вакцинированных стельных коров и нетелей.

Исходная культура вакцинного штамма В.аоогтиз 75/79-АВ была выделена в 1979 году от коровы, в 1974 г. иммуни­зированной и в 1976 г. реиммунизированной вакциной из штамма В.аЬогтиз 82. В результате целенаправленной селек­ции выделенной культуры путем многократных пассажей че­рез организм морских свинок и телок и на питательных средах был получен штамм В.аЬоПиз 75/79-АВ.

В ходе комиссионного изучения на морских свинках и крупном рогатом скоте разного возраста было установлено, что культура вакцинного штамма приживляется в организме привитых животных в сравнительно короткие сроки, расселя­ясь в генерализованной форме в течение 60 дней у морских свинок и 30 дней у телок. Штамм не вызывает в лимфатичес­ких узлах и внутренних органах морских свинок патологичес­ких изменений, характерных для бруцеллеза, не мигрирует от иммунизированных на неиммунизированных животных.

По результатам исследования сывороток крови в РА и РСК с 5 -бруцеллезным антигеном крупный рогатый скот к 90-му дню после иммунизации вакциной из штамма В. аЬоПиз 75/79-АВ почти полностью утрачивает агглютинины и компле­ментсвязывающие антитела.

Не зарегистрировано случаев выделения культуры вак­цинного штамма из молока от коров периодически исследо­ванных в течение 3 месяцев после иммунизации.

С целью изучения абортогенных свойств за 1004 коро­вами и нетелями (стельными телками) с разным сроком стель­ности, иммунизированными вакциной 75/79-АВ наблюдали до отела. Из указанного числа абортировали 2 коровы на 7 и 30 сутки после иммунизации, что было не связано с введени­ем вакцины.

Иммуногенные свойства вакцины были изучены на мор­ских свинках и телках.

В первом опыте использовали 74 морские свинки живым весом 350-400 г., сформированные в группы, в том числе три опытные - по 20 животных в каждой и одна - контрольная, на­считывающая 14 животных. Морских свинок первой группы иммунизировали культурой штамма 75/79-АВ, второй - штам­ма 19, третьей - штамма 82, четвертой - не иммунизировали. Через 90 дней после иммунизации всех животных заразили вирулентной культурой В. аЬоПиз 54, а через 35-37 дней убили для бактериологического исследования. Согласно полученным результатам, заражению противостояли 88,8 % животных, им­мунизированных вакцинной из штамма В. аЬогтиз 75/79 - АВ, 65,0 % - из штамма 82 и 84,2 % - из штамма 19. Все контрольные морские свинки заразились.

Три опыта было проведено с использованием 95 телок. В первом - на телках 4-х месячного возраста, сформированных в 3 опытные и одну контрольную группы, была определена опти­мальная иммунизирующая доза вакцины (табл. 1).

Животным опытных групп ввели вакцину в разных дозах. Спустя 6 меся­цев телок опытных и контрольной групп заразили стандартной культурой вирулентного штамма В. abortus 54-М-ВГНКИ, сус­пендированной в физиологическом растворе, конъюнктивально в дозе 15 млн. микробных клеток из расчета по 7,5 млн. м. кл. в каждый
глаз в объеме 0,1 мл.

Через 48 дней после заражения животных убили. Для бактериологического исследования были отобраны лимфатические узлы и внутрен­ние органы, по 21 пробе патологического мате­риала от каждой.

Как видно из материалов таблицы, опти­мальная иммунизирующая доза вакцины со­ставляет 100 млрд. м. к. Вакцина в указанной дозе обеспечила защиту от заражения культурой вирулентного штамма бруцелл 100 % иммунизи­рованных животных при заражении всех конт­рольных неиммунизированных телок.

Второй опыт был посвящен сравнительно­му изучению иммуногенных свойств вакцины из штамма В. abortus 75/79-АВ, адъювантвак-цины из штамма В. melitensis "Невский-13" и вакцины из штамма В. abortus 82. Для исследо­ваний из 26 телок 15-18-ти месячного возраста сформировали 4 группы животных. В первых трех группах было по 7 голов и в четвертой (кон­трольной) - 5 голов. Схема и результаты опыта приведены в таблице 2.

Телок первой группы иммунизировали сус­пендированной в физиологическом растворе двухсуточной агаровой культурой штамма В. abortus 75/79-АВ, подкожно в область средней трети шеи в дозе 100 млрд. м. к. в объеме 5 мл, животных второй группы - такой же культурой из штамма 82. Адъювантвакцину ввели телкам третьей группы подкожно в область подгрудка в дозе 450 млрд. м. к. в объеме 3 мл. Телок конт­рольной группы не иммунизировали.

Через 35 дней после иммунизации всех животных заразили путем нанесения на конъюн­ктиву каждого глаза по 0,1 мл взвеси стандарт­ной культуры вирулентного штамма В. abortus 54-М-ВГНКИ в дозе 15 млн. м. к.

Убой и бактериологическое исследование патологического материала от подопытных и контрольных животных провели через 39 дней после заражения.

Согласно результатам опыта, вакцины из штаммов В. abortus 75/79-АВ и 82 обеспечи­ли защиту от заражения культурой вирулентно­го штамма бруцелл 28,6 % иммунизированных животных, а адъювантвакцина из штамма В. melitensis "Невский-13" - 42,8 %, при 100 %-ном заражении неиммунизированных животных.

В третьем опыте проведен сравнительный контроль иммуногенных свойств производственных серий вакцин из штаммов KB 17/100, 75/79-АВ, 19, изготовленных на Щел­ковском биокомбинате.

Штамм В. abortus KB 17/100, находящийся в R - форме, получен путем целенаправленной селекции по культуральным, морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам из культуры вакцинного штамма В. abortus 104-М в S - фор­ме.

Штамм безвреден для лабораторных животных. При вве­дении мышам в дозе 250 млн. микробных клеток и морским свинкам в дозе 2*10э он не вызывает у них патологических изменений, характерных для бруцеллеза.

Остаточная вирулентность штамма ниже, чем у исходного штамма, ИД50 для мышей линии С57Блек/6 составляет 5500 микробных клеток.

Вакцина из штамма KB 17/100 представляет собой эмульсию типа "вода в масле". При введении вакцины в дозе 2*109 микробных клеток морским свинкам и в дозе 7*109 микробных клеток кроликам у животных вырабатываются только R -антитела в титрах от 1:160 до 1:3200.

В опыте по определению иммуногенности использовали

35 телок в возрасте 14-17 месяцев из хозяйства, благополуч­ного по бруцеллезу крупного рогатого скота по данным серо­логического исследования животных перед вакцинацией и с учетом эпизоотической ситуации.

Каждой вакциной иммунизировали по 10 телок. Адъю-вант-вакцину вводили животным подкожно в область подгрудка в объеме 3 мл (4,5* 10" м. к.), вакцину из штамма В. abortus 19 - подкожно в область задней трети шеи в дозе 80 млрд. м. к. в объеме 4 мл, вакцину из штамма В. abortus 75/79-АВ подкожно в область задней трети шеи, в дозе 100 млрд. м. к. в объеме 5 мл. Через 6 месяцев всех иммунизированных и контрольных (неиммунизированных) телок заразили вирулент­ной культурой В. abortus 54-М-ВГНКИ конъюнктивально в дозе 10 млн. м. к.

Через 30 дней после заражения телок убили, а внутрен­ние органы и лимфатические узлы (25 объектов) от них под­вергли бактериологическому исследованию (табл. 3).

В результате проведенного опыта существенных разли­чий между количеством животных, иммунизированных испы­туемыми вакцинами, и защищенных от заражения культурой вирулентного штамма не установлено.

В производственных условиях Саратовской области применение вакцины вакцины из штамма KB 17/100 было начато в 1998 году. В течение последующих 3-х лет вакциной было им­мунизировано 197590 голов крупного рогатого скота, что позво­лило в относительно короткое время (8-24 месяца) оздоровить хозяйства 6-ти районов от бруцеллеза крупного рогатого скота.

В целом, полученные резульгаты позволяют заключить, что вакцина из штамма В. abortus 75/79-АВ является иммуно-генной, слабоагглютиногенной и неабортогенной и, таким об­разом, удовлетворяет основным современным требованиям, предъявляемым к живым противобруцеллезным вакцинам.

К одной из самых перспективных противобруцеллез-ных вакцин следует отнести адъювант-вакцину из штамма KB 17/100, которая не индуцирует синтез S - бруцеллезных антител в диагностических титрах у несенсибилизированных бруцеллами животных, но индуцирует его у крупного рогатого скота с латентной формой бруцеллеза, что позволяет за счет быстрого удаления из стад таких животных, ускорить оздоров­ление неблагополучных хозяйств; не обладает абортогенными свойствами и может быть использована для иммунизации стельных коров и нетелей, и, будучи инактивированной, не представляет экологической опасности.

Действующее вещество

Вакцина бруцеллезная живая сухая
Инструкция по медицинскому применению - РУ № Р N003612/01

Дата последнего изменения: 28.04.2017

Лиофилизат для приготовления суспензии для подкожного введения и накожного скарификационного нанесения.

Одна доза вакцины для подкожного введения взрослым содержит от 3,4 х 108 до 4,6 х 108 живых микробных клеток (м.к.) в 0,5 мл, для накожного скарификационного нанесения - от 4 х 109 до 1,6 х Ю10 живых м.к. в 0,1 мл растворителя. В зависимости от количества живых микробных клеток в ампуле должно содержаться от 4 до 10 накожных доз.

В одной дозе вакцины для накожного скарификационного нанесения, содержатся стабилизаторы: сахароза - 0,015 г, натрия глутамата моногидрат - 0,00225 г, тиомочевина -0,00075 г, желатин - 0,00225 г.

Имеет вид пористой массы белого или белого с желтоватым оттенком цвета.

Препарат представляет собой лиофилизированную культуру живых микробов вакцинного штамма Brucella abortus 19 BA.

Вакцина через 20-30 дней после прививки обеспечивает развитие иммунитета продолжительностью 10-12 месяцев, максимальная напряженность иммунитета сохраняется 5-6 месяцев.

Профилактика бруцеллеза козье-овечьего типа у взрослых.

Прививкам подлежат лица, выполняющие следующие работы:

• по заготовке, хранению, обработке сырья и продуктов животноводства, полученных из хозяйств, где регистрируются заболевания скота бруцеллезом;
• по убою скота, больного бруцеллезом, по заготовке и переработке полученных от него мяса и мясопродуктов.

Животноводы, ветеринарные работники, зоотехники в хозяйствах энзоотичных по бруцеллезу.

Лица, работающие с живыми культурами возбудителя бруцеллеза.

• Перенесенный бруцеллез в анамнезе. Положительная серологическая или кожноаллергическая реакция на бруцеллез.
• Острые инфекционные и неинфекционные заболевания, хронические заболевания в стадии обострения - прививки проводят не ранее, чем через 1 мес. после выздоровления (ремиссии).
• Первичные и вторичные иммунодефициты. При лечении стероидами, антиметаболитами, химио- и рентгенотерапии прививки проводят не ранее, чем через 6 мес. после окончания лечения.
• Системные заболевания соединительной ткани.
• Злокачественные новообразования и злокачественные болезни крови.
• Распространенные рецидивирующие заболевания кожи.
• Аллергические заболевания (бронхиальная астма, анафилактический шок, отек Квинке в анамнезе).
• Беременность и период лактации.

Применение препарата противопоказано.

Вакцинацию проводят однократно накожно или подкожно. Одна доза при накожном введении составляет 2 капли (0,1 мл) и содержит 1х10 10 м.к., при подкожном введении составляет 0,5 мл и содержит 4х10 8 м.к. Ревакцинацию проводят по показаниям через 10-12 мес. накожно, используя половинную дозу, которая составляет 1 каплю (0,05 мл) и содержит 5 х 10 9 м.к.

С целью выявления противопоказаний врач (фельдшер) в день прививки проводит опрос и осмотр прививаемого с обязательной термометрией. При температуре выше 37°С прививка откладывается. В случае необходимости проводят необходимое лабораторное обследование.

Перед каждой прививкой у вакцинируемого в обязательном порядке определяют наличие специфического иммунитета с помощью одной из серологических или кожно-аллергических реакций. Прививкам подлежат лица с отрицательной реакцией.

Прививки следует проводить не позднее, чем за 3-4 недели до начала работы, связанной с риском заражения.

Проведенную прививку регистрируют в установленных учетных формах с указанием наименования препарата, даты прививки, дозы, названия предприятия- изготовителя препарата, номера серии, реакции на прививку.

Вакцинация накожным способом

Препарат растворяют натрия хлорида раствором для инъекций 0,9%, который вносят в ампулу стерильным шприцем с иглой из расчета 0,1 мл на одну прививочную дозу. Ампулу встряхивают до образования равномерной суспензии. Время растворения вакцины не должно превышать 1 мин. Растворимый препарат не должен содержать осадков или хлопьев. Место прививки - наружную поверхность средней трети плеча - обрабатывают спиртом или смесью спирта с эфиром; применение других дезинфицирующих средств не допускается. После испарения спирта и эфира, не прикасаясь к коже, наносят две капли вакцины на расстоянии 30-40 мм друг от друга, кожу натягивают и стерильным скарификатором проводят через каждую нанесенную каплю вакцины 6 насечек (3 продольные и 3 поперечные) длиной 10 мм каждая с расстоянием между насечками 3 мм. Насечки не должны кровоточить, кровь должна выступать только росинками.

Плоской стороной скарификатора втирают вакцину в насечки в течение 30 сек и дают подсохнуть 5 мин.

При ревакцинации применяют половинную дозу, т.е. 1 каплю вакцины, через которую делают 6 насечек.

Вакцинация подкожным способом

Прививочная доза препарата при этом способе в 25 раз меньше, чем при накожной вакцинации; разведение вакцины производят из расчета 12,5 мл натрия хлорида раствора для инъекций 0,9% на одну дозу вакцины для накожного скарификационного нанесения (подкожная доза - 0,5 мл х 25 = 12,5 мл).

Препарат растворяют так же, как для накожной вакцинации, после чего полученную суспензию переносят в стерильный флакон для инъектора, в который вносят необходимый объем растворителя (например, если в ампуле содержится 7 накожных доз вакцины, то содержимое должно быть суспендированным в 12,5 мл х 7, т.е. в 87,5 мл).

Вакцину вводят инъектором, рассчитанном на подкожное введение (БИ-ЗМ или противоинфекционным протектором ППИ-2), согласно Инструкции по применению инъектора в объеме 0,5 мл.

Прививки проводят в область наружной поверхности плеча на границе между верхней и средней третью. Место введения обрабатывают так же, как и при накожной прививке.

Местная и общая реакция на вакцинацию незначительны. Местная реакция при накожной прививке может появиться через 24-48 ч в виде гиперемии, инфильтрата кожи или в виде розово-красных узелков по ходу насечек, иногда сливающихся в валик или образующихся небольшую припухлость. При безыгольном методе введения через 12-24 ч на месте инъекции могут появиться гиперемия, инфильтрат диаметром до 25 мм, слабая болезненность. Общая реакция возникает в первые сутки у 1-2% привитых и выражается недомоганием, головной болью, повышением температуры тела до 37,5 - 38°С.

Прививки против бруцеллеза проводят не ранее, чем через 1 мес. после других профилактических прививок или за 1 мес. до них.

Допускается одновременная накожная вакцинация живыми вакцинами против бруцеллеза с прививками против одной из следующих инфекций: ку-риккетсиоза, туляремии и чумы.

Сведения о возможном влиянии лекарственного препарата на способность управлять транспортными средствами, механизмами

Лиофилизат для приготовления суспензии для подкожного введения и накожного скарификационного нанесения. По 4-10 накожных доз в ампуле. По 5 ампул в пачке вместе с инструкцией по применению и ножом ампульным или скарификатором ампульным.

При упаковке ампул с кольцом или точкой для вскрытия нож ампульный или скарификатор ампульный не вкладывают.

В соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8°С.

В соответствии с СП 3.3.2.1248-03 при температуре от 2 до 8°С в недоступном для детей месте.

3 года. Препарат с истекшим сроком годности применению не подлежит.

Перетрухина А. Т., Блинова Е. И.,

Возбудители бруцеллеза - B. melitensis, B. abortus, B. suis - относятся к роду Brucella и входят в группу 4 (Грамотрицательные, аэробные/микроаэрофильные палочки и кокки) классификатора бактерий Берджи.
Бруцеллы - мелкие, неподвижные палочки, располагающиеся в мазках отдельными группами. Спор не образуют, некоторые штаммы образуют капсулу. Грамотрицательны. Облигатные аэробы.
Высоко требовательны к питательным средам. Элективной средой для их культивирования являются печеночный агар, печеночный бульон. Культивируются в аэробных условиях, но при повышенном содержании углекислого газа.
Биохимически бруцеллы малоактивны.
Дифференциация бруцелл на виды и на биовары основана на комплексе биологических признаков: потребность в СО2, способность расти на средах в присутствии некотрых красителей (основной фуксин, тионин), образование Н2S.
Антигенное строение бруцелл сложное; у них имеются общие родоспецифические и видоспецифические антигены.
К основным факторам патогенности бруцелл относится продукция эндотоксина, ферментов агрессии и защиты (гиалуронидаза, факторподавляющий фагоцитоз и др.). Антигены бруцелл обладают выраженным сенсибилизирующим (аллергенным) действием. Развитие инфекционной аллергии определяет своеобразие патогенеза, клиники бруцеллеза и иммунитета.
Бруцеллез - особо опасная инфекция. Источником инфекции являются больные животные. Люди, болеющие бруцеллезом, как источник инфекции не представляют угрозы окружающим.
Основные пути заражения - алиментарный и контактно-бытовой.
Бруцеллы проникают в организм через неповрежденные кожу и слизистые оболочки. С места внедрения они попадают в лимфатические узлы, вызывая их пролиферацию и воспаление. Бруцеллы легко прорывают лимфатический барьер, проникают в кровь и разносятся по всему организму, образуя очаги размножения в костном мозге, печени, почках и других органах. Микробы и продукты их жизнедеятельности вызывают сенсибилизацию организма, что приводит к формированию инфекционной аллергии.
В течение болезни формируется нестерильный инфекционный иммунитет. Постинфекционный иммунитет перекрестный и недостаточно напряженный.
Разнообразие клинических проявлений бруцеллеза существенно повышает значимость лабораторной диагностики этого заболевания.
Материалом для исследования является кровь. Основной метод диагностики - серологическое исследование (реакции Райта или Хейдельсона), а также постановка аллергической диагностической пробы с бруцеллином (реакция Бюрне). Разработаны тест-системы для реализации методов иммуноиндикации и молекулярно-генетических методов. Бактериологическое исследование проводится только в лабораториях, работающих с особо опасными инфекциями.
Для этиотропной терапии применяют антибиотики. При лечении хронических форм бруцеллеза используют лечебную бруцеллезную вакцину.
Специфическая профилактика осуществляется живой вакциной.
Накожная сухая живая бруцеллезная профилактическая вакцина
Данный препарат представляет собой взвесь живой культуры вакцинного штамма B. abortus 19-ВА в сахарозо-желатиновой среде, высушенную методом сублимационной сушки. Сухая вакцина имеет вид аморфной или кристаллической массы молочно-белого или слегка желтоватого цвета. Вакцину высушивают в вакуумных ампулах емкостью 6-8 мл. В каждой ампуле содержится от 5 до 30 доз вакцины. Одна накожная прививочная вакцинирующая доза равна 10 млрд., а ревакцинирующая - 5 млрд. живых бруцелл. В ампулах с сухой вакциной должен сохраняться вакуум в пределах 200 мм рт. ст., остаточная влажность - в пределах 1,5-3 %. Вакцину проверяют на отсутствие бактериальной загрязненности, безвредность и иммуногенность.
Безвредность устанавливают на пяти белых мышах весом до 20 г, которым подкожно вводят 2 млрд. микробных тел. Мыши в течение 6 дней должны быть живы.
Иммуногенные свойства определяют на десяти морских свинках весом 350-400 г. Свинки получают однократно по 10 доз сухой вакцины; через 20-30 дней свинок заражают вирулентным штаммом
B. melitensis. Через 20-30 дней животных забивают, вскрывают и исследуют бактериологическим методом. Вакцину признают иммуногенной, если не менее 7 из 10 свинок, привитых вакциной, не поддаются заражению культурой вакцин овечьего типа.
Бруцеллезную живую сухую вакцину применяют для вакцинации и ревакцинации людей против бруцеллеза. Иммунизации против бруцеллеза подлежат лица профессионально связанные или временно привлекаемые к работе с мелким рогатым скотом. Показанием к вакцинации людей является наличие бруцеллезной инфекции у мелкого рогатого скота или выделение бруцелл козье-овечьего вида от других животных. В очагах бруцеллеза крупного рогатого скота при инфекции B. abortus проводить прививки не рекомендуется.
Вакцинацию проводят накожно однократно. Такую вакцину запрещается использовать для подкожного введения.
Непосредственно перед прививкой вакцину разводят стерильным физиологическим раствором. Необходимо обеспечить наличие определенного числа бруцелл в одной прививочной дозе. Для этого в ампулу с вакциной вносят двойное количество растворителя. Содержимое тщательно перемешивают.
Прививку производят на наружной поверхности средней трети плеча. Кожу предварительно очищают спиртом. После высыхания на кожу наносят по одной капле вакцины в двух местах на расстоянии 3-4 см. Затем стерильным прививательным пером через каждую каплю вакцины производят по три крестообразные насечки длиной 0,8-1 см на расстоянии 0,3-0,4 см друг от друга. Насечки не должны кровоточить. Плоской стороной пера втирают вакцину в насечки, после чего вакцина должна высохнуть в течение 5-10 мин.
Через 24-48 часов развивается местная реакция, проявляющаяся в появлении розово-красных узелков по ходу насечек, иногда сливающихся в валик., образующий небольшую припухлость.
Взрослых вакцинируют одной дозой, что соответствует 2 каплям вакцины. Для вакцинации детей от 7 до 15 лет используют половину дозы взрослого, а ревакцинацию производят половинной дозой, установленной для вакцинации. По эпизоотологическим и эпидемиологическим показателям накожная ревакцинация производится через 7-12 месяцев.
Иммунитет против бруцеллеза формируется к концу 1-го месяца, сохраняя наивысшую напряженность в течение последующих 5-6 мес.
Вакцина должна храниться в темном, прохладном помещении при температуре не выше 10 °С. Возможно хранение при температуре ниже 0 °С при отсутствии резких колебаний температуры. Хранение и транспортировка вакцины при температуре выше 10 °С недопустима, так как при этом снижается иммунологическая эффективность препарата.
Срок годности вакцины - 12 месяцев со дня изготовления. Переконтролю вакцина не подлежит. Забракованную или неиспользованную по истечении срока годности вакцину уничтожают кипячением или дезинфицирующими средствами. На уничтоженную вакцину составляют акт с указанием причин, по которым она не была использована.
Поливалентная бруцеллезная лечебная вакцина
Для лечения острых и хронических форм бруцеллеза применяется поливалентная бруцеллезная вакцина. Этот препарат приготавливается из хорошо проверенных штаммов B. melitensis и B. abortus bovis, обладающих типичными культуральными, биохимическими, агглютинабельными свойствами, вирулентных для белых мышей и морских свинок.
Вакцина представляет собой взвесь в физиологическом растворе бруцелл овечьего и коровьего видов, убитых нагреванием при 60 °С в течение 1 часа, и содержит 500 млн. и 1 млрд. микробных тел в 1 мл. Контролируется вакцина на стерильность, чистоту и стандарт, а маточная взвесь - на токсичность и специфическую безвредность. Препарат разливается в ампулы по 2 мл.
Перед употреблением вакцину встряхивают до получения равномерной мути; при наличии хлопьев или крупинок вакцина бракуется. Вакцина из вскрытых ампул немедленно используется, нельзя разводить вакцину впрок.
Для получения соответствующей лечебной дозы вакцину разводят стерильным физиологическим раствором. Вакцинотерапия производится при положительной аллергической реакции. При отрицательной или сомнительной внутрикожной пробе, даже при наличии положительной реакции агглютинации, от применения этого метода лечения следует временно воздержаться до появления выраженной аллергической реакции.
Вакцина применяется в виде внутривенных и внутрикожных инъекций в соответствующей дозировке. По ориентировочной схеме внутрикожные инъекции осуществляются следующим образом: вводится в две точки 2-4-10 млн. микробных тел вакцины, разведенной 1:100, затем в четыре точки - 20 млн., в десять точек - 100 млн., в десять-двенадцать точек - 200 млн. вакцины, разведенной 1:10 и, наконец, в шесть точек - 300 млн. неразведенной вакцины.
Основным методом вакцинотерапии бруцеллеза является внутривенный. Он производится только в условиях стационара, начиная с введения одного-двух миллионов микробных тел, а при гиперреактивности - с двухсот тысяч. При определении количества инъекций и интервалов между ними необходимо подходить строго индивидуально.
Введение вакцины бруцеллезному больному сопровождается резкой шоковой реакцией, эта реакция не является опасной для больных, но у некоторых из них она может оказаться тяжелой и повлечь за собой ослабление сопротивляемости организма. Степень реакции зависит от аллергического состояния больного, показателем которого является (кроме клинических симптомов) внутрикожная аллергическая проба.
Срок годности вакцины - 1,5 года.
Бруцеллезный единый диагностикум
Диагностикум - антиген предназначен для постановки реакции агглютинации Райта, являющейся одной из основных иммунологических реакций, применяемых в диагностике бруцеллеза, а также реакции агглютинации на стекле.
Препарат представляет собой взвесь бруцелл в физиологическом растворе, содержащем в 1 мл 10 млрд. микробных тел, убитых 0,5 % формалином или нагреванием с последующим добавлением в качестве консерванта карболовой кислоты.
Штаммы для изготовления диагностикума должны обладать всеми характеризующими бруцеллы свойствами. Выращивание бруцелл производят на обычном мясопептонном агаре с добавлением 1 % глюкозы и 2 % глицерина или на печеночном агаре при температуре 37 °С в течение 48-72 часов. После этого производят смыв бруцелл 0,5 % формалинизированным физиологическим раствором, устанавливают стандарт в 10 млрд. микробных тел в 1 мл.
Формалинизированную взвесь - диагностикум ставят в термостат при 37 °С на 48 часов для инактивирования. Препарат разливают в ампулы, контролируют на стерильность, стандарт и агглютинабельность.
Препарат представляет собой белую, слегка желтоватую гомогенную взвесь. Для постановки реакции Райта диагностикум разводят в десять раз (до конечной концентрации в 1 млрд. микробных тел), для реакции агглютинации на стекле - используют цельный (0,03 мл).
Срок годности диагностикума - 1 год.
Диагностикум для серологической
реакции Хеддльсона - Кайтмазовой
Диагностикум - антиген представляет собой прокипяченную взвесь бруцелл в 12 % растворе поваренной соли с добавлением красителей (генцианвиолет или метиленовый синий) и содержит 10 млрд. микробных клеток в 1 мл.
Изготовление препарата (кроме метода инактивации) и контроль производится так же, как и диагностикума для реакции Райта.
Срок годности препарата - 1 год.
Бруцеллин для внутрикожной пробы по Бюрне
Препарат представляет собой фильтрат 3-недельной убитой нагреванием бульонной культуры бруцелл из штаммов овечьего, коровьего и свиного видов. Это прозрачная жидкость светло-желтого цвета. Каждая ампула содержит 1 мл бруцеллина. Основным действующим началом бруцеллина является специфический белок (аллерген).
Бруцеллин применяют для постановки внутрикожной реакции Бюрне. Аллергическая внутрикожная проба основана на способности организма, сенсибилизированного бруцеллезным антигеном, специфически отвечать местной реакцией на внутрикожное введение небольших доз бруцеллина. Реакция специфична, отличается высокой чувствительностью и позволяет часто ставить диагноз бруцеллеза в случаях, когда гемокультура или серологические реакции остаются отрицательными. Она появляется у больных, как правило, к концу 1-го месяца заболевания. В дальнейшем реакция Бюрне сохраняется с большим постоянством очень долго, иногда годами, уже после исчезновения клинических симптомов.
Реакция Бюрне может быть положительной и у клинически здоровых людей. В этих случаях она свидетельствует об аллергической перестройке организма под влиянием бессимптомной инфекции, что часто наблюдается у лиц, которые по своей профессии имеют дело с больным бруцеллезом крупным рогатым скотом.
Внутрикожная проба становится положительной и после вакцинации людей живой бруцеллезной вакциной.
При положительной реакции на месте введения бруцеллина появляется болезненная отечность красноватого или бледно-розового цвета в зависимости от пигментации и особенностей кожи.
Реакцию оценивают обычно на следующий день после ее постановки путем осмотра и ощупывания кожи. Наличие выраженного отека кожи на месте введения бруцеллина считают положительной аллергической реакцией. При регистрации положительной реакции отмечают максимальный размер отека в см, степень болезненности и окраску. Диагностическое значение имеет отек не менее 2×3 см. В случае отрицательного результата через 24 ч учет реакции производят повторно через 48 ч.
Бруцеллин следует хранить при температуре от 4 до 10 °С в сухом помещении. При температуре ниже 0 °С транспортировка препарата недопустима.
Срок годности препарата - 1 год. По истечении срока годности препарат подлежит переконтролю для продления срока годности. При сохранении физических свойств и активности срок годности может быть продлен на 6 мес.
Антиген для опсоно-фагоцитарной реакции
Препарат предназначен для проверки реактивности организма больного бруцеллезом по опсоно-фагоцитарной реакции. Антиген готовится из одного или нескольких штаммов бруцелл любого типа.
Для этой цели подбираются такие штаммы, которые не поглощаются нейтрофилами здоровых людей; наоборот, нейтрофилы больных бруцеллезом должны их фагоцитировать.
Препарат представляет собой взвесь инактивированных теплом бруцелл в стерильном растворе поваренной соли. Препарат содержит 8 млрд. микробных тел в 1 мл. Бактериальную взвесь проверяют на чистоту и стерильность по обычной методике. Затем суспензию разливают в ампулы, запаивают и этикетируют.
Готовый препарат также подвергается контролю на чистоту и стерильность.
Срок годности диагностикума - 2 года со дня изготовления.
Бруцеллезная агглютинирующая сыворотка
Для идентификации культур бруцелл по специфической реакции агглютинации и для стандартизации бруцеллезных диагностикумов применяется гипериммунная сыворотка крови крупного рогатого скота, иммунизированного убитой культурой бруцелл из типичных штаммов. Сыворотка выпускается в высушенном состоянии с титром не ниже 1:1600.
Срок годности сыворотки - 5 лет.
Люминесцирующие бруцеллезные антитела
Для обнаружения бруцелл в мазках из различных материалов от больных и животных (кровь, костный мозг), биопробного материала, из первичных культур, подлежащих окончательной идентификации, и некоторых объектов внешней среды могут быть применены люминесцирующие бруцеллезные сыворотки. Сырьем для их приготовления служат гипериммунные противобруцеллезные сыворотки. Препарат обладает строгой специфичностью, сообщая яркую люминесценцию B. melitensis, B. abortus bovis, B. abortus suis и не сообщая ее туляремийным бактериям и другим гетерологичным микробам.
Срок годности препарата - 1 год.